人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究

目的比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据。方法采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量。结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g。10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.648 0、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.944 8、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.123 3、5.321 9 mg/g。结论人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异。     

冬虫夏草及人工虫草核苷类成分的TLCS研究

目的：以腺苷、尿苷、鸟苷为指标测定天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分的含量，并对不同虫草样品进行薄层色谱指纹图谱对比研究，探求虫草中核苷类化合物鉴别的专属性。方法：采用高效薄层色谱扫描法进行含量测定，同时建立了不同虫草样品的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱。结果：虫草菌丝体中测得腺苷、尿苛鸟苷成分高于天然虫草。结论：该法快速简便，重现性好，能有效鉴别出虫草中核苷类成分以及评价不同电菌样品的质量。     

虫草类产品中5种核苷类成分的测定及蛹虫草质量分析

目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法采用岛津ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷,而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大,蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液,发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高,且在24 h内稳定。虫草素性质稳定,而N6-(2-羟乙基)-腺苷对热和酸都不太稳定;其中4种制备方法测得的虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷含量一致。结论为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据,以特征成分虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。     

RP-HPLC测定天然虫草与人工虫草中核苷类成分的含量

 目的分析不同来源的天然虫草与人工虫草中主要核苷类成分的差异。方法应用RP-HPLC检测18个样品中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素的含量。Symmetry Shield Rp18柱(3.9 mm×150 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱。流速0.2～1.2mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃。结果本法高效灵敏,重现性好。所测人工虫草核苷类成分的含量较天然虫草高,不同产地天然虫草4种主要的核苷类成分的差异较不同来源人工虫草的小。结论本法能有效鉴别虫草的核苷类成分,可用于天然虫草和人工虫草中核苷类成分的分析,评价不同来源虫草的质量。     

泰山虫草菌丝体与天然冬虫夏草化学成分初步分析

目的:与天然冬虫夏草做对比,对泰山虫草菌丝体的多糖、水溶性蛋白、核苷类成分及无机元素进行了分析。方法:采用硫酸-苯酚法、Folin-酚试剂法、双波长薄层扫描法、原子吸收分光光度法、凯氏定氮法及荧光光谱法测定了上述各成分的含量。结果:泰山虫草菌丝体中多糖的含量为3.14%,低于冬虫夏草中多糖含量(5.89%);水溶性蛋白的含量二者相当,分别为0.795%和0.783%;泰山虫草菌丝体中核苷类成分腺苷、尿苷、次黄嘌呤核苷和次黄嘌呤含量分别为0.230%、0.908%、0.515%和0.097%,明显高于冬虫夏草中核苷类成分的含量,分别是冬虫夏草的8.21、3.75、11.7、5.7倍;钙、铁、锌、硒和锰微量元素的含量分别为100、53.6、12.2、0.12和1.50μg/g,其它无机元素氮、磷、镍的含量高于冬虫夏草样品,铝、汞等有害元素含量接近或低于冬虫夏草样品。结论:泰山虫草菌丝体中富含多糖、蛋白质、核苷类成分及微量元素等营养物质,尤其泰山虫草菌丝体中主要有效成分核苷类成分明显高于冬虫夏草,是很有开发利用价值的食品或药物新资源。     

虫草保健品中13种核苷类成分的UHPLC-ESI-MS/MS定量分析及评价

目的:对香港和大陆市场上销售的8种常见虫草保健品进行核苷类成分的定量分析及评价。方法:采用冰浴超声提取法与UHPLC-ESI-MS/MS分析法,快速检测虫草保健品中的13种核苷类成分。结果:虫草保健品中被测核苷类成分的含量明显高于天然冬虫夏草药材。这些保健品绝大部分组成为冬虫夏草菌丝体粉,而并非是由天然冬虫夏草经直接粉碎加工而成。结论:通过对13种核苷类成分的含量测定,比较市场上以虫草药材或虫草菌丝体为原料制备的保健品质量,可以反映部分已经上市销售的虫草类保健品在核苷类成分种类及含量之间的差异性。     

冬虫夏草不同部位核苷类成分比较分析

目的：建立一种同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素5种核苷类成分含量的高效液相色谱法。方法：ZORBAX SB-Aq（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长260 nm,柱温30℃,流速0.8 mL·min-1。结果：对6批冬虫夏草样本子座、虫体和全草的核苷类成分进行了分析,结果发现冬虫夏草子座核苷类成分含量高于虫体和全草。结论：该方法重复性好,准确性高,可用于冬草夏草中核苷类成分的含量测定。     

人工虫草与冬虫夏草HPLC特征图谱研究

目的以人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草为研究对象,建立高效液相色谱(HPLC)特征图谱。方法采用超声法提取虫草中的水溶性成分,HPLC建立虫草的特征图谱。采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.04 mol/L磷酸二氢钾溶液(B),梯度洗脱(0~16 min,0%A;16~38 min,0%→10%A;38~58 min,10%→15%A;58~65 min,15%→0%A),流速1.0 m L/min,柱温25℃,检测波长260 nm,进样体积20μL。运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)》,建立人工虫草与天然虫草HPLC特征图谱,同时指认了7个核苷类成分,并进行比较研究。结果本方法精密度、重复性、稳定性良好。以腺苷为参照峰,对11批冬虫夏草、10批人工北虫草和12批发酵虫草菌粉进行指纹图谱分析结果显示,其指纹图谱相似度分别为0.889~0.982、0.781~0.980、0.502~0.970。结论天然虫草的指纹图谱相似度较高,人工北虫草和发酵虫草菌粉指纹图谱的相似度较低。本方法可作为评价人工虫草和天然虫草质量的参考依据。     

冬虫夏草及人工菌丝体的核苷类成分的HPLC研究

冬虫夏草 Cordycepssinensis( Berk) Sacc.为麦角科虫草属的药用真菌 ,为冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科虫草蝙蝠蛾 H epialus armoricanusOberthus等幼虫尸体的复合体 ,具有广泛的药理作用。核苷类成分为虫草有效成分之一 ,具有扩张心脏和外周血管的药效作用 ,其中尤以腺苷的作用为显著 [1～ 3 ]。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版对冬虫夏草中腺苷规定 ,不得少于 0 .0 1 0 %。目前核苷类分析方法有 HPLC法[4～ 6] 、薄层色谱法[7,8] 、高效毛细管电泳法[9～ 11] 等。高效液相色谱法主要针对单个指标进行评估 ,如以腺苷为指标作含…     

炮制前后半夏多种核苷类成分变化研究

目的：建立HPLC同时测定半夏及其炮制品(姜半夏、法半夏、清半夏)中肌苷、鸟苷、胞苷、尿苷、胸苷、腺苷、尿嘧啶、次黄嘌呤8个核苷类成分的含量,比较半夏炮制前后核苷类成分含量的变化情况,探究炮制对成分含量的影响。方法：采用CAPCELL PAK C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为260 nm;柱温为25℃;进样量为20μL。利用SPSS 25.0、SIMCA 14.0软件对半夏及其3种炮制品的核苷类成分含量进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘判别分析(PLS-DA)。结果：建立的HPLC法可以较好地对半夏中核苷类成分进行分离和测定,炮制前后半夏中核苷类成分含量差异较大,姜半夏中胞苷未检出,清半夏中腺苷与肌苷未检出,法半夏炮制前后成分种类无较大变化。半夏及其炮制品中核苷类成分含量较高者为鸟苷与尿苷,平均值分别为0.0113%、0.0117%。主成分分析及偏最小二乘判别分析结果显示核苷类成分能够较好地将半夏及其炮制品进行区分,对分类结果影响较大的成分分别为尿苷、胸苷、鸟苷、胞苷。结论：半...     

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??OBJECTIVE To establish a high performance capillary electrophoresis (HPCE) method for simultaneous determination of seven nucleosides and nucleobases, including adenine, uracil, adenosine, hypoxanthine, uridine, guanosine, and inosine in Inonotus obliquus samples of different batches. METHODS Based on the mode of HPCE, uncoated fused silica capillary (75 ??m??64.5 cm , 56 cm of effective length ) was used with separation voltage of 20 kV. The 55 mmol??L^-1 sodium borate solution was selected as the running buffer solution (pH 9.5). The detection wavelength was set at 260 nm. The sample was injected at 5 kPa??6 s and column temperature was maintained at 30 ??. RESULTS Good linear relationship was obtained between the response peak areas and the concentrations of all the seven nucleosides (r>0.998 8). The average recoveries of the method were between 96.46%-102.12%. The contents of the seven nucleosides in the Inonotus obliquus samples of different origins were different. CONCLUSION The established method is reliable, accurate, and can be used for the quality control of Inonotus obliquus.     

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??OBJECTIVE To establish a quantitative analysis of multi-components by single-marker (QAMS) method for determination of uridine, guanosine and adenosine in Cordyceps sinensis. METHODS Adenosine was used as the marker to calculate the relative correction factors (RCF) for uridine and guanosine by using high performance liquid chromatography(HPLC). Both QAMS method and external standard method (ESM) were performed to determine the three kinds of nucleosides in Cordyceps sinensis. RESULTS There were no significant differences between the two methods. CONCLUSION The developed QAMS method is feasible to evaluate the quality of Cordyceps sinensis.     

正交试验优化川党参总核苷的提取工艺

目的:优选川党参中核苷类成分的提取工艺条件,为该有效部位的开发提供基础资料。方法:采用超声波提取川党参中核苷类成分,以胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的总提取量为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察不同因素对川党参中核苷类成分提取量的影响。运用HPLC测定胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的含量,流动相甲醇(A)-水(B)梯度洗脱(0~10min,1%~5%A;10~15 min,5%~15%A;15~22 min,15%~17%A;22~26 min,17%~20%A;26~32 min,20%~24%A),检测波长260 nm。结果:各因素对核苷类成分提取量的影响顺序为甲醇体积分数提取次数料液比提取时间,最佳提取工艺为加10倍量水提取2次,每次30 min,川党参中4种核苷类成分总提取量1.523 mg·g~(-1)。结论:建立的HPLC检测川党参中核苷类成分的含量方法准确可靠。优选的提取工艺稳定可行,具有节约成本、快速、高效等优点。     

人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究

目的：研究人工蛹虫草Cordyceps militaris中核苷类化学成分。方法：建立人工蛹虫草中核苷类化合物的提取方法并用色谱水法分离各个核苷类化合物。结果：分离鉴定了4个化合物，分别是尿嘧啶核苷（1）、腺嘌呤核苷（2）、鸟嘌呤核苷（3）和酪氨酸（4）。结论：从核苷类物质分析来看，该人工蛹虫草菌丝体中核苷类物质含量丰富，主要为化合物1、2、3，三者总和约占菌丝体干重的1．3％。     

冬虫夏草及其人工菌丝对小鼠腹腔巨噬细胞激活作用的实验观察

本文报告冬虫夏草及其人工菌丝水提物对小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)激活作用的实验观察。结果表明,每天肌注5g/kg,连续4天,能使 Mφ的吞噬百分率和吞噬指数明显增加,与对照组相比,P<0.001,而天然虫草与人工菌丝之间则无明显差异。还证明Mφ内酸性磷酸酶活性也明显增强。提示人工菌丝具有与天然虫草类似的效应,另外对该药激活 Mφ的机理还进行了初步探讨。     

不同产地加工方法太子参核苷类成分Q-TRAP-LC-MS/MS分析

目的探讨不同加工方法对太子参核苷类成分量的影响。方法采用Q-TRAP-LC-MS/MS技术同时测定不同加工太子参药材中13种核苷类成分的量。结果太子参核苷类成分中,以胞苷、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷的量较高;不同加工方法对太子参中核苷的量有一定影响,烘干样品核苷的量普遍高于晒干样品。结论为揭示加工对太子参化学成分的影响及优选太子参适宜产地加工方法提供基础资料。     

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??OBJECTIVE To establish a QTRAP-UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of 10 kinds of nucleosides and nucleobases in Scrophulariae Radix processed by different methods, and investigate the influences of different processing < br/>METHODS on contents of nucleosides and nucleobases. METHODS The contents of 10 kinds of nucleosides and nucleobases in Scrophulariae Radix processed with different METHODS were simultaneously determined by QTRAP-UPLC-MS/MS, and TOPSIS analysis was used for comprehensive evaluation of nucleosides and nucleobases. RESULTS The contents of guanosine,uridine, adenosine and uracil were relatively high in Scrophulariae Radix.There were differences in contents of nucleosides and nucleobases of Scrophulariae Radix processed with different methods, and the samples processed by method of ??sweating?? had better quality. CONCLUSION This study provides a scientific basis for investigation on the influence of processing METHODS on contents of nucleosides and nucleobases in Scrophulariae Radixand screening of suitable processing method for Scrophulariae Radix.     

HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量

目的 :建立测定冬虫夏草及蚕蛹虫草中腺苷和虫草素的方法。方法 :HPLC-ESI-MS法 ,用甲醇为提取溶剂 ,采用选择性离子检测 (SIM)和电喷雾离子化 (ESI) ;色谱条件 :ShimadzuVP-ODS色谱柱 ;流动相水 甲醇 甲酸(94∶5∶1) ,以 2 氯腺苷为内标。结果 :腺苷回归方程Y=0 .1346X +0.0129,r=0.9984 ,线性范围 0.5～124.5mg·L^-1;虫草素回归方程Y=0.2164X +0.0215 ,r=0.9991,线性范围 0.5～ 136 .5mg·L^-1;腺苷和虫草素加样回收率分别为 95 .8%及 98.1%。结论 :方法灵敏、快速和选择性好 ,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的分析及质量控制。     

基于指纹图谱和多指标定量测定的鹿茸饮片质量控制研究

目的采用HPLC法建立鹿茸饮片指纹图谱,并测定核苷类成分含量,进行聚类分析与主成分分析(PCA),比较鹿茸饮片中6种核苷成分(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)的差异。方法采用HPLC法对16批不同批次鹿茸饮片6种核苷类成分进行测定,运用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)"进行评价,并结合PCA和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等化学计量学方法对4种饮片(蜡片、粉片、纱片和骨片)进行区分与比较。结果建立了鹿茸核苷类成分HPLC指纹图谱,相似度均达0.960以上,确定了6个共有峰(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)构成鹿茸饮片的特征峰,尿嘧啶、次黄嘌呤和肌苷是差异性化合物,可作为鉴别和区分鹿茸饮片质量控制指标。结论该法所建立的鹿茸核苷类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合6种核苷类成分含量测定可更好控制其质量,对鹿茸饮片的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。