高迁移率族蛋白B1及其信号分子作用研究进展

HMGB1是HMGB亚家族成员之一。早期研究显示,HMGB1是一种DNA结合蛋白,通过与多种转录因子、复制蛋白、甾体受体及RAG1重组酶作用,参与DNA重组、修复、基因转录调控,细胞复制和分化成熟等多种生命活动。随着研究的深入,人们对HMGB1有了丰富的认识,包括其基因和分子结构、蛋白的合成和分泌、翻译后修饰、作用的靶细胞表面受体和胞内的信号传递通路、靶细胞活化后释放的炎症介质和由此导致的相关疾病、以及靶向治     

叶酸受体功能变异对叶酸代谢的影响及其在肿瘤治疗中的应用

叶酸为体内DNA合成、修复及甲基化所必需的微营养素,其缺乏可诱发DNA单双链断裂、染色体畸变等基因组稳定性下降事件及DNA甲基化异常、改变基因表达.叶酸受体是一类高亲和力叶酸结合蛋白,其在正常组织和恶性组织中的表达范围、表达量及功能存在很大差异,常被用于肿瘤靶向治疗.细胞表面叶酸受体的数量和类型影响叶酸的摄取效率,同时,叶酸-药物复合物靶向叶酸受体的作用也受到循环过程中叶酸含量的干扰.据此,该文将对叶酸代谢与叶酸受体表达之间的关系及其在肿瘤治疗中的应用现状作一概述.     

癌基因、生长因子与胶质瘤

癌基因目前认为是一类控制正常细胞生长发育的基因,普遍存在于正常动物细胞中,可在多种理化因素的诱导下,发生结构和功能的改变,从而使细胞发生恶变。生长因子一般认为是一种多肽分子,能与靶细胞膜上的高亲和性受体特异结合,刺激细胞合成DNA,使细胞增殖。近几年来,由于分子生物学的迅猛发展,已将某些癌基因与生长因子有机地联系起来了。已发现有些癌基因编码生长因子、生长因子受体或介导生长因子作用的因子。胶质瘤是一种常见的脑部肿瘤。在对它     

新型HER2适配体的筛选及鉴定

目的研发能特异性结合人表皮生长因子受体2(HER2)的DNA适配体,为开发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术提供依据。方法体外合成全长86个碱基并含有40个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以HER2表位肽为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从单链DNA文库中筛选能够选择性结合HER2多肽的核酸适配体;流式细胞术检测富集进度、适配体与HER2蛋白及HER2阳性细胞的结合特性;MFold软件预测二级结构。结果经多轮筛选获得了能够识别HER2多肽的DNA适配体HA5,其能够选择性地结合HER2蛋白及HER2阳性的乳腺癌细胞,而不结合胰蛋白酶和HER2阴性细胞。结论 DNA适配体HA5能选择性地识别HER2阳性的乳腺癌细胞,在研发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术方面具有应用潜能。     

单链DNA结合蛋白hSSB1对基因组的稳定性起了关键作用

细胞中的单链DNA非常容易降解，所以细胞通过单链DNA结合蛋白对其进行保护。单链DNA（ssDNA）结合蛋白（SS—Bs）在DNA复制、重组、损伤检测以及修复等DNA多种代谢过程中普遍存在，也是非常必要的。单链DNA结合蛋白在结合和分离单链DNA、检测DNA损伤、刺激核酸酶、解螺旋酶和链交换蛋白、启动转录以及介导蛋白和蛋白的相互作用等方面具有多重作用。在真核生物中，主要的单链结合蛋白是复制蛋白A（RPA），它是异源三聚体结构。     

结合抗原性抑制T细胞是细胞免疫的效应器(假说)

按照目前的观点,结合抗原性抑制T细胞(Ts)及其产物(特异抑制性T细胞因子,TsF)的功能,仅仅是调节免疫系统的活性。TsF的调节是按以下方式进行的。TsF在与辅助T细胞(Th)结合抗原受体固定的抗原,及Th表面能识别TsF中Ia样抗原决定簇的受体相互作用之后,则发生酶裂解并游离出效应肽,效应肽能抑制靶细胞中DNA和蛋白质的合成。此时,可把受体已与抗原结合的Th看做是携带抗原的细胞,其功能已受到结合抗原性TsF的抑制。文献中曾记截有两型结合抗原性Ts。第一型TsF     

整合素调节Fak/SFKs与生长因子受体信号传导的研究进展

在胚胎发育和组织修复过程中,整合素介导的信号传导起着重要作用.整合素与细胞外配体结合,引发的细胞内信号可以产生两种主要作用,即肌动蛋白细胞骨架重构和调节细胞行为,如细胞存活、分化和生长.整合素也可以通过与细胞内衔接蛋白、胞质酪氨酸激酶、生长因子/细胞因子受体直接结合或功能联合,进入信号传导过程.了解有关整合素信号的最新实验和理论进展,尤其着重于整合素调节Fak/Src家族激酶（SFKs）活化和整合素与可溶性生长因子/细胞因子受体相互作用很有必要.     

肝细胞生长因子与妊娠期高血压疾病

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种具有多效性作用的肝素结合性酸性蛋白.HGF在胎盘中主要由绒毛核心间质细胞表达,旁分泌作用于邻近滋养细胞表面受体c-met.妊娠期高血压疾病时,HGFmRNA及蛋白产物表达下降.HGF在调节滋养细胞浸润能力、抗细胞凋亡和胎盘发生方面与妊娠期高血压疾病关系密切.     

细胞表面硫酸肝素蛋白多糖在信号传导中的作用

硫酸肝素蛋白多糖由硫酸肝素和核心蛋白共价连接而成。细胞表面硫酸肝素蛋白多糖主要包括Syndecans和Glypicans两类 ,它们作为共受体调节许多配体的特异性受体的激活 ;此外 ,它们本身也具有信号传导功能 ,尤其是Syndecans这类跨膜分子 ,通过胞外区与配体结合 ,通过胞浆区与细胞骨架和下游信号传导分子相互作用。本文主要就细胞表面硫酸肝素蛋白多糖的结构、生物合成及其在信号传导中的作用作一综述     

Kinectin与树突状细胞TLR4-TRIF信号途径的相关性

驱动结合蛋白Kinectin是真核细胞内一种与囊泡转运相关的膜受体蛋白,为驱动蛋白(Kinesin)受体.当树突状细胞(DC)接受细菌脂多糖(LPS)的刺激后,其Toll样受体(TLR)4信号途径被活化,大量的抗原肽-MHC Ⅱ复合物被转运到细胞表面以启动免疫应答.研究表明,TLR4-TRIF信号途径对MHCⅡ从胞内转运到细胞表面至关重要.由于Kineetin定位于合成MHCⅡ的内质网且参与调节胞吐、胞质运输等过程,我们通过荧光定量PCR检测了小鼠骨髓来源DC中Kineetin的mRNA表达,以探讨其与TLR4-TRIF信号途径的关系.     

转化生长因子-β/Smad信号通路研究进展

转化生长因子β(transform ing growth factor-,βTGF-β)可通过特异性结合并激活具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的细胞表面受体启动各种应答。Sm ads蛋白是TGF-β超家族细胞内重要的信号转导和调节分子,活化的受体可刺激受体调节的Sm ads蛋白磷酸化,与Sm ad 4形成复合物入核调控靶基因的转录。TGF-β应答是细胞种类特异性的,并且受通路中各种成分和其他信号转导通路的调节。     

118 细胞表面硫酸肝素蛋白多糖在信号传导中的作用

硫酸肝素蛋白多糖由硫酸肝素和核心蛋白共价连接而成.细胞表面硫酸肝素蛋白多糖主要包括Syndecans和Glypicans两类,它们作为共受体调节许多配体的特异性受体的激活;此外,它们本身也具有信号传导功能,尤其是Syndecans这类跨膜分子,通过胞外区与配体结合,通过胞浆区与细胞骨架和下游信号传导分子相互作用.本文主要就细胞表面硫酸肝素蛋白多糖的结构、生物合成及其在信号传导中的作用作一综述.     

细胞表面硫酸肝素蛋白多糖在信号传导中的作用

硫酸肝素蛋白多糖由硫酸肝素和核心蛋白共价连接而成。细胞表面硫酸肝素蛋白多糖主要包括Syndecans和Glypicans两类，它们作为共受体调节多配体的特异性受体的激活；此外，它们本身也具有信号传导功能，尤其是Syndecans这类跨膜分子，通过胞外区与配体结合，通过胞浆区与细胞骨架和下游信号传导分子相互作用。本文主要就细胞表面硫酸肝素蛋白多糖的结构、生物合成及其在信号传导中的作用作一综述。     

肺炎链球菌表面蛋白在细菌体外粘附中的介导作用

目的在体外研究肺炎链球菌表面蛋白对细菌粘附于宿主细胞的介导作用。方法用ＦＩＴＣ荧光标记肺炎链球菌（ＳⅡ、ＳⅢ），用蛋白质合成抑制剂，ＲＮＡ合成抑制剂和神经氨酸酶分别处理肺炎链球菌和小鼠腹腔巨噬细胞后，在体外观察这些因素对细菌与巨噬细胞粘附率的影响；另外观察细菌细胞壁提取物对上述粘附率的影响。结果证实了粘附过程存在剂量依赖和时间依赖的关系，是特异的粘附过程。用多因素分别处理肺炎链球菌和巨噬细胞后，其粘附率的改变与肺炎链球菌合成ＲＮＡ和蛋白质有关，需要肺炎链球菌识别巨噬细胞表面糖蛋白结构的受体。肺炎链球菌可溶性细胞壁成分能与完整肺炎链球菌同样有对巨噬细胞的粘附，去蛋白细胞壁成分则无此作用。结论提示细菌表面蛋白介导了这一粘附过程。     

人端粒相关蛋白

端粒是染色体末端的特殊结构,由端粒DNA与端粒蛋白构成,维持染色体的稳定。端粒相关蛋白直接影响端粒的功能,调节端粒DNA的长度,与细胞的衰老和癌变密切相关。端粒蛋白包括端粒双链DNA结合蛋白、端粒单链DNA结合蛋白、其它端粒相关蛋白。端粒结合蛋白直接保护端粒DNA,端粒相关蛋白通过与端粒结合蛋白的相互作用间接影响端粒的功能。本文对这些端粒相关蛋白的细胞生物学功能的研究进展进行概述。     

人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用

背景：在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢？ 目的：探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。 方法：在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-time PCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa mRNA表达量。 结果与结论：覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa mRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P < 0.05,P < 0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P < 0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。     

SARS病毒S蛋白片段与细胞结合作用分析

目的研究SARS冠状病毒(SARSCoV)S蛋白片段与SARSCoV敏感细胞Vero的相互作用,明确S蛋白的受体结合位点。方法在E.coli中表达S蛋白第260～600位氨基酸(S260600)和397～796位氨基酸(S397796)片段,通过Westernblot对蛋白表达进行确认,用NiSepharose螯合层析对重组蛋白进行纯化。将纯化的S260600和S397796蛋白与Vero细胞4℃共同孵育1h后,先后与SARS患者血清及FITC标记的抗人IgG作用,通过流式细胞仪检测蛋白与细胞表面受体的结合情况。结果成功构建了原核表达质粒pET30a/S260600和pET30a/S397796,并表达、纯化出S260600和S397796重组蛋白。分别用SARS患者血清和抗6×His单克隆抗体进行Westernblot检测,证实重组蛋白得到正确表达。流式细胞仪分析显示S260600和S397796重组蛋白均可与Vero细胞发生结合,但S397796的结合力要弱于S260600。同时发现S260600重组蛋白与SARSCoV非敏感细胞NIH3T3细胞不能结合,进一步证明S260600重组蛋白与Vero细胞表面受体的结合是特异性的。结论重组蛋白S397796和S260600具有受体结合能力,尤其S260600包含了重要的受体结合位点,对进一步研究介导SARSCoV感染的细胞表面受体、开展疫苗和抗病毒药物的筛选均具有重要意义。     

表皮生长因子受体基因及其相关基因与肿瘤的关系

目前,生长因子及其受体与癌基因的关系研究进展迅速。人们发现有多种癌基因产物与某些生长因子或其受体基因相同或类似。并有证据表明,生长因子受体系统功能失调与细胞的恶性转化密切相关。随着DNA重组技术的发展,有可能在细胞中引     

人类和小鼠T11(CD2)基因的外显子-内含子组织和顺序比较

50KDa T11(CD2)表面糖蛋白是T淋巴细胞与绵羊细胞结合的受体,抗人类T11分子特定表位(T11_1)的单抗能阻断T细胞和羊红细胞的花环形成。CD2分子在T细胞活化过程中也起重要作用。本文作者构建了含人和小鼠编码CD2分子基因的DNA克隆。人和小鼠T11基因的限制性内切酶和     

大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子真核表达载体的构建及其体外表达的鉴定

背景：星形胶质细胞被激活后表现出神经干细胞的特性,细胞表面的神经营养因子(表皮生长因子、睫状神经营养因子)受体超表达,通过改善复杂的内环境,有利于定向诱导神经干细胞向神经元的分化。 目的：构建大鼠pSecTag2/Hygro B-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF真核表达质粒,检测其在cos-7细胞中的共表达。 方法：采用反转录-聚合酶链反应技术从大鼠颌下腺、坐骨神经组织总RNA中扩增出表皮生长因子、睫状神经营养因子基因功能区,将上述基因片段分别连接到真核表达载体pSecTag2/Hygro B,聚合酶链反应初步筛选、双酶切鉴定后送测序。将构建成功的两种重组载体单独及共转染cos-7细胞,Western blot法鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白的瞬时表达。 结果与结论：反转录-聚合酶链反应结果证实成功获得大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子cDNA。DNA序列分析证实2种真核表达载体中的表皮生长因子、睫状神经营养因子序列与GenBank中目的序列一致。脂质体介导转染cos-7细胞48 h后,Western blot鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白在cos-7细胞中的表达,分别在Mr6 000,22 000处出现阳性条带。提示大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子基因的真核表达载体pSecTag2/Hygro B-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF构建成功,共转染cos-7细胞后能够共表达重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白。