大鼠延髓内含前-原脑啡肽mRNA、甲硫氨酸-脑啡肽和亮氨酸-脑啡肽神经元的分布

应用原位杂交和免疫组织化学方法,对成年大鼠延髓内含前-原脑啡肽(PPE)mRNA和甲硫氨酸-脑啡肽(M-ENK)与亮氨酸-脑啡肽(L-ENK)免疫反应神经元进行观察。结果表明:含PPEmRNA的神经元胞体,多数分布在孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构等形成的一条从背内侧到腹外侧区的弧形带内。M-ENK与L-ENK样免疫反应阳性结构(神经元胞体、纤维和终末)也主要密集分布在该带内。本结果对ENK(M-ENK和L-ENK)参与延髓内脏功能活动的调控过程,提供了进一步的形态学证据。     

脑啡肽样神经元在人胎儿中脑的分布与发育研究

应用免疫组织化学方法研究了１６～４０周人胎儿中脑甲啡肽（Ｍ－ＥＮＫ）样和亮啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）样神经元的发育与分布。结果发现：于１６周时在中脑已出现两者阳性神经元，开始仅在中央灰质和黑质出现散在分布的浅染神经元，随着发育阳性神经元增加，染色加深；２０周后在动眼神经核、滑车神经核及网状核等部位出现阳性神经元，各区域中阳性大多极神经元出现较晚。ＥＮＫ在人胎儿中脑发育主要集中于１６～３２周，且Ｍ－ＥＮＫ强于Ｌ－ＥＮＫ。根据上述结果本文对ＥＮＫ在人胎儿发育中的可能功能进行了讨论。     

大鼠延髓内神经激肽B受体神经元对腹膜伤害性刺激的Fos表达——免疫组织化学双重染色研究

为探讨神经激肽Ｂ受体（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎｂｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＮＫＲ）神经元在大鼠延髓的定位及其在腹膜伤害性传入信息整合中的作用。应用免疫组织化学双重染色方法，显示ＮＫＲ神经元的分布并观察它们对腹膜化学伤害性刺激的Ｆｏｓ表达。结果表明：ＮＫＲ样免疫反应（ＮＫＲ－ＬＩ）神经元主要分布在孤束核（Ｓｏｌ）、延髓腹外侧区（ＶＬＭ）、三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｓｐ５Ｃ）浅层和三叉旁核（Ｐａ５）。腹膜伤害性刺激激诱导的Ｆｏｓ表达神经元多数分布在Ｓｏｌ、ＶＬＭ、Ｐａ５和最后区。Ｓｏｌ、ＶＬＭ和Ｐａ５中约３０．１％的ＮＫＲ－ＬＩ神经元同时呈Ｆｏｓ样免疫反应。本研究提示：延髓内上述核团ＮＫＲ－ＬＩ神经元与腹膜伤害性初级传入信息的整合有关，可能参与内脏伤害性刺激的抗伤害性感受（ａｎｔｉ－ｎｏｃｅｃｉｐｔｉｏｎ）过程。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内PPTA,CGRP和PPE …

利用原位杂交技术和免疫组化技术，观察完全福氏佐剂致炎大鼠的三叉神经脊束核尾侧亚核和／或三叉神经节内ＳＰ、ＣＧＲＰ和Ｌ－ＥＮＫ样阳性结构及它们相应的前体ＰＰＴＡ ｍＲＮＡ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＥｍＲＮＡ分布状况的动态变化。原位杂交结果显示：ＰＰＴＡｍＲＡ在三叉神经节与三叉神经脊束核尾侧亚核浅层神经元中的表达于致炎刺激后１２ｈ明显增强，分别于１ｄ和４ｄ时达到高峰，２１ｄ后恢复正常；ＣＧＲＰｍＲＮＡ在     

人胚胎下丘脑—腺垂体系统P物质,生长抑素,亮啡肽和甲啡肽神经元的发…

用免疫组化方法观察了Ｐ物质（ＳＰ），生长抑素（ＳＲＩＦ），亮啡肽（Ｌ－ＥＮＫ），甲啡肽（Ｍ－ＥＮＫ）在１６－２４周胎儿下丘脑及腺垂体内的发育与分布。结果表明：在１６周胎儿下丘脑已出现ＳＰｅＳＲＩＦ－ＥＮＫ和Ｍ－ＥＮＫ阳性神经元，第三脑室室管膜上皮呈阳性染色。下天脑的变化以１６－２４周最为明显，，在１６周阳性细胞多为小神经元，分布疏散，２０－２４周阳性细胞为梭形和多极神经元，主要分布干室周核，室旁核     

大鼠脑干面口部运动神经元与5-HT样、SP样、L-ENK样、GABA样和Gly样阳性终末间的突触联系

为了观察５－羟色胺（５－ＨＴ）样、Ｐ物质（ＳＰ）样、亮氨酸－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）样、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）样和甘氨酸（Ｇｌｙ）样阳性终末与脑干面口部运动核（三叉神经运动核、面神经核和舌下神经核）间的突触联系，用ＨＲＰ逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双标技术，在电镜下对５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末与ＨＲＰ逆标面口部运动神经元间的突触联系进行了观察。５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末在脑干面口部运动核内呈均匀分布，没有区域特异性。将ＨＲＰ注入面口部肌肉或相应的周围神经后，ＨＲＰ逆标神经元见于脑干运动核不同部位内支配相应肌肉的运动神经元。５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成非对称性的轴－树突触；ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末则主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成对称性的轴－树突触；偶见上述阳性轴突终末与ＨＲＰ逆标运动神经元的胞体形成轴－体突触。结果提示：主要来自脑干运动前神经元的５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末及ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末可能分别对脑干运动神经元发挥兴奋性或抑制性调控作用     

孤束核内生长抑素mRNA分布的原位杂交组化研究

用原位杂交法对孤束核尾侧部内生长抑素ｍＲＮＡ（ＳＯＭｍＲＶＡ）的分布进行了研究。ＳＯＭｍＲＮＡ位于不同平面孤束核内的神经元胞体和近端树突中，从ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元一般为中小型细胞，呈圆形或椭圆形，分布于孤束核的内侧亚核、背侧亚核、背外侧亚核、连合亚核、中间亚核、腹侧亚枝和腹外侧亚核，其中以最后区上段及其吻侧平面的孤束核的内侧亚核、连合亚核、背侧亚核和背外侧亚核最为多见。结果提示ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元在该核尾侧部各亚核内的广泛分布可能与该核参与对血压、心血管、呼吸、胃肠道等内脏活动的中枢控制有密切关系。生长抑素作为一种神经调制物可能在上述孤束核参与的植物性神经复杂整合功能中起着重要的作用。     

18月龄雌性大鼠下丘脑内源性阿片肽含量及其mRNA水平变化的…

本文应用分子生物学和放射免疫测定方法，观察了老年前期雌性大鼠下丘脑、垂体和血浆中内阿片肽含量及下丘脑内阿片肽基因表达的变化。与５月龄青年大鼠比较，１８月龄雌性大鼠下丘脑和血浆β－ＥＰ、Ｌ－ＥＮＫ、Ｄｙ－ｎＡ含量减少，垂体β－ＥＰ、Ｌ－ＥＮＫ含量升高，ＤｙｎＡ含量降低（Ｐ〈０．０５￣０．０１）。下丘脑ＰＯＭＣ基因和ｐｒｏｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ基因ｍＲＮＡ水平明显低于青年大鼠（Ｐ〈０．０５）。结果提示，     

大白鼠脊髓前角内含γ—氨基丁酸神经元的化学神经解剖学研究

用ＨＲＰ与免疫细胞化学结合法和免疫电镜方法观察了大白鼠脊髓Ｌ４～５节段内前角含γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）神经元的分布及其与躯体传出的关系。光镜下，在脊髓前角各层，包括位于前角的前外侧部的Ｒｅｘｅｄ ＩＸ层，均有ＧＡＢＡ免疫反应阳性神经元胞体和梢分布。ＧＡＢＡ阳性胞体为圆形或三角形，具有多个突起，可分大、中两型。电镜下，ＧＡＢＡ样免疫反应产物呈细小颗粒状沉淀，分布于核周质、树突和轴突内。在轴突末梢，免     

大鼠脑干向面口部运动核的P物质能和脑啡肽能投射

目的 观察大鼠脑干面口部运动核（三叉神经运动核、面神经核和舌下神经核）内Ｐ物质（ＳＰ）和亮氨酸脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）样阳性终末的中枢起源。方法 荧光金（ＦＧ）逆行追踪与ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样免疫荧光组织化学染色相结合的双重标记技术。结果 将ＦＧ分别注入三叉神经运动核、面神经核或舌下神经核后，ＦＧ逆标神经元主要位于臂旁核簇、三叉上核、三叉神经感觉主核、脑桥和延髓网状结构、巨细胞网状核α部和延髓中缝核簇。     

亮氨酸脑啡肽纤维和神经元在大鼠脚间核亚核的密度

用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７只，以含０．２％苦味酸和４％多聚甲醛的磷酸盐缓冲液灌注。取脑，作冠状连续切片，切片以兔抗Ｌ－ＥＮＫ抗血清孵育及ＡＢＣ法处理。结果见到脚间核的首侧、中央、背外侧和尖４个亚核中含有亮氨酸脑啡肽免疫阳性纤维，而背外侧和尖亚核中还有免疫阳性的神经元。用计算机图像分析系统测量首侧亚核，中央亚核，背外侧亚核，尖亚核内Ｌ－ＥＮＫ物质的密度，数据依次为５１．９３％、５７．５５％、４４．４６     

电离辐射对大鼠下丘脑和垂体内亮脑啡肽含量的影响

本文应用放射免疫分析（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＲＩＡ）方法检测４，８和２５Ｇｙ＿６０ＣｏＹ射线照射后大鼠下丘脑和垂体内亮脑啡肽（ｌｅｕｃｉｎｅ－ｅｕｋｅｐｈａｌｉｎ，Ｌ－ＥＮＫ）含量的变化。发现８Ｇｙ照射后２４和７２小时下丘脑Ｌ－ＥＮＫ含量分别为１３８．２３±１８．３２ｐｇ／ｍｇ和２１０．６８±２８．９９ｐｇ／ｍｇ，前者明显低于正常对照组（１７７．９２±２４．６８ｐｇ／ｍｇ）（Ｐ＜０．０１），后者明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。２５Ｇｙ照射后２４和４８小时下丘脑Ｌ－ＥＮＫ含量分别为１３１．６５±１０．６４ｐｇ±ｍｇ和１５２．６６±１４．０７ｐｇ／ｍｇ，均明显低于正常对照组（前者Ｐ＜０．０１，后者Ｐ＜０．０５）。２５Ｇｙ照射后４８小时垂体Ｌ－ＥＮＫ含量为９６．３７±１５．７４ｐｇ／ｍｇ，明显低于正常对照组（１２１．４１±１．９４ｐｇ／ｍｇ）（Ｐ＜０．０１）。     

白细胞介素—1和阿片肽促进大鼠大脑皮层神经细…

对白细胞介素－１（ＩＬ－１）、脑啡肽、β－内啡肽及即刻早期基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ与癫痫发病机理的研究。结果显示ＩＬ－１、ＩＬ－１受体拮抗剂、β－内啡肽、抗β－内啡肽抗血清、亮－脑啡肽（ＬＥ）均能促进大脑皮层神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ表达，但ＩＬ－１受体拮抗剂、抗β－内啡肽抗血清促ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ表达量明显低于ＩＬ－１、ＬＥ及β－内啡肽的作用，并能部分抑制后者的作用     

大鼠孤束核中P物质和氨酸—脑啡肽样神经元对咽肌运动神经元的调…

用ＰＲＶ和ＳＰ或Ｌ－ＥＮＫ免疫荧光双标记法研究了大鼠孤束ＳＰ及Ｌ－ＥＮＫ样神经 对咽肌运动神经元的调控。ＰＲ注射大鼠咽肌后，在孤束核的中介亚核和中间亚核中可邮少量ＰＲＶ和ＳＰ或Ｌ－ＥＮＤ双标记。首次证明了大鼠孤束核中的ＳＰ及Ｌ－ＥＮＫ样神经元对咽肌运动元的调控。推测孤束核中的ＡＳＰ及Ｌ－ＥＮＫ可能对咽肌运动的精确调控有关。     

P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布

本实验采用PAP免疫细胞化学技术,观察P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布并作了计数。1.含P物质样免疫反应神经元胞体仅见于中缝背核最尾侧部,含P物质阳性胞体数平均167个/只;而亮-脑啡肽样免疫反应胞体几乎遍于中缝背核全长,其阳性胞体数平均132个/只。2.亮-脑啡肽样免疫反应胞体主要定位于中缝背核中线区;而P物质样免疫反应胞体除分布于中缝背核中线区以外,也定位在其两侧的延伸。3.亮-脑啡肽样免疫反应胞体恒定地出现在中缝正中核内,平均199个/只;而P物质样免疫反应胞体仅见于2例动物。4.中缝背核内有些含P物质样免疫反应阳性胞体或突起,紧邻血管壁排列,未观察到亮-脑啡肽样免疫反应神经元有类似现象。本实验观察到鼠中缝正中核内存在含P物质样免疫反应神经元胞体。     

IL—1受体相关激酶1和2协同调控IL—1诱导的NF—？…

目的 研究细胞介素１受体相关激酶１（ＩＲＡＫ－１）和ＩＲＡＫ－２在白细胞介素１（ＩＬ－１）诱导核因子－кＢ（ＮＦ－кＢ）活化中的作用。方法 Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导反义和ＩＲＡＫ－１寡核苷酸和反义ＩＲＡＫ－２寡核苷酸转染ＨｅｐＧ２细胞。用逆转录ＰＣＲ法检测ＩＲＡＫ－１ ｍＲＮＡｔ ＩＲＡＫ－２ ｍＲＮＡ表达水平,以夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＮＦ－кＢ的活化。结果 （１）反义ＩＲＡＫ－１寡核苷酸和反义ＩＲ     

大鼠脑干向三叉神经脊束核尾侧亚核浅层的神经减压素能和脑啡肽…

本研究用荧光金（ＦＧ）逆行追踪与免疫荧光组织化学染色相结合技术对大鼠脑干向三叉神经脊束核尾测亚核（Ｖｃ）的ＮＴ能和Ｌ－ＥＮＫ能投射进行了观察。脑干向Ｖｃ发出ＮＴ能和Ｌ－ＥＮＫ能投射的神经元主要位于中脑导水管周围灰质、中缝大核、巨细胞网状核α部和延髓中缝核簇。结果提示ＮＴ和ＥＮＫ可能参与下行抑制系统，Ｖｃ浅层密集的ＥＮＫ样阳性终末不仅来自Ｖｃ内的局部或中间神经元，而且来自下行抑制系统的起始核团和脑干     

IL—2对神经元NMDAR1m RNA表达和细胞内钙浓度的影响

Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体和细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化与神经元的兴奋性关系密切。本文报道以大鼠大脑皮层神经元为研究对象，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交并以Ｆｕｒａ－２作为Ｃａ２＋荧光指示剂，观察了外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）对ＮＭＤＡ受体１型亚单位（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达量及［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果显示：不同浓度的ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）作用于原代培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元６小时后其ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量明显增加，并与ＩＬ－２浓度呈正相关关系。当其浓度为２５～２００Ｕ／ｍｌ时，ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量增加４４．３％～２１９．７％（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）与新生大鼠大脑皮层神经元共同孵育５～１０分钟后，［Ｃａ２＋］ｉ增加２７．１％～９４．２％（Ｐ＜０．０５）。钙通道阻断剂ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ可完全阻断ＩＬ－２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，而ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ－８０１无此作用。本文结果提示：外源性ＩＬ－２具有兴奋性神经调质样作用，可能参与或介导了神经兴奋毒性作用和惊厥性疾病的发生与发展过程。     

抗氧化剂PDTC抑制氧化的低密度脂蛋白诱导的人肾小球系膜细胞NF_(-k)B活化

目的 研究氧化的低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）核因子－ＫＢ（ＮＦ－ＫＢ）活化的影响，以及抗氧化剂毗咯二硫氨基甲酸酯（Ｐ ＤＴＣ）对ＮＦ－ＫＢ活化的抑制作用，探讨ＯＸ－ＬＤＬ介导肾损害的基因调控机制及抗氧化剂ＰＤＴＣ防治脂质肾损害的可能性。方法 将Ｏｘ－ＬＤＬ或ＰＤＴＣ与ＨＭＣ共培养后，提取细胞核蛋白进行凝胶迁移率变动分析（ＥＭＳＡ）检测ＮＦ－ＫＢ的活化，用细胞ＥＬＩＳＡ法检测细胞内ＩＫＢα蛋白含量的变化，反映ＩＫＢα的降解及免疫组化染色检测细胞内的Ｐ６５向核转位。结果 正常对照组未见ＮＦ－ＫＢ活化，当用不同浓度（１０、２５、５０及１００ｍｇ／Ｌ）的Ｏｘ－ＬＤＬ，刺激肾小球系膜细胞 ｌｈ后，均可引起细胞 ＮＦ－ＫＢ活化及 ＩＫＢα降解。与对只组相卜较差异显著（ｐ＜０．０５），以５０ｍｇ／Ｌ 的ＯＸ－ＬＤＬ刺激ＨＭＣ１ｈ，ＮＦ－ＫＢ活化及 ＩＫＢα降解最明显。ＮＦ－ＫＢ活化的同时，伴有Ｐ６５由胞浆向胞核的转位。１００μｍｏｌ／Ｌ ＰＤＴＣ，能明显抑制 ＮＦ－ＫＢ的活化、ＩＫＢα降解（ｐ＜０．０１）及 Ｐ６５的核转位。结论Ｏｘ－ＬＤＬ。能诱导ＨＭＣ的ＩＫＢαａ降解、Ｐ６５的核转位，最终使Ｎ     

一氧化氮对脊髓和背根神经节神经元的体外存活及活性作用研究

本文应用免疫细胞化学及ＮＳＥ－ＥＬＩＳＡ方法观察了一氧化氮对体外培养脊髓和背根神经节神经元的存活及对活性的影响。结果表明：一氧化氮合酶抑制剂Ｎ－Ａｒｇ组（１００、２００μｍｏｌ／Ｌ）ＮＳＥ免疫反应阳性神经元数目、面积（ＡＦ值）及活性（ＯＤ值）明显大于空白对照组（Ｐ＜０．０１）。而一氧化氮合酶底物Ｌ－Ａｒｇ组（１ｍｍｏｌ／Ｌ）神经元面积积分和活性则小于对照组（Ｐ＜０．０１）。Ｌ－Ａｒｇ的细胞毒性作用可为Ｎ－Ａｒｇ逆转。