红细胞终末分化期出现与珠蛋白基因表达增强子HS2序列特异结合的蛋白质因子

利用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹和电泳迁移率改变分析法，研究了处于终末分化阶段的人胚肝中、晚幼红细胞和经ｈｅｍｉｎ诱导分化前后的Ｋ５６２细胞核抽提物中与地高辛标记的ＨＳ２探针特异结合的蛋白质。发现经ｈｅｍｉｎ诱导后的Ｋ５６２细胞样品中出现一些为诱导前缺如的，分子量为１２，１４，１８，４５和５０ｋＤ的ＨＳ２结合蛋白。这些结合蛋白在印迹图谱中的位置（分子量大小）与存在于正常终末分化期红细胞中ＨＳ２结合蛋白的相近。同样，诱导后Ｋ５６２细胞核蛋白质与ＨＳ２形成复合物的电泳迁移图谱与正常分化的人胚肝红细胞核蛋白质－ＨＳ２复合物的相似，而与未经诱导的Ｋ５６２细胞核蛋白质－ＨＳ２复合物的迁移图谱存在差异。提示诱导分化和正常分化的红细胞表达一些新的ＨＳ２结合蛋白，这些仅在终末分化期红细胞中出现的ＨＳ２结合蛋白，可能是参与红细胞分化和珠蛋白基因表达调控的重要因素。     

红细胞终末分化期出现与珠蛋白基因表达增强子HS2序列特异结合蛋白…

利用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹和电泳迁移率改变分析法，研究了处于终末分化阶段的人胚肝中、晚幼红细胞和经ｈｅｍｉｎ诱导分化前后的Ｋ５６２细胞核抽提物中与地高辛标记的ＨＳ２探针特异结合的蛋白质。发现经ｈｅｍｉｎ诱导后的Ｋ５６２细胞样吕中出现一些为诱导前缺如的，分子量为１２，１４，１８，４５和５０ｋＤ的ＨＳ２结合蛋白。这些结合蛋白在印迹图谱中的位置（分子量大小）存存在于正常终末分化期红细胞中ＨＳ２结合     

红细胞分化相关蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

应用杂交瘤技术和电泳迁移超滞留技术筛选和制备红细胞分化相关蛋白单克隆抗体，以阐明此类蛋白的生物学功能。用杂交瘤技术制备了５８０株针对终末分化期红细胞，包括人胚肝中，晚幼红细胞和氯高铁血红素诱导分化的人红白血病细胞核蛋白的单克隆抗体。     

BDNF对诱导分化的SH-SY5Y细胞G1期相关蛋白表达的影响

研究不同浓度的脑源性神经营养因子(BDNF)在体外诱导SH-SY5Y细胞分化时对G1期细胞周期相关蛋白表达的影响。采用全反式维甲酸(RA)和低(1ng/ml)、中(10ng/ml)、高(100ng/ml)三种不同浓度BDNF在无血清培养液中相继诱导SH-SY5Y细胞分化,形成均一的具有神经元形态的细胞。以实时定量RT-PCR法检测G1期细胞周期相关蛋白(包括cdk4,cdk6,cyclin D1,Cyclin E,p16和p27)的mRNA水平的表达变化。结果显示:不同浓度的BDNF处理后,Cdk4mRNA的表达水平均低于未分化细胞组(P<0.05);Cdk6和Cyclin D1的mRNA表达水平与RA组比较显著降低(P<0.05),Cyclin E和p16的mRNA表达水平仅在高浓度BDNF处理后明显降低,与未分化组比较P<0.05,p27的mRNA表达水平无显著变化。以上结果提示BD-NF在诱导SH-SY5Y细胞分化的同时无意促使其再进入细胞周期。同时,用RA预处理5d后改换BDNF培养SH-SY5Y细胞,可使细胞展现出成熟神经细胞的形态,是体外研究某些脑疾病的理想细胞模型。     

天花粉蛋白诱导小鼠Th2/Tc2亚群分化与MHC背景相关

为阐明天花粉蛋白 (Tk )诱导免疫抑制和基因调控的机制 ,应用ELISA方法动态测定小鼠OVA特异性T淋巴细胞培养上清液中T细胞亚群相关细胞因子的含量 ,观察Tk对高、低易感品系小鼠T细胞分泌细胞因子格局的影响。发现Tk作用下 ,高易感品系C5 7BL/ 6 (H 2 b)IL 4、IL 10分泌量大幅度增高 ,IFN γ显著下降 ;而低易感品系C3H/He (H 2 k)相应的细胞因子变化极小。上述结果表明 :(1)Tk可诱导功能性T细胞亚群向Th2 /Tc2方向分化 ,并导致OVA特异性T细胞增殖受抑 ;(2 )T细胞亚群分化与MHC背景密切相关。提示Tk作用下T细胞亚群的分化受MHC基因调控     

甲基CpG结合蛋白2与Rett综合征

DNA甲基化转录抑制的机制之一是通过在甲基化DNA上结合上特异的转录抑制因子（repressors)发挥作用的,这种转录抑制因子即为甲基CpG结合蛋白（MeCP)。现已发现了多种甲基CpG结合蛋白,如MeCP1和MeCP2等,本主要介绍MeCP2的研究状况及与Rett综合征的关系。     

钙结合蛋白S100A2与肿瘤

钙结合蛋白家族成员其结构相似，都具有与钙离子结合的区域，但功能不尽相同，特别是与肿瘤的关系研究显示出不同的功能作用。S100A2是唯一的与肿瘤发生发展呈负相关的蛋白。本文将对钙结合蛋白S100A2基因的结构、功能、定位、组织分布及其与肿瘤的关系等加以回顾，并对其在肿瘤基因治疗中的作用进行阐述。     

重组人骨形成蛋白-2对细胞成骨分化的作用

目的 进一步探讨rhBMP-2的促细胞成骨分化作用，以期找到合适的成骨分化标志作为rhBMP-2的定量活性测定指标。方法 首先表达制备rhBMP-2，用小鼠股部肌袋包埋法进行诱骨活性实验，然后检测rhBMP-2作用后的骨髓基质细胞（MSC）、NIH3T3和C2C12等3种细胞的碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（OC）、细胞总蛋白合成量以及细胞增殖的变化。结果 rhBMP-2具有良好的诱导骨形成的活性，可增加3种细胞的OC含量和蛋白合成量，对MSC的ALP活性变化影响明显，且可促进MSC的增殖，抑制NIH3T3细胞的生长。结论 rhBMP-2具有促进上述细胞向成骨细胞分化的作用；在一定剂量范围内，rhBMP-2的作用与细胞骨钙素合成量的增加呈线性正相关，故定量测定OC的含量基本可反映rhBMP-2的活性。     

钙结合蛋白S100A2与肿瘤

钙结合蛋白家族成员其结构相似,都具有与钙离子结合的区域,但功能不尽相同,特别是与肿瘤的关系研究显示出不同的功能作用.S100A2是唯一的与肿瘤发生发展呈负相关的蛋白.本文将对钙结合蛋白S100A2基因的结构、功能、定位、组织分布及其与肿瘤的关系等加以回顾,并对其在肿瘤基因治疗中的作用进行阐述.     

甲基CpG结合蛋白2与 Rett综合征

DNA甲基化转录抑制的机制之一是通过在甲基化DNA上结合上特异的转录抑制因子(repressors)发挥作用的,这种转录抑制因子即为甲基CpG结合蛋白(MeCP).现已发现了多种甲基CpG结合蛋白,如MeCP1和MeCP2等,本文主要介绍MeCP2的研究状况及与Rett综合征的关系     

转化生长因子β-1联合内脏内胚层样END-2细胞共培养对小鼠胚胎干细胞体外分化为心肌细胞的实验研究

目的添加转化生长因子_1β(TGF_β1)以及与内脏内胚层样END_2细胞共培养,定向诱导胚胎干细胞(ESCs)分化,探索联合使用化学诱导法与共培养法对ESCs的心肌细胞定向诱导分化作用。方法将ESCs悬浮培养形成2~3 d类胚体(EBs),再向培养液内添加TGF_β1,或(和)将2~3 d EBs与END_2细胞或END_2细胞条件培养液共培养。自然分化为对照组。免疫荧光技术检测心肌细胞特异性肌动蛋白(α_actin)及肌钙蛋白T(TnT)的表达,透射电镜观察分化心肌细胞的超微结构。结果向培养液添加TGF_β1或将2~3 d EBs与END_2细胞或END_2细胞条件培养液共培养,各自有(43±2.08)%(P<0.01),(69±3.61)%(P<0.01),(65±3.06)%(P<0.01)的EBs出现自发节律性收缩,均表达心肌细胞特异性蛋白α_Actin和TnT,观察到心肌样超微结构。自然分化组发生自发节律性收缩的EBs只有(12±1.53)%,尤其是联合使用两种诱导方法,自发性收缩的EBs高达(91±1.52)%(P<0.01),收缩区域较单一诱导组大,且细胞形态较单一。结论联合使用化学诱导和共培养2种诱导法对ESCs的心肌细胞定向分化有协同作用。     

Eating ourselves to death (and despair): The contribution of adiposity and inflammation to depression

Obesity and related metabolic conditions are of epidemic proportions in most of the world, affecting both adults and children. The accumulation of lipids in the body in the form of white adipose tissue in the abdomen is now known to activate innate immune mechanisms. Lipid accumulation causes adipocytes to directly secrete the cytokines interleukin (IL) 6 and tumor necrosis factor α (TNFα), but also monocyte chemoattractant protein 1 (MCP-1), which results in the accumulation of leukocytes in fat tissue. This sets up a chronic inflammatory state which is known to mediate the association between obesity and conditions such as cardiovascular disease, type 2 diabetes, and cancer. There is also a substantial literature linking inflammation with risk for depression. This includes the observations that: (1) people with inflammatory diseases such as multiple sclerosis, cardiovascular disease, and psoriasis have elevated rates of depression; (2) many people administered inflammatory cytokines such as interferon α develop depression that is indistinguishable from depression in non-medically ill populations; (3) a significant proportion of depressed persons show upregulation of inflammatory factors such as IL-6, C-reactive protein, and TNFα; (4) inflammatory cytokines can interact with virtually every pathophysiologic domain relevant to depression, including neurotransmitter metabolism, neuroendocrine function, and synaptic plasticity. While many factors may contribute to the association between inflammatory mediators and depression, we hypothesize that increased adiposity may be one causal pathway. Mediational analysis suggests a bi-directional association between adiposity and depression, with inflammation possibly playing an intermediary role.