豚鼠回肠Peyer＇s集结含神经肽Y、P物质和降钙素基因相关肽神经的分布

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合ＧＤＮ显色技术，在光镜水平观察了含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维在豚鼠回肠Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的定位与分布。结果显示，邻近Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的粘膜下层内有以上３种肽能神经纤维和神经元胞体分布，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结不同区域含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的定位有明显差异。在上皮下圆顶区，３种肽能神经分支均形成纤细的神经网，并向滤泡相关上皮方向延伸；滤泡间区含ＮＰＹ神经多循微血管壁走行、仅少数分支定位于免疫细胞之间，而含ＳＰ和ＣＧＲＰ神经以非血管性纤维为主、常分布于此区的免疫活性细胞间；滤泡区内仅见少量含ＮＰＹ和ＳＰ神经终末分布、未发现含ＣＧＲＰ神经分支。总体上，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维数较ＣＧＲＰ免疫反应纤维为多。Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经支配的发现，为研究神经肽调节消化道粘膜免疫功能提供了形态学依据。本文对Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内这些肽能神经的起源、性质及其在胃肠粘膜局部免疫反应中可能的调节机制进行了讨论。     

痢疾杆菌口服免疫小鼠肠道相关淋巴组织中CD45R^＋和CD45RB^＋…

为了解肠道相关淋巴细胞（ＧＡＬＴ）对痢疾杆菌口服免疫的应答状况，分离了Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｅｒｉ四次免疫后Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾（ＳＰ），肠系膜淋巴结（ＭＬＮ），Ｐｅｙｅｒ’ｓ结（ＰＰ），固有膜（ＬＰ）和上皮内（ＩＥ）淋巴细胞，对末次免疫后１～３ｄ内免疫组与对照组ＧＡＬＴ中的ＣＤ４５Ｒ＾＋和ＣＤ４５ＲＢ＾＋细胞群作了ＦＣＳ分析，结果免疫后起动７ｄＩＥ和ＬＰＣＤ４５Ｒ＾＋细胞增加而ＭＬＮ和ＰＰＣＤ４     

肝脏内细胞因子基因表达的定量分析

肝脏由实质性肝细胞(ＰＬＣ)和非实质性肝细胞(ＮＰＬＣ)组成,来自肝窦衬里的ＮＰＬＣ是一个异质性细胞群体,主要包括:淋巴细胞、柘否细胞(Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞)、内皮细胞、小凹细胞(ｐｉｔ细胞)和储脂细胞等,这些细胞可产生多种细胞因子,为了解有关Ｂ细胞分化及应答产生抗体的分子机制,文章作者从基因水平上研究比较了小鼠肝、脾及Ｐｅｙｅｒ’ｓ淋巴集结中细胞因子的表达,以无特异病原体小鼠(ＳＰＦ小鼠)和常规饲养小鼠为研究对象,用ＲＴＰＣＲ方法分析了上述部位中的单个核细胞(ＭＮＣ)中ＩＬ2、ＩＬ4、ＩＬ5、ＩＬ6以及ＩＦＮγ的表达水…     

GTNI与C-WISC在一组汉族儿童中测验结果的比较研究

中国———韦氏儿童智力量表(Ｃ-ＷＩＳＣ)[1]已广泛应用于教育、医疗等诸多领域,成为我国智力测验工具中的一套标准智力量表。龚氏非文字智力量表[2](Ｇｏｎｇ’ｓＴｅｓｔｏｆＮｏｎｖｅｒｂａｌＩｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ,ＧＴＮＩ)属一种文化公平的智力测验,其量表简要...     

孕中期各周β-HCG正常值测定及其临床意义

通过对孕中期β－ＨＣＧ正常值的测定，我们可得到筛查胎儿Ｄｏｗｎ’ｓ综合征所需的一组正常对照值。本实验用原子能科学院地β－ＨＣＧＲＩＡＫＩＴ进行放免检测。结果显示β－ＨＣＧ随孕周增另而逐渐下降，除孕１３周与孕２６周外，其他各孕期之间均无显著性差异，我们可用所测β－ＨＣＧ数据进行Ｄｏｗｎ‘ｓ综合征的筛查，通过对孕中期各周β－ＨＣＧ正常值的测定，可以使我们在筛查工作中，地ＨＣＧ的值有一个可对比的正常参考     

Th1和Th2细胞在痢疫苗诱导小鼠产生粘膜免疫应答 …

目的 在初步了解ＣＤ４＾＋细胞参与痢疾疫苗诱导小鼠肠粘膜免疫应答的基础上，从细胞及分子水平进一步探索Ｔｈ１和Ｔｈ２细胞在小鼠肠粘膜对痢疾疫苗免疫应答中的调节作用。方法 以本室构建的福氏２ａ及宋内氏双价痢疾疫苗株ＦＳ－２１１７或ＦＳ－５４１６灌胃免疫小鼠，从细胞表型及几种细胞因子ｍＲＮＡ表达水平两方面观察小鼠肠粘膜中Ｐａｙｅｒ氏结（Ｐｅｙｅｒ’ｓ ｐａｔｃｈ，ＰＰ）及肠系膜巴结等免疫诱导部位Ｔｈ１和     

Gas2基因在肝细胞癌中的表达及意义

已知Ｇａｓ2在细胞周期阻滞时特异性表达 ,并因其被证实参与细胞凋亡而引起人们的关注[1] 。我们对肝细胞肝癌(ＨＣＣ)和癌旁及正常肝组织中Ｇａｓ2的原位表达作对比观察 ,结合ＨＣＣ中细胞增殖及凋亡状况 ,分析Ｇａｓ2在ＨＣＣ发生、发展中的可能作用。一、材料与方法1.标本处理 :36例ＨＣＣ及相应癌旁组织取自 1999年复旦大学附属中山医院首次住院手术患者 ,另有 8例正常组织 ,取自同期因良性肿瘤而部分切除的肝手术标本。2 .原位杂交检测Ｇａｓ2ｍＲＮＡ :探针由上海肿瘤研究所提供 (与ＧｅｎｅＢａｎｋ的Ｇａｓ2ｍＲＮＡ序列有 98.6 %同…     

疾病的易感性,移植,供体选择和MHC

早在１９５０年初在Ｐｅｔｅｒ，Ｇｏｒｅｒ的实验中，Ｒｉｃｈａｒｄ Ｂａｔｃｈｅｌｏｒ’ｓ教授创造了杰出的研究业绩，包括移植、耐受、ＭＨＣ与疾病的易感性，本文对这三方面分别作了详细地论述。     

多重半套式聚合酶链反应检测脑脊液中细菌16S rRNA基因

根据细菌 16Ｓ核糖体ＲＮＡ(ｒｉｂｏｓｏｍａｌＲＮＡ ,ｒＲＮＡ)基因兼有保守性和变异性 ,以及对于本应无菌的体液标本 (如血液、脑脊液 ) ,只要确定有细菌存在即可断定为感染之特点 ,建立了多重半套式聚合酶链扩增 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｓｅｍｉ ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ)的方法 ,对脑脊液标本中细菌的感染进行检测。在ＧＥＮＥＢＡＮＫ中查得常见细菌 16ＳｒＲＮＡ基因序列 ,用ＤＮＡｓｔａｒ软件进行分析 ,在保守区Ｕ3 和Ｕ8各寻找一段序列作为细菌的通用引物 (上游引物Ｐｕ3:5′ＴＡＣＧＴＧＣＣＡＧＣＡＧＣＣＧＣＧＧＴＡＡＴＡ3′ ,下游…     

淋巴细胞杂交瘤技术创始人Milstein逝世

淋巴细胞杂交瘤技术创始人Ｄｒ .Ｃ’ｅｓａｒＭｉｌｓｔｅｉｎ于 2 0 0 2年 3月 2 4日在英国剑桥因心脏病不幸逝世 ,享年 74岁。 1975年 ,Ｍｉｌｓｔｅｉｎ同他的博士后Ｄｒ .ＧｅｏｒｇｅｓＫ¨ｏｈｌｅｒ从事了单克隆抗体的研究工作 ,于 1984年分享Ｎｏｂｅｌ医学和生理学奖。Ｍｉｌ ｓｔｅｉｎ生于阿根廷Ｂａｈｉ’ａＢｌａｎｃａ ,就读于ＢｕｅｎｏｓＡｉｒｅｓ大学 ,196 0年获得剑桥Ｐｈ .Ｄ。在其一生的学术生涯中 ,除获Ｎｏｂｅｌ奖外 ,还获得ＡｌｂｅｒｔＬａｓｋｅｒＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈＡｗａｒｄ和Ｇｅｎ…     

发育大鼠骨骼肌内GAP－43与CGRP、突触小泡标记物的分布关系

发育大鼠骨骼肌内ＧＡＰ－４３与ＣＧＲＰ、突触小泡标记物的分布关系ＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＧＡＰ－４３ｉｎｒｅｌａｔｉｏｎｔｏＣＧＲＰａｎｄｓｙｎａｐｔｉｃｖｅｓｉｃｌｅｓｍａｒｋｅｒｓｉｎｒａｔｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｓｄｕｒｉｎｇｄｅｖｅｌ...     

21－羟化酶CYP21B基因Ile~（172）→Asn错义突变

为了解先天性肾上腺皮质增生症患者的２１－羟化酶ＣＹＰ２１Ｂ基因中Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ错义突变的发生率，根据放大受阻突变体系（Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ＡＲＭＳ）的要求，设计了３种引物：５＇ｄ（ＴＴＧＧＧＡＧＡＣＴＡＣＴＣＣＣＴＧＣＴＣＴ）３＇（共同引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＡ）３＇（正常引物）、５＇ｄ（ＡＧＧＴＧＡＧＧＴＡＡＣＡＧＴ）３＇（突变引物），在７例患儿中进行了检测，发现具有本突变者３例。对其中一例进行的家系分析，结果提示：这组引物有快速、简便的优点，不需使用同位素就能对具有Ｉｌｅ~（１７２）→Ａｓｎ变异的高危家庭成员作产前诊断。     

CD4+T细胞在痢疾疫苗诱导小鼠肠粘膜免疫应答中的作用

以本室构建的双价痢疾候选疫苗株ＦＳ５４１６ 作为口服免疫原,检测了小鼠ＰＰ 结（Ｐｅｙｅｒ ,ｓ ｐａｔｃｈｅｓ） 中Ｔ 淋巴细胞的体外增殖反应, 观察了腹腔注射抗Ｌ３Ｔ４ ｍ Ａｂ 对小鼠肠粘膜部位产生特异性Ｉｇ 分泌细胞的影响。结果表明：①小鼠口服免疫后,ＰＰ 结中的ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞可产生明显的特异性增殖反应：②选择性地删除ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞后,小鼠肠粘膜无抗原特异性Ｉｇ 分泌细胞产生。以上提示,小鼠肠粘膜对痢疾疫苗的免疫应答需要ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞的参与。     

钩体内鞭毛蛋白基因重组质粒的构建、表达和免疫保护性研究

对钩端螺旋体病的有效预防亟需广谱、高效、安全、价廉的疫苗。为了获得重组表达的钩体内鞭毛亚单位蛋白抗原,以探讨制备新疫苗的途径,我们设计一对引物（Ｐ１＝５’－ＧＣＣＧＴＣＧＡＣＡＴＧＡＴＴＡＴＣＡＡＴ－３’,Ｐ２＝５’－ＧＧＣＴＡＧＣＴＡＴＴＡＧＡＴＡＴＧＣＴＧＣＡＧ－３’）,以赖型０１７株钩体ＤＮＡ为模板,利用ＰＣＲ扩增其编码基因完整的开放阅读框架,扩增产物经ＳａｌＩ、ＣｌａＩ双酶切消化后定向克隆于ｐＴ７－７载体上,构建原核表达重组质粒ｐＬＦ２。将该质粒转化入大肠杆菌ＪＭ１０９（ＤＥ３）中,经Ｉ…     

DNA修复基因hOGG1多态与食管癌遗传易感性

目的：研究修复８－羟基鸟嘌呤的ｈＯＧＧ１基因Ｓｅｒ３２６Ｃｙｓ多态与中国人食管癌易感性的关系。方法：采用病例－对照分子流行病学方法,以ＰＣＲ－单链构象多态（ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）技术,分析了２０１名正常对照和１９６例食管癌患者ｈＯＧＧ１基因第３２６位Ｓｅｒ／Ｓｅｒ、Ｓｅｒ／Ｃｙｓ和Ｃｙｓ／Ｃｙｓ基因型分布,并比较不同基因型与食管癌风险的关系。结果：正常人群的Ｓｅｒ／Ｓｅｒ、Ｓｅｒ／Ｃｙｓ和Ｃｙｓ／Ｃｙｓ基因型频率分别为３３．８％、５２．８％和１３．４％,而食管癌病例组则分别为３９．８％、３８．８％和２１．４％。虽然两组人群的Ｃｙｓ等位基因频率基本相同（３９．８％４０．８％）,但食管癌病例组的Ｃｙｓ／Ｃｙｓ基因型频率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）     

铈法取代铅法显示ACP酶的电镜细胞化学探讨

铈法取代铅法显示ＡＣＰ酶的电镜细胞化学探讨祝素文，王占友，石玉秀（中国医科大学组胚教研室沈阳１１０００１）显示酸性磷酸酶（ＡｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅＡＣＰ）的电镜酶细胞化学方法常用硝酸铅法（ＧＯｒｍｏｒｉ’ｓ）［１］。铅法有其缺点：①电镜下酶反应...     

丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合多表位抗原基因与谷胱甘肽转硫酶基因的融合表达及其在小鼠中免疫应答的研究

目的：探讨复合多表位丙型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ）及恶性疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ,Ｐｆ）双价疫苗的可行性。方法：将人工合成的复合多表位ＨＣＶ基因ＰＣＸ及Ｐｆ抗原基因ＡＢ（ＳＰｆ６６＋ＳＰｆ１０５）克隆到谷胱甘肽转硫酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＧＳＴ）表达载体ｐＧＥＸ２Ｔ中,并在大肠杆菌中高效表达ＧＳＴＨＣＶＰｆ复合抗原（ＧＳＴＣＡＢ）,分析表达产物的免疫特异性、免疫原性及安全性。结果：ＧＳＴＣＡＢ可被ＨＣＶ患者血清、鼠抗ＧＺＰＣＸ及鼠抗Ｐｆ抗体特异识别,可诱发小鼠产生针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ及ＰｆＡｇ的特异性体液免疫应答及针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ的迟发性超敏反应,免疫后ＣＤ８＋Ｔ细胞比例略为升高,免疫小鼠未见明显的毒副作用。结论：ＧＳＴＣＡＢ融合蛋白具有良好的ＨＣＶ及Ｐｆ免疫特异性,可诱发理想的体液及细胞免疫应答,可望成为ＨＣＶＰｆ双价疫苗的候选抗原。     

HBsAg中蛋白与IL-18联合核酸免疫HBsAg转基因小鼠的实验研究

对乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)转基因小鼠鼠系所进行的ＨＢＶ核酸疫苗免疫转基因小鼠的实验研究〔1,2〕 提示核酸疫苗有治疗潜力。本研究的目的是研究在白细胞介素 18(ＩＬ 18)的辅助作用下 ,ＨＢＶ表面抗原中蛋白核酸疫苗免疫ＨＢｓＡｇ转基因小鼠的效果。材料与方法质粒构建 :引物设计 :上游引物 :5′ ＧＴＡＣＴＧＣＡＧＧＣＣＡＴＧＣＡＧＴＧＧＡＡＴＴＣＣ 3′ ;下游引物 :5′ ＧＴＡＧＡＴＣＴＧＡＧＡＧＴＡＡＣＣＣＣＡＴＣＴＣＴＴＴＧ 3′。ＰＣＲ法扩增ＨＢｓＡｇ中蛋白基因序列 ,将ＰＣＲ产物亚克隆至ｐＧＥＭＴｅａｓｙ载体 (Ｐｒ…     

大鼠β防御素rBD-1的cDNA克隆

目前已在人体中证实有α、β两类防御素。尤其引人注目的是新近发现β－防御素在粘膜上皮广泛表达,其功能失活与病原微生物定植、集落于粘膜上皮而导致严重的粘膜感染关系密切。建立合适的动物模型以研究β－防御素在宿主粘膜屏障抵御病原微生物侵袭中的作用,意义重大。大鼠为常用的实验动物,本文报道大鼠β－防御素－１的ｃＤＮＡ克隆。根据ＧｅｎｅＢａｎｋ大鼠ｒＢＤ－１ｃＤＮＡ序列（登录号为ＡＦ０６８８６０）设计特异引物：Ｍ１５’３’ＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＡＣＴＴＣＡＣＣＧ;Ｍ２５’３’ＣＣＣＴＴＧＣＴＴＧＴＣ…     

原始生殖细胞迁移的分子机理

脊椎动物原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）的迁移是发育生物学最基本的问题之一。最近的研究结果表明细胞外基质、生殖腺嵴释放的趋化因子和细胞因子等，都是ＰＧＣｓ迁移过程中不可缺少的条件。对这些事件的了解不但有助于了解ＰＧＣｓ迁移的机理，而且对阐明由于ＰＧＣｓ异常迁移而引起的生殖细胞肿瘤等病理现象的机制都是有必要的。