心肌缺血再灌注亚细胞钙变化电镜细胞化学研究

应用Ｃａ（２＋）细胞化学探针－焦锑酸钾技术，结合ｘ线电子探针微区分析研究心肌缺血再灌注肌浆网、线粒体等亚细胞Ｃａ（２＋）原位分布变化。结果表明，正常细胞Ｃａ（＠＋）主要位于肌浆网内、细胞膜及细胞核内，胞浆及线粒体内无Ｃａ（２＋）颗粒。缺血３０ｍｉｎ，Ｃａ（２＋）分布变化不明显。再灌注３０ｍｉｎ及６０ｍｉｎ肌浆网及肌膜Ｃａ（２＋）明显减少，同时胞浆及线粒体内出现大量Ｃａ（２＋）沉淀颗粒。Ｘ线电子探针微区分析证实心肌亚细胞高电子密度沉淀颗粒主要成分为Ｃａ（２＋）。本研究直接证实心肌肌浆网Ｃａ（２＋）聚集能力障碍及线粒体Ｃａ（２＋）沉积增多是心肌缺血再灌注损伤的重要原因。     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

LAK和TIL细胞的表型测定

应用多种抗人淋巴细胞的单克隆抗体和流式细胞仪，分析用ＩＬ－２诱生患者淋巴细胞２周形成的ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞的表型。结果：ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（８５．０±２．５３）％，ＣＤ＿（１６）细胞为（８．３±１．０）％，证实ＬＡＫ细胞是以Ｔ细胞为主，包括有ＮＫ细胞的混合群体。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占８１．４８％，因而推测ＬＡＫ细细胞中，抗原特异性和ＭＨＣ限制性的ＣＴＬ细胞占有很大比例。ＴＩＬ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（６４．７±９．７）％，ＣＤ＿（１６）￣＋细胞为（１．６±０．２）％，Ｌｅｕ７￣＋细胞为（６．８±１．１）％。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占ＣＤ＿８￣＋细胞的８６．７６％，证实ＴＩＬ细胞主要是Ｔ细胞，ＮＫ细胞极少。     

糖尿病患者血小板游离钙变化与血栓素B2生成的关系

为了探讨糖尿病患者血小板胞浆内游离Ｃａ￣（２＋）浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）与血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）生成的关系，及其在糖尿病微血管病变发病中的作用，作者用Ｃａ￣（２＋）荧光指示剂ｆｕｒａ－２直接测定２７例糖尿病患者（合并微血管病变苔１３例，无微血管病变者１４例）血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ，并且同步测定ＴＸＢ＿２。结果：以钙载体Ａ＿（２３１８７）诱导，糖尿病组血小板［（Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为１１４７±５２ｎｍｏｌ／Ｌ，高于对照组（８９７±４９ｎｍｏｌ／ＬＰ＜０．０１），且与ＴＸＢ，生成呈正相关：而用花生四烯酸诱导，糖尿病组血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为３５３±１４ｎｍｏｌ／Ｌ，虽高于对照组（３１２±１６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０５），但与ＴＸＢ＿２生成未呈显著相关。上述改变在糖尿病有或无微血管病变两组之间比较无显著性差异，提示糖尿病患者血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ变化可能通过膜磷脂酶环节致使ＴＸＢ＿２生成增多，参与微血管病变的发病。     

人大肠癌细胞内Ca￣（2＋）浓度变化

人大肠癌细胞内Ｃａ￣（２＋）浓度变化王红梅，宋今丹石松田，徐淑芹，李北利（基础医学院细胞生物学教研室）（预防医学系中心实验室）关键词大肠癌；Ｃａ￣（２＋）浓度；原子吸收光谱法本文以原子吸收光谱法测定人大肠癌、癌周及相邻正常粘膜组织细胞内Ｃａ￣（２＋）...     

Ca^2＋对心肌的保护作用：一种临床可接受的心肌保护

内源性Ｃａ￣（２＋）是ＰＫＣ激活的强力因子,心肌长时间缺血前应用外源性Ｃａ（２＋）能否激活ＰＫＣ而保护心肌呢？在９０ｍｉｎ心肌缺血和１８０ｍｉｎ再灌注前分别给大鼠如下处理：３次短暂心肌缺血;３次ＩＰＣ前静注异搏定;３次ＩＰＣ前静注灯盏花素乙（Ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅ,ＣＨＥ）;静脉注射ＣａＣｌ＿２;灯盏花－ＣａＣｌ＿２,静注ＣａＣＩ＿２前,静脉注射灯盏花素乙。静脉注射Ｃａ￣（２＋）与ＩＰＣ能起到相同的心肌保护作用,二组心肌坏死面积较对照组明显减小上ＰＣ对心肌的保护作用可被异搏定消除;ＣａＣａ￣（２＋）及心肌缺血预处理对心肌的保护作用均可被灯盏花素乙所抑制。静注ＣａＣｌ＿２能激活ＰＫＣ而对鼠心肌起保护作用,临床很有希望在ＰＴＣＡ、心脏移植等术前用静注ＣａＣｌ＿２对心肌进行保护。     

枸杞多糖对小鼠胸腺细胞凋亡的调节

目的：以ＤＥＸ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，研究中药枸杞多糖（ＬｙｃｉｕｍＢａｒｂａｒｕｍＰｏｌｙｄｓｃ－ｃｈａｒｉｄｅ．ＬＢＰ）及氧化苦参碱（ＯＸＹ）对胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚２倍体细胞，二苯胺法测定胸腺细胞ＤＮＡ片断化％及ＤＮＡ凝胶电泳。结果：ＬＢＰ可抑制ＤＥＸ诱导的ＤＮＡ片断化，其抑制作用具有剂量依赖性，以１ｇ／Ｌ最明显；ＬＢＰ（ｌｇ／Ｌ）尚可阻止ＤＥＸ诱导的胸腺细胞内Ｃａ￣（２＋）升高。结论：ＬＢＰ可抑制ＤＥＸ诱导的小鼠胸腺细胞凋亡，ＯＸＹ对此无明显的调节作用。     

血管平滑肌α肾上腺素受体触发Ca~2 运动的研究

血管平滑肌α肾上腺素受体触发Ｃａ￣２＋运动的研究课题负责关永源（中山医科大学药理学教研室；广州，５１００８９）该项研究采用离体血管条收缩，Ｃａ￣２＋内流子外溢及Ｆｕｒａ－２荧光测定胞浆Ｃａ￣２＋瞬即变化等技术，研究血管平滑肌α肾上腺受体触发Ｃａ￣２＋...     

败血症休克时心肌钙释放功能的变化

目的：观察败血症休克大鼠心肌肌浆网（ＳＲ）钙诱发的钙释放（ＣＩＣＲ）功能变化。方法：盲肠结扎穿孔法复制大鼠败血症休克；蔗糖密度梯度离心法制备心肌ＳＲ膜；测定ＳＲＣＩＣＲ。结果：由被动和主动负载Ｃａ￣（２＋）的ＳＲＣＩＣＲ在休克早期降低不明显，晚期明显减少，Ｃａ￣（２＋）对ＣＩＣＲ作用的Ｋ＿ｍ值无明显显影响。结论：随着休克进展，心肌ＳＲ　ＣＩＣＲ损伤加重，其受损机理不是由于Ｃａ￣（２＋）与钙释放通道的亲和力改变所致。     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

Mechanism of allyl chloride-induced cytoskeletal injury to nerve cells

ＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｌｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｄｕｃｅｄｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔａｌｉｎｊｕｒｙｔｏｎｅｒｖｅｃｅｌｓＸｉｅＫｅｑｉｎ谢克勤,ＳｕｎＫｅｒｅｎ孙克任,ＧａｏＳｈｕｊｕｎ高树君,ＺｈａｎｇＬｅｉ张磊ａｎｄＺｈａｎｇＭｉｎ张Ｉｎｓｔｉ...     

心肌内钙细胞化学及EDX能谱分析

用焦锑酸钾法对心肌内钙进行细胞化学定位,经X射线能量失散谱分析(EDX)法显示,OPP法及PPP法对细胞内结合钙均有特异性反应,OPP法更为敏感。钙细胞化学证明心肌内钙的分布是高度隔室化的,其主要钙贮存池是肌浆网和线粒体,其中肌浆网含钙量更高,焦锑酸钾钙细胞化学定位及EDX能谱分析对进一步探讨钙在心肌细胞代谢及损伤过程中的作用机制有重要意义。     

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜—能谱技术研究失血心肌细胞内Ca~（2＋）的分布

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜－能谱技术研究失血心肌细胞内的Ｃａ（２＋）的分布。结果表明：在失血心肌细胞的线粒体和内质网内的Ｃａ（２＋）明显增多。这一结果对探讨失血肌细胞损伤机理具有一定意义。     

用电镜X射线显微分析法研究梗塞样心肌细胞内钙的分布

用电子显微镜X射线显微分析技术,结合用新鲜组织的快速冷冻固定及冷冻超薄切片技术,对新鲜大鼠心房细胞肌原纤维内Ca~(2+)进行定量分析。大鼠经30mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)皮下注射后6G,发现肌原纤维Ca~(2+)浓度明显升高,达每kg(干重)361mmol/L,正常对照组的Ca~(2+)浓度小于1mmol/L,每kg(干重),而ISO与异搏定同时使用时Ca~(2+)浓度与对照组近似。结果证明,ISO引起的心肌细胞缺血损伤与肌原纤维内Ca~(2+)浓度升高有关,而异搏定能阻止Ca~(2+)内流,有对抗ISO的心肌毒作用。     

氯丙烯对鸡胚脑神经细胞钙稳态与能量合成影响的研究

进一步研究氯丙烯的中毒机理,探讨氯丙烯对神经细胞内钙稳态与能量合成的影响。方法用Fura-2／AM、电子探针X线微区分析、ATP生物发光分析等方法测定氯丙烯染毒后鸡胚脑神经细胞内游离Ca2+、钙百分含量及ATP、ADP、AMP含量的改变。 结果随着氯丙烯浓度的增加,细胞内游离Ca2+浓度、钙百分含量明显增加(P     

牛磺酸对心肌细胞核钙转运功能异常的保护

目的：为观察异丙肾上腺素（ISO）致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能的异常变化及牛磺酸对其影响。方法：给Wistar大鼠皮下注射5mg/kgISO液,造成心肌缺血损伤模型。超速离心分离纯化心肌细胞核。酶学方法鉴定核纯度和测定核膜Ca^2 -ATP酶活性,同位素法观测核钙的摄取。结果：与正常对照组比较,心肌缺血组（实验组）心肌细胞核膜Ca^2 依赖性ATP酶活性降低18．1％（P＜0．05）,^45Ca^2 摄取效率也显著降低,其最反应速度（Vmax)降低56.4％,细胞核心Ca^2 依赖性ATP酶的最大反应速度（Vmax)降低33．0％（P＜0．05）。平衡常数（Km)降低42．8％（P＜0．01）。牛磺酸保护组心肌细胞核Ca^2 －ATP酶活性及核^45Ca^2 摄取与正常对照组比较均未见显著性改变。结论：牛磺酸对ISO致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞钙转运功能降低有保护作用。     

晶体停搏液中钙离子浓度对幼兔未成熟心肌的保护作用

OBJECTIVE: To determine the myocardial protective effect of St. Thomas II cardioplegia at different calcium concentration on immature myocardium. METHODS: Isolated perfused neonatal rabbit hearts from three groups (the calcium concentration of St. Thomas II cardioplegia was modified: [Ca2+] 0.6 mmol/L; [Ca2+]1.2 mmol/L; [Ca2+]2.4 mmol/L) were subjected to 20 degrees C hypothermia, 90 minutes of global ischemia followed by 30 minutes reperfusion in Langendorff mode. RESULTS: Although the recovery of LVDP, +/- dp/dtmax at calcium content of 2.4 mmol/L after 10 minutes of reperfusion was significantly higher than that at 0.6 and 1.2 mmol/L calcium (P < 0.05, P < 0.01, respectively), the declined tendency of left ventricular hemodynamics in this group was detected after 20 minutes of reperfusion. By the end of 30-minute reperfusion, the left ventricular hemodynamic recovery at 2.4 mmol/L calcium did not differ from those at 0.6 mmol/L and 1.2 mmol/L calcium. Conversely, postischemic left ventricular functions at 0.6 and 1.2 mmol/L calcium were gradually improved during the 30 minutes reperfusion. Ca(2+)-ATPase activity at 2.4 mmol/L calcium showed significant increase (P < 0.01, P < 0.001), whereas ATP content was lower than that of other groups. CONCLUSION: Calcium accumulated in extracellular space during ischemia enters myocardial cell via Ca2+ channel and Ca2+/Na+ exchange after reperfusion, activates Ca(2+)-ATPase, and finally accelerates adenosinetriphosphate (ATP) consumption induced by calcium, which would be responsible for the results of our study. We conclude that, from the point of view of myocardial cell energy metabolism, St. Thomas II cardioplegia at high calcium concentration can not provide immature myocardium with optimal myocardial protection.     

参附注射液保护阿霉素心肌毒性机理研究

目的:观察参附注射液保护阿霉素心脏毒性的作用机理.方法:急性分离单个心肌细胞,运用TILLVISION钙离子荧光成像及分析系统,观察不同组间单个心肌细胞内游离钙离子的浓度变化.结果:阿霉素可引起心肌细胞内钙离子水平显著升高(P＜0.01),参附注射液干预可显著降低异常心肌细胞内游离钙离子浓度;同时,参附注射液还可抑制咖啡因诱导的内钙释放.结论:参附注射液对阿霉素心脏毒性的保护作用可能是通过抑制肌浆网的内钙释放,避免心肌细胞内钙超载,从而维持细胞内钙离子水平,达到保护心肌的作用.     

不同表面处理条件下钛瓷结合界面的研究

目的 研究不同表面处理条件下钛瓷界面的形态学特征及钛、硅氧等元素的扩散情况．方法 在纯钛表面用8种不同表面处理方法烧结Ti-Bond瓷粉，其中预氧化按不同温度分为：300℃、400℃、500℃、600℃4组，自然氧化按不同时间分为：5min、15min、2h、24h4组，采用扫描电子显微镜及电子探针检测界面形貌及元素扩散情况。结果 500℃预氧化组、600℃预氧化组扫描电镜图片观察到钛瓷结合处钛基体表面的裂缝及剥离面，电子探针检测发现界面处各元素呈梯度分布，硅、氧元素分布的梯度与钛元素相反。结论 裂缝及剥离面的出现说明了钛瓷分离的部位及钛氧层的脆性。不同表面处理各组元素扩散宽度不同，但难于准确测量比较．