乌贼墨诱生小鼠细胞毒因子活性的检测

用乌贼墨处理小鼠后，采集血清。经体外细胞毒实验证明：乌贼墨诱生的血清对人和鼠的肿瘤细胞株均有不同程度的杀伤作用。这一结果提示：乌贼墨可能具有诱生内源性细胞毒因子产生的活性。     

乌贼黑提取物对体内巨噬细胞的激活作用

目的：以白细胞介素１（ＩＬ－１）和α肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的产生水平及巨噬细胞的吞噬功能为指标，通过检测乌贼墨提取物在体内对巨噬细胞的活化作用，进一步了解乌贼墨的抗肿瘤机理。方法：以常规生物学测定的＾３Ｈ－ＴdＲ掺入法和细胞素测定法进行检则。结果：乌贼墨提取物处理组动物的ＩＬ－１和ＴＮＦ－α的生产水平及巨噬细胞的吞噬功能均较对照组呈现有显著意义的增高或增强。结论：乌贼墨提取物呆于体内激活巨噬细     

乌贼墨提取物对体内巨噬细胞的激活作用

目的：以白细胞介素１（ＩＬ－１）和α肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的产生水平及巨噬细胞的吞噬功能为指标,通过检测乌贼墨提取物在体内对巨噬细胞的活化作用,进一步了解乌贼墨的抗肿瘤机理。方法：以常规生物学测定的３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和细胞毒测定法进行检则。结果：乌贼墨提取物处理组动物的ＩＬ－１和ＴＮＦ－α的产生水平及巨噬细胞的吞噬功能均较对照组呈现有显著意义的增高或增强。结论：乌贼墨提取物可于体内激活巨噬细胞,增强细胞免疫功能,间接发挥抗肿瘤作用。     

乌贼墨的抗感染作用

目的：研究乌贼墨的体外抗菌作用和对小鼠感染模型的体内抗感染作用。方法：琼脂打孔法检测乌贼墨体外抗菌活性，并通过小鼠死亡率观察乌贼墨对小鼠抗感染能力的影响。结果：新鲜乌贼墨与粗提乌贼墨在体外对琼脂打孔法中的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎双球菌无抑菌圈产生。但实验组小鼠大肠埃希菌感染后与对照组小鼠比较，其死亡率有明显降低。结论：用琼脂打孔法测新鲜乌贼墨与粗提乌贼墨在体外无抗菌活性，但粗提乌贼墨在体内可以提高小鼠对大肠埃希菌感染的抵抗力。     

乌贼墨促凝血作用机制的实验研究

作者对乌贼墨促进凝血的机制进行了研究。实验结果显示，乌贼墨能够缩短小白鼠的凝血时间，使兔血清中纤溶酶活性明显降低，但对兔血小板数量无影响。     

小鼠自然杀伤细胞在乌贼墨作用下的活性表达

目的：研究乌贼墨对BALB／c小鼠脾细胞自然杀伤（NK）细胞活性的诱生作用。方法：用5％的乌贼墨给小鼠灌胃，连续5d后取不同时间的小鼠脾细胞，应用乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性。同法观察乌贼墨对S180和Meth A荷瘤鼠的抑瘤作用。结果：口服乌贼墨后可使小鼠NK细胞杀伤活性增强，实验组与对照组比较有显著性差异，（P＜0.01）；诱生后24h至7d NK细胞杀伤活性处于高峰期，2周左右恢复正常水平；乌贼墨可使荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性增强，瘤体缩小。结论：乌贼墨能诱导小鼠NK细胞杀伤活性，抑制荷瘤鼠瘤体的生长。     

乌贼墨的药理作用研究进展

乌贼属于软体动物门头足纲乌贼目乌贼科。乌贼墨由墨囊中的分泌腺合成,在墨囊中储存,是乌贼遇到天敌时喷出来染黑周围水域的黑色物质。我国医药对乌贼的应用历史悠久,对乌贼墨的药用始于止血。现代对乌贼墨的研究是从乌贼墨中黑色素的结构及其生物合成开始的。自从日本学者发现乌贼墨的抗肿瘤活性以来[1],对其免疫调节作用、抗肿瘤作用的研究已成为热点。然而在生产中乌贼的墨囊一般是作为废弃物弃去的,因此挖掘其潜在药用价值对于充分利用海洋资源、扩大药源有深远意义。现重点就乌贼墨的理化性质和药理作用,尤其是抗肿瘤作用综述如下。1乌…     

乌贼墨抗癌活性的实验研究

乌贼墨作为一种中药，文献上早有记载。它主要作为止血剂，治疗出血性疾病，如功能性子宫出血、胃出血等^[1]。实验证明它可以预防实验动物放射病^[2]。1991年日本学者发现乌贼墨囊中含有高效抗癌物质^[3]。1994年吕昌龙^[4]也证明乌贼墨具有抗癌活性。我们观察了乌贼墨对荷人肝癌HHC15裸小鼠的抑瘤作用，现将实验结果报道如下。     

肿瘤坏死因子抗肿瘤作用及机理研究进展

肿瘤坏死因子抗肿瘤作用及机理研究进展空军成都医院（６１００６１）周晓武综述第三军医大学大坪医院张胜本审校Ｃａｒｓｗｅｌｌ及Ｏｌｄ等人的研究发现，经卡介苗致敏注射脂多糖后，小鼠血清中存在着一种导致ＭｅｔｈＡ肉瘤发生出血坏死的物质，由Ｏｌｄ将该物质命名为...     

乌贼墨中主要活性成分的定性定量分析

目的:建立乌贼墨主要活性成分的定性鉴别与定量分析方法.方法:通过黑色素溶于碱性溶液、在酸性环境中有黑色物质析出的性质对黑色素进行定性鉴别,采用HPLC-AccQ-Tag法测定乌贼墨中甘氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸和丙氨酸的含量,采用原子吸收分光光度法测定乌贼墨中微量铁元素的含量.结果:在鉴别反应中,乌贼墨黑色素可溶于2 mol/L氢氧化钠溶液,并在2 mol/L盐酸溶液中有黑色飘浮状物析出.4种氨基酸和铁元素的加样回收率均在95%～105%之间, RSD均小于5%(n＝6),3批乌贼墨样品中甘氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸和铁元素的平均含量分别为7.37、11.23、12.05、7.32和0.206 mg·g-1.结论:乌贼墨活性成分的定性定量方法准确可靠,重复性好,可用于乌贼墨的质量控制.     

Antioxidant Effect of Sepia Ink Extract on Extrahepatic Cholestasis Induced by Bile Duct Ligation in Rats

Objective The aim of our study was to assess the complications of hepatic fibrosis associated with bile duct ligation and the potential curative role of sepia ink extract in hepatic damage induced by bile duct ligation.
Methods Rattus norvegicus rats were divided into 3 groups: Sham-operated group, model rats that underwent common bile duct ligation (BDL), and BDL rats treated orally with sepia ink extract (200 mg/kg body weight) for 7, 14, and 28 d after BDL.
Results There was a significant reduction in hepatic enzymes, ALP, GGT, bilirubin levels, and oxidative stress in the BDL group after treatment with sepia ink extract. Collagen deposition reduced after sepia ink extract treatment as compared to BDL groups, suggesting that the liver was repaired. Histopathological examination of liver treated with sepia ink extract showed moderate degeneration in the hepatic architecture and mild degeneration in hepatocytes as compared to BDL groups.
Conclusion Sepia ink extract provides a curative effect and an antioxidant capacity on BDL rats and could ameliorate the complications of liver cholestasis.     

全不相合与全相合骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入

【目的】 探讨全不相合与全相合供者骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入情况。【方法】 以异基因脾细胞输注致敏的BALB/c小鼠作为移植受者,致敏模型经8 Gy 60Co照射后分别经尾静脉移植1 × 107 C57BL/6或BALB/c供者的骨髓细胞。予CFSE标记供者骨髓细胞,并分别在移植后不同时间点(2、12及48 h),通过病理切片及组织细胞悬液动态示踪供者细胞在致敏受者各组织的分布。移植后记录各组的生存情况,每周监测造血重建与骨髓恢复情况。【结果】 归巢实验表明C57BL/6骨髓细胞在致敏受者股骨的分布随时间推移先增加而后减少,在脾脏的分布随时间推移呈进行性减少。BALB/c骨髓细胞在致敏模型股骨及脾脏的分布均随时间推移而增加。接受C57BL/6骨髓细胞的致敏模型于移植第12 ~ 15天内全部死亡,血象及骨髓象呈进行性下降;而接受BALB/c骨髓细胞的能长期存活,血象及骨髓象能迅速恢复。【结论】 全不相合的供者骨髓细胞在致敏模型中完全被排斥,而全相合供者的骨髓细胞能在致敏模型中能进行有效的归巢与植入。     

骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内示踪归巢的实验研究

 【目的】了解骨髓间充质干细胞在以异基因脾细胞输注致敏小鼠体内的归巢情况。【方法】正常同种异基因小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及鉴定后,体外予经羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯荧光染料标志,经尾静脉注射到致敏组和非致敏组小鼠体内（每组10只）,在6h、24h和48h处死动物,分别应用冰冻切片和流式检测方法了解骨髓间充质干细胞在各个脏器的分布情况。【结果】冰冻切片和流式检测结果均表明骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内迅速和持久在脾,肝脏聚集,而非致敏动物却没有明显聚集到肝脾等脏器,却是最终归巢到了骨髓。其中流式定量结果表明：6h时致敏小鼠脾脏荧光阳性细胞为（3.78±0.66）％,与同期正常小鼠脾脏结果比较P ＜0.05,有统计学意义;而在48h时致敏小鼠骨髓荧光阳性细胞为（0.43±0.35）％,同期正常小鼠骨髓为（5.40±1.58）％,两者比较 P ＜0.05,有统计学意义。【结论】应用异基因脾细胞致敏的小鼠体内肝脾等免疫脏器明显受到致敏影响,其对骨髓间充质干细胞体内归巢的定位具有很高的趋化吸附作用,中止了骨髓间充质干细胞正常状态下向骨髓的归巢。     

肥胖型哮喘小鼠体内氧化应激反应变化及其与气道炎症和重构的关系

目的探讨肥胖型哮喘小鼠体内氧化应激反应变化及其与气道炎症和重构的关系。方法 60只雌性C57/6 J小鼠随机分为哮喘组、肥胖组、肥胖哮喘组和对照组。哮喘组在普通饲料基础上,采用卵白蛋白腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法构建哮喘模型;肥胖组采用高脂饮食诱导肥胖模型;肥胖哮喘组在高脂饲料基础上,采用卵白蛋白致敏激发构建肥胖哮喘模型;对照组以普通饲料饲养,生理盐水致敏激发。12周后收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞计数及分类。ELISA法测定肺组织匀浆中IL-6和8异前列腺素2α（8-iso-PGF2α）水平。肺组织切片观察小鼠病理变化,测定气管壁总面积（WAt）、气道平滑肌面积（WAm）和管腔基底膜周长（Pbm）。结果肥胖哮喘组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸粒细胞比例、肺组织IL-6水平以及气管壁总厚度（WAt/Pbm）均较肥胖组、哮喘组明显增高（P〈0.05）。肥胖哮喘组的平滑肌层厚度（WAm/Pbm）较肥胖组增高,但与哮喘组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肺匀浆8-iso-PGF2α水平按肥胖哮喘组、哮喘组、肥胖组、对照组的顺序依次降低（P〈0.05）,且与BALF白细胞总数、WAt/Pbm及IL-6水平呈正相关（r值分别为0.828、0.863和0.891,P〈0.01）。结论氧化应激反应参与了肥胖哮喘小鼠气道炎症和重构过程。     

过敏性休克小鼠血清及 BALF中 IL-4、IL-6 和 IgE 水平检测及其临床意义

目的 通过研究过敏性休克小鼠模型致敏组和对照组中 IL-4、IL-6 和 IgE 的不同表达,进一步探讨过敏性休克的免 疫学发病机制,为人类过敏性休克的治疗提供新的思路。 方法 雄性昆明种小鼠 60 只随机分成致敏组 40 只和对照组 20 只。致敏组 小鼠于第 1 天腹腔注射致敏原卵蛋白（OVA）0.25ml,1 周后加强注射一次,饲养 3 周后尾静脉注射 OVA 0.5ml 诱发过敏性休克;对照 组以同等量的 PBS 缓冲液代替。以酶联免疫吸附（ELISA）法检测致敏组和对照组小鼠血清及肺泡灌洗液（BALF）中 IL-4、IL-6 和 IgE 的水平。 结果 成功建立过敏性休克小鼠模型。致敏组血清 IL-4、IL-6 和 IgE 的水平分别是对照组的 3.59、2.49、2.83 倍。致敏组 BALF 中 IL-4、IL-6 和 IgE 的水平分别是对照组的 2.75、1.82、1.58 倍。致敏组血清及 BALF 中 IL-4、IL-6 和 IgE 水平两两呈正相关 （均 P＜0.01）;对照组血清及 BALF 中 IL-4、IL-6 和 IgE 水平均无关（均 P ＞0.05）。 结论 血清及 BALF 中 IL-4、IL-6 水平升高提 示细胞因子可能参与过敏性休克发病过程。IL-4、IL-6 与 IgE 之间的相关性研究提示,IL-6 可能通过上调 IL-4 的表达在过敏性休克 的发病过程中发挥作用。     

The effect of Astragapolysaccharide on the lymphocyte proliferation and airway inflammation in sensitized mice

Ａｉｒｗａｙｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｂｙｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｅｌｓ,ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓａｎｄａｃｔｉｖａｔｅｄＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｓｏｆａｓｔｈｍａ...     

雷公藤对致敏小鼠T细胞活化及其IL-5 mRNA表达的影响

目的　探讨致敏小鼠T淋巴细胞活化与IL 5mRNA表达间的关系及雷公藤内酯醇 (TP)的影响。方法　采用卵蛋白(OVA )致敏的方法建立模型 ;运用免疫细胞化学与原位杂交双染法 (ICC ISH)观察活化的T淋巴细胞 (CD2 5 )与IL 5mRNA表达的相关性及TP、地塞米松 (DM)的影响 ;同时就TP的作用与DM相比较。结果　致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与正常对照组间无显著差异(P >0 0 5 )。经TP、DM处理后 ,致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著低于致敏组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著低于致敏组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著高于致敏组 (P <0 0 1) ,而CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与致敏组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。TP组与DM组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 5mRNA表达与T淋巴细胞活化关系密切。TP、DM抑制T淋巴细胞活化可能是其抑制IL 5产生的机制之