正常鼠和免疫鼠CD3AK细胞和LAK细胞杀伤活性的比较研究

实验取正常鼠和Ｐ８１５肿瘤细胞致敏的免疫鼠脾细胞，经抗ＣＤ３抗体与低剂量ＩＬ－２或高剂量ＩＬ－２分别诱生为ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞，用改良的乳酸脱氢酶释放法以Ｐ８１５细胞和ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，测定ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果表明：正常鼠ＣＤ３ＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性高于ＬＡＫ细胞，对ＹＡＣ－１细胞的杀伤活性低于ＬＡＫ细胞。免疫鼠ＬＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性明显增高，高     

LAK和TIL细胞的表型测定

应用多种抗人淋巴细胞的单克隆抗体和流式细胞仪，分析用ＩＬ－２诱生患者淋巴细胞２周形成的ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞的表型。结果：ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（８５．０±２．５３）％，ＣＤ＿（１６）细胞为（８．３±１．０）％，证实ＬＡＫ细胞是以Ｔ细胞为主，包括有ＮＫ细胞的混合群体。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占８１．４８％，因而推测ＬＡＫ细细胞中，抗原特异性和ＭＨＣ限制性的ＣＴＬ细胞占有很大比例。ＴＩＬ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（６４．７±９．７）％，ＣＤ＿（１６）￣＋细胞为（１．６±０．２）％，Ｌｅｕ７￣＋细胞为（６．８±１．１）％。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占ＣＤ＿８￣＋细胞的８６．７６％，证实ＴＩＬ细胞主要是Ｔ细胞，ＮＫ细胞极少。     

肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

Graves病患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞变化的临床意义

对４４例Ｇｒａｖｅｓ病初治患者于治疗前检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ＮＫ细胞活性，结果显示ＣＤ＿３细胞与正常对照组差异无显著性（Ｐ＞０．０５），ＣＤ４细胞低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），ＣＤ＿细胞显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＣＤ＿４／ＣＤ＿８值及ＮＫ细胞则显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），并发现这些变化与Ｔ３、Ｔ４无显著相关性。对Ｇｒａｖｅｓ病的细胞免疫改变作了初步讨论。     

用IL－2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌症病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞体外增殖试验，结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６），ｃｐｍ值较治疗前均有明显的提高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；在Ｔ细胞亚群的测定中，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较，ＣＤ３＋和Ｃ８＋细胞都未发现明显的差异，只有Ｃ４＋细胞较治疗前（１３／１７）有了显著提高（Ｐ＜０．０１）；ＮＫ细胞虽未达到正常水平，但也显示较治疗前有显著增高的倾向；结果表明，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞疗法既对肿瘤细胞有直接杀伤作用，也对细胞免疫起了明显的促进作用。     

CD_3AK细胞的培养与抗肿瘤活性研究

目的体外扩增经ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）活化的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ），并测定其抗肿瘤细胞作用和表型变化。②方法取１３例肺癌和２例肝癌病人外周血，经密度梯度离心获取淋巴细胞，以ＣＤ３ＭｃＡｂ和ＩＬ－２作为诱导剂，采用液相三步扩增方法扩增培养，并分别用ＭＴＴ和ＩＦＡ法与自体ＬＡＫ对照细胞比较细胞动力学、细胞毒作用和表型变化。③结果ＣＤ３ＡＫ细胞扩增速度、数量和抗肿瘤活性均优于自体ＬＡＫ细胞，其表型为ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８和ＣＤ１６的特殊异源淋巴细胞群。其中ＣＤ４亚群表型数量随培养时间延长明显升高（χ２＝７．６６，Ｐ＜０．０１），而ＣＤ１６则明显下降（χ２＝５．２３，Ｐ＜０．０５），该亚群表型变化可能与培养时间有关。④结论ＣＤ３ＡＫ细胞具有较强的杀肿瘤细胞作用，同时也可作为基因治疗的理想载体细胞。     

静注CD_3AK细胞治疗晚期肝癌的初步观察

用培养７ｄ以上的ＣＤ３单抗激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）加ｒＩＬ－２静注治疗晚期肝癌２１例，其中ＣＲ１例，ＰＲ５例，临床有效率以ＣＲ＋ＰＲ计为２８．９％，明显高于ＬＡＫ细胞抗肝癌疗效。治疗后大多数病人临床症状改善，生活质量提高，外周血ＣＤ３＋、ＣＤ４＋升高，ＣＤ８＋下降，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋升高，统计学检验均有显著差异。患者血清ＳＩＬ－２Ｒ水平明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：静脉注射ＣＤ３ＡＫ细胞可以降低肝癌患者机体瘤负荷，增强机体免疫力，从而对晚期肝癌产生较好的治疗效果。     

植物血凝素激活的LAK细胞激活培养条件与其生物学特性关系的研究

将ＰＨＡ和ｒＩＬ ２合理配伍应用于ＬＡＫ细胞的激活培养中，研究了ＰＨＡ ＬＡＫ细胞的增殖、细胞毒活性及表型。结果表明：培养条件中加入适量ＰＨＡ可促进ＰＨＡ ＬＡＫ的增殖（Ｐ＜０．０５），不影响其细胞毒活性。ＰＨＡ／ｒＩＬ ２共同预刺激组于培养第２ｄ细胞数明显下降（３０％～４０％），但其到达增殖高峰的时间、峰值及扩增倍数与同一培养条件下的ＰＨＡ单独预刺激组相比，差别无显著性（均为Ｐ＞０．０５）；但前者对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ的杀伤高峰值大于后者（Ｐ＜０．０１）。各组ＰＨＡ ＬＡＫ中有０．６０～０．７７的细胞为ＣＤ３＋Ｔ细胞，但ＰＨＡ ＬＡＫ／ｒＩＬ ２共同预刺激者的ＣＤ３＋、ＣＤ８＋细胞所占比率较ＰＨＡ单独预刺激者为高（Ｐ＜０．０５）。     

开放性骨折早期外周血T细胞亚群及可溶性白细胞介素—2受体的变化

目的 研究不同程度开放性骨折早期机体免疫状态。方法 伤后ｄ３留取外周止血样本,采用流式细胞法及双抗夹心ＥＬＩＳＡ法对３２例开放性骨折患者及２０例正常体查者的Ｔ细胞亚群及ｓＩＬ－２Ｒ进行了检测。结果 与对照组相比ＣＤ３及ＣＤ４细胞百分比明显下降,ＣＤ８细胞百分比明显上升,ＣＤ４／ＣＤ８值下降明显（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,开放性骨折ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对对照组（Ｐ〈０．０１）,结论开放性骨折     

冠心病患者外周血T细胞亚群及Ig抗核抗体检测和分析

用ＣＤ系列ＡＢＣ法检测４０例冠心病（ＣＨＤ）患者及３２例正常对照者外周血Ｔ细胞亚群及免疫球蛋白抗核抗体（ＩｇＡＮＡ）。结果表明ＣＨＤ组ＣＤ￣＋＿３、ＣＤ￣＋＿４和ＣＤ￣＋＿８比正常对照组显著减少（Ｐ＜０．０１）。ＣＨＤ组Ｔ细胞亚群各参数在性别上差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。而男性ＣＨＯ的老年期亚组ＣＤ￣＋＿８比老年前期亚组显著减少（Ｐ＜０．０５）。ＣＨＯ组ＩｇＧＡＮＡ阳性率较正常对照组显著增高（Ｐ＜０．０１）。认为细胞免疫功能低下及体液免疫功能亢进的免疫功能失调可能有助于冠心病的发生和（或）发展。     

Induction of LAK cells in acute leukemia patients and kinetics of LAK activity in long term culture in vitro

Peripheral blood mononuclear cells(PBMNC)isolated from patients with acuteleukemia(AL)and from normal controls were cultured in a medium containing1000units/ml of recombinant interleukin-2(IL-2).Marked LAK activity was induced onthe third culture day in the normal controls,with the highest cytotoxicity appearing be-tween day 3 and 5,whereas induction of LAK activity in the AL patients began on the5th day of culture,with a peak level appearing at day 15,showing that the peak ofLAK activity was significantly delayed in AL.LAK cells surface phenotyping tests showedthat CD_8 and CD_(16) positive cells began to increase significantly from day 5 and reachedthe highest level at week 3,whereas CD_4~- subclass began to decrease at day 5 anddropped to the nadir at week 3,indicating that LAK activity was positively correlatedwith the proportion of CD_8~+ and CD_(16)~+ cells,but negatively with that of CD_4~+ cells.     

LC-CW对人LAK细胞的影响及其机理的研究

提取干酪乳酸杆菌细胞壁成分(LC-CW),研究其对人外周血LAK细胞的影响及其作用机理。结果表明,1.LC-CW可以单独或与IL-2协同,促进PBL的增殖。2.LC-CW可以增强rIL-2诱导的人外周血LAK细胞杀伤Raji细胞的作用,统计学分析有显著意义。但是单独使用LC-CW不能诱导LAK细胞杀伤活性。3.LC-CW可使PBL的CD_4~+,CD_(16)~+抗原表达增加,与IL-2协同,可增加CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+和CD_(25)~+抗原的表达。4.LC-CW可促进PHA-P诱导的IL-2的产生。本研究结果提示LC-CW是一种重要的LAK细胞活性增强因子。     

慢性活动性肝炎、肝炎后肝硬化患者外周血LAK细胞活性的研究

用~(125)I释放法测定慢性活动性肝炎、肝炎后肝硬化各13例患者外周血LAK细胞活性。结果:慢活肝组为17.95±7.54%、肝炎后肝硬化组为19.97±4.65%,均显著低于健康对照组35.89±6.7%(P<0.01),LAK细胞活性低下可能是导致慢性活动性肝炎、肝炎后肝硬化迁延不愈的原因之一。     

CD3AK细胞的诱导及其体外抗肿瘤活性的实验研究

本研究采用抗ＣＤ３单克隆抗体辅以少量的基因重组人白细胞介素２和植物血凝素诱导外周血淋巴细胞，成功地研制出具有抗瘤活性的ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞。     

肝硬化患者外周血T细胞亚群检测及意义

应用 OKT 系列单克隆抗体,通过间接免疫荧光法,对25例肝硬化失代偿期患者及30例正常人外周血 T 细胞亚群进行检测。结果表明肝硬化患者 CD_8细胞阳性率高于正常组(P<0.01),CD_4/CD_(?)比值较正常组为低(P<0.01),提示肝硬化患者机体存在免疫功能紊乱。     

小鼠CD3AK的诱生与抗瘤活性的实验研究

采用固相抗小鼠ＣＤ３单抗和重组白细胞介素２刺激小鼠脾细胞以诱生抗ＣＤ３单抗激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）。结果表明这种方法诱生的ＣＤ３ＡＫ能够增殖并介导体外抗瘤活性。     

最优化细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞 少因子培养体系的探索

 【目的】 尝试使用IL-2、IL-7和IL-12的单因子、双因子和三因子组合进行杀伤细胞/自然杀伤细胞(CIK/NK)细胞扩增培养,探讨最优化CIK/NK细胞少因子培养体系的建立.【方法】 采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞并分成6组,每组分别加入IL-2(80 ng/mL)、 IL-7(40 ng/mL)及IL-12(40 ng/mL)的单因子、双因子和三因子组合(IL-7组;IL-12 组;IL-7+IL-12组;IL-2 + IL-7组;IL-2 + IL-12组;IL-2 + IL-7 + IL-12组),每组6个重复孔,共培养21 d收获细胞。在细胞培养开始和第21天,实验各组取细胞悬液进行流式细胞仪检测CD3+ CD56 + CIK细胞及CD3- CD56+ NK细胞比例。【结果】 单因子培养体系的IL-12组在CIK细胞扩增比例上是各组中最高的(22.96 ± 1.41)%,双因子体系的IL-2 + IL-12组的CIK细胞扩增比例也达到(18.58 ± 0.68)%;上述两组的CIK细胞扩增比例已经达到或基本达到使用传统多因子扩增方法所获得的比例&;#65377;IL-12组的NK细胞扩增比例为(30.23 ± 1.18)%,IL-2 + IL-7组的NK细胞扩增比例也达(29.52 ± 0.89)%。 【结论】 使用IL-12、IL-2 + IL-12或IL-2 + IL-7组合的少因子培养体系进行CIK/NK细胞的培养扩增是可行的。     

血栓闭塞性脉管炎患者T细胞亚群的改变

应用间接SPA花环法检测了57例血栓闭塞性脉管炎患者的外周血T细胞亚群,并以50例正常人作为对照。结果表明:血栓闭塞性脉管炎患者在活动期和稳定期CD_3、CD_4和CD_8细胞的百分率均明显低于正常对照组,其中以活动期CD_8百分率下降最明显,CD_4/CD_8比值明显升高,稳定期CD_4/CD_8比值与正常组无统计学意义。