远隔肢体缺血预处理对兔单肺缺血-再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 从细胞凋亡的角度探讨远隔肢体缺血预处理影响兔肺缺血-再灌注(I-R)损伤的可能机制.方法 18只日本大耳白兔随机均分为三组:缺血-再灌注组(I-R组)、肢体缺血预处理组(R组)、假手术组(S组).建立兔在体左肺缺血-再灌注(I-R)损伤模型.通过采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端缺口标记技术(TUNEL)检测再灌注3 h时凋亡指数(AI)的变化,予Westernblotting检测肺组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况.结果 与S组比较,I-R组肺组织细胞凋亡指数和Bax蛋白显著增高(P＜0.01),而Bcl-2蛋白含量显著降低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05).R组细胞凋亡指数和Bcl-2蛋白表达明显高于I-R组(P＜0.01),而Bax蛋白的含量明显低于I-R组(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P＜0.05).结论 远隔肢体缺血预处理可上调肺组织Bcl-2蛋白,下调Bax蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值,抑制肺组织细胞凋亡,从而对肺缺血-再灌注损伤起到保护作用.     

舒芬太尼预处理对肠缺血再灌注大鼠急性肺损伤的影响及阿片受体在其中的作用

目的 评价舒芬太尼预处理对肠缺血再灌注大鼠急性肺损伤的影响及阿片受体在其中的作用.方法 成年健康雄性Wistar大鼠48只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=8):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、舒芬太尼预处理组(SPC组)、COTP+ SPC组、NTD+ SPC组和nor-BNI+ SPC组.I/R组、SPC组、COTP+ SPC组、NTD+ SPC组和nor-BNI+ SPC组采用夹闭肠系膜上动脉45 min,再灌注2h的方法制备肠缺血再灌注模型;S组仅分离肠系膜上动脉,不夹闭.SPC组、COTP+ SPC组、NTD+ SPC组和nor-BNI+ SPC组于缺血前10 min时静脉注射舒芬太尼10μg/kg;COTP+ SPC组、NTD+ SPC组于注射舒芬太尼前10 min时分别静脉注射μ受体拮抗剂COTP 1mg/kg或δ受体拮抗剂NTD 5 mg/kg; nor-BNI+ SPC组于注射舒芬太尼前15 min时静脉注射κ受体拮抗剂nor-BNI 5 mg/kg.于再灌注2h时处死大鼠,取肠组织,观察肠粘膜形态并进行肠粘膜损伤评分;取左肺组织,观察肺组织形态并进行肺损伤评分;采用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,计算凋亡指数;采用免疫组化法测定肺组织Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达,计算Bcl-2/Bax比值.结果 与S组比较,I/R组、SPC组、COTP+ SPC组、NTD+ SPC组和nor-BNI+ SPC组肠粘膜损伤评分、肺损伤评分和凋亡指数升高,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.01);与I/R组比较,SPC组肠粘膜损伤评分、肺损伤评分和凋亡指数降低,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.01);与SPC组比较,COTP+ SPC组、NTD+ SPC组和nor-BNI+ SPC组肠粘膜损伤评分、肺损伤评分和凋亡指数升高,Bcl-2蛋白表达下调,Bax表达蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比值下降(P＜0.01).结论 舒芬太尼预处理可减轻肠缺血再灌注大鼠急性肺损伤,该作用与激活阿片受体有关.     

异丙酚对大鼠小肠缺血再灌注时粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠小肠缺血再灌注时粘膜上皮细胞凋亡的影响及其机制.方法 健康Wistar大鼠24只,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和异丙酚+缺血再灌注组(P+I/R组).夹闭肠系膜上动脉,缺血1 h,再灌注2 h,制备小肠缺血再灌注损伤模型.S组和I/R组缺血前10 min开始经股静脉持续输注生理盐水10 ml·kg-1·h-1,P+I/R组静脉注射异丙酚10 mg/kg,以后持续输注异丙酚10 mg·kg-1·h-1.取空肠组织3 cm,常规制备全层石蜡切片,行HE染色,光镜下观察小肠组织病理学;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;TUNEL法检测小肠粘膜上皮细胞凋亡,计数凋亡细胞及总细胞,计算小肠粘膜上皮细胞凋亡指数.结果 与S组比较,I/R组和P+I/R组Bcl-2和Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax增加,小肠组织损伤程度增强,小肠粘膜上皮细胞凋亡指数增高(P＜0.01或0.05);与I/R组比较,P+I/R组Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,小肠组织损伤程度减轻,小肠粘膜上皮细胞凋亡指数降低(P＜0.01).结论 异丙酚可减轻大鼠小肠缺血再灌注损伤时粘膜上皮细胞凋亡,其机制与上调Bcl-2基因的表达和下调Bax基因的表达有关.     

瑞芬太尼对大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡的影响

目的 评价瑞芬太尼对大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡的影响.方法 成年Wistar大鼠54只,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)和瑞芬太尼组(R组).IIR组及R组采用夹闭肠系膜上动脉1 h后再灌注的方法制备肠缺血再灌注模型,R组于缺血前10min开始静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1至再灌注末,S组及IIR组给予等容量生理盐水.分别于再灌注1、3、6 h时处死6只大鼠,取肝组织,检测肝组织Bcl-2与Bax表达水平及肝细胞凋亡情况,计算肝细胞凋亡指数(AI).结果 与S组相比,IIR组和R组Bcl-2与Box表达上调,肝细胞AI升高,IIR组Bcl-2/Bax比值降低,R组Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与IIR组相比,R组Bcl-2表达、Bcl-2/Bax比值升高,Box表达下调,肝细胞AI降低(P<0.05).结论 瑞芬太尼可抑制大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡,其机制与上调Bcl-2表达及抑制Bax表达上调有关.     

氟比洛芬酯对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响.方法 SPF级雄性健康成年SD大鼠60只,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=20):假手术组(S组)、肺缺血再灌注组(IR组)和氟比洛芬酯组(FA组).采用阻断左肺门60 min再灌注120 min的方法制备肺缺血再灌注模型.FA组开胸前15 min经股静脉注射氟比洛芬酯10 mg/kg.于左肺门再灌注120 min时处死大鼠,取肺组织,计算肺湿干重比和凋亡指数,检测肺组织NF-κB活性、Bcl-2和Bax蛋白表达,计算Bcl-2/Bax比,并观察病理学结果.结果 与S组比较,IR组和FA组肺组织湿干重比、凋亡指数和NF-κB活性增强,Bcl-2和Bax蛋白表达上调,IR组Bcl-2/Bax比降低,FA组Bcl-2/Bax比升高(P＜0.01);与IR组比较,FA组肺组织湿干重比、凋亡指数和NF-κB活性降低,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比升高(P＜0.05).FA组肺组织病理学损伤较IR组减轻.结论 氟比洛芬酯可减轻大鼠肺缺血再灌注损伤,其机制与抑制NF-κB活化,改善Bcl-2和Bax平衡,从而抑制细胞凋亡有关.     

氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响

目的观察氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法SPF级SD大鼠48只,随机分为假手术组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、氢吗啡酮组(H组)和吗啡组(M组),每组12只。采用前房加压灌注的方法制备视网膜缺血-再灌注损伤模型。于缺血前15 min,H组颈内静脉注射氢吗啡酮0.1mg/kg,M组注射吗啡1mg/kg,C组和IR组注射等容量生理盐水。再灌注24 h后,取大鼠视网膜组织,采用HE染色法观察病理学变化,测定视网膜内层厚度及全层厚度;采用TUNEL法计算细胞凋亡指数(AI);采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量;采用ELISA法检测TNF-α、IL-6浓度;采用硫代巴比妥酸及黄嘌呤氧化酶法分别检测MDA浓度和SOD活性。结果与C组比较,IR组视网膜出现病理学损伤,AI明显升高(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显升高,Bcl-2蛋白含量和Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显升高(P<0.05),SOD活性明显减弱(P<0.05)。与IR组比较,H组和M组视网膜组织病理学损伤明显减轻,AI明显降低(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显降低,Bcl-2蛋白含量明显升高,Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显降低,SOD活性明显增强(P<0.05)。结论氢吗啡酮可减轻大鼠视网膜缺血-再灌注损伤,其机制可能与改善视网膜细胞凋亡、炎症反应及氧化应激相关。     

缺血预处理对胆管上皮细胞凋亡及bcl-2/Fas蛋白表达的影响

目的 观察缺血预处理对缺血再灌注损伤引起的胆管上皮细胞凋亡(AI)以及对调控基因(bcl-2,Fas)蛋白表达的影响. 方法 SD大鼠36只分为假手术(SO)组、缺血再灌注(IR)组、缺血预处理(IP)组.热缺血时间为30min.缺血预处理为缺血前采用5 min缺血及5 min×2次再灌注.分别于再灌注12 h后处死动物取肝脏标本.检测肝内胆管上皮细胞凋亡及bcl-2/Fas蛋白表达水平. 结果 凋亡细胞主要见于肝内大胆管,SO组凋亡的胆管上皮细胞罕见,IR和IP组与SO组比较,胆管上皮细胞AI有显著性增加(P<0.01,P<0.05).IP组与IR组比较,胆管上皮细胞AI有显著性降低(P<0.05).肝内大胆管bcl-2蛋白阳性表达:IP组bcl-2蛋白阳性表达较SO组和IR组差异均具有显著性意义(P<0.01,P<0.05).Fas蛋白阳性表达:IR组与SO组比较,Fas蛋白阳性表达差异有显著性意义(P<0.05).IP组与IR组间相比差异无显著性意义(P>0.05). 结论 IR诱导Fas蛋白的表达促进肝内胆管上皮细胞发生凋亡.IP通过上调调控基因bcl-2蛋白的表达抑制胆管上皮细胞的凋亡,与Fas蛋白表达关系不明显.     

异丙酚联合缺血预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响

Objective To investigate the effects of combination of propofol and ischemic preconditioning (IP) on pneumocyte apoptosis and the mechanism involved during lung ischemia-reperfusion (IR) injury in rats.Methods Fifty male SD rats weighing 200-250 g were randomly divided into 5 groups (n = I0 each) : group Ⅰsham operation (group S); group Ⅱ IR; group Ⅲ propoful (group P); group Ⅳ IP and group Ⅴ P+ IP. The animals were anesthetized with intraperitoneul 1% pentobarbital 10 mg/kg, tracheostomized and mechanically ventilated. Lung IR was induced by occlusion of hilum of the right lung for 1 h followed by 2 h of reperfusion.performed by occlusion of hilum of the right lung for 5 min followed by 5 min of reperfusion, repeating 3 times, ischemia. The animals were killed at 2 h of reperfusion. Tissues of inferior lobe of right lung were obtained for observation of histopathulogy with light microscope and the index of quantitative assessment of histologic lung injury (IQA) was calculated. The apoptosis of pneumocytes was detected using TUNEL and apeptosis index (AI) was calculated. The expression of Bcl-2 and Bax protein in lung tissues was detected using immunohistechemical method. Correlation between IQA and AI and between Bcl-2/Bax protein ratio and AI was analyzed. Results Compared with group S, IQA and AI in the other four groups were significantly increased after reperfusion, and the expression of Bcl-2 and Bax protein was significantly increased and Bcl-2/Bax protein ratio significantly decreased in group IR (P < 0.01). Compared with group IR, 1QA and AI were significantly decreased, Bcl-2 protein expression was up-regulated and Bcl-2/Bax protein ratio was significantly increased in group P, IP and P + IP, Bax protein expression was down-regulated in group IP and P + IP (P < 0.01), but there was no significant difference in Bax protein expression between group P and IR (P > 0.05). IQA and AI were significantly lower and Bcl-2/Bax protein ratio was significantly higher in group P + IP than in group P and IP (P < 0.05). IQA was positively correlated with AI (r = 0.951, P < 0.01). AI was negatively correlated with Bcl-2/Bax protein ratio (r = -0.851, P < 0.01). Conclusion The combination of propofol and IP can inhibit pneumocyte apoptosis through regulating the expression of Bcl-2 and Bax protein and ameliorate lung IR injury.     

吸入麻醉药预处理对兔缺血再灌注心肌Bcl-2、Bax及p53基因表达的影响

目的探讨吸入异氟醚、七氟醚及地氟醚预处理对兔在体心脏局部缺血再灌注过程中心肌细胞Bcl-2、Bax及p53基因表达的影响。方法 40只新西兰白兔随机分成5组(n=8):假手术对照组(P组)、缺血再灌注对照组(IR组)、异氟醚预处理组(Ⅰ组)、七氟醚预处理组(S组)、地氟醚预处理组(D组)。除P组外,每组接受左冠脉前降支3 h阻断和3 h再灌注。吸入药预处理组在缺血前分别吸入1MAC的异氟醚、七氟醚或地氟醚,30 min后洗脱15 min。取心肌缺血区边缘组织用流式细胞仪测凋亡指数(AI)和Bcl-2、Bax及p53基因的蛋白表达量。结果 AI:P组为(0.93±0.27)％,IR组为(14±4)％,I、s、D组较IR组显著减少,分别为(6.7±1.8)％、(6.7±1.6)％、(7.4±2.0)％(P<0.01)。Bcl-2、p53、Bax基因的蛋白表达:Bcl-2基因的蛋白表达量I、S、D组高于IR组,Bax基因和p53基因的蛋白表达量I、S、D组低于IR组。结论 异氟醚、七氟醚及地氟醚预处理抑制缺血再灌注所致心肌细胞凋亡与上调BcI-2基因的蛋白表达、下调p53和Bax基因的蛋白表达有关。     

异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤时Bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的影响及与Bcl-2蛋白表达的关系。方法 Wistar大鼠36只,随机分为对照组(C组)和异丙酚处理组(P组)。每组再分为缺血前、缺血30 min和再灌注30 min 3个亚组。分别用DNA原位末端缺口标记技术(TUNEL法)测定凋亡细胞和用免疫组化法测定Bcl-2蛋白的表达。结果 与缺血前相比,缺血30 min及再灌注30min亚组的凋亡指数(AI)显著增加(P<0.01),Bcl-2蛋白的光密度值显著减少(P<0.01);与C组相比,P酚组缺血30 min及再灌注30 min亚组的AI显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的光密度值显著增加(P<0.01)。结论 异丙酚通过调控Bcl-2表达而减少心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的发生。     

氯胺酮对兔肺缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和Caspase-3mRNA表达的影响

目的 观察氯胺酮对兔肺缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 90只兔建立单肺缺血再灌注模型后,被随机分成3组（每组30只）：对照组（C组）、缺血/再灌注组（I/R组）和氯胺酮组（KET组）.每组30只兔子又平均分成再灌注后1小时、3小时、5小时组.检测各组超氧物歧化物（SOD）活性、丙二醛（MDA）浓度、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量和凋亡指数（AI）变化.图像分析TUNEL染色和原位杂交对肺细胞凋亡及Caspase-3mRNA表达.结果各相同时间点I/R组比C组SOD活性显著降低（P〈0.01）,而MDA、TNF-α含量和AI明显升高（P〈0.01）;与I/R组比较,相同时间点KET组SOD活性升高,而MDA、TNF-α含量和AI则有不同程度降低（P〈0.01或P〈0.05）.肺再灌注后TUNEL法检测阳性细胞主要分布在肺泡上皮细胞和血管内皮细胞,Caspase-3 mRNA表达主要分布在血管内皮细胞;每个时间点I/R组Caspase-3 mRNA表达相比C组显著增加,同时肺细胞凋亡也显著增加.然而,使用氯胺酮后,两者都有明显减少.结论氯胺酮可通过减少缺血/再灌注后MDA、TNF-α含量,提高SOD活性,降低caspase-3 mRNA表达而抑制肺细胞凋亡,减轻再灌注后兔肺损伤.     

丙泊酚对肢体缺血-再灌注大鼠肾损伤和肺损伤时细胞凋亡的影响

目的从细胞凋亡的角度探讨大鼠肢体缺血-再灌注后肾损伤和肺损伤的发病机制及丙泊酚对其影响的可能机制。方法复制大鼠肢体缺血-再灌注损伤(LIR)动物模型。24只SD大鼠随机分为对照组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、丙泊酚处理组(P组)和10%的脂肪乳对照组(T组)。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端缺口标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡的变化,琼脂糖凝胶电泳法进一步证实组织DNA的改变,同时用免疫组织化学的技术检测肾、肺Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达。结果(1)C组肺组织和肾组织未见细胞凋亡现象,IR组凋亡细胞显著增多,P组凋亡细胞数较IR组和T组显著减少而多于C组(P<0.05),T组和IR组比差异无统计学意义。(2)Bcl-2表达在IR组和T组均比C组明显下降(P<0.05),P组的表达比IR组和T组增高(P<0.05)。Caspase-3在IR组和T组的表达显著高于P组和C组(P<0.05),P组和C组及IR组和T组差异有统计学意义。Caspase-3表达与凋亡细胞数呈正相关(r=0.9149,P<0.01);Caspase-3与Bcl-2的表达呈直线负相关(P<0.01)。(3)C组肾、肺组织均无凋亡梯形条带的出现,而IR组、T组有凋亡典型的梯形条带,P组梯形条带不甚清楚。结论肾、肺细胞凋亡的发生可能参与了LIR后肾、肺损伤,丙泊酚的活性成分1,6-二异丙酚通过抑制Caspase-3表达同时上调Bcl-2而减少细胞凋亡,从而减轻LIR后肾和肺的损伤。     

帕瑞昔布钠预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 评价帕瑞昔布钠预先给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠64只,体重250～300 g,随机分为4组(n=16):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注+帕瑞昔布钠5 mg/kg组(P5组)和缺血再灌注+帕瑞昔布钠10 mg/kg组(P10组).I/R组、P5组和P10组采用线栓法进行脑缺血2 h.P5组和P10组在缺血前30 min时分别经颈内静脉注射帕瑞昔布钠5、10 mg/kg.再灌注24 h时进行神经功能缺陷评分,然后取脑组织,测定脑梗死体积、细胞凋亡率、Bc1-2和Bax表达,并计算Bcl-2与Bax的比值(Bcl-2/Bax).结果 与S组比较,I/R组神经功能缺陷评分、细胞凋亡率、Bcl-2及Bax表达均升高,Bcl-2/Bax降低,脑梗死体积增大(P＜0.01).与I/R组比较,P10组神经功能缺陷评分降低,P5组和P10组细胞凋亡率和Bax表达降低,脑梗死体积缩小,Bcl-2表达和Bcl-2/Bax升高(P＜0.05或0.01).与P5组比较,P10组脑梗死体积缩小,细胞凋亡率和Bax表达降低,Bcl-2表达和Bcl-2/Bax升高(P＜0.05或0.01).结论 帕瑞昔布钠预先给药可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,且与剂量有关,其机制与上调Bcl-2表达、下调Bax表达从而抑制细胞凋亡有关.     

瑞芬太尼预先给药对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡相关基因和炎性相关基因表达的影响

目的 探讨瑞芬太尼预先给药对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡相关基因及炎性相关基因表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,体重280～320 g,采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注45 min的方法 建立心肌缺血再灌注模型,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)动脉下仅穿线,不结扎;缺血再灌注组(IR组)行心肌缺血再灌注;瑞芬太尼预先给药组(R组)以6 μg·kg-1·min-1的速率经股静脉输注瑞芬太尼,15 min后行心肌缺血再灌注.于再灌注45 min时处死大鼠,取左心室心尖部缺血区心肌组织,应用信号转导基因芯片技术检测心肌细胞凋亡相关基因及炎性相关基因的表达.结果 与S组比较,IR组Bax基因,Bcl-2基因、Bcl-2L1基因和Birclb基因表达下调;肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因、细胞间粘附分子1(ICAM-1)基因表达上调,Birc3基因、白细胞介素2(IL-2)基因、IL-2rα基因、IL-4基因表达正常.与IR组比较,R组Bar基因、Bcl-2基因、Bcl-2L1基因Birclb和Bitc3基因表达上调,ICAM-1基因表达下调,IL-2基因、IL-2rα基因、IL-4基因、TNF-α基因表达正常.与S组和R组比较,IR组Bcl-2/Bax基因比降低(P<0.05).结论 瑞芬太尼预先给药可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与上调抗心肌细胞凋亡相关基因表达和下调促炎性相关基因表达有关.     

Bcl-2/Bax及Caspase-3在心肌缺血再灌注引起的急性肺损伤中的表达及作用

目的 探讨Bcl-2/Bax及Caspase-3在心肌缺血再灌注及后处理对大鼠肺损伤的表达及作用.方法 雄性SD大鼠30只随机分为3组,每组10只,假手术组（S）、心肌缺血/再灌注组（IR）、缺血后处理组（IPost）.结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血/再灌注模型,后处理组于再灌注前1 min内,连续3个循环灌注10s,缺血10s,再灌注120 min后快速取肺.SP法测定肺组织内Bcl-2/Bax及Caspase-3.TUNEL法检测细胞凋亡.结果 与S组相比较,IR组,IPost组,Bax,Caspase-3,Bcl-2表达减少（P＜0.01）,细胞凋亡增多;与IR组相比较,IPost组,Bax,Caspase-3,细胞凋亡（TUNEL）表达减少,Bcl-2表达增多（P＜0.01）,细胞凋亡减少.结论 缺血后处理可以诱导Bcl-2表达增强,Bax及Caspase-3表达降低,从而减轻肺损伤.     

lncRNA-MALAT1/miRNA-145在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转录子1(MALAT1)在舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法 SPF级大鼠36只,体重180~200 g,随机分为三组:假手术组(Sham组),缺血-再灌注损伤组(IR组),缺血-再灌注损伤+舒芬太尼组(SUF组),每组12只。IR组和SUF组建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,SUF组于再灌注前10 min尾静脉注射舒芬太尼1μg/kg,Sham组和IR组注射等体积生理盐水。再灌注后2 h检测大鼠血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,同时检测大鼠心肌梗死面积;检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3和Caspase-3含量;检测大鼠心肌组织中lncRNA-MALAT1和miRNA-145的相对表达量。结果与Sham组比较,IR组和SUF组CK-MB和cTnT浓度明显升高,LDH活性明显增强,心肌梗死面积明显增大,心肌组织中Bax/Bcl-2比值明显降低,Cleaved-caspase-3蛋白含量明显升高,lncRNA-MALAT1相对表达量明显升高,而miRNA-145相对表达量明显降低(P<0.05)。与IR组比较,SUF组CK-MB和cTnT浓度明显降低,LDH活性明显减弱,心肌梗死面积明显减小,Bax/Bcl-2比值明显升高,Cleaved-caspase-3蛋白含量明显降低,lncRNA-MALAT1相对表达量明显降低,miRNA-145相对表达量明显增加(P<0.05)。结论舒芬太尼预处理能减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤程度,其机制可能与抑制lncRNA-MALAT1、升高miRNA-145表达有关。     

缺血预处理对肺缺血-再灌注损伤的保护作用及机制

目的　探讨缺血预处理 (IP)对肺缺血 -再灌注 (IR)损伤的保护作用和可能的机制。　方法　建立兔在体IR损伤模型 ,将 36只兔随机分为 IP组、IR组和对照组 ,每组 12只 ,观察各组肺湿 /干重比 ,检测各组肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,对支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中白细胞进行分类计数 ,并检测各组肺通透性指数。　结果　 IP组与 IR组比较 ,肺湿 /干重比明显降低 (P<0 .0 1) ;肺组织中 SOD活性显著增高 ,MDA含量和 MPO活性明显降低 (P<0 .0 1) ;BAL F中中性粒细胞分类计数、肺通透性指数明显降低(P<0 .0 1)。IP组与对照组比较 ,上述指标差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。　结论　 IP可通过减轻 IR时肺组织中性粒细胞的浸润与激活 ,提高机体抗氧化自由基的能力 ,而减轻 IR引起的肺损伤。     

依托咪酯后处理对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 评价依托咪酯后处理对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠32只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、脂肪乳组(L组)和依托咪酯后处理组(Ep组).采用栓塞右侧大脑中动脉2h恢复灌注的方法制备大鼠脑缺血再灌注模型.Ep组于再灌注即刻腹腔注射依托咪酯乳剂20 mg/kg(1 ml/100 g),I/R组和L组分别给予等容积生理盐水和脂肪乳.于再灌注24h时处死大鼠,取缺血侧脑组织,HE染色后光镜下观察病理学结果,采用TUNEL法检测凋亡细胞,计算凋亡指数,采用免疫组化染色法测定Bcl-2和Bax的表达,计算Bcl-2与Bax表达的比值(Bcl-2/Bax).结果 与S组比较,I/R组、L组和Ep组细胞凋亡指数升高,Bcl-2和Bax表达上调,Bcl-2/Bax升高(P＜0.05);与I/R组和L组比较,Ep组细胞凋亡指数降低,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高(P＜ 0.05);I/R组和L组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).Ep组脑组织病理学损伤较I/R组明显减轻.结论 依托咪酯后处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与调节Bcl-2和Bax的平衡表达,抑制细胞凋亡有关.