急性经口毒性评价试验方法的研究进展

急性经口毒性试验是毒理学安全性评价第一阶段最基础性的试验，LD50是其最为常用的评价指标。本文评述了传统的LD50测试法以及3种主要替代方法（上下增减剂量法，固定剂量法，急性毒性等级法）的优缺点及其实际应用前景。     

接枝氯丁橡胶胶粘剂急性经口毒性测试方法探讨

接枝氯丁橡胶胶粘剂是近阶段广泛使用的胶粘剂中常见的一种，为使用安全常要了解其各项毒性指标。急性经口毒性试验（ＬＤ５０测定）是最基本、最常见的毒理学测试方法，测试时常用稀释法。其稀释液通常情况下均能缓解受试物对动物皮肤或粘膜的急性刺激性，可客观、准确地...     

β-烟酰胺单核苷酸的急性及亚急性经口毒性

β-烟酰胺单核苷酸(NMN)急性经口毒性试验采用最大限量法,将大、小鼠分别设置对照组和5000mg/kg剂量组,每组10只动物,雌雄各半,进行一次性经口灌胃染毒。28d重复剂量亚急性经口毒性试验,将大鼠分为对照组和1000mg/kg剂量组,每组10只大鼠,雌雄各半,连续灌胃染毒28d,记录动物摄食和体质量变化,染毒后检测动物血常规和血清生化指标。取大鼠主要脏器,计算脏器系数并制作病理组织切片。结果显示,急性经口毒性试验未见动物明显异常。亚急性经口毒性试验1000mg/kg剂量染毒组大鼠体质量、摄食量、食物利用率、血常规及生化指标与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),肝、肾脏器质量和脾脏器系数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学检查未见病理性损伤。NMN急性经口毒性试验半数致死剂量(LD₅₀)>5000mg/kg,亚急性经口毒性试验最大无作用剂量(NOAEL)>1000mg/kg。     

4种急性经口毒性试验方法的比较研究

[目的]通过比较4种急性经口毒性试验方法操作性和结果一致性,分析其在化学品急性毒性评价中的应用价值及其意义. [方法]对3种已知化学物(对苯二胺、对苯二酚、硼酸)分别使用固定剂量法(FDP)、上下增减剂量法(UDP)、急性毒性分类法(ATC)3种替代方法与传统霍恩氏(Horn's)法进行大鼠急性经口毒性试验.比较各方法判断化学物毒性分类的一致性;并对动物使用、剂量选择、观察指标进行综合分析. [结果]3种化学物分别用4种方法测定得到的全球化学品统一分类和标签系统(GHS)分类结果一致.3种替代方法均采用序贯原则,使用实验动物数量较少,但实验周期更长.FDP法和ATC法不以获得精确半数致死量(LD50)为研究目标,即不以动物死亡作为最终结果判定标准,降低了实验动物的死亡率,提高了动物福利.UDP法与Horn's法很相似,系列剂量都有相对固定的剂量级数因子,都以动物死亡为重要的结果判断指标,都能获得确切的LD50值及其95％CI;但UDP更适合染毒后短期(48h内)死亡的急性毒性评价. [结论]可根据受试物的性质和已知资料,选择合适的急性经口毒性替代方法代替传统Horn's法.     

重组人乳铁蛋白急性经口毒性试验和90天喂养试验

目的评价转基因奶牛乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白食用安全性。方法参照GB 15193.1—2014《食品安全国家标准食品安全性毒理学评价程序》进行小鼠急性经口毒性试验和大鼠90天亚慢性毒性试验。结果急性经口毒性试验观察期内各小鼠均未见任何毒性效应,判断重组人乳铁蛋白的小鼠急性经口LD5020 000 mg/kg;90天喂养试验结果表明,给予动物人体推荐剂量300倍的重组人乳铁蛋白,未观察到有害作用,大鼠的无明显损害作用剂量水平(NOAEL)为10.00g/(kg·d)。结论重组人乳铁蛋白属无毒级,无亚慢性毒性,无潜在的食用安全风险。     

土壤肥料急性经口毒性的试验方法研究

目的观察一次经口给予小鼠土肥后,动物在短期内出现的健康损害效应,从而建立一套经济、快捷的土壤肥料急性毒性检测标准方法。方法参考《农药登记毒理学实验方法》(GB15670-1995)中的急性经口毒性试验方法。结果8个土肥样品的LD50值。结论建立一套以小鼠为试验对象,以霍恩法和限量法相结合的土肥急性毒性检测的标准方法。     

3种替代方法在急性经口毒性实验中应用研究

目的评价3种替代法(固定剂量法、急性毒性分级法和上下法)在急性经口毒性检测中的应用价值。方法分别选取7种消毒剂原料和6种农药原药共13种化学品作为受试物,参照经济合作与发展组织3种急性毒性实验替代方法进行实验,依据全球化学品统一分类及标签制度(GHS)急性经口毒性分级原则获得各受试物毒性分级,分析各替代方法结果与传统实验方法之间的相关性和一致性。结果 3种替代方法判断GHS毒性分级与传统实验方法间具有较高一致率、相关性和一致性。各替代方法消耗动物数量均少于传统实验方法,但所需实验时间长于传统实验方法(P<0.05)。结论 3种替代方法结果与传统实验方法间具有较高一致性和相关性,可认为这3种方法具有取代传统检测方法的潜力。     

井铜水剂亚急性经口毒性试验研究

目的探讨4.5%井铜水剂的亚急性经口毒性效应 ,同时确定亚急性无作用剂量 ,为亚慢性或慢性毒性试验提供剂量设定依据及观测指标。方法选取健康Wistar大鼠48只 ,随机分为高、中、低、对照4个组 ,连续灌胃14天 ,试验结束时 ,从股动脉放血处死 ,观测相关指标。结果检样对大鼠的体重增长有抑制作用 ,使大鼠的血红细胞数减少、血红蛋白含量降低 ,使大鼠AST活力明显升高、CRE降低 ,与对照组比较均具有显著性差异 (P<0.05)或极显著性差异 (P<0.01) ,且呈剂量 -反应关系。结论4.5 %井铜水剂为低毒类农药 ,其亚急性无作用剂量<1100mg/kg。     

海藻糖羟丙基三甲基氯化铵急性经口毒性及不同种属动物急性经皮毒性的比较

目的对一种拟用作化妆品的化学原料进行毒理学安全性评价。方法通过小鼠急性经口毒性试验测定海藻糖羟丙基三甲基氯化铵的经口毒性(染毒剂量为46.4、100、215、464 mg/kg);家兔急性经皮毒性试验(染毒剂量为10.0、21.5、46.4、100 mg/kg)和豚鼠急性经皮试验(染毒剂量为2180 mg/kg)和多次皮肤刺激性试验(染毒剂量为0.5 g)来评价海藻糖羟丙基三甲基氯化铵经皮肤吸收和短期作用而产生毒性反应。结果急性经口毒性试验显示,海藻糖羟丙基三甲基氯化铵经口对雄性、雌性小鼠的LD_(50)分别为200、171 mg/kg,按急性毒性分级标准属于中等毒级。急性经皮毒性试验显示,其经皮对雄性、雌性家兔的LD_(50)分别为31.6、43.0 mg/kg,按急性毒性分级标准属于高毒级。豚鼠急性经皮毒性试验按急性毒性分级标准属于微毒级。家兔多次皮肤刺激试验,由于样品经皮毒性太强,动物于第4天全部死亡。结论海藻糖羟丙基三甲基氯化铵经皮毒性大于经口毒性,用作化妆品原料具有一定的潜在风险。     

复方菊苣粉急性经口毒性和遗传毒性研究

目的 研究复方菊苣粉的急性经口毒性和遗传毒性。方法 SD大鼠(体质量为170 g～190 g)20只,设15 g/(kg·bw)1个剂量组,进行急性经口毒性试验;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验选用昆明种小鼠(体质量为25 g～30 g)50只,设2.5 g/(kg·bw)、5.0 g/(kg·bw)和10.0 g/(kg·bw)3个试验组,同时设阴性对照和阳性对照;体外哺乳类细胞染色体畸变试验：试验设11个复方菊苣粉剂量：-S9条件下设5.0 mg/ml、2.5 mg/ml和1.25 mg/ml 3个剂量;+S9条件下设2.18 mg/ml、1.09 mg/ml和0.55 mg/ml 3个剂量。同时设阴性对照,进行综合评价。结果 急性经口毒性试验：SD大鼠15 g/(kg·bw)剂量经口染毒后,2周内未见动物死亡,亦无明显的中毒症状或不良反应,判属无毒级别。遗传毒性试验：Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和体外哺乳类细胞染色体畸变试验三项遗传毒性试验结果均为阴性。结论 复方菊苣粉属无毒级物质,未见遗传毒性作用。     

一种微生物发酵茶多酚结晶粉的急性经口毒性试验结果分析

目的 观察一种微生物发酵茶多酚结晶粉对小鼠的急性经口毒性.方法 试验采用霍恩氏法,微生物发酵茶多酚结晶粉设为10 000 mg/kg·BW、4 640 mg/kg·BW、2 150 mg/kg·BW和1 000 mg/kg·BW共4个剂量组,取40只SPF级昆明种小鼠,雌雄各半,经口灌胃染毒.结果 观察期间所有染毒动物...     

苦瓜水提取物对小鼠的急性经口毒性和遗传毒性实验研究

目的了解苦瓜水提取物的急性经口毒性和遗传毒性，为苦瓜的开发利用提供实验依据。方法按照GB15193—2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行急性经口毒性实验、Ames实验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验及小鼠精子畸形实验。结果苦瓜水提取物的急性经口LD50〉21500mg/kg bw；三项遗传毒性实验结果均为阴性。结论苦瓜水提取物对小鼠的急性经口毒性属无毒，未见遗传毒性作用。     

乳氟禾草灵原药的亚慢性经口毒性

根据《农药登记毒理学试验方法》(GB 15670—1995)进行乳氟禾草灵原药亚慢性经口毒性试验。结果显示，高剂量染毒组大鼠血WBC计数降低，血清天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶升高，雄鼠中性粒细胞比例升高，肾脏器系数偏高；中、高剂量染毒组大鼠单核细胞比例、血清尿素氮和肌酐升高，肝脏质量及脏器系数均偏高，雌鼠淋巴细胞比例降低。雌、雄大鼠亚慢性经口最大无作用剂量分别为3.81 mg/kg和3.50 mg/kg。     

基因重组球状脂联素蛋白的急性经口毒性和遗传毒性研究

目的检测基因重组球状脂联素蛋白(gAd)蛋白的经口毒性和遗传毒性,为其临床应用提供医学毒理学依据。方法按照GB15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行急性经口毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验。结果急性经口毒性试验中实验组动物7d内未见中毒症状,LD50>10g/kg体重。Ames试验中各组回变菌落数均未超过自发回变菌落数2倍,且无剂量反应关系,结果为阴性。骨髓微核试验中各剂量组雌雄性别微核形成率与阴性对照结果比较,差异无统计学意义P均>0.05),结果为阴性。小鼠精子畸形试验中各实验组与阴性对照组结果比较,差异无统计学意义(P均>0.05),精子畸形试验结果为阴性。结论基因重组gAd蛋白属实际无毒级物质,未见遗传毒性作用。     

急性经口毒性替代方法在化学品检验中的应用研究

目的 探讨3种急性经口毒性替代法(固定剂量法、急性毒性分级法和上下法)在化学品急性毒性评价中的应用价值.方法 健康雌性SD大鼠,8～12周龄,体重160～200 g.分别选取10种化妆品原料和12种日化品原料共22种化学品作为受试物,参照经济合作与发展组织(OECD)3个急性经口毒性试验替代方法进行检测,依据全球化学品统一分类及标签制度(GHS)急性经口毒性分级原则获得各受试物毒性分级,分析各替代方法结果与传统试验方法之间的相关性和一致性.结果 与传统试验方法结果相比较,各替代方法判断化妆品原料急性毒性分级的一致率均为80%(8/10),固定剂量法、急性毒性分级法和上下法判断日化品原料的一致率分别为91.7%(11/12)、75.0%(9/12)和83.0%(10/12).各替代方法消耗动物数量均少于传统试验方法,差异有统计学意义(P<0.05),但所需实验时间长于传统试验方法,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 在化妆品和日化品原料急性经口毒性分析检测中,3种替代方法结果与传统试验方法具有较高的一致性和相关性,其中固定剂量法在日化品原料毒性检测中更具应用潜力.

Abstract：

Objective To evaluate three alternative methods for LD50 test-Fixed Dose Procedure (FDP),the Acute Toxic Class Method (ATC) and Up and Down Procedure (UDP).Methods Female SD rats (8～12 weeks of age,160~200 g) were used.Three alternative methods from OECD were applied to assess 22 chemicals (10 cosmetic raw materials and 12 raw materials of personal and home care products).The toxicity ranking for tested chemicals was established according to Globally Harmonized System(GSH).The results LD50 test were compared for the consistency and correlation between alternative methods and traditional test.Results For cosmetic raw materials,the concordance rate of the three alternative methods was 80%(8/10);for raw material of personal and home care products,the concordance rates of FDP,ATC and UDP was 91.7%(11/12),75.0%(9/12) and 83.0%(10/12),respectively.The number of animals required in three alternative methods was significantly lower than that in traditional test (P<0.05),but the time required in three alternative methods was significantly higher than that in traditional test (P<0.05 ).Conclusions High consistency and correlation were found between each alternative method and LD50 test.FDP may be more potential when applied to assess acute oral toxicity of cosmetic raw materials.     

克菌丹的亚慢性经口毒性研究

目的 研究克茵丹的亚慢性经口毒性,确定克茵丹亚慢性经口的最大无作用剂量并初步确定毒作用靶器官.方法 96只SD大鼠分为4组,每组24只,分别为空白对照组,受试物低、中、高剂量组,共4个实验组,分别用含0、333、1 105和3 333 ng/kg克茵丹的饲料给无特定病原体级大鼠喂饲90 d(动物实际摄食克茵丹的量在雌性分别为0、36.0、124.4、371.3 mg.kg-1·d-1,在雄性分别为O、30.9.94.2.323.6 mg-1·d-1).以一般状态、体质量、血常规9项,血生化12项,尿液常规,部分脏器系数和病理检查为观察指标.结果 中、高剂量组雌性和雄性动物试验期间体质量较对照组明显降低;高剂量组雌性动物血小板(Plt)降低,高剂量组雄性动物的白细胞(WBC)降低和血清尿素氮(BUN)升高.中、高剂量组动物部分脏器体比升高.中、高剂量的部分动物肾脏有不同程度病理改变.结论 克茵丹在SD大鼠亚慢性经口试验中最大无作用剂量为:雌性36.0 mg·kg-1·d-1,雄性30.9 mg·kg-1·d-1.肾脏可能是克茵丹的靶器官.     

苯醚甲环唑的亚慢性经口毒性

目的研究苯醚甲环唑原药对大鼠的主要亚慢性毒性作用及无明显损害作用剂量。方法按照GB 15670-1995《农药登记毒理学实验方法》中大鼠亚慢性经口毒性试验方法进行,设0、300、900、2 700 mg/kg 4个剂量组。结果中剂量组(900 mg/kg)雌性大鼠肝/体比、肾/体比高于对照组,雄性大鼠RBC计数、血容积比(HCT)低于对照组,高剂量组(2 700 mg/kg)雌性大鼠体重总增加量、总摄食量、总食物利用率低于对照组,肝/体比、肾/体比高于对照组,雄性大鼠肝/体比高于对照组,RBC、HGB、HCT、球蛋白(GLOB)平低于对照组,碱性磷酸酶(ALP)活力高于对照组。上述观察指标均存在剂量-效应关系。结论苯醚甲环唑原药的无明显损害作用剂量(NOAEL)为:雄性大鼠(20.94±2.64)mg/(kg.d),雌性大鼠(24.54±1.35)mg/(kg.d)。     

转FBP7-iaaM基因棉籽表达蛋白的小鼠急性经口毒性研究

目的 探讨转FBP7-iaaM基因棉籽表达蛋白的急性经口毒性.方法 选择体重18～22 g的SPF级健康昆明小鼠16只,雌雄各半.禁食16h后,以iaaM基因表达蛋白2 000 mg/kg剂量一次经口灌胃染毒,连续观察2周.结果 该蛋白染毒后未见明显中毒症状,两周内未出现死亡.结论 iaaM基因表达蛋白对小鼠急性经口毒性LD50＞2 000 mg/kg.     

烯啶虫胺原药的亚慢性经口毒性的实验研究

目的了解烯啶虫胺原药的亚慢性经口毒性。方法按照GB15670—1995进行亚慢性经口毒性实验(90d喂养)。SPF级SD大鼠分成4组,每组22只,雌雄各半,体重80~96g,受试物掺进饲料中,实际摄入剂量分别为0、5.6、24.7、132.2mg.kg-1.d-1。结果实验结束时,中、高剂量组动物体重均降低;高剂量组雄性动物血清白蛋白降低,部分动物脏器(肝、肺、脑)有不同程度的病理表现,心、肝、肺、肾、脑、睾丸体比升高;中剂量组部分动物肺有不同程度的病理表现,肺体比升高;而低剂量组动物各观察指标(包括动物表现、体重、血常规、血生化、脏器系数和各主要脏器病理检查等)无明显异常发现。结论烯啶虫胺原药在SD大鼠亚慢性经口毒性的最大无作用剂量为5.6mg.kg-1.d-1。     

利谷隆原药对大鼠亚慢性经口毒性试验的研究

为研究取代脲类除草剂利谷隆原药的亚慢性经口毒性作用 ,采用国标GB15 6 70 1995亚慢性经口毒性试验方法进行了实验研究。结果显示与对照组相比 ,雌、雄性大鼠高剂量给药组 (4 0mg kgBW ,5 4mg kgBW)出现精神萎糜等神经、精神中毒症状 ,体重增长速度显著性降低 (P <0 0 5 ) ;雌性大鼠血清中谷丙转氨酶 ,雌、雄性大鼠胆红素含量明显增高 (P <0 0 5 ) ;雌性大鼠肝、脾脏器系数 ,雄性大鼠肝、脾、肾、睾丸脏器系数明显增高 (P <0 0 5 )。结论 :取代脲类除草剂利谷隆原药影响大鼠体重增长并对大鼠多脏器造成了损害。雌性大鼠亚慢性经口最大无作用剂量为 6 8mg kgBW ;雄性大鼠为 9 3mg kgBW。