子宫内膜癌组织中PTEN基因突变及蛋白表达的检测

背景与目的:肿瘤抑制基因———第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen,PTEN)被称为子宫内膜的看家基因。但有关PTEN基因在子宫内膜癌发生发展中的确切作用尚不清楚。本研究旨在检测子宫内膜癌组织中PTEN基因的突变及蛋白表达情况。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerasechainreaction-singlestranconformationpolymorphism,PCR-SSCP)和DNA序列分析法,检测52例子宫内膜癌组织和10例正常子宫内膜组织中PTEN基因第5和第8外显子的突变;免疫组织化学法检测PTEN蛋白的表达,并结合临床病理特征进行分析。结果:子宫内膜癌组织的PTEN基因突变率和蛋白缺失率分别为25%和60%,高于正常子宫内膜组织(0%),差异有显著性(P<0.05)。病理学分级为G1、G2及肌层浸润深度<1/2的组织的PTEN基因突变率高于病理学分级为G3及肌层浸润深度≥1/2者,而病理学分级为G1、G2组织的PTEN蛋白表达缺失率低于病理学分级为G3者,差异有显著性(P<0.05)。PTEN基因突变率和蛋白表达缺失率在子宫内膜样腺癌和其它组织类型之间比较,差异有显著性(P<0.05),而在不同手术分期之间差异无显著性(P>0.05)。结论:PTEN基因突变和蛋白阳性表达常发生在病理学分级较低的子宫内膜癌病例     

子宫内膜癌组织中PTEN基因突变、PTEN蛋白及雌激素受体亚型的表达及意义

目的:检测子宫内膜癌组织中PTEN基因的突变、蛋白表达及雌激素受体亚型(ERα、ERβ)mRNA表达并探讨其意义。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测36例子宫内膜癌、20例正常子宫内膜组织中PTEN基因第5和第8外显子的突变;免疫组织化学法检测PTEN蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增ERα和ERβ片段检测其mRNA的相对表达水平。结果:子宫内膜癌组织中PTEN基因突变率和蛋白缺失率分别为30.6%和61.1%,高于正常子宫内膜组织(0)(P<0.05)。PTEN蛋白表达完全缺失在G2、G3级肿瘤高于G1级(P<0.05),PTEN基因突变率和蛋白缺失率均与肌层浸润、淋巴结转移及手术-病理分期无明显关系(P>0.05)。ERαmRNA、ERβmRNA在PTEN表达缺失的肿瘤中低于PTEN表达阳性者(P<0.05)。结论:PTEN基因突变与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与ERαmRNA、ERβmRNA表达水平有关。     

PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的相关性研究

目的:探讨子宫内膜癌中抑癌基因PTEN的表达,及其与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化检测16例正常子宫内膜、32例子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达,分析其与临床病理的相关性.结果:抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组中蛋白阳性表达显著低于正常子宫内膜组(P<0.01).PTEN阳性表达的缺失与组织学分级与肌层浸润深度有关(P<0.05).结论:PTEN基因突变及蛋白表达缺失与子宫内膜癌的发生有关,与子宫内膜癌的分化程度、肌层浸润深度有相关性.     

子宫内膜癌中EGFR蛋白的表达及EGFR基因突变

目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在子宫内膜癌组织中的表达及其基因突变情况。方法:取江西省肿瘤医院及南昌大学第二附属医院2007年1月至2011年4月期间的子宫内膜石蜡包埋组织104例,其中子宫内膜癌组织56例、非典型增生子宫内膜组织18例、正常子宫内膜组织30例,利用免疫组化检测上述各组织中EGFR蛋白的表达,PCR法扩增子宫内膜癌或正常子宫内膜组织中EGFR基因外显子19、21序列并测序检测其突变情况。结果:子宫内膜癌组织中EGFR的阳性表达率高于正常子宫内膜[73.2%(41/56)vs 30.0%(9/30),P<0.01]及非典型增生子宫内膜[73.2%(41/56)vs 44.4%(8/18),P<0.05]。进一步分析表明:G3级子宫内膜癌中EGFR的阳性表达率明显高于G1级[81.8%(9/11)vs 66.7%(12/18),P<0.01]及G2级[81.8%(9/11)vs 74.1%(20/27),P<0.05],在肌层浸润>1/2组中的阳性表达率也明显高于肌层浸润≤1/2组[86.8%(33/38)vs 44.4%(8/18),P<0.01]。但EGFR的表达与子宫内膜癌的FIGO分期、有无淋巴结转移无明显相关性。发现1例子宫内膜癌组织中,EGFR基因外显子19有G2281A突变,而外显子21无突变。结论:EGFR的阳性表达率与子宫内膜癌的组织学分级及肌层浸润深度有关,子宫内膜癌组中存在EGFR外显子19的G2281A点突变。     

PTEN基因突变及蛋白表达与子宫内膜癌的相关性研究

目的:探讨子宫内膜癌组织中PTEN基因突变、蛋白表达异常,及其与子宫内膜癌发生、发展和临床病理特征的相关性.方法:应用PCR-SSCP方法检测52例子宫内膜癌组织和10例正常子宫内膜组织中PTEN基因突变情况,同时检测PTEN蛋白的表达并结合临床病理资料进行分析.结果:PTEN基因突变在正常子宫内膜组织中与子宫内膜癌组织中差异有显著性.正常子宫内膜组织中PETN蛋白阳性表达率与子宫内膜腺癌组织中蛋白表达率差异有显著性.子宫内膜癌组织中PTEN基因突变率与蛋白表达缺失率与子宫内膜癌的组织学分级,组织病理类型,肌层浸润深度密切相关,PTEN基因突变率与蛋白表达缺失率与是否绝经、孕产次、体重指数、有无糖尿病、高血压、无统计学关联.52例子宫内膜癌组织中35例PTEN蛋白表达缺失,表达缺失组织中18例发生PTEN基因突变.结论:PTEN基因突变及蛋白表达缺失与子宫内膜癌的发生和发展有一定相关性,与子宫内膜样腺癌的分化程度、肌层浸润深度有相关性,而与临床特征无相关性.子宫内膜癌中.PTEN基因突变是PTEN蛋白表达缺失的重要原因.     

子宫内膜癌中PTEN蛋白、P-AKT蛋白的表达及意义

目的:检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白及P-AKT蛋白表达并探讨其意义.方法:采用免疫组织化学法检测66例子宫内膜癌、28例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白及P-AKT的表达.结果:子宫内膜癌组织中PTEN蛋白为缺失表达,高于正常子宫内膜组织(P＜0.05),而且PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级(P＜0.05),PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关(P＜0.05),与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系(P＞0.05).子宫内膜癌组织中P-AKT蛋白表达为高表达,P-AKT的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期、有无淋巴结转移以及肿瘤浸润子宫肌层深度显著相关(P＜0.05),其表达与组织学类型无关(P＞0.05).P-AKT与PTEN的表达呈明显负相关.结论:PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生细胞分化较差的子宫内膜癌.PTEN蛋白表达缺失与P-AKT表达水平有关.     

MRI灌注、PTEN蛋白表达对子宫内膜癌肌层侵犯的评估

目的探讨F＇TEN蛋白表达与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法对32例子宫内膜癌患者,术前1周内行MRI（核磁共振）灌注检查、PTEN（第十染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因）蛋白表达测定。MRt灌注检查采用超导磁共振仪体线圈,通过灌注Gd—DTPA代谢像了解子宫内膜癌肌层浸润深度。经诊刮证实为子宫内膜癌患者的子宫内膜癌组织,采用链霉素抗生素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测PTEN表达。结果在32例子宫内膜癌患者中,MRI灌注检查无肌层浸润和浅肌层浸润17例,深肌层浸润15例。PTEN蛋白表达检测：阳性表达14例,阴性表达18例;术后病理检查证实无肌层浸润和浅肌层浸润17例,深肌层浸润15例。MRI灌注检查准确度为90．48％,其中在特殊类型癌中PrEN蛋白表达缺失率为83．33％,Ⅳ期患者PTEN蛋白表达缺失率为100．00％。G12、G3级患者PTEN蛋白表达缺失率为65．22％（P〈0．05）。深肌层浸润患者中PTEN蛋白表达缺失率为73．33％（P〈0．05）。结论MRI灌注对术前子宫内膜癌肌层侵犯深度的检测准确性优于PTEN蛋白表达。PTEN蛋白表达缺失与子宫内膜癌的发生和发展,组织学类型、手术病理分期、组织学分级、肌层浸润深度密切相关。     

Beclin1、PTEN在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

背景与目的:子宫内膜癌的确切发病机制尚不明确。本研究旨在探讨抑癌基因Beclin1(BECN1)、PTEN在子宫内膜癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系。方法:采用免疫组织化学PowerVision二步法测定79例子宫内膜癌、34例子宫内膜增殖症以及22例正常子宫内膜组织中BECN1、PTEN的表达并加以分析。结果:BECN1在正常子宫内膜组织、子宫内膜增殖症、子宫内膜癌组织中的阳性率分别为93.33%、58.82%、34.18%;PTEN的阳性率分别为93.33%、64.71%、32.91%。BECN1、PTEN在正常子宫内膜组织、子宫内膜增殖症、子宫内膜癌组织中的表达率逐渐下降差异有显著性(χ2=42.318,P<0.001;χ2=31.746,P<0.001)。BECN1表达程度与子宫内膜癌细胞分化、组织学类型相关,与手术病理分期和肌层浸润深度无关。PTEN蛋白表达与细胞分化程度、组织学类型以及肌层浸润深度有关,而与手术病理分期无关。BECN1与PTEN表达之间呈正相关。结论:BECN1、PTEN低表达与子宫内膜样腺癌的发生、发展相关。     

子宫内膜癌组织中抑癌基因PTEN突变分析

目的了解子宫内膜癌组织中磷酸酶基因PTEN突变情况及其与临床病理特征的关系.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性方法(PCR-SSCP)对70例子宫内膜癌组织进行PTEN基因9个外显子的突变检测.结果70例子宫内膜癌组织中PTEN基因突变率为38.57%(27/70),突变较多地分布在第5、7、8号外显子上;子宫内膜样癌突变率(44.8%)明显高于浆液性和粘液性腺癌(8.3%),P＜0.05,G1级、G2级、G3级的突变率分别为53.3%、45.5%、18.2%(P＜0.05),Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期的突变率分别为52.4%、28.6%、14.3%(P＜0.05),肌层浸润程度越深,突变率越低(P＜0.05).结论PTEN基因突变是子宫内膜癌发生的早期事件,并与预后良好的临床病理特点相关.     

子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨PTEN蛋白表达与子宫内膜癌病理特征的关系。方法：应用免疫组化方法检测15例正常子宫内膜、18例子宫内膜癌前病变，60例子宫内膜癌组织中的PTEN蛋白表达。结果：正常子宫内膜、子宫内膜癌前病变和子宫内膜癌组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为93．3％、66．7％和40．0％，三者之间有显著性差异（P＜0．05）。子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达缺失率与组织学分级、组织类型和临床分期密切相关（P＜0．05），组织分化程度高、临床分期早、内膜样腺癌组织中PTEN蛋白表达缺失率明显低于组织分化程度低、临床分期晚及其他组织类型癌。结论：PTEN蛋白在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用，PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的组织学分级、组织类型和临床分期密切相关。     

PTEN基因在子宫内膜癌中的突变表达及其临床意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中PTEN抑癌基因突变、蛋白表达异常及其与子宫内膜癌发生发展的关系。方法:采用聚合酶链反应—单链构象多态性分析方法和DNA测序技术,检测52例子宫内膜癌组织中PTEN基因突变高发区外显子5、8的突变情况,同时应用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化酶免疫组织化学方法检测PTEN蛋白的表达。结果:1)52例组织中PTEN外显子5突变率为17.31%,外显子8突变率为7.69%,总突变率为25.00%。统计分析表明,PTEN基因突变与子宫内膜癌的组织学分级、组织病理类型和肌层浸润深度密切相关(P<0.05)。2)52例组织中PTEN蛋白表达缺失率为59.62%,蛋白表达缺失率与组织学分级和组织学分类密切相关(P<0.05)。3)52例中21例PTEN蛋白表达阳性,31例表达阴性,表达缺失组织中13例发生PTEN基因突变。结论:1)PTEN蛋白表达异常与PTEN基因突变有关,基因突变是基因失活的重要机制之一。2)PTEN蛋白表达缺失、PTEN基因突变与子宫内膜癌的发生和发展密切相关。     

PTEN/PI3K信号转导途径与子宫内膜癌生物学行为的相关性

目的 :研究PTEN/PI3K信号转导途径与子宫内膜癌发生发展的关系。方法 :应用免疫组化和免疫印迹方法对 68例子宫内膜癌和癌前病变组织及 11例正常子宫内膜进行PTEN、p PKB及p Bad蛋白检测。结果 :1)PTEN蛋白的阳性表达率在正常增殖期子宫内膜组织中最高 ( 90 9% ) ,非典型增生组织中开始下降 ,在子宫内膜癌组织中明显降低 ( 4 9 1% ) ,三者之间比较 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 1;2 )p PKB及p Bad与PTEN的阳性表达呈相反趋势 ,在非典型增生组织及内膜癌组织中p PBK及p Bad表达阳性率明显增加 ,差异均有统计学意义 ,P <0 0 1,P <0 0 5。在子宫内膜癌PTEN表达阴性组织中p PKB、p Bad蛋白染色积分均明显高于PTEN阳性组 ,P <0 0 5 ,P <0 0 1;3 )相关分析显示PTEN与p PKB及p Bad表达均呈负相关 ,r =-0 67,P <0 0 5 ;r =-0 65 ,P <0 0 5 ;4)PTEN、p Bad蛋白的阳性表达率在不同的临床分期、组织学分级及不同肌层浸润程度之间比较 ,差异均无统计学意义 ,P >0 0 5 ,而PTEN、p PKB只在临床分期间差异有统计学意义 ,P <0 0 5。结论 :PTEN/PI3K信号转导途径与子宫内膜癌的发生密切相关。伴随PTEN表达缺失 ,p PKB、p Bad阳性表达更加明显 ,提示PTEN蛋白表达可作为子宫内膜癌早期诊断指标和基因治疗靶点。     

子宫内膜癌组织中PTEN mRNA表达的研究

目的:探讨子宫内膜癌组织中PTENmRNA的表达及临床病理意义。 方法:应用逆转录 -聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增65例子宫内膜癌和15例正常子宫内膜组织中PTEN基因外显子1 -8、5 -9和5-8片段 ,并结合临床病理资料进行分析。结果:在65例子宫内膜癌组织中 ,PTENmRNA的表达缺失率在外显子1 -8、5-9和5-8分别为49.23 %(32/65)、38.46 %(25/65)和32.31 %(21/65) ,而正常子宫内膜组织中全部呈阳性表达。二者在三组中表达缺失率的差别显著(P<0.05)。而且子宫内膜癌组织中的表达缺失率在特殊类型癌和G3 级组织中分别高于内膜样腺癌和G1～2 级组织(P<0.05)。 结论:子宫内膜癌组织中存在较高比例的PTENmRNA表达缺失 ,表明PTEN基因转录水平异常在子宫内膜癌的发生发展中起重要作用     

子宫内膜癌组织中抑癌基因PTEN突变和表达的探讨

目的：研究抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组织中的突变频率、分布和表达，探讨其在子宫内膜癌发病中的意义。方法：提取40例新鲜子宫内膜癌及癌周组织的基因组DNA，应用聚合酶键式反应—单链构象多态性分析(PCR—SSCP)方法，研究PTEN基因9个外显子的突变情况，并对突变样本进行测序分析。采用免疫组织化学法进行PTEN蛋白表达研究，并与组织学类型、临床分期、病理分级、淋巴结转移和雌孕激素受体状态的相关性进行分析。结果：40例子宫内膜癌中共检测到突变为18例，占45、0％。18例结果显示，8例为错义突变，10例分别为无意义突变、插入和缺失，形成截短蛋白。异常突变点中44、0％为外显子5，28.0％为外显子8，17．0％为外显子3，外显子1和6各有1例。免疫组化结果显示PTEN主要分布于细胞浆中：23／40例(57．5％)子宫内膜癌中PTEN表达完全缺失，10／40例(25．0％)表达部分缺失。PTEN在子宫内膜癌的表达与组织学类型和临床分期有关，与病理分级、肌层侵润及淋巴结转移无明显相关性。PTEN表达缺失率在雌孕激素受体阳性的癌组织中明显高于雌孕激素受体阴性的癌组织。结论：PTEN可能和子宫内膜癌的发生有关。     

Somatic mutation of PTEN in vulvar cancer.

PTEN, a candidate tumor suppressor gene located at chromosome 10q23.3, has been shown to be mutated in approximately 40% of endometrial cancers. Such mutations have also been identified in endometrial hyperplasia, indicating that inactivation of the PTEN tumor suppressor gene is an early event in the genesis of some endometrial cancers. In this study, we have extended the analysis of PTEN in gynecological cancer to include adenocarcinoma of the cervix and vulvar carcinomas. Microdissected tissue (including normal tissues), preneoplastic, and neoplastic lesions were analyzed from 9 patients with cervical cancer and 10 patients with vulvar cancer. Only 1 cervical adenocarcinoma displayed a PTEN mutation. In contrast, five of eight vulvar carcinomas studied harbored PTEN mutations. Alterations were identified in carcinoma in situ as well as squamous cell carcinoma of the vulva. In two patients, PTEN mutations were identified in mucosal regions with mild or focal dysplasia. These results suggest that PTEN is frequently altered in vulvar carcinomas and can be found associated with early dysplastic changes in vulvar mucosa.     

抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1在肾癌组织中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

背景与目的:PTEN/MMAC1/TEP1是近来新发现的具有磷酸酯酶活性的抑癌基因,有研究证实PTEN在人类多种肿瘤中存在丢失或突变,与肿瘤的发生、发展密切相关,但在肾癌中研究较少。本研究拟探讨肾细胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)中抑癌基因PTEN的蛋白表达及其与肾癌生物学行为的关系。方法:收集44例手术后并经病理学检查证实的RCC组织、15例癌旁非癌肾组织及10例非瘤正常肾组织,采用免疫组化SP法进行PTEN蛋白检测,按PTEN蛋白阴、阳性各选15例RCC组织和10例正常肾组织,用流式细胞仪检测细胞的增殖指数和凋亡率,从而分析PTEN蛋白与肾细胞增殖和凋亡的关系。结果:PTEN蛋白在肾组织中表达主要位于胞浆,RCC组织中PTEN阳性表达率为36.36%,显著低于癌旁非癌肾组织(73.33%)及正常肾组织(100%)(P<0.01),在不同组织类型中无统计学差异(P>0.05)。PTEN蛋白在Ⅰ、Ⅱ期RCC组织中表达显著高于Ⅲ、Ⅳ期RCC组织(P<0.05),PTEN蛋白阳性RCC细胞的增殖指数为(5.6±0.8)%,显著低于PTEN蛋白阴性者的(15.6±1.6)%(P<0.01),而PTEN蛋白阳性者的细胞凋亡率为(6.5±1.9)%,显著高于PTEN蛋白阴性者的(2.8±1.6)%(P<0.01)。结论:PTEN蛋白在RCC组织中的阳性表达明显下降,其抑癌作用机制可能是诱导细胞周期阻滞在G1期和增加细胞凋亡率,提示检测PT     

PTEN,Bcl-2基因蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及临床病理意义

目的:研究PTEN、Bcl-2在子宫内膜腺癌发生、发展中的作用。方法:应用免疫组化S-P法检测PTEN,Bcl-2在10例正常子宫内膜,10例子宫内膜不典型增生,58例子宫内膜腺癌中的表达,并分析它们与子宫内膜腺癌临床病理指标的关系。结果:PTEN蛋白在正常子宫内膜,子宫内膜不典型增生和子宫内膜腺癌中的阳性表达逐渐降低,差异有显著性(P<0.05)。在子宫内膜腺癌中PTEN的表达与临床分期、组织分化、肌层浸润及淋巴结转移无关。Bcl-2蛋白在正常子宫内膜,子宫内膜不典型增生和子宫内膜腺癌中的阳性表达逐渐降低,差异有显著性(P<0.005)。在子宫内膜腺癌中Bcl-2的表达与临床分期、组织分化、肌层浸润及淋巴结转移均显著相关(P<0.05)。结论:PYEN和Bcl-2在子宫内膜腺癌的发生,发展中起着不同程度的作用。它们的检测可对子宫内膜腺癌的早期诊断、恶性程度、预后的判断和进一步治疗提供依据。