生物素—链毒亲和素免疫学测定地高辛间接包被方法的研究

笔得曾经成功地应用德国Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ公司生产的现成的链霉亲和素小管建立了生物素－链霉亲和素测定地高辛的反应模型，本文用国产的甸霉亲和素自行包被，采用的是一种间接包被方法。首先人工合成ＢＮＨＳ－ＢＳＡ，将其先行包被于板上，然后加入６．２５μｇ／Ｌ的链霉亲和素溶液，室温（２０－２５℃）３ｈ，并应用到地高辛的临床检测中。     

酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因

目的建立血清内源性哇巴因（ＥＯ）浓度测定的酶联免疫吸附试验，促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清，用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果以抗血清稀释度为１：１００００、包被抗原浓度为１μｇ／ｍｌ时标准曲线最理想，灵敏度为０．２３μｇ／Ｌ，血清ＥＯ高（２．４μｇ／Ｌ）、中（１．２μｇ／Ｌ）、低（０．６μｇ／Ｌ）浓度的平均批内变异系数为４．７％，批间变异系数为１２．３％；高、低浓度的回收率分别为９６．３％和９１．４％；与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应，与地高辛存在１．８％的交叉反应。用该法测定正常人（１０例）、孕妇（２３例）及原发性高血压患者（１０例）血清ＥＯ含量分别为０．５１±０．１７、０．８１±０．２６、０．７４±０．２０μｇ／Ｌ。结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点，可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究。     

急性脑血管病患者血与脑脊液中肿瘤坏死因子含量的变化及其临床意义

目的：探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）与急性脑血管病（ＡＣＶＤ）的关系。方法：采用酶联免疫吸附法检测了６０例ＡＣＶＤ患者血与脑脊液（ＣＳＦ）中ＴＮＦ水平。结果：ＡＣＶＤ组血及ＣＳＦ中ＴＮＦ水平分别为（２．３９１±０．５１９）μｇ／Ｌ和（３．２９４±１．４１８）μｇ／Ｌ，对照组血及ＣＳＦ中ＴＮＦ水平分别为（１．７６９±０．２７２）μｇ／Ｌ和（１．２３６±０．３９９）μｇ／Ｌ，ＡＣＶＤ组血及ＣＳＦ中ＴＮＦ含量均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。轻、中、重型ＡＣＶＤ组患者血ＴＮＦ水平分别为（２．１１３±０．４１２）μｇ／Ｌ、（２．４１７±０．３１０）μｇ／Ｌ和（２．９４６±０．４３４）μｇ／Ｌ，ＣＳＦ中ＴＮＦ水平分别为（２．７６３±１．１０８）μｇ／Ｌ、（３．４１７±０．９４２）μｇ／Ｌ和（４．２１９±１．２５３）μｇ／Ｌ，轻、重型组分别与中型组比较，血和ＣＳＦ中ＴＮＦ含量均有显著性差异（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。结论：ＴＮＦ参与了ＡＣＶＤ的炎性反应过程，抑制ＴＮＦ产生及抗炎性反应的治疗可能具有潜在的临床价值。     

脑出血患者血浆血小板α—颗粒膜蛋白的变化及其临床意义

目的：探讨脑出血患者血浆血小板α颗粒膜蛋白（ＧＭＰ１４０）含量的变化和临床意义。方法：用放射免疫分析法测定９０例脑出血患者和７０例正常人血浆ＧＭＰ１４０的含量。结果：脑出血患者血浆ＧＭＰ１４０含量于发病１周内达高峰〔（２６．５４±７．２１）μｇ／Ｌ〕，明显高于正常对照组〔（９．０２±２．８９）μｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１〕，以后逐渐下降，第３周末多数降为正常〔（９．６５±３．４０）μｇ／Ｌ〕。出血量＞５０ｍｌ组血浆ＧＭＰ１４０含量〔（３９．５８±７．２９）μｇ／Ｌ〕显著高于出血量＜２０ｍｌ组〔（１５．３５±３．９０）μｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１〕；重型组血浆ＧＭＰ１４０含量〔（３２．１８±６．８１）μｇ／Ｌ〕明显高于轻型组〔（１３．０２±３．２１）μｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１〕；恶化死亡组血浆ＧＭＰ１４０含量〔（３３．３１±８．４５）μｇ／Ｌ〕明显高于治愈组〔（１４．６５±５．３４）μｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１〕。结论：测定脑出血患者血浆ＧＭＰ１４０含量可作为临床上估计出血量、监测病情和判断预后的一个指标。     

化学发光酶免疫法测定地高辛

建立地高辛血清浓度的非放射性检测方法。利用进口发光剂和自制的兔抗地高辛ＩｇＧ，建立了化学发光酶免疫测定血清地高辛浓度的方法，结果，最低检测限为０．０５６μｇ／Ｌ，平均回收率９８．７％，批内变异系数≤８．８％，临床常用甾体药物无明显干扰，与荧光偏振免疫法相关良好。结论，化学发光酶免疫法灵敏，准确，稳定，特异，可以作为地高辛血药浓度监测的非放射性常规方法。     

苦味酸动力学法测定血清（浆）中的肌酐

本文采用动力学方法，在７２１—型分光光度计上检测血清（浆）中的肌酐。实验结果表明：在０．６ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ和０．０５ｍｏｌ／Ｌ苦味酸中，肌酐在１８０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，吸光度与浓度呈线性关系，平均回收率９７％，ＣＶ＜４．０％；在动力学方法中，２０ｇ／Ｌ蛋白质、５．０ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖和１００μｍｏｌ／Ｌ丙酮对肌酐的测定基本无干扰。本方法与Ｂｅｃｋｍａｎ７００型自动生化分析仪作比较实验，相对误差＜２０％。本法具有操作迅速，仪器设备简单，无需沉淀蛋白，结果准确等优点，可以作为肌酐测定的常规方法使用。     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

降钙素原生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附分析法的建立

目的建立生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析（biotin．streptavidinamplifiedELISA,BA．ELISA）法半定量检测人血清中降钙素原含量。方法通过双抗体夹心法,结合生物素一链霉亲和素系统的放大作用,建立降钙素原的半定量检测方法。并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果该方法的最低检测限为0．12mg／mE,线性范围为0．12～20ng／mL,回收率为98．59％。分析内和分析间变异系数分别为4．9％～16．8％和7．1％～14．9％。与降钙素原结构类似物及血清中常见的干扰物质特异性良好。通过对73例血清样本进行检测分析,当阈值为0．5ng／mL时,敏感性和特异性分别为100％和96．0％。结论本研究建立的降钙素原生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析法具有灵敏、简便、准确等特点,具有良好的应用前景。     

等剪切场中剪切诱导血小板释放神经肽Y

采用剪切激活血小板的方法，利用特异性放射免疫分析显示大鼠富血小板血浆（ＰＲＰ）与富血小板组分（ＰＥＦ）分别含神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫活性物质９２．５９±１０．０９μｇ／Ｌ与９７．０２±３１．１１μｇ／Ｌ，高于去血小板血浆（ＰＦＰ）（１．５２±１．３２μｇ／Ｌ），与贫血小板血浆（ＰＰＰ）（１．６６±１．６１μｇ／Ｌ）中的含量（Ｐ＜０．００１）。ＰＲＰ经剪切诱发血小板聚集后，ＰＦＰｓ（剪切后）中ＮＰＹ浓度升高到２．２５±１．３７μｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５），ＰＰＰ经剪切后ＮＰＹ浓度则降为１．２２±１．０７μｇ／Ｌ。结果表明大鼠血小板中含有大量ＮＰＹ，经剪切激活血小板使其聚集时，可以释放。剪切后ＰＲＰｓ与ＰＥＦｓ的ＮＰＹ浓度均升高，分别为１１２．４９±２３．０μｇ／Ｌ与１２１．９１±３１．２９μｇ／Ｌ，提示剪切促进血小板合成ＮＰＹ。     

链霉亲和素—生物素—ELISA方法的建立及其在HBsAg测定中的应用

根据链霉亲和素（ＳＡ）与生物素（Ｂ）之间有很强亲和力的原理，建立了ＥＬＩＳＡ板先用ＳＡ包被再与生物素化抗体结合的间接包被方法。通过试验，选择了生物素化白蛋白（Ｂ－ＢＳＡ）预包被，再连接ＳＡ以制备ＳＡ酶标板。应用生物素化的ＨＢｓ单抗及酶标记的抗ＨＢｓ单抗，建立了检测ＨＢｓＡｇ的ＳＡＢ－ＥＬＩＳＡ方法，得到良好的效果。     

前列腺特异抗原的随龄变化

为了探讨血清前列腺特异抗原（ＰＳＡ）的随龄变化，用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测了１００例前列腺正常的男性血清ＰＳＡ的浓度，结果显示，年龄与血清ＰＳＡ显著相关（Ｐ〈０．０１），随着年龄的增加，ＰＳＡ浓度逐渐增加（Ｐ〈０．０５）。不同年龄段的第９５％百分位数分别为；〈５０岁者为３．８μｇ／Ｌ，５０￣５９岁者为４．４μｇ／Ｌ，６０￣６９岁者为６．８μｇ／Ｌ，≥７０岁者为７．７μｇ／Ｌ。因此，不同年龄段应采用不     

L615小鼠白血病淋巴细胞高密度脂蛋白受体特性的研究

应用放射受体分析法研究发现６１５系小鼠外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）具有对高密度脂蛋白（ＨＤＬ３）特异、高亲和性、可饱和的ＨＤＬ受体。Ｌ６１５小鼠白血病淋巴细胞ＨＤＬ受体活性明显增高，其受体最大结合量（Ｂｍａｘ）明显高于正常对照组（Ｐ＜０．００１），亲和力虽较正常降低，但随外周血白细胞数升高，亲和力则逐渐增高［Ｋｄ值分别为（４．５３３±０．４１）×１０－８ｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．００１）、（３．６５±０．２７）×１０－８ｍｏｌ／Ｌ、（３．００±０．１４）×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＞０．０５］，直至与正常对照组无明显差异。而Ｂｍａｘ却逐渐降低，分别为５．６５±０．２４μｇ／ｍｇ细胞蛋白、４．４０±０．２３μｇ／ｍｇ细胞蛋白、３．３２±０．９３μｇ／ｍｇ细胞蛋白（Ｐ＜０．００１）。     

脑梗塞并发多器官衰竭患者肿瘤坏死因子含量的观察

目的：检测脑梗塞并发多器官功能衰竭（ＭＯＦ）患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的含量变化并探讨其意义。方法：单纯急性脑梗塞患者（ＡＣＩ组）２１例，脑梗塞并发多器官功能衰竭患者（ＭＯＦ组）２４例（其中伴上消化道出血１１例，心功能衰竭７例，肾功能衰竭６例）。采用放射免疫方法检测２组患者血清ＴＮＦ的含量。结果：脑梗塞并发ＭＯＦ组ＴＮＦ含量〔（２．４７±０．３９）μｇ／Ｌ〕明显高于ＡＣＩ组〔（１．８９±０．２４）μｇ／Ｌ〕，Ｐ＜０．０１。脑梗塞并发ＭＯＦ组中各亚组间ＴＮＦ〔上消化道出血组（２．５３±０．４３）μｇ／Ｌ，心功能衰竭组（２．０１±０．２８）μｇ／Ｌ，肾功能衰竭组（２．４１±０．３２）μｇ／Ｌ〕差异显著（Ｐ均＜０．０１），尤以上消化道出血组升高明显。结论：ＴＮＦ参与了脑梗塞并发上消化道出血的发病；监测ＴＮＦ变化有助于对脑梗塞并发ＭＯＦ患者的病情观察和预后估计。     

2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基)苯酚显色法测定尿钴

为了建立测定尿液中钴含量的化学方法，依据钴与２－（５－溴－２－吡啶偶氮）－５－（二乙氨基）苯酚及ＴｒｉｔｏｎＸ－１００在ｐＨ５．２缓冲液中生成稳定的红色配合物，经１２ｍｏｌ／Ｌ硫酸酸事，用分光光度计进行测定，本法具有较高的灵敏度（ε＝８．２６×１０＾４Ｌ／（ｍｏｌ·ｃｍ）和较好的选择性，最低检出浓度为３．８μｇ／Ｌ变异系数为４．６％，对于２０ｍｌ尿样，加入不同量钴０．２～０．４μｇ，回收率９３．０     

血清Ⅲ型前胶原及Ⅳ型胶原在肝硬化测定中的临床意义

用放射免疫法测定肝硬化病人的血清Ⅲ型前胶原及Ⅳ型胶原并与正常对照作比较探讨，ＰＣⅢ，Ⅳ－Ｃ怀肝硬化的关系。测定的１０９例，正常对照３８例，肝硬化７１例，结果显示：肝硬化病人血清ＰＣⅢ，Ⅳ－Ｃ的含量分别为１８０．１３±７０．０７μｇ／Ｌ及１６２．５±４４．１５μｇ／Ｌ，明显高于对照组的８８．００±２１．０３μｇ／Ｌ和９７．８８±１７．７２μｇ／Ｌ，Ｐ值均小于０．０１。     

尿葡萄糖二酸测定及对药物性肝炎鉴别诊断的评价

本文根据酶竞争抑制原理，应用自动生化分析仪测定尿液中葡萄糖二酸（ＵＧＡ），提高了测定效率、精密度和准确性。本法天内ＣＶ为３．１％，回收率９６．５％，线性范围０～１８０μｍｏｌ／Ｌ。４８例健康人ＵＧＡ为１．８～３１．３μｍｏｌ／ｇ．Ｃｒ，非药物性肝炎病人为４．２～５６．８μｍｏｌ／ｇ．Ｃｒ、药物性肝炎病人为１９．６～５５３μｍｏｌ／ｇ．Ｃｒ，以５０μｍｏｌ／ｇ．Ｃｒ作为切割值，其鉴别诊断效率为８７．８％。同时也观察到某些药物对测定有负干扰。     

急性心肌梗塞实验诊断指标的评价

本文应用一步夹心ＥＬＩＳＡ法定量检测血清肌钙蛋白（ＴｎＴ），３３名健康者浓度范围０～０．０８μｇ／Ｌ，１２名急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者均超过参考值上限（０．２μｇ／Ｌ），同时检测血清肌红蛋白（Ｍｂ），血清磷酸肌酸激酶同工酶（ＣＫ－ＭＢ）作比较后发现，ＴｎＴ灵敏度高，升高时间早，持续时间长，可判断梗塞预后，是一种特异的心肌损伤血清标志物。     

简要快讯

０１９ 时间分辨免疫荧光法测定血清胰蛋白酶－１与α抗胰蛋白酶复合物［芬兰］／Ｊｏｈａｎ　Ｈｅｄｓｔｒｏｍ 在恶性胆道疾病时，血清中胰蛋白酶－１与α抗胰蛋白酶复合物浓度常增高。用时同分辨免疫荧光法测定该复合物的检测限为０．４２μｇ／Ｌ线性范围为０～１００μｇ／Ｌ回收率为８７～１０２μｇ／Ｌ，参考值为８．９～３３μｇ／Ｌ，与良性胆道疾病，胰腺癌，肝细胞癌相比，胆道癌病人血清中该复合物的浓度显著性升高。用ＲＯＣ分析发现，该复合物在区分恶性和良性胆道疾病方面比ＣＡ１９—９，ＣＥＡ等肿瘤标志物更敏感，因而是…     

生物素-链霉亲和素酶免疫法PSA测定的评价

目的 评价生物素-链霉亲和素酶免疫分析法(BSA-ELISA)测定前列腺特异性抗原(PSA)并与化学，发光法(CLIA)进行比较。方法根据EP9-A文件要求采集数据，并以相应软件分析这两种方法的相关性；同时对BSA-ELISA的测定范围，变异系数(CV)，最小检测限进行测定。结果两种方法测定的结果具有较好的相关性。回归方程Y=0．985X-0．131，相关系数(r)=0．997。PSA的批内平均CV为2．21％，批间平均CV为3．08％。测定范围为1．50～85．00μg／L。最小检测限为0．30μg／L。结论采用全自动酶免疫分析仪的BSA-ELISA与CLIA自动分析仪测定PSA的相关性好，结果稳定，偏差小，可以在临床上常规应用。     

TLC、LTD、Surestep~(TM)三种尿吗啡定性检测方法的对比研究

目的比较薄层色谱法（ＴＬＣ）、改良纸薄层色谱法（ＬＴＤ）和一步法（ＳｕｒｅｓｔｅｐＴＭ）对海洛因依赖者尿吗啡定性检测的敏感性。方法３０例海洛因依赖者脱毒过程中逐日尿液标本采用该三种方法进行检测，并以３０名健康者尿液标本作对照。结果３０名健康者尿液标本吗啡定性检测三种方法均呈阴性。ＴＬＣ法戒断毒品３～４天，ＬＴＤ法４～６天，ＳｕｒｅｓｔｅｐＴＭ法６～１５天尿毒品检测转为阴性，灵敏度ＳｕｒｅｓｔｅｐＴＭ０．２～０．３μｇ／ｍｌ、ＬＴＤ０．４～０．５μｇ／ｍｌ、ＴＬＣ０．６～０．７μｇ／ｍｌ。结论ＴＬＣ法准确性高、经济、易开展，但灵敏度差、检测费时。ＬＴＤ法准确性好、灵敏度较高、检测时间短，但成本高。ＳｕｒｅｓｔｅｐＴＭ是一种免疫色谱法，一步操作可得结果，灵敏度高，但准确性差，主要用于初筛。