抗原受体基因寡/亚克隆重排和克隆演化的研究进展

抗原受体基因如免疫球蛋白重链（IgH）及T细胞受体（Tea）的可变区（V）和连接区（J）片段在干细胞向淋巴系分化时会发生特异性重排，形成V-D-J片段，不同淋巴细胞其V—D—J重排方式是不同的。因此重排后形成V—D—J片段是每个淋巴细胞克隆特有的基因标志。淋巴系肿瘤为单克隆起源，因此其IgH／TCR基因重排方式是单一的，经聚合酶链反应（PCR）或Southern杂交等方法检测可出现特征性的重排带。可作为淋巴系肿瘤克隆的独特基因标志，已较广泛应用于淋巴系肿瘤微小残留病（MRD）及基因分型等研究。但多重研究显示应用DNA印迹法及以PCR等方法检测发现在相当一部分淋巴系统肿瘤患者中存在2种或2种以上的抗原受体基因（IgH和／或TCR）重排方式，而且在随后疾病的发展过程中，     

淋巴细胞白血病与非霍奇金淋巴瘤免疫标记对比研究

采用单克隆抗体免疫酶标和ＰＣＲ技术对比研究３１例淋巴细胞白血病和２５例非霍奇金淋巴瘤免疫表型和ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排。证明淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤虽均为淋巴细胞恶性增殖，但其肿瘤细胞具有不同的细胞起源及免疫学特征。     

小儿急性白血病IgH基因重排与白血病克隆性和免疫分型的关系

选用一对免疫球蛋白重链基因V区和J区的通用引物,进行PCR检测不同类型小儿急性白血病免疫球蛋重链基因重排。33例小儿急性白血病初诊未治骨髓标本检测结果呈单克隆条带的为U-ALL3/7例,C-ALL4/6例,单/B祖双标记白血病1/3例,T-ALL1/4例,AML1/10例。B-ALL、AMoL、髓/T双标记白血病各1例均阴性。说明免疫球蛋白重链基因重排主要见于B细胞系ALL及其与B细胞相关的双标记白血病,阳性率为47％,可以作为分析白血病细胞来源的标志之一,并辅佐基因分型。另外对20例正常人外周血单个核细胞DNA检测结果均为一片模糊,无明确条带,说明可以区分淋巴细胞系克隆增殖和反应性增生。本文尚对2例PCR产物进行DNA序列分析,结果参与重排的J区分别为J_4和J_5,DNA同源性很小,有可能设计克隆特异性引物和探针作微小残留病检测。     

IgH、TCRδ基因重排与急性非淋巴细胞白血病的相关性

目的 探讨初诊急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患中免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体δ链（ＴＣＲδ）基因重排情况。方法 用聚合酶链反应方法检测ＩｇＨ及ＴＣＲδ基因重排。结果 ３０例患中９例（３０％）发生ＩｇＨ基因重排,５例出现ＴＣＲδ基因重排。结论 ＡＮＬＬ中确定存在系列不保真现象,不仅具有较高的ＩｇＨ重排发生率,还具有ＴＣＲδ重排发生。     

多重PCR检测急性淋巴细胞白血病IgH及TCRγ链重排基因

多重ＰＣＲ检测急性淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲγ链重排基因徐兵周淑芸孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排，可作为淋巴细胞白血病特异性基因标志。应用多聚酶链（ＰＣＲ）技术检测重排基因以其灵敏、快速等特点而优于其它传统方法。但目前Ｐ...     

急淋白血病抗原受体基因重排的克隆演化问题

急性淋巴细胞白血病中抗原受体基因重排的克隆演化可导致２种以上重排亚克隆同时存在，或病程中白血病克隆重排的改变，本文综述有关抗原受体基因重排克隆演化发生机理，表现形式及临床意义等方面的研究现状。     

急性单核细胞白血病患者外周血和骨髓TCR Vβ亚家族T？…

采用ＲＴ－ＰＣＲ扩增急性单核细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ５）患者外周血和骨髓单个核细胞的ＴＣＲ Ｖβ２４个亚家族基因,分析其ＴＣＲ Ｖβ亚家族的利用情况。结果发现,不同标本中可检测到１－１９Ｖβ亚家族的Ｔ细胞,不同患者外周血和骨髓中ＴＣＲ Ｖβ亚家族Ｔ细胞分布不尽相同。研究结果提供了ＡＭＬ－Ｍ５患者外周血和骨髓中ＴＣＲ ＶβＴ细胞倾斜性分布的细胞免疫功能改变特点。     

急性白血病耐药基因的聚合酶链反应研究

ＭＤＲ可能导致ＡＭＬ化疗失败，本文应用ＰＣＲ技术，从基因水平，结合细胞遗传学分析，对ＡＭＬ病人进行ＭＤＲ基因表达与化疗疗效的动态观察。发现２０例初、复诊患者有１５例ＭＤＲ表达，但后者与ＣＲ无线性关系，年龄、性别、ＦＡＨ各亚型、染色体异常与否均与ＭＤＲ表达、ＣＲ取得不相关。单凭ＭＤＲ基因表达难以估计ＡＭＬ病人的预后。     

免疫球蛋白重链基因指纹图谱分析小儿急性淋巴细胞白血病的克隆性

目的：探讨小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排形式的种类，以及是否存在几个克隆并存的情况。方法：应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术，构建ＩｇＨ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ基因指纹（ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ），分析３４例ＡＬＬ患儿ＩｇＨ基因重排的基因指纹图谱。结果：单克隆的ＩｇＨ基因重排中除了单等位基因重排９例（３２．１４％）外，有１５例（５３．５７％）是双等位基因重排；４例（１４．２９％）白细胞数高、免疫表型是早期Ｂ细胞的病例表现寡克隆性ＩｇＨ重排。结论：从基因水平证实，小儿ＡＬＬ多发生ＩｇＨ双等位基因重排，且有多个克隆并存的现象。     

p73基因异常表达与急性淋巴细胞白血病相关性的研究

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)发生发展的机制。方法应用RT-PCR技术检测42例ALL患者的p73基因mRNA表达情况,并结合患者的临床资料进行分析,同时采用限制性内切酶酶切结合多聚酶链反应方法(REP法)检测p73基因第一外显子甲基化情况。结果42例ALL患者甲基化检测结果28.6%(12/42)存在甲基化,甲基化患者p73mRNA均阴性表达,正常对照组和不存在p73基因甲基化的病人表达p73mRNA。p73mRNA阴性表达与ALL患者首次化疗既获完全缓解及平均缓解时间的降低有明显关系。结论ALL患者p73基因存在较高的阴性表达,p73基因失活在ALL的发生发展中起重要作用。p73基因失活主要原因之一是过度甲基化。p73mRNA检测对判断ALL患者预后有一定的意义。     

急性髓细胞白血病M2b型AML1—ETO融合基因转录本的检测

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）－Ｍ２ｂ患者约９０％有ｔ（８；２１）。已经证明它导致ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因。我们应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测了２２例ＡＭＬ－Ｍ２ｂ，其中ｔ（８；２１）阳性１６例，阴性２例，不能确定有无ｔ（８；２１）的４例，发现全部２２例患者均可检出ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因转录本。同时在５例ｔ（８；２１）阴性的ＡＭＬ中，包括Ｍ２ａ例，Ｍ3 １例，均未检出上述融合基因转录本     

多重PCR法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病患者克隆性免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

目的 应用多莺PCR方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的克隆性免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排,为实时定量RT-PCR(RQ-PCR)法监测ALL患者体内的微量残留病(MRD)奠定基础.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和(或)TCR检测方法,设计96条不同的PCR引物,分成14个混合管,通过多重PCR,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD克隆性基因重排.结果 在22例成人B系ALL患者中,Ig克隆性重排检出率为96%,其中IgH为86%,IgK为14%.在18例成人T系ALL患者中,TCR克隆性重排检出率为100%,其中TCRB为83%,TCRG为78%,TCRD为39%.两个及两个以上克隆性标志物的检出率在B和T系ALL中分别为91%(22例中20例)和89%(18例中16例).结论 BIOMED-2协作组设计的14管多重PCR引物和方法,几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性T、B细胞增殖群体,方法简便、可靠、覆盖面广,适用于成人ALL患者基因重排检测和MRD监测.     

PCR检测急性淋巴细胞白血病脑脊液中白血病细胞

白血病细胞可侵脑脑组织和脑膜，继发中枢神经系统白血病。涂片染色法检测脑脊液中白血病细胞缺乏敏感性。近年来聚合链反应技术已成功地用于检测急性淋巴细胞白血病残留白血病细胞。     

石蜡包埋B细胞淋巴瘤组织克隆性IgH基因重排的检测

目的：探讨克隆性免疫球蛋白重链第三互补决定簇区（IgHCD43）基因重排在B细胞非霍奇金淋巴瘤（B－NHL）诊断方面的价值。方法：采用半巢式PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）及银染技术,检测38例B－NHL、4例T－NHL及10例慢性扁桃腺炎,经福尔马林固定、石蜡包埋病理组织的克隆性IgHCDR3重排。结果：29例B－NHL及1例免疫组化未能明确细胞来源的NHL克隆性IgHCDR3重排阳性;4例T－NHL及10例慢性扁桃腺炎克隆性IgHCDR3重排阴性。结论：克隆性IgHCDR3重排可作为B－NHL与反应性增生鉴别的特生标志,大部分情况下可作为系分化标志。     

混合谱系白血病基因重排与急性白血病

涉及染色体11q23的异常是造血系统肿瘤的常见改变，该异常导致位于11q23处的混合谱系白血病（MLL）基因发生重排，与多种伙伴基因发生融合。MLL基因编码蛋白主要包括3个功能区域：转录抑制区、转录激活区和DNA结合区，它起着转录因子功能，在人体发育及细胞分化过程中，起着重要调控作用。MLL基因重排包括易位、部分串联重复、缺换、片段扩增等，MLL易位可产生许多不同类型的融合基因，最终诱导白血病发生。MLL重排的白血病有特异生物学特性，已成为白血病中的一个特殊亚型。     

采用甲基化特异性聚合酶链反应研究急性白血病p15基因CpG？…

目的 探讨ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化作为各型急性白血病通用的基因标志物的可行性。方法 采用甲基化特异性聚合链反应（ＭＳＰ）法检测４０例初治或复发急性白血病、５例完全缓解白血病及８例（份）正常骨髓的ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化,并对ＭＳＰ产物进行序列测定。结果 急性白血病患ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化阳性率为８０％,ＡＭＬ与ＡＬＬ的阳性率（分别为８３％和７３％）差异无显性;５例完全缓解期白血病患中１例ｐ