荧光信号引物PCR定量测定血清HCV—RNA的实验室评价

目的对Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ荧光标记ＨＣＶ定量ＰＣＲ方法进行实验室考核。方法２８例抗ＨＣＶ（＋）、定性ＰＣＲ（＋）的血清标本，用于重复性测定；２０例健康人血清用于正常值测定；５例定性ＰＣＲ（＋）和５例定性ＰＣＲ（－）标本用于Ａｍｐｌｉｓｅｍｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法的比较。结果孔间变异系数（ＣＶ）为 ２０．６％，操作者间ＣＶ为 ４３．８％，批内 ＣＶ为 ６１．９％，批间ＣＶ为８５．１％。２０例健康人血清测定值均小于最小检测浓度，即１０２拷贝／ｍｌ。用Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法对５ 例定性ＰＣＲ（－）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ均为阴性；对５ Ｎ定性ＰＣＲ（＋）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ均为阳性，ＨＣＶ－ＲＮＡ的浓度为 ２． ５ × １０５拷贝 ／ｍｌ～ １． ７ ×１０６拷贝 ／ｍｌ， ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ方法有 ２例未能检出。结论 Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ ＨＣＶ定量 ＰＣＲ方法特异性和灵敏度均好，可用于临床疾病的研究和抗病毒药物疗效的评估。由于批内、批间变异系数较大，试验与操作均应严格规范。     

不同血清学标志血清中HBV DNA和HCV RNA的分析研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４８１例乙肝血清学五项指标至少一项阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果显示ＨＢＶＤＮＡ的检出率为９１．５％，ＨＣＶＲＮＡ的检出率为１５．４％，并提示（１）当乙肝患者血清中抗ＨＢｅ阳性甚至抗ＨＢｓ阳性时，仍有相当部分的ＨＢＶ存在且仍在复制；（２）ＨＢＶ和ＨＣＶ感染可相互增加其易感性；ＨＢｓＡｇ阳性与否与抗ＨＣＶ可能有一定关系；（３）ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ具有较高的敏感性。     

207例乙肝患者血清HDV RNA和HBV DNA检测及其意义探讨

对２０７例急性，慢性，亚急重型乙型肝炎患者的外周血进行了丁肝病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ和乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的检测，结果检出ＨＤＶＲＮＡ阳性２８例（１３．５％）。其中，在抗－ＨＢｅ阳性者和ＨＤＶＲＮＡ检出率较高，为１８．９％，ＨＢｅＡｇ阳性者中的ＨＤＶＲＮＡ检出率较低，为７．９％，在本文２８例ＨＤＶＲＮＡ阳性的患者中６例（２１．４％）检出ＨＢＶＤＮＡ；而在其余１７９例ＨＤＶＲＮＡ阴性病例中，则有６５     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５′端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％，凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶ ＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录－套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５’端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％。凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录。套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率达９３．３％（１４／１５）。ＴｔｈＤＮＡ聚合酶用于ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ５’端非编码序列片段具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。     

582例乙型肝炎表面抗原阳性者庚型肝炎病毒抗体的检出率及其近期变化

目的：了解庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者中的流行状况及其近期变化。方法：采用酶联免疫吸附试验对５８２例ＨＢｓＡｇ阳性者的血清标本进行抗－ＨＧＶ检测。抗－ＨＧＶ阳性者在３个月后再次检测抗－ＨＧＶ,以观察抗－ＨＧＶ的近期转归情况。结果：５８２例ＨｂｓＡｇ阳性者中抗－ＨＧＶ阳性４６例,阳性率为７．９％,４６例中５例在３个月后抗－ＨＧＶ转为阳性。阴转率为１１％。结论：ＨＢｓＡ     

PCR检测HBV—DNA与乙型型肝炎病毒不同血清标志的对比分析

为探讨ＨＢＶ－ＤＮＡ在乙肝炎病毒血清不同标志模式中的分布状况及临床意义。方法：应用聚合酶链反应技术在４８５例血清标本进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测，并与血清五项免疫指标对比分析。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｃ阳性模式中，阳性率最高达９２．８６％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ及ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ，阳性率分别为６６．２５％和６８．８３％；除单项抗－ＨＢｓ和免疫指标     

肝组织HCV—NS3抗原与HCV感染血清不同模式的关系及临床意义

采用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ方法检测血清ＨＣＶ ＲＮＡ、抗－ＨＣＶ，采用鼠单克隆抗体ＰＡＰ方法检测肝组织内ＨＣＶ－ＮＳ３抗原。结果发现被检测的４５例丙型肝炎患者随着病情加重和病程延长，血清抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ及肝组织ＨＣＶ－ＮＳ３抗原阳性率逐步增高；某些患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ阳性结果不一致；血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性肝组织ＨＣＶ－ＮＳ３阳性率明显同     

丙型肝炎病毒基因分型研究

为了解青岛地区丙型肝炎病毒基因型分布以及ＨＣＶ－５；ＮＣ和ＨＣＶ－ＮＳ５ｂ两区域分型结果间的差异。本文对采１４７例各型佩肝患者和７例有偿供血者的１５４份ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性血清，同时进行了ＨＣＶ－５’ＮＣ和ＨＣＶ－ＮＳ５ｂ两个区域酶切分型研究。     

抗—HBc阴性的乙肝病毒携带者血清学分析

１９９４年间检测的乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者９６６５人份，ＨＢｓＡｇ阳性中１４６例抗－ＨＢｃ阴性，，其中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ同时阳性的１３９例，占９５．２％，对其随访观察，ＡＬＴ正常，抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ均阴性、ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＢｃＡｇ检出率均为１００％；４０例随访１年后，血清学指标无变化。结果提示，抗－ＨＢｃ阴性的ＨＢＶ携带者，非近期感染或活动性病变；体内ＨＢＶ复制活跃，具有较强的传染性。可能的     

乙型肝炎病毒前S1蛋白及其抗体与HBV血清标志物的相关性

为探讨Ｐｒｅ－Ｓ１、抗Ｐｒｅ－Ｓ１与ＨＢＶ免疫标志物的相关性，正确评价其临床意义，我们采用ＥＬＩＳＡ对３３０例ＨＢｓＡｇ阳性标本进行了Ｐｒｅ－Ｓ１、抗Ｐｒｅ－Ｓ１与ＨＢＶ血清标志物相关性的探讨。１　材料和方法１．１　标本　收集ＨＢｓＡｇ阳性标本３３０份，－２０°Ｃ保存。１．２　试剂　ＨＢＶ血清标志物检测试剂由科华生物技术有限公司生产，批号９８０３２０，前Ｓ１试剂盒由新新医学生物工程公司提供，批号９８０４２６。１．３　方法　按说明书操作。２　结果２．１　血清前Ｓ１和ＨＢＶ免疫标志的检测　结果见表１…     

原发性肝癌组织HBVDNA存在状态及HBsAg,HBcAg表达的检测

本文采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术检测原发性肝癌（ＰＨＣ）组织ＨＢＶＤＮＡ存在状态，同时应用免疫组化染色检测ＰＨＣ组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ表达，并比较ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ在ＰＨＣ组织与癌旁肝组织的定位分布。结果显示：整合型ＨＢＶＤＮＡ在３２例ＰＨＣ组织检出率７１．９％（２３／３２），癌旁组织检出率４０．７％（１１／２７）；ＰＨＣ组织内检出ＨＢＳＡｇ阳性细胞１２例（３７．５％）未检出ＨＢＣＡｇ；癌组织检出ＨＢｓＡｇ２６例（９６．３％），ＨＢｃＡ９５例（１８．５％）。结果提示：ＨＢＶ感染与ＰＨＣ发生密切相关，ＨＢＶ可能通过整合于宿主细胞染色体对ＰＨＣ发生起一定作用。     

荧光探针定量PCR检测HBV—DNA

本文采用荧光探针定量（ＦＱ－ＰＯＣＲ）法准确定量检测ＨＢＶ－Ｍ阳性标志中的ＨＢＶ－ＤＮＡ数量。结果显示：ＨＢｅＡｇ（＋组（３２份）的阳性率为１００％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数范围在１０＾５－１０＾９／ｍｌ之间。ＨＢｅＡｂ（＋）组（４７份）的阳性率为２３．４％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝范围在１０＾３－１０＾５．７／ｍｌ之间;ＨＢｓＡｂ（＋）组（３７份）的阳性率为２．７％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数为１０＾５／ｍｌ。     

甘肃省1992－1994年部分地区人群HBV感染血清流行病学调查

我们于１９９２－１９９４年对甘肃省部分地区、城乡人群乙型病毒性肝炎感染状况，进行了血行流行病学调查。结果显示，ＨＢＶ感染率为５２．３０％，ＨＢｓＡｇ用性率为７．５０％，抗－ＨＢＣ阳性率为４４．８０％，抗－ＨＢｓ阳性率为３６．６５％。ＨＢＶ感染各地分布不均，城乡差异显著，并随年龄增长呈增高趋势。双亲携带ＨＢｓＡｇ状况与子女ＨＢｓＡｇ用性率密切相关。ＨＢｓＡｇ阳性者分布呈明显家庭集聚性，１８６例ＨＢｓＡｇ阳性者中ＨＢｅＡｇ阳性６９人。ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｓ，同时用性有１２例。     

临床血清标本的HBV－DNAPCR检测指标与若干HBV免疫学指标关系

临床血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检测指标与若干ＨＢＶ免疫学指标关系程宗浩上海青浦县卫校我们应用上海复华公司的ＰＣＲ检测试剂和上海科华公司ＥＬＩＳＡ检测试剂分别检测了３４７份血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ指标。其中ＨＢｓＡｇ阴性３０...     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

婴幼儿对乙肝疫苗低应答和无应答对策的研究

本文对１０１名低、无应答儿童采用不同方案加强免疫，进行随机对照前瞻性研究观察，表明，对母亲ＨＢｓＡｇ阳性的低、无应答婴幼儿采用注射分枝杆菌多糖与乙肝疫苗（３０μｇ×３）联合应用，免后１年抗体阳转率可达９０％左右；对母亲ＨＢｓＡｇ阴性的低、无应答婴幼儿采用加强１支１０μｇ乙肝疫苗，可使近一半婴幼儿产生抗－ＨＢｓ。利用ＰＣＲ检测低、无应答者的ＨＢＶ－ＤＮＡ，仅有３.８５％为ＨＢＶ感染者，母亲为ＨＢｓＡｇ阳性者的无应答婴幼儿若不进行加强免疫，仍存在着ＨＢＶ感染的危险性。     

干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法对２６例干扰素治疗前丙肝患者血清ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，并对１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性的标本进行外周血单个核细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，发现２６例血清标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为２６．９％，而１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性标本，其ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ有３例阳性，阳性率为２１．１％。因此，ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ是丙肝病毒血症的又一个诊断指标，是否可作为干扰素疗效判断的     

乙型肝炎五种标志物模式及其表面抗原稀释度与原发性肝癌的相…

为探讨乙肝五种标志物模式及ＨＢｓＡｇ在血清中的稀释度与原发性肝癌（ＨＣＣ）间的相关民生，我们采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和反向血凝法分别检测了３９例ＨＣＣ病人血清乙肝标志物（ＨＢＶ－Ｍ）和ＨＢｓＡｇ稀释度，结果发现３５例ＨＢＶ－Ｍ阳性病例中，大三阳（ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ，抗－ＨＢＣ阳性）仅占２２．８％，而小三阳（ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢＣ，抗－ＨＢＣ阳性）却占了６２．８％，３３例ＨＢｓＡｇ阳性的     

聚合酶链反应检测血透患者血清中HBV DNA的临床意义

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了４２例维持性血液透析患者血清标本的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，以评价ＰＣＲ技术在调查透析中心ＨＢＶ感染的流行病学方面的应用价值。结果在４２例标本中有１７例ＨＢＶＤＮＡ阳性（４０．５％），与常规血清标志物相比较，ＨＢｓＡｇ阳性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６０．９％，而全部血清标志物均阴性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为１３．３％。提示：ＰＣＲ方法是监测中心透析ＨＢＶ传染的更灵敏、更可靠手段。它也是对ＨＢＶ变异类型的鉴别及疗效评价方面的一个重要方法。