骨髓移植供受者HLA－DRB的单链构型多态性配型

用ＰＣＲ和单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法检查供受者的ＨＬＡ－ＤＲＢ－１基因座的多态性的一致性，以此做ＤＲＢ的基因配型。１６例同胞供受者对的ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型，有６对相合（６／１６），１０对不合（１０／１６）。此基因配型结果与其它配型结果比较，说明ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型在区分同胞供受者对的Ⅱ类抗原多态性上有较高的灵敏度，同时表明此类配型在应用于骨髓移植前检查同胞供者的意义。     

聚合酶链反应—单链构象多态性分析与反向杂交法进行骨髓移植…

用聚合酶链反应（ＰＣＲ），扩增骨髓移植（ＢＭＴ）受者及７８例无关供者ＨＬＡ－ＤＰＢ１基因，作单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析，初步选出与受者ＨＬＡ－ＤＰＢ１ＳＳＣＰ带型相同者；最后进行反向杂交检测，确定ＨＬＡ－ＤＰＢ１更为相容的供者。应用上述技术，从７８例无关供者中选择出１例与ＢＭＴ受者基因相同的供者。整个过程快速、经济、准确性高。     

骨髓移植供受者HLA—DRB的单链构型多态性配型

用ＰＣＲ和单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法检查供受的ＨＬＡ－ＤＲＢ－１基因座的多态性的一致性，以此做ＤＲＢ的基因配型。１６例同胞供受对的ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型，有６对相合（６／１６），１０对不合（１０／１６）。此基因配型结果与其它配型结果比较，说明ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型在区分同胞供受对Ⅱ类抗原多态性上有较高的灵敏度，同时表现此类配型在应用于骨髓移植前检查同胞供的意义     

HLA-DRB1基因分型在移植配型及亲子鉴定中的应用

应用聚合酶链反应－序列持异性引物（ＰＣＲ＿ＳＳＰ）方法对南京地区汉族人群ＨＬＡ－ＤＲＢ１位点基因特异性及骨髓移植配型、亲子鉴定等进行了分析。ＤＲＢ１基因频率范围在０．００３３～０．１８３３之间，以ＤＲ９１ＤＲ４占多数；骨髓移植通过配型移植成功３例，２例存活情况良好；ＤＲＢ１位点排除亲子关系５例，其中２例为ＨＬＡ－ＤＲＢ１单独排除亲缘关系。本法具有操作简单、快速、结果可靠的特点，不仅适用于移植配型、     

HLA的PCR—SSP分型技术

ＰＣＲ－ＳＳＰ是采用ＰＣＲ技术，针对被检基因设计一系列具有等位基因多态性的序列特异上物扩增被检标本，分析ＰＣＲ产物判定ＨＬＡ型别，ＨＬＡ－ＤＲＩ￣ＤＲ１８可以采用１９对引物检定，采用两步法以７９对引物可以检定ＤＲ全部基因型。ＨＬＡ－ＤＱ采用２０条引物不同组合，陈检定与血清学型别一致的特异性还可分析部份基因型；以２２对引物则可检定ＤＱＢ１全部基因型。ＰＣＲ－ＳＳＰ技术比ＰＣＲ－ＳＳＯＰ及ＰＣＲ－ＲＥ     

应用PCR－SSP对异基因骨髓移植供受者HLA－DQA1位点的基因分型

为探索一种可靠性和灵敏性高的ＨＬＡⅡ类基因的配型方法，根据Ｏｌｅｒｕｐ提出的１６个特异性引物序列，用多聚酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，对ＤＱＡ＿１基因位点的多态性进行检测和分型，并与多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ－ＳＳＯＰＨ）及多聚酶链反应－单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测结果进行比较，获得了一致的分型结果。ＰＣＲ－ＳＳＰ可分辨出ＤＱＡ＿１位点的纯合体和杂合体等位基因，并能检测出单一碱基的点突变；它将ＰＣＲ扩增和检测两个步骤合并为一次完成，操作更简便、快速。并已将ＰＣＲ－ＳＳＰ方法成功地用于１５对异基因骨髓移植的供、受者的分型。ＰＣＲ－ＳＳＰ作为基因分型的有效技术，可为骨髓来源提供直接的科学依据。     

PCR－SSCP用于HLA－DR4等位基因多态性研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术，分析了８例已知ＤＲ４等位基因型的个体，其中７例不同基因型的样本ＳＳＣＰ图谱有明显区别，２例均为ＤＲＢ１＊０４１０的样本，ＳＳＣＰ图谱则完全一致。笔者着重探讨了影响ＳＳＣＰ分析的主要因素：聚丙烯酰胺凝胶浓度和交联度，凝胶中是否含甘油，电泳温度、电流或电压大小等。提示ＰＣＲ－ＳＳＣＰ可用于研究ＨＬＡ的微观多态性、器官移植的配型及法医学上个体识别等方面，具有简便，快速、经济以及高度的分辨力和良好的重复性。     

PCR－SSCP用于HLA－DR4等位基因多态性研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术，分析了８例已知ＤＲ４等位基因型的个体，其中７例不同基因型的样本ＳＳＣＰ图谱有明显区别，２例均为ＤＲＢ１＊０４１０的样本，ＳＳＣＰ图谱则完全一致。笔者着重探讨了影响ＳＳＣＰ分析的主要因素：聚丙烯酰胺凝胶浓度和交联度，凝胶中是否含甘油，电泳温度、电流或电压大小等。提示ＰＣＲ－ＳＳＣＰ可用于研究ＨＬＡ的微观多态性、器官移植的配型及法医学上个体识别等方面，具有简便，快速、经济以及高度的分辨力和良好的重复性。     

D1S80位点高度多态性及其在骨髓移植中的应用

Ｄ１Ｓ８０位点是一个由核心序列组成的ＶＮＴＲ位点，具有高度多态性，高度杂合性和体细胞稳定性。种族多态性及个体多态性尤其显著。Ｄ１Ｓ８０位点作为一种个体标志应用于ＢＭＴ后的监测，灵敏度高，特异性强，且不受供者与受者性别、血型、ＨＬＡ型等巧合一致的限制。将Ｄ１Ｓ８０位点与ＡＰＯＢ３’和Ｄ１７Ｓ３０等位点进行比较，可见Ｄ１Ｓ８０位点的个人鉴别力最高。     

应用PCR－SSCP法探讨外周血B细胞参与多发性骨髓瘤的发病

为探讨多发性骨髓瘤（ＭＭ）的克隆起源，经形态学及ＡＢＣ法筛选１８例外周血无浆细胞污染的ＭＭ患者，采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增免疫球蛋白重链ＣＤＲ３区编码基因，并经单链构象多态性（ＳＳＣＰ）法分析其单链构象多态性。经平行检测患者外周血（ＰＢ）和骨髓（ＢＭ）标本，发现１５例ＢＭ及１１例ＰＢ获得预期的克隆特异性ＰＣＲ产物为８０～１１０ｂｐ，其中９例ＰＢ和ＢＭ获得相同的ＰＣＲ产物，８例为１条扩增条带，其ＳＳＣＰ分析可见２条单链，另１例ＰＣＲ产物为２条扩增条带，其ＳＳＣＰ分析可见３条单链，同一患者ＰＢ与ＢＭ标本的单链泳动速度一致。提示至少６０％ＭＭ患者ＰＢ和ＢＭ不仅ＰＣＲ产物一致，其单链构象也一致，研究结果证实了外周血Ｂ细胞参与ＭＭ的发病。     

应用PCR-RFLP技术对HLA-DRB1*04位点进行基因分型

目前对ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因分型，应用较多方法是ＰＣＲ－ＳＳＯＰ法，其优点是结果准确可靠，缺点是需合成许多探针，有放射性辐射，操作复杂及耗时长。为了探索快速、简便、精确的ＤＲＢ１＊０４等位基因分型方法，笔者对Ｏｔａ等［１］的方法加以改进，用ＰＣＲ－...     

肾移植HLA-DR血清学分型与PCR-SSP基因分型的比较

目的：比较肾移植供受体ＨＬＡ－ＤＲ血清学分型与ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型方法的差异,以探讨两种方法的优缺点。方法：对已作ＨＬＡ－ＤＲ标准血清学分型的供受体标本,用ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型法作ＨＬＡ－ＤＲ抗原分型。结果：血清学法耗时８０ｍｉｎ,ＰＣＲ－ＳＳＰ法耗时１４５ｍｉｎ;血清学方法误差率为１１．５％（受者１５．１％,供者８．７％）。结论：ＰＣＲ－ＳＳＰ法作ＨＬＡ－ＤＲ分型具有准确、简便、快速等优点。     

应用PCR—SSP对异基因骨髓移植供受者HLA—DQA1位点的基因分型

为探索一种可靠性和灵敏性高的ＨＬＡⅡ类基因的配型方法，根据Ｏｌｅｒｕｐ提出的１６个特异性引物序列，用多聚酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，对ＤＱＡ１基因位点的多态性进行检测和分型，并与多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ－ＳＳＯＰＨ）及多聚酶链反应－单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测结果进行比较，获得了一致的分型结果。ＰＣＲ－ＳＳＰ可分辨出ＤＱＡ１位点的纯合体和杂合体     

应用PCR－SSCP技术检测B淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测Ｂ淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞于力，刘敬忠，孙燕，刘春蕙，汪月增我们把多聚酶链反应（ＰＣＲ）与ＤＮＡ单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）相结合，建立了一种检测方法，对骨髓中微量肿瘤细胞进行了检测。材料和方法１标...     

PCR－DNA指纹图识别异基因骨髓移植后重建造血的细胞起源

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增多态性小卫星ＤＮＡ的３３．１，３３．６位点，联合地高辛标记寡核苷酸探针杂交方法，以小卫星ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＤＮＡ指纹图为特异性遗传标志，识别２例慢性粒细胞白血病患者接受同胞供髓的骨髓移植后造血重建的细胞起源。结果显示均有供者源性造血细胞植活。该方法灵敏度高，特异性强，无同位素污染，尤其适用于同性别、同血型、ＨＬＡ全相合的异基因骨髓移植植活指标的监测。     

非亲缘异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病的护理

非亲缘异基因骨髓移植 (ＵＲＤ -ＢＭＴ)是从无血缘关系人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)配型相合的供者体内采集骨髓 ,移植于受者体内以恢复造血功能 ,根治白血病的一种有效方法。在我国因供者选择困难及移植并发症高尚处于起步阶段。据报道 ,ＵＲＤ -ＢＭＴ移植相关死亡率高于亲缘异基因骨髓移植 ,而急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ)是移植失败的主要原因之一[1] 。提高护士对ＵＲＤ -ＢＭＴ后ａＧＶＨＤ临床特点的认识 ,采取有效的护理措施 ,对移植成功与否至关重要。现将我院 1999年 6月～ 2 0 0 1年 8月进行的非亲缘异基因骨髓移植 8例患者ａＧ…     

PCR—SSP分析视网膜色素膜炎易感基因

采用聚合酶链式反应和顺序特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）基因分析方法，对视网膜色素膜炎患者２９例及３０例无血缘关系的健康人的人类主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）ＤＱ各等位基因及亚基因进行了检测分析。实验结果显示：ＭＨＣ－ＤＱＢ１＊０３０１基因可能是视网膜色素膜炎的相关基因之一；ＰＣＲ－ＳＳＰ具有快速、简便、敏感、准确和可靠等优点，值得推广应用。     

ABO血型系统的基因分型

本文介绍了ＡＢＯ血型系统的分子基础及在此基础上对ＡＢＯ血型系统的基因分型的几种主要方法：ＰＣＲ－ＤＮＡ测序法、ＰＣＲ－限制性内切酶酶切法、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ－序列特异性引物（ＳＳＰ）、ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）等。另外还介绍了基因分型技术在ＡＢＯ亚型研究中的应用。     

混合淋巴细胞培养在骨髓移植供体选择中的作用

混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）是传统的配型骨髓移植（ＢＭＴ）供受体主要组织相容性复合（ＭＨＣ）的重要方法。但近年来，随着分子生物学和ＰＣＲ技术发展，出现了许多新的配型ＨＬＡ的基因学方法。利用这些方法，学者们对ＭＬＣ配型ＨＬＡ及选择ＢＭＴ供体的作用进行了研究。认为ＭＬＣ在有血缘关系的同胞间ＢＭＴ供体选择中尚有一定的作用，耐 在无关供体的选择时，ＭＬＣ可被省略而为ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－Ｆ等方法代替。     

多位点VNTR用于异基因骨髓移植植入存活检定研究

目的：探讨多位点可变数串联重复序列（ Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ）—— Ｄ１７ Ｓ３０、 Ｐ Ａ Ｈ、 Ｖ Ｓ１７、 Ｍ Ｌ Ｏ Ｗ １ 在异基因骨髓移植存活检定中的应用。方法：以聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ）扩增４ 个位点 Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ, Ｐ Ｃ Ｒ 产物以聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法检测,对２ 名异基因骨髓移植（ Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ）患者作移植物成活检定研究。结果：受者获得了供者源性细胞植入存活的证据。结论：多位点 Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ个体特异性强、识别力高,可作为 Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ 植活的可靠指标,尤其是用于血型、性别、 Ｈ Ｌ Ａ 表型全相合的 Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ,移植后 １５ 天便可获得植入证据。