大鼠化学诱发肝癌过程中GGT和AFP的表达

用γ-谷氨酰转肽酶—甲胎蛋白(GGT-AFP)双染色法对F_(344)大鼠化学诱发肝癌过程中GGT与AFP的表达进行研究.结果表明,肝细胞癌梁状型以AFP阳性为主,腺管型以GGT阳性为主;胆管细胞癌以GGT阳性为主.提示在形态学上,肝细胞癌可以同时表达GGT与AFP;增生结节GGT和AFP的表达与肝癌的细胞类型相关.对肝癌发生的可能途径进行了讨论.     

γ-谷氨酰转移酶ⅠmRNA亚型联合甲胎蛋白mRNA检测对肝癌的诊断价值

目的：探讨γ-谷氨酰转移酶ⅠmRNA（GGTⅠmRNA）亚型和甲胎蛋白（AFP）mRNA检测对肝癌的诊断价值。方法：运用RT—PCR检测肝脏组织标本和人肝细胞株QSG-7701、人肝癌细胞株HepG2中GGTⅠmRNAA、B、C3种亚型和AFP mRNA的表达。结果：AFP mRNA在肝癌组织中的表达显著高于非癌肝组织、癌旁组织和远癌组织。GGTⅠmRNAA亚型主要在非癌肝组织中表达，B亚型主要在远癌组织、癌旁组织、癌组织中表达。人肝细胞株QSC-7701中GGTⅠmRNAC亚型阳性表达。人肝癌细胞株HepG2中AFP mRNA、GGTⅠ mRNAB亚型表达阳性。GGTⅠmRNAB亚型联合AFP mRNA诊断肝癌的阳性率可达98．0％，小肝癌的阳性率达95．2％。结论：在肝脏癌变的过程中存在着GC-TⅠmRNAA亚型向B亚型的转化，联合监测GGTⅠmRNA亚型和AFPmRNA有助于对肝癌的早期诊断。     

DLK1在肝癌和相关慢性肝病组织中的表达

目的探讨DLK1基因在肝癌和相关慢性肝病组织中的表达情况,寻找新的肝癌标志物.方法采用免疫组化S-P法检测正常肝组织(Norma)l、中度慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、癌周肝硬化(PC)和肝细胞癌(HCC)共95例标本中AFP和DLK1的表达;应用原位杂交方法检测癌周肝硬化、肝细胞癌组织共45例标本中DLK1 mRNA和AFP mRNA的表达.结果 AFP蛋白和DLK1蛋白在正常肝组、慢性肝炎组和肝硬化组均不表达,在癌周肝硬化组阳性表达率为27.9%和23.3%,在肝癌组为46.7%和51.1%,肝癌组AFP蛋白阴性病例中仍有22.73%的DLK1蛋白阳性表达.肝癌组与癌周肝硬化组比较,差异有统计学意义(P<0.05),癌周肝硬化组AFP蛋白表达与DLK1蛋白表达之间具有相关性.AFP mRNA和DLK1 mRNA阳性表达率在癌周肝硬化组为23.3%和41.9%,在肝癌组为40%和31.1%.DLK1 mRNA阳性表达率在癌周肝硬化组和肝癌组差异无统计学意义(P>0.05).结论 AFP联合检测DLK1蛋白可提高肝癌的检出率,DLK1蛋白可作为肝癌诊断候选标志物;癌周肝硬不同于不伴癌的肝硬化而具有癌前病变性质.     

F_(344)大鼠癌前期病变组织中γ-谷氨酰转肽酶、甲胎蛋白的表达

应用丫-谷氨酰转肽酶-甲胎蛋白(GGT-AFP)双染色法对F_(344)大鼠癌前期病变组织中GGT,AFP的产生细胞进行研究.结果表明,透明细胞结节、嗜酸性细胞结节GGT阳性,AFP阴性;嗜碱性细胞结节GGT阴性,部分结节AFP阳性;不典型增生细胞两者均阴性.提示增生结节及肝癌来源于小肝细胞及散在的AFP阳性细胞.     

血清GP73联合AFP、CEA、CA199、GGT检测在PHC早期筛查的应用价值

目的探讨血清高尔基体糖蛋白73(GP73)联合甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)对早期筛查原发性肝癌的临床应用价值。方法收集肝癌实验组患者53例、其他恶性肿瘤对照组患者46例和健康人对照组20例血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测法测定血清GP73浓度;化学发光免疫分析仪测定血清AFP、CEA、CA199水平;7600生化分析仪测定血清GGT水平。结果肝癌实验组患者血清GP73水平显著高于其他恶性肿瘤对照组和健康对照组(P0.05)。ROC曲线分析显示,GP73诊断肝癌的灵敏度(86.8%)明显优于AFP(54.7%)(P0.01),而特异性较AFP差(P0.01)。在24例血清AFP呈低浓度的原发性肝癌患者中,血清GP73对肝癌的阳性检出率为75.0%,远高于AFP(P0.01)。血清GP73联合AFP、CEA、CA199、GGT检测可显著提高肝癌诊断灵敏度,达98.1%。结论血清GP73和AFP、CEA、CA199、GGT联合检测可显著提高肝癌的检出率,对原发性肝癌的早期筛查和诊断具有临床意义。     

甲胎蛋白mRNA在肝癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨甲胎蛋白 (AFP) m RNA在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法 :用巢式逆转录聚合酶链反应 (nestedRT- PCR)检测 19例肝细胞癌患者癌组织 AFP m RNA。结果 :16例 (88.9% )患者癌组织 AFP m RNA呈阳性表达 ,其外周血 AFP m RNA亦为阳性 ;而阴性表达的 3例其外周血 AFP m RNA和血清 AFP亦为阴性。癌组织 AFP m RNA阳性率在血清 HBs Ag阳性组 (93.8% )、合并肝硬化组 (10 0 % )和血清 AFP≥ 2 5 μg/ L 组 (10 0 % )高于 HBs Ag阴性组 (33.3% )、无合并肝硬化组 (5 7.1% )和 AFP<2 5 μg/ L 组 (5 7.1% ) (P <0 .0 5 )。相关分析显示外周血 AFP m RNA阳性率和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达呈正相关 (r =0 .6 413,P <0 .0 5 ;r=0 .6 0 2 4,P <0 .0 5 )。癌组织 AFP m RNA阳性表达和血清 HBs Ag阳性表达及合并有肝硬化呈正相关 (r =0 .6 5 0 3,P <0 .0 5 ;r =0 .5 90 8,P <0 .0 5 ) ,而与有无门静脉癌栓或肝外转移及癌灶大小无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :大多数肝细胞癌的 AFP基因处于活化状态。外周血 AFP m RNA阳性表达和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达有关     

血清标志物AFP、CEA、GGT的联合检测在原发性肝癌 诊断中的临床价值

目的 探讨血清标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)及谷氨酸氨基转肽酶(GGT)联合检测对原发性肝癌诊断的临床意义.方法 随机选取检测者200例作为研究对象,分为原发性肝癌组、乙型肝炎肝硬化组、慢性乙型肝炎组、健康体检组,各50例,用电化学发光免疫分析检测AFP、CEA,用速率法检测GGT血清水平并计算阳性率、灵敏度、特异度.结果 乙型肝炎肝硬化组、慢性乙型肝炎组AFP、CEA、GGT多呈低浓度阳性,分别不超过200 ng/mL、10 ng/mL、100 U/L,乙型肝炎肝硬化组AFP、CEA、GGT分别为(4.440±2.850)ng/mL、(3.76160±2.14295)ng/mL、(33.420±36.169)U/L,慢性乙型肝炎组AFP、CEA、GGT分别为(15.010±30.346)ng/mL、(2.22260±1.43915)ng/mL、(55.880±37.365)U/L,健康体检组多正常,原发性肝癌组多异常升高,显著高于其它3组,差异具有统计学意义(P<0.05),三项联合检测阳性率高于单项检测阳性率及任意两项联合检测阳性率,差异具有统计学意义(P<0.05),任意两项联合检测阳性率与任意单项联合检测阳性率虽有差异,但差异无统计学意义.结论 血清标志物AFP、CEA、GGT联合检测可提高原发性肝癌的诊断率,对诊断原发性肝癌具有一定的临床应用价值.     

肿瘤标志物联合检测在肝癌诊断中的应用

目的探讨血清中甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、谷氨酰转肽酶(GGT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、血清铁蛋白(SF)、糖链抗原CA19-9测定(CA199)、糖链抗原CA50测定(CA50)的联合检测在肝癌诊断中的应用。方法对70例肝癌患者、77例肝良性疾病患者和100例健康体检者进行血清中AFP、CEA、GGT、AFU、SF、CA199、CA50的检测。结果肝癌组肿瘤标志物测定值阳性率均高于肝良性疾病组(P<0.05)。肝癌组肿瘤标志物测定值阳性率均高于对照组(P<0.05)。AFP、CEA、GGT、AFU、SF、CA199、CA50的联合检测阳性率为77.1%,明显高于单项检测(P<0.05)。结论血清中AFP、CEA、GGT、AFU、SF、CA199、CA50的联合检测对肝癌诊断具有重要意义。     

CEA、CK_(8,18)、AFP和AAT在肝细胞癌中表达及意义

用免疫组化方法观察癌胚抗原(CEA)、低分子量细胞角蛋白((CK_(8,18))、甲胎蛋白(AFP)和a_l抗胰蛋白酶(AAT)在75例肝细胞癌(HCC)中的表达。其中,CEA57/75例阳性(76％);CK_(a,18)54/75例阳性(72％);AFP51/75例阳性(68％);AAT58/75例阳性(77.3％)。AFP和AAT在中等分化(Ⅱ级HCC中阳性率最高;CK_(8,18)在低分化(Ⅲ级)HCC中的表达比其他3种相对较高。CEA抗血清能显示HCC的毛细胆管分化,它是HCC的特征性标记,在病理鉴别诊断上有很大意义。CK_(,18)、AFP和AAT可见于非肝细胞来源的肿瘤,病理上的应用价值有限。AAT在HCC和癌周肝组织的阳性率分别为77.3％和66.7％,远比AFP68％和26.7％高,两者有显著差异(P<0.01)。因此,血清AAT的检测对HCC的诊断和预后估计可能比AFP更有意义。     

血清GP73和AFP等十项肿瘤标志物联合诊断HBsAg阳性肝癌的研究

目的探讨血清高尔基体蛋白73（GP73）及甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、铁蛋白（SF）、糖基抗原（CA19-9、CA15-3、CA125）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）、亮氨酸氨基转肽酶（LAP）等肿瘤标志物单项和联合检测对乙型肝炎（乙肝）病毒表面抗原（HBsAg）阳性肝癌的诊断价值。方法收集85例慢性乙肝、74例乙肝肝硬化、133例HBsAg阳性肝癌患者及46例健康体检者的血清,对GP73及AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP等肿瘤标志物进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 Spearman相关分析表明血清GP73与AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP均有一定的相关性（均P＜0.05）,除CA125外,肝癌组的相关系数均比非肝癌组小;但只有GP73与AFP、GGT及LAP的相关性在两组间的差异有统计学意义（均P＜0.05）。GP73、AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP在慢性乙肝组、乙肝肝硬化组、肝癌组和正常对照组中的差异均有统计学意义（均P＜0.05）,肝癌组的GP73、AFP、LAP的血清水平均显著高于其他组（均P＜0.05）。ROC曲线分析表明,单项指标中以GP73的ROC曲线下面积最大（AUC=0.792）,但与AFP和ALP的差异不大（Z=0.127、1.908,P=0.899、0.056）。通过logistic回归对上述指标构建新的预测模型,联合预测因子（PRE）的AUC显著高于其它单项指标（均P＜0.05）。结论 GP73单项检测有较好的诊断作用,GP73联合AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP检测可提高对HBsAg阳性肝癌的诊断效能。     

肝细胞癌的免疫组织化学及组织病理学研究

对153例HCC外检标本进行了HBsAg及HBcAg定位观察。结果发现癌周围肝组织中HBsAg检出率为61%,HBcAg为26%。癌组织中HBsAg检出率为4.6%,HBcAg为3.9%,二者在癌组织中的总检出率为7.2%。此外对AFP、AAT、AACT及CEA进行了定位检测。癌组织中AFP、AAT检出率均为47%,AACT为71%,CEA为62%。与临床血清检测结果一致。同时还观察到LCD的出现与HBV感染有密切关系,LCD细胞中AFP、AAT、AACT及CEA的检出与癌周正常肝细胞无明显区别。     

凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的：通过研究凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,探讨Survivin在HCC发生、发展中的作用。方法：采用流式细胞术（FCM）及免疫组化（SP）法对30例肝癌组织、20例癌旁组织及10例正常肝组织中的Survivin蛋白进行定量检测,并结合临床资料进行分析。结果：① Survivin在HCC组织中的表达率显著高于癌旁组织及正常肝组织（P<0.05）;②Survivin蛋白在癌旁正常组织中无表达;③Survivin蛋白的表达与肿瘤的大小、部位、包膜、AFP无关联（P>0.05）,而与镜下门静脉癌栓形成有关联（P<0.05）。结论：Survivin基因蛋白在HCC组织中过表达是反应HCC生物学行为的有效指标,Survivin基因蛋白表达的特异性有望成为HCC基因诊断与治疗的靶点。     

雌雄激素受体在增生结节及肝癌的表达

对４２例肝癌及癌旁组织中雌激素受体（ＥＲ）和雄激素体（ＡＲ）的表达进行了观察。结果表明，ＥＲ和ＡＲ在癌旁组织、增生结节及肝癌３种组织中，ＥＲ的阳性表达分别为２５例、１２例及２４例，ＡＲ的阳性表达分别为２８例、８例及２３例；癌旁正常肝组织、肝硬化组织中的嗜酸性毛玻璃样肝细胞及嗜酸性细胞结节ＥＲ及ＡＲ染色较正常肝细胞染色深；ＥＲ及ＡＲ的阳性表达在不同组织分化程度和不同性别间无明显差异（Ｐ＞０．０５），不同组织的ＥＲ和ＡＲ阳性表达之间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示嗜酸性毛玻璃样肝细胞为性质改变的肝细胞，嗜酸性细胞结节为肝癌的癌前期病变。     

RYBP在原发性肝细胞癌中表达的临床意义

目的：探讨PcG(polycomb group)相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中差异表达 的临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测77例HCC癌组织及癌旁正常组织中RYBP的表达水平,分析其表达水平 与HCC临床病理特征、患者5年生存率及预后的关系。结果：RYBP在HCC癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组 织(P<0.05)。HCC患者RYBP表达水平与HBsAg,ALT,谷氨酰转肽酶(glutamyl transpetidase,GGT)、III型前胶原、肿瘤 大小、远处转移、肿瘤分化程度等临床指标明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明HCC癌组织中RYBP低表达患者 无复发生存率(recurrence-free survival,RFS)和总体生存率(overall survival,OS)均明显低于RYBP高表达患者(P<0.05)。单因素Cox回归分析提示低龄和RYBP高表达是RFS的保护因素,而GGT、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度和肿瘤大小等指标是RFS的危险因素(P<0.05);RYBP高表达是OS的保护因素,但肿瘤个数,ALT,GGT,甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP),腹膜癌胚抗原(peritoneal carcinoembryonic antigen,pCEA),淋巴结转移,TNM分期和肿瘤大小是危险因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示年龄、GGT、淋巴结转移和TNM分期是RFS的独立危险因素(P<0.05),淋巴 结转移和TNM分期是OS的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析提示：与血清中AFP水平相比,肿瘤组织 中RYBP的表达水平能更好地预测HCC患者的预后。结论：PcG相关蛋白RYBP在HCC组织中表达降低,影响HCC患者 的预后,可能成为HCC治疗的新靶点。     

HERV-HLTR相关蛋白2在肝癌中的表达及其临床意义

目的 检测肝细胞癌组织中HERV-HLTR相关蛋白2(HHLA2)的表达及其与不同病理分级、临床分期、肝功能及甲胎蛋白(AFP)的关系.方法 采用免疫组化法检测150例肝癌石蜡包埋组织标本中HHLA2的表达阳性率,并以10例患者正常肝脏组织标本作为正常对照,比较在不同的病理分级、临床分期、肝功能分级及AFP水平情况下肝癌组织中HHLA2的表达差异.结果 肝癌组织中HHLA2的阳性表达率显著高于正常对照(P＜0.05),低分化肝癌HHLA2表达阳性率最高,低分化、中分化肝癌组HHLA2表达阳性率显著高于高分化组(P＜0.05);肝癌巴塞罗那分期C期、D期患者HHLA2阳性表达率显著高于A期、B期(P＜0.05);肝功能Child-Pugh A级的患者HHLA2阳性表达率明显低于B级及C级(P＜0.01);不同年龄、不同血清AFP水平患者肝癌组织中HHLA2的表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肝癌细胞癌患者癌组织中HHLA2的阳性表达率明显升高,HHLA2可能在肝癌的发生、发展、转移中具有一定的作用.     

肝细胞癌中CK7、CK19及AFP的表达相关性研究

目的探讨CK7、CK19在肝细胞癌（HCC）中的表达,以及与HCC患者甲胎蛋白（AFP）表达及临床病理特征的关系。方法收集65例原发性HCC患者的癌组织标本及血清标本,免疫组化检测CK7、CK19表达情况,并用ELISA法检测血清中AFP水平。结果HCC患者癌组织中CK7的表达阳性率为46.2%（30/65）,CK19表达阳性率为18.5%（12/65）。HCC癌组织中可见表达CK7、CK19的卵圆细胞,可同时表达AFP。CK19表达与血清AFP表达水平有显著相关性（P=0.000）。结论人类HCC中同样有卵圆细胞的存在,这部分HCC患者预后较差,AFP及CK19的联合检测可有助于这部分患者的早期诊断。     

组织芯片检测肝细胞肝癌中ARF6蛋白的表达及临床意义

目的:探讨二磷酸腺苷核糖基化因子6(ADP-ribosylation factor 6,ARF6)在肝细胞肝癌(简称肝癌)组织中的表达及临床意义?方法:收集肝癌手术切除标本150例,以癌旁肝硬化组织作对照,制作组织芯片,用组织芯片技术结合免疫组化法,检测肝癌组织和癌旁肝硬化组织ARF6的表达,探讨ARF6表达与临床病理特征及预后之间的关系?结果:肝癌组织中ARF6的阳性表达率为48.7%(73/150),在癌旁肝硬化组织中ARF6的阳性表达率为8.3%(4/48),两者比较差异有统计学意义(P < 0.05)?肝癌组织中ARF6阳性表达与门静脉癌栓?临床分期?肿瘤直径及甲胎蛋白(AFP)水平相关(P < 0.05)?ARF6表达阴性的肝癌患者在肝切除术后的无瘤中位存活时间为45个月,1?3?5年无瘤生存率分别为(93.22 ± 7.93)%?(58.91 ± 6.18)%?(24.59 ± 6.80)%;ARF6表达阳性患者的无瘤中位存活时间为36个月,1?3?5年无瘤生存率分别为(88.91 ± 3.70)%?(41.61 ± 5.93)%?(19.03 ± 4.94)%?ARF6表达阴性与表达阳性的肝癌患者的无瘤生存时间差异有统计学意义(P = 0.019 1)?结论:肝癌组织中ARF6的表达与预后密切相关,ARF6不仅可作为肝癌预后不良的判断指标,还有望成为一种新的肝癌预后判断的标志物和潜在的治疗靶标?