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目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)检测儿童病毒性脑炎脑脊液(CSF)中的病原体的价值。方法应用定性聚合酶链反应(PCR)对2002年1月至2004年10月保定市儿童医院收治的病毒性脑炎患儿78例的CSF标本筛选,检测最常见的引起病毒性脑炎的6种病毒,对单纯疱疹病毒(HSV),柯萨奇病毒(CV),埃可病毒(EV)阳性者做FQ PCR检测,其中HSV分别在3个时点(治疗前、治疗中、出院时)检测DNA拷贝数。结果定性聚合酶链反应阳性标本FQ PC检测100%阳性,HSV DNA拷贝数在3个时点有统计学差异,病毒核酸拷贝数与临床表现一致。结论FQ PCR可作为儿童病毒性脑炎早期诊断的有效方法之一,动态观察HSV DNA含量有助于指导治疗,估计疾病的发展和预后     

婴儿单纯疱疹病毒性脑炎1例

单纯疱疹病毒性脑炎(HSV脑炎),占美国脑炎发病数的10%,在日本最近因乙型脑炎锐减,此种预后不良的脑炎引起人们注意。本病根据临床表现,脑电图,CT扫描和脑闪烁图等特点,比较容易考虑其诊断,但不易早期确诊。最初曾用副作用较大的疱疹净和阿糖胞苷治疗。     

小儿病毒性脑炎

小儿病毒性脑炎正常分为急性和亚急性二大类。据Beghi 统计,乳幼儿发病为21.8人/10万,1～4岁为15.4/10万,5～9岁25.1人/10万,10岁以上3.1人/10万。本文就急性单纯疱疹脑炎和引起亚急性发病的麻疹、风疹脑炎加以综述。单纯疱疹病毒性脑炎单纯疱疹病毒性脑炎(HSVE)不仅病死率、病残率高,予后差,而且发病率日益增加,成为目前各国病毒性脑炎重要原因。自1977年Whitley 报告应用脑活检进行早期诊断,早期投用阿糖腺苷(Ara-A)等抗病毒药物,本病予后大有改观,病死率由70%下降到20～40%。(一)早期诊断主要是依据临床表现。脑脊液(CSF),脑电图,头部CT     

婴幼儿单纯疱疹病毒性脑炎临床分析

目的 探讨婴幼儿单纯疱疹病毒性脑炎的早期诊断与治疗。方法 应用间接免疫荧光试验(IIF)检测15例婴幼儿病毒性脑炎患儿血清和脑脊液中单纯疱疹病毒(HSV)IgM抗体。结果 脑脊液检查HSV-IgM抗体阳性者10例诊断为单纯疱疹病毒性脑炎(HSVE),占67%,5例为非单纯疱疹性脑炎(NHSVE),占33%。确诊HSVE后立即予以静脉滴注无环鸟昔(ACV),治愈率达60%。结论 HSVE居婴幼儿病毒性脑炎首位,HSV-IgM抗体检测有助于HSVE的病原学早期诊断。早期抗病毒治疗,可降低死亡率,改善预后。     

单纯疱疹脑炎的早期诊断

单纯疱疹病毒(HSV)是人类严重局灶性脑炎的最常见病因,单纯疱疹脑炎(HSE)病死率高,神经系统后遗症多。HSE 病人如能在发病早期接受阿糖腺苷或无环鸟苷抗病毒治疗,则其病死率和严重后遗症的发生率可明显下降。然而,早期诊断 HSE是一个难题,多年来,确诊 HSE 仍然依靠脑活检结果。近几年,国外在早期诊断 HSE 方面有较大进展,本文简要综述 HSE 诊断的研究进展。     

没有皮肤粘膜病损的新生儿单纯疱疹病毒感染

多数新生儿单纯疱疹病毒(HSV)感染病例,因在其病程中出现典型的皮肤、眼或口咽病损,而作出诊断。但播散性HSV感染与HSV脑炎的新生儿也可不出现皮肤粘膜病损,这也许是本病易于漏诊的原因。据作者经验,患播散性HSV感染与HSV脑炎新生儿中,仅30％曾有疱疹性皮肤、眼或口腔病损。因目前已有针对HSV的有效抗病毒药物,故早期认识新生儿HSV感染的临床特征,使之早期确诊至为重要。又因新生儿HSV感染常来自母亲生殖道HSV感染,故正确诊断本病对其母     

小儿病毒性脑炎的病原研究

目的　 探讨小儿病毒性脑炎的病原。 方法 　应用酶联免疫吸附方法 (ELISA)测定 5 1例病毒性脑炎患儿的脑脊液 (CSF)和血清中多种病毒特异性IgM抗体。 结果 　 5 1例病毒性脑炎患儿CSF中病毒IgM抗体阳性 2 1例 ( 4 1 2 %) ,血清中病毒IgM抗体阳性 18例 ( 35 3%)。 结论 　本地区病毒性脑炎多由肠道病毒和疱疹病毒引起 ,其中以CoxB和HSV为主要病原。     

无环鸟苷治疗疱疹类病毒感染症的效果

无环鸟苷(Acyclovir,ACV)对疱疹类病毒,尤其对单纯性疱疹病毒(HSV)和水痘-带状疱疹病毒(VZV)有很强的活性,患恶性肿瘤和自身免疫性疾病等免疫功能低下的患儿,如感染了 VZV 和 HSV 等疱疹类病     

逆转录多重套式聚合酶链反应在儿童病毒性脑炎病原学研究中的应用

目的探讨早期同步检测病毒性脑炎(VE)主要病原新方法。方法应用逆转录多重套式聚合酶链反应(RT-M-nPCR)对100例VE患儿及73例对照组脑脊液(CSF)标本进行单纯疱疹病毒(HSV)DNA与肠道病毒(EV)RNA同步检测。结果整个过程约需5 h。该法与ELISA及经典nPCR方法比较,符合率分别为96%及100%。100例VE患儿CSF标本中,HSV阳性18例,EV阳性17例,在100例VE中,有26例重症,其中HSV感染14例(53.85%),EV感染7例(26.92%),不明病原5例(19.23%)。不同病原检出率与年龄的关系:年龄~3岁、~7岁、~14岁HSV分别检出7.4%、11.9%、35.5%,EV分别检出25.9%、19.05%、6.5%。结论RT-M-nPCR是一种能在早期同步检测HSV及EV的具有巨大潜在应用价值的病原检测技术;在VE重症中HSV感染最常见;HSV感染在年长儿发病率高,而EV感染在学龄前及婴幼儿中多见。     

荧光定量PCR测定在小儿非细菌性脑膜炎病原学诊断中作用及其临床意义

目的 研究疱疹类病毒与肺炎支原体(MP)在潍坊地区小儿中枢神经系统(CNS)感染发病中的作用 及荧光定量PCR测定(FQ-PCR)与临床的关系。方法 利用FQ-PCR法检测小儿非细菌性脑膜炎(非菌脑)脑脊液 (CSF)中EBV、HSV、CMV和MP的核酸,并与CSF中其特异性抗体结果进行比较。结果 192例非菌脑患儿中84 例病原DNA阳性(阳性率43.8％),且年龄越小,阳性率越高,以0-3岁组最高,占50.0％;阳性者中,EBV-DNA阳 性率最高(46.4％),其次是HSV-DNA和MP-DNA(28.6％和14.3％),CMV-DNA阳性率最低(10.7％);重型患儿 CSF 4种病原DNA的拷贝量明显高于轻型患儿(P<0.05,0.01);CSF病原DNA阳性率与特异性IgM阳性率分 别为43.8％(47／192例)和24.5％(84／192例)(P<0.01)。结论 小儿CNS感染发病中上述4种病原不可忽视; CSF病原DNA拷贝量检测对判断非菌脑病情具有重要指导意义;MP的直接损伤是MP脑膜炎的发病机制之一; FQ-PCR特异性强、敏感性高,需标本量少,是早期快速诊断小儿非菌脑的可靠方法,值得推广使用。     

脑脊液蛋白降低的病毒性脑炎23例报告

病毒性脑炎(病毒脑)脑脊液蛋白常表现为增高,本院1987～1988年收住CSF蛋白降低的病毒脑23例,占同期住院病毒脑82例的28.0%,现报告如下。临床资料诊断标准:(1)起病急,有明显意识     

聚合酶链反应结合地高辛标记探针诊断儿童单纯疱疹病毒感染

目的　评价聚合酶链反应 (PCR )结合地高辛分子杂交技术在单纯疱疹病毒 (HSV) DNA检测中的临床意义。方法　应用该方法检测 3 6例HSV感染患儿血白细胞和 3例重症病毒性脑炎患儿脑脊液中HSV DNA。结果　HSV DNA检测阳性率 61.54% (2 4/ 3 9) ,其中HSV Ⅰ型阳性率占 75% (18/ 2 4) ,HSV Ⅱ型占16.66% (4/ 2 4) ,Ⅰ Ⅱ型混合型占 8.3 3 % (2 / 2 4)。结论　HSV病原体的PCR检测结合地高辛分子杂交技术对早期诊断儿童HSV感染及提高HSV感染患儿的疗效具有重要意义     

小儿单纯疱疹病毒性脑炎19例临床观察

单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)是病毒性脑炎中常见的一种。国内有关小儿HSE的报道仍不多见。1993年8月～1995年8月我们应用聚合酶链反应(PCR)DNA扩增技术对病房中疑似为脑炎的124例患儿脑脊液进行单纯疱疹病毒(HSV)DNA检测,发现HSE19例(15.3％),现报告如下。     

新生儿中枢神经系统单纯疱疹病毒感染的临床横断面研究

目的通过分子生物学方法了解新生儿中枢神经系统单纯疱疹病毒(HSV)感染情况,并对其临床特点进行分析。方法收集考虑中枢神经系统病毒感染新生儿40例的脑脊液(CSF)标本,通过套式PCR检测CSF中HSV-DNA及酶联免疫吸附法检测CSF中特异性HSV-IgM抗体。结果2例患儿检测CSF中HSV-1 DNA( ),其母亲妊娠期均体健,无生殖器疱疹史,无皮损;1例提示为播散性感染,另1例局限为中枢神经系统感染。40例CSF检测HSV-2 DNA均阴性。结论HSV感染占新生儿中枢神经系统病毒感染的5%,不是常见病原;1型可能为新生儿HSV中枢感染的常见类型,可能与我国孕母HSV-2血清感染率较低有关。     

儿童单纯疱疹病毒性脑炎22例临床特征和随访研究

目的 分析儿童单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）的临床特征,探讨其诊断依据及影响预后的因素。方法 对22例经脑脊液病毒病原学确诊的HSE患儿的临床特征进行分析,并对治疗效果进行观察和随访。结果 发热22例（100％）,意识障碍18例（81％）,其中昏迷12例[采用Glasgow Coma Scale(GCS)评分、GCS≤4分3例、5－7分5例、8－9分4例],嗜睡6例。惊厥16例（72％）,呕吐13例（59％）,头痛10例（45％）,精神症状8例（36％）。合并颅神经麻痹10例（45％）,肢体瘫痪7例（31％）。应用酶联免疫吸附方法测定脑脊液（CSF）HSV－IgM阳性者13例、特异性IgG抗体局部产生指数：血清／CSF比值≤20者7例、双份CSF标本恢复期特异性HSV－IgG4倍以上升高者4例;或采用聚合酶链反应（PCR)技术测定脑脊液HSV－DNA阳性者3例。头颅CT和（或）MRI提示异常者19例,病变部位以额、颞叶为主12例,7例伴颅内出血。对15例患儿进行6个月－6年的随访,完全恢复5例,轻度残疾3例,中度残疾2例,合并癫Xian者7例。结论 HSE临床可分轻重两型,早期意识障碍及精神症状是本病特征。脑脊液病毒学检测阳性为确诊依据。起始治疗时的病程、意识状态、及脑内病变程度是影响预后的重要因素。     

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目的分析儿童单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)临床特征和预后,探讨HSE早期诊断的重要性。方法分析2005年1月至2010年5月复旦大学附属儿科医院神经科住院的20例HSE患儿,均经脑脊液(CSF)病毒病原学确诊,观察治疗效果及预后。结果 20例患儿中发热20例(100%)、意识障碍16例(80%)、抽搐19例(95%)、精神行为异常4例(20%)、肢体偏瘫7例(35%)。CSF常规或生化异常14例(70%),其中红细胞增多9例(64%)、CSF糖<2.2mmol/L3例(21%)。头颅影像学检查19例异常(95%),颅内出血11例(58%),其中合并丘脑出血5例(45%);中脑梗塞1例(5%)。对12例进行6个月至5年的随访,完全康复1例、智力运动发育迟缓生活不能自理5例、智力发育迟缓3例、肢体运动障碍3例、合并癫痫7例。结论 HSE起病急,多为重症病情,但儿童患者临床特征可不典型。应进行细致临床观察,尽早行神经影像学检查,积极查找病原学,早期正规给予抗病毒治疗是早期诊断、改善预后的关键。     

疱疹性湿疹的临床及实验室检查特点

疱疹性湿疹(EH)或称Kaposi水痘疹,是一种潜在危及生命的严重并发症,可发生在特异反应性皮炎患儿。1887年Kaposi首先描述这种水疱疹是由于湿疹皮肤重复感染单纯疱疹病毒(HSV)所致。据估计5岁以下儿童约3%患特异反应性皮炎,因而就有患EH的潜在危险。由内脏播散造成的病死率约1～9%,因此早期诊断和特效治疗是重要的。本文对EH的临床、疾病的实验特点及其治疗进行报道。患者与方法本文分析的14例是英国伦敦儿童医院从1980年5月至1983年5月初诊为EH的患儿。本组平均年龄为34个月(9个月～10.5岁)。入院后每一患儿进行隔离和严格预防感染。在湿疹皮损及其它部位鼻腔、咽喉和直肠做拭子病毒及细菌培养;当能获得水疱液时,送经电镜(EM)检查,以提供快速病毒     

小儿病毒性脑炎的病原研究

目的 探讨小儿病毒性脑炎的病原。方法 应用酶联免疫吸附方法（ELISA）测定51例病毒性脑炎患儿脑脊液（CSF）和血清中多种病毒特异性IgM抗体。结果 51例病毒性脑炎患儿CSF中病毒IgM抗体阳性21例（41.2%），血清中病毒IgM抗体阳性18例（35.3％）。结论 本地区病毒性脑炎多由肠道病毒和疱疹病毒引起，其中以CoxB和HSV为主要病原。     

婴儿血中四种疱疹类病毒DNA及特异性IgM抗体检测

目的 建立1种能快速区分4种疱疹类病毒DNA的特异性酶切图谱。方法 在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计1对通用引物,该引物能同时扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型(HSVⅠ／Ⅱ)、爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)、人巨细胞病毒(CMV)4种病毒。选择BamHI和BstUI2种内切酶对同一PCR产物进行酶切,建立了能区分4种疱疹类病毒的PCR限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)法。采用PCR-RFLP和ELISA法,对75例怀疑病毒感染的患儿和38名健康儿童的血标本进行上述4种病毒DNA及IgM抗体检测。结果 4种标准病毒株PCR扩增后产物为510～592bp,经酶切后能区分病毒种类,其最小检出量为0．1fg,与乙型肝炎病毒、新型隐球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和人类基因组：DNA无交叉反应。用该方法检测临床75份血标本,阳性23份,其中CMV、EBV和HSVⅡ感染分别为13、4和5例,HSVⅠ为1例,同时用ELISA法检测该标本,10例阳性,分别为CMV5例、EBV3例和HSVⅡ2例。在38例健康体检儿童的血标本中上述4种病毒DNA及IgM抗体均为阴性。结论 本研究建立的4种疱疹类病毒特异性酶切图谱具有特异敏感,快速准确的特点,能检测到ELISA法不能检测到的疱疹病毒感染。     

应用PCR-RFLP技术检测中枢神经系统感染患儿6种疱疹类病毒DNA的实验研究

目的　建立一种能快速区分 6种疱疹类病毒DNA特异的限制性内切酶图谱。方法　 2 0 0 2年 1～ 12月浙江大学儿童医院在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,该引物能同时扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型 (HSVI/HSVⅡ )、爱泼斯坦—马尔病毒 (EBV)、人巨细胞病毒 (CMV)、水痘 带状疱疹病毒 (VZV)和人类疱疹病毒 6型 (HHV6) 6种病毒。选择BstUI内切酶对PCR产物进行酶切。 98例怀疑病毒性脑炎、脑膜炎患儿的脑脊液标本用PCR RFLP和ELISA法进行检测。结果　 6种标准病毒株PCR扩增后产物为 5 10～ 5 92bp ,经酶切后能区分为何种病毒 ,其最小检出量为 0 1fg ,与乙肝病毒、真菌、细菌和人类基因组无交叉反应。用该方法检测临床 98份脑脊液标本中的疱疹类病毒 ,13份阳性 ,同时用ELISA法检测该标本 ,5例阳性。PCR阳性检出率为 13 3% ,ELISA为 5 0 9% (P <0 0 5 )。 2例患儿在院外阿昔洛韦已治疗 2～ 3d ,但入院后在其脑脊液中仍能检测到病毒DNA。 10例诊断为疱疹病毒感染患儿经更昔洛韦每天 10mg/kg ,分两次静脉注射治疗 14d后 ,8例临床症状明显好转 ,2例病情未见好转。结论　建立的疱疹类病毒特异的限制性内切酶图谱具有特异敏感 ,快速准确的特点 ,且不受抗病毒药物的影响 ,为中枢神经系统疱