黄体酮对缺氧脑组织一氧化氮含量的影响

目的：观察成年小鼠缺氧后脑内一氧化氮含量的变化及黄体酮的干预作用。方法：实验于2002-09／2003-06在新乡医学院生理学与神经生物学教研室完成。32只雄性昆明种小鼠，随机分为4组，对照组、单纯缺氧组、低孕酮（4mg／kg）组和高孕酮（8mg／kg），后两组于缺氧前30min腹腔注射孕酮4mg／kg或8mg／kg。小鼠缺氧24h断头取脑，检测脑皮质及海马组织中的一氧化氮含量。结果：32只小鼠均进入结果分析。①缺氧24h后，单纯缺氧组脑皮质一氧化氮的生成量明显高于对照组[（2．15&;#177;0．29），（1．66&;#177;0．65）μmol／g，P〈0．05]；经孕酮预处理的两组，脑皮质组织一氧化氮含量较单纯缺氧组均有所下降，4mg／kg组的效果尤为明显，下降了35．81％（P〈0．01）。②海马组织在缺氧24h后，单纯缺氧组一氧化氮含量明显高于对照组[（1．76&;#177;0．60），（1．21&;#177;0．58）μmol／g，P〈0．05]；低孕酮（4mg／kg）组[（1．07&;#177;0．33）μmot／g]显著低于单纯缺氧组（P〈0.01）；而高孕酮（8mg／kg）组[（1．27&;#177;0．41）μmol／g]与单纯缺氧组差异无显著性（P〉0．05）。结论：成年小鼠缺氧24h后脑皮质和海马组织一氧化氮含量明显升高，黄体酮通过降低这种一氧化氮的升高，可能产生一定的神经保护作用。     

抗疲Ⅰ号耐缺氧抗疲劳的实验观察

目的:观察对进驻高海拔1570～2366m地区士兵疲劳适应性训练具有满意效果的抗疲Ⅰ号对小鼠耐缺氧、抗疲劳的作用。方法:实验于2004-06/2005-06在解放军兰州军区总医院完成。选取清洁级成年昆明雌性小鼠160只,18～22g,雄性小鼠240只,18～22g。抗疲Ⅰ号由兰州乃夫生物技术研究所研制提供,由枸杞、肉桂、桑叶、茯苓、野菊花等组成。其中总蛋白含量为31.71%,总氨基酸为62.19%,8种必需氨基酸为32.51%,谷光甘肽为383.10mg/g,总多糖为4.13%,总皂甙为3.34mg/g,超氧化物为28.70NU/mg。将雌雄昆明小鼠按体质量分别随机分成按人体推荐抗疲Ⅰ号药用量眼0.03g/穴kg·d雪演的10,20,30倍眼0.3,0.6,0.9g/穴kg·d雪演3个剂量组和1个阴性对照组,雌性小鼠每组40只,雄性小鼠每组60只。用药组和对照组分别以相应剂量抗疲Ⅰ号穴均溶于0.4～0.5mL蒸馏水中雪和生理盐水灌胃饲养30d,雌性小鼠每组再随机分为3组,分别进行耐缺氧实验的常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验,分析抗疲I号耐缺氧功能;雄性小鼠每组再随机分配,分别进行负重游泳试验,爬杆试验,尿素氮、肝糖原测定试验,乳酸测定试验。通过对各实验组耐缺氧3项实验指标和抗疲劳4项实验指标的统计,分析抗疲Ⅰ号耐缺氧、抗疲劳的可能机制。结果:耐缺氧试验小鼠160只自然淘汰14只,抗疲劳试验小鼠240只自然淘汰12只,共374只小鼠进入结果分析。①抗疲Ⅰ号0.3g/穴kg·d雪剂量组小鼠亚硝酸钠中毒存活时间与对照组相比,差异有显著性意义眼穴18.65±2.74雪,穴15.95±1.68雪min,P<0.05演;0.6g/穴kg·d雪剂量组急性脑缺血性缺氧时间与对照组相比,差异有显著性意义眼穴32.38±3.57雪,穴29.84±2.23雪s,P<0.05演。②0.6g/穴kg·d雪组负重游泳试验时间与对照组相比,差异有显著性意义眼(414.86±180.54),(280.28±78.25)s,P<0.05演;0.9g/穴kg·d雪组爬杆试验时间及肝糖原含量与对照组相比,差异有显著性意义眼(327.00±156.00),(152.00±118.00)s;(23580.0±11712.2),(12113.6±9503.8)mg/kg;P<0.05演;0.3,0.6g/穴kg·d雪组乳酸升幅明显低于对照组穴P<0.05雪。结论:抗疲Ⅰ号有较好的耐缺氧、抗疲劳作用,与其能减少脑耗能、耗氧,清除体内乳酸和自由基,改善小鼠肌肉、肝脏储备糖原营养的功能有关。     

环胞霉素A对一氧化氮生成作用的影响

目的研究环胞霉素A对一氧化氮生成作用的影响。方法培养血管内皮细胞ECV304,分为TNFα组和TNFα CsA组,TNFα刺激浓度为50ng/mL,CsA浓度为0.1、1、10μmol/L,培养24h后测定上清中的NO浓度;临床研究中的20例膜性肾病患者分为治疗组14例和对照组6例,治疗组服用CsA5mg/kg/d和强的松1mg/kg/d,对照组强的松1mg/kg/d,治疗4周,分别测定治疗前后外周血中的NO含量和24小时尿蛋白量。结果培养细胞研究发现TNFα组NO为74.63±5.83μmol/L,TNFα CsA(0.11、、10μmol/L)组依次为11.49±1.72μmol/L9、.78±1.05μmol/L9、.54±0.83μmol/L,二者之间存在明显差异,P<0.01;14例膜性肾病患者治疗前后血NO浓度分别为197.58±21.64μmol/L、125.39±16.46μmol/L,二者之间存在明显差异,P<0.01,而对照组治疗前后为186.72±15.43μmol/L和179.45±18.32μmol/L,没有明显差别,治疗组4周前后的24小时尿蛋白量分别为4.53±0.92g和3.81±1.26g,P<0.01,而对照组前后变化无统计学意义。结论环胞霉素A可以抑制TNFα诱导的NO产生。     

银杏叶制剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿的防治作用研究

目的:探讨银杏叶制剂对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑水肿的防治作用.方法:应用非开颅性大鼠SAH模型,检测蛛网膜下腔出血前及出血后1,6及24小时时脑组织含水率和电解质(Na+和K+)含量的变化,并观察银杏叶制剂和尼莫地平对其影响.结果:单纯SAH组术后6小时和24小时脑组织含水率(80.41%±0.76%和82.81%±0.55%)较术前含水率(77.60%±0.55%)增加;Na+含量术前(355.6±45.8)μmol/g,术后6小时和24小时分别增至(461.8±46.7)μmol/g与(684.4±48.0)μmol/g;K+含量于术后6小时和24小时[(530.3±29.3)μmol/g与(461.6±52.1)μmol/g]较术前[(586.9±24.6)μmol/g]减少(P均<0.01).在尼莫地平组和银杏叶制剂组,术后6小时时含水率(79.06%±0.68%与78.66%±0.61%)较单纯SAH组为低(P<0.05或P<0.01),24小时时含水率(80.60%±0.53%与79.51%±0.72%)亦低于单纯SAH组(P<0.05或P<0.01),而银杏叶制剂组又低于尼莫地平组(P<0.05);2组Na+含量在术后6小时[(408.8±22.1)μmol/g与(419.1±50.3)μmol/g]和24小时[(529.6±54.9)μmol/g与(507.4±31.2)μmol/g]均低于单纯SAH组(P<0.05或P<0.01);2组K+含量在术后24小时[(516.0±34.6)μmol/g与(501.5±20.5)μmol/g]均高于单纯SAH组(P均<0.05).结论:银杏叶制剂可有效防治大鼠SAH后脑水肿.     

糖尿病大鼠肾脏抗氧化酶变化与灯盏花素的干预效应

目的:在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型上,探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应的影响。方法:实验于2004-04/2005-04在武汉大学医学院实验中心完成。健康Wistar大鼠30只,随机分为正常组、糖尿病对照组和灯盏花素治疗组,糖尿病对照组和灯盏花素治疗组采用一次性尾静脉注射链脲佐菌素60mg/kg,正常组则用等量柠檬酸缓冲液尾静脉注射,72h后,尾静脉采血测血糖≥16.7mmol/L,确定造模均成功。灯盏花素治疗组灯盏花素20mg/(kg·d)灌胃给药;正常组、糖尿病对照组给予等量生理盐水灌胃。实验期间自由进水、进食,不使用胰岛素及其他降糖药物。12周后,测定各组空腹血糖、血总胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐、糖化血红蛋白水平,免疫比浊法测尿蛋白排泄量,运用比色法测定肾脏皮质丙二醛含量、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果:①糖尿病对照组肾脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于正常组眼(128.17±9.33),(58.67±4.67),(106.5±13.0)μkat/g;(215.83±49.50),(98.17±7.50),(178.0±17.0)μkat/g,P<0.05演。②灯盏花素治疗组肾脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于糖尿病对照组眼(170.83±26.33),(77.83±6.50),(139.5±15.0)μkat/g;(128.17±9.33),(58.67±4.67),(106.5±13.0)μkat/g,P<0.05演。③糖尿病对照组肾脏丙二醛含量显著高于正常组,而灯盏花素治疗组肾脏丙二醛含量显著低于糖尿病对照组眼(13.57±3.89),(3.62±0.18)μmol/g;(6.87±1.96),(13.57±3.89)μmol/g,P<0.05演。结论:灯盏花素可通过保护肾脏抗氧化酶,抑制氧化应激反应,对糖尿病大鼠肾脏产生保护作用。     

藻酸双酯钠对培养大鼠神经细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

目的:观察藻酸双酯钠对缺氧缺糖培养所致大鼠皮质神经细胞损伤的保护作用。方法:实验于2002年在郑州大学医学院药理教研室完成。体外培养大鼠胚胎皮质神经细胞,以缺氧加缺糖培养建立神经细胞损伤模型,通过测定乳酸脱氢酶,一氧化氮,丙二醛及超氧化物歧化酶活性和细胞内钙离子浓度,以观察藻酸双酯钠对培养神经细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用,并采用流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率。结果:①神经细胞缺氧缺糖性损伤后,细胞死亡数明显升高,乳酸脱氢酶含量显著增加,藻酸双酯钠各浓度(50,100,150mg/L)均能显著减少细胞死亡,降低乳酸脱氢酶漏出量眼(865.17±69.18),(733.48±58.51),(504.27±80.02),(1051.88±46.84)μkat/g,P<0.05/P<0.01演鸦②神经细胞损伤后,一氧化氮含量及细胞内丙二醛含量显著增加,超氧化物歧化酶活性显著降低。藻酸双酯钠各浓度(50,100,150mg/L)均可显著降低一氧化氮及丙二醛含量、升高超氧化物歧化酶活性(P<0.05,P<0.01)鸦③神经细胞损伤后细胞内钙离子含量显著增加,藻酸双酯钠各浓度(50,100,150mg/L)均可显著降低细胞内钙离子含量(抑制率分别为:27%,35%,54%)鸦④神经细胞平均凋亡率为(32.8±6.5)%,藻酸双酯钠50,100,150mg/L分别使细胞平均凋亡率降为(22.3±5.1)%、(13.2±4.4)%、(7.9±3.5)%。结论:藻酸双酯钠对培养神经细胞缺氧缺糖性损伤具有显著的保护作用,其机制可能与藻酸双酯钠降低一氧化氮含量、降低细胞内钙离子累积,抗过氧化作用以及抑制细胞凋亡有关。     

通络方药对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:探讨通络方药对糖尿病大鼠肾皮质氧化应激及抗氧化损伤能力的作用。方法:实验于2005-08/12在第二军医大学动物中心完成。选择雄性SD大鼠20只,大鼠适应性饲养5d,禁食18h后随机数字表法选取15只大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)诱发糖尿病,另5只大鼠同时腹腔注射等体积的缓冲液作为对照。将糖尿病模型动物随机数字表法分为糖尿病模型组,通络方药处理组,褪黑素处理组,对照组,各组5只。通络方药处理组每天上午灌服通络方药水溶液1g/kg,褪黑素处理组每天上午灌服褪黑素溶液5mg/kg,其余两组均灌服等体积稀释液,连续处理6周后检测通络方药及褪黑素对糖尿病大鼠肾脏氧自由基代谢状态及抗氧化能力的改变。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①通络方药处理组、褪黑素处理组及糖尿病模型组大鼠血糖水平均明显高于对照组眼分别为(21.3±5.8),(21.6±3.0),(21.9±2.6),(4.0±0.5)mmol/L,P<0.05演,但各造模组间两两相比,血糖水平差异均无显著性意义(P>0.05)。②各造模组大鼠肾皮质丙二醛含量与对照组比较均增加,其中通络方药处理组丙二醛水平稍高于对照组,低于糖尿病模型组,差异均无显著性意义(P>0.05);褪黑素处理组丙二醛水平与糖尿病模型组相比明显降低,差异有显著性意义眼分别为(0.33±0.13),(0.90±0.35)μmol/L,P<0.05演。③各造模组大鼠肾皮质内超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力及谷胱甘肽含量均低于对照组,其中通络方药处理组超氧化物歧化酶活性高于糖尿病模型组(P>0.05),低于褪黑素处理组眼分别为(473.43±191.70),(763.49±175.04)μkat/g,P<0.05演;通络方药处理组谷胱甘肽含量显著高于糖尿病模型组分别为眼(22.2±11.8),(8.4±4.9)mg/g,P<0.05演,低于褪黑素处理组和对照组(P>0.05)。结论:通络方药可部分改善高糖引起的肾脏氧化应激,对糖尿病引起的大鼠肾脏损害具有一定的保护作用。     

AMPA受体拮抗剂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤自由基的影响

目的:探讨α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionicacid,AMPA)受体拮抗剂GYKI-52466对缺氧缺血新生鼠脑组织自由基的影响。方法:选用7日龄Wistar大鼠30只,随机分为3组,假手术组,缺氧缺血组和治疗组。治疗组在缺氧缺血后即刻开始予GYKI-5246610mg/kg腹腔注射,每小时注射1次,共4次。缺氧缺血组予等量生理盐水腹腔注射。于处置后24h检测脑组织中超氧化物歧化酶(superoxidedismutaseSOD)、谷胱甘肽、丙二醛水平。结果:缺氧缺血组脑组织SOD,GSH水平分别为(1.47±0.15)mkat、(75.03±5.22)mg/g,明显低于假手术组(2.51±0.16)mkat、(88.66±4.50)mg/g(t=3.237～15.573,P均<0.001);MDA含量为(8.03±0.64)pmol/g,较假手术组(5.12±0.57)pmol/g显著升高(t=6.253～15.373,P<0.001)。而治疗组脑组织SOD、谷胱甘肽水平分别为(2.73±0.21)mkat、(83.47±6.38)mg/g,明显高于缺氧缺血组(P<0.001;P<0.005);丙二醛含量为(6.07±0.68)pmol/g,较缺氧缺血组显著下降(P<0.001)。结论:AMPA拮抗剂可通过拮抗氧自由基发挥对缺氧缺血性脑损伤时脑的保护作用。     

脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用及其细胞内信号传递

目的:观察体外培养大鼠胚脑皮质神经元对缺氧耐受的时间窗,探讨外源性脑源性神经营养因子对缺氧神经元保护作用的时效-量效关系,及该保护作用可能的细胞内信号传递途径。方法:实验于2004-02/2005-02在四川大学华西医院移植工程及移植免疫实验室完成。体外培养孕17～19dSD大鼠皮质神经元,随机数字法分为基线对照组、单纯缺氧组及缺氧 脑源性神经营养因子组,7d后作缺氧培养,采用四氮唑盐比色法检测0～10h段各时间点单纯缺氧组和缺氧 脑源性神经营养因子组(分别在缺氧前24h及缺氧前即刻加入25～100μg/L脑源性神经营养因子)存活率的差别,并用Westernblotting检测两组神经元在Akt/磷酸化Akt及CREB/磷酸化CREB表达的差别。结果:①脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用是相对的,该保护作用具有时效-量效关系,缺氧前24h加入大剂量脑源性神经营养因子组(100μg/L)优于缺氧即刻加入小剂量(25μg/L)组,缺氧损伤到一定程度后(>10h)脑源性神经营养因子的保护作用将明显减弱犤缺氧前24h加入100μg/L脑源性神经营养因子在1,2,4,8,10h细胞活性分别为基线对照组的(133.85±3.72)%,(109.83±5.43)%,(86.15±0.68)%,(53.78±1.71)%,(33.41±1.64)%,而缺氧前即刻加入25μg/L脑源性神经营养因子组在以上时点细胞活性分别为基线对照组的(81.55±1.07)%,(92.10±4.89)%,(78.75±1.87)%,(43.58±2.42)%,(33.13±0.94)%,单纯缺氧组的细胞活性分别为基线对照组的(82.12±3.15)%,(81.79±2.61)%,(64.5±4.56)%,(45.9±1.74)%,(35.45±1.25)%犦。②加入脑源性神经营养因子可使磷酸化Akt表达增加,磷酸化CREB表达提前并维持较长时间。结论:脑源性神经营养因子可减轻缺氧对神经元的损害,而Akt表达上调可能是脑源性神经营养因子发挥其对缺氧神经元保护作用的重要途径之一。     

应激性胃溃疡与孕酮的保护作用及其机制

目的:观察不同剂量和不同作用时间孕酮对应激性胃溃疡的预防和治疗作用。方法:实验于2005-02/06在山东师范大学生理实验室完成。选择健康昆明种雄性小鼠100只,鼠龄4～6周,体质量22～24g。建立束缚冷水应激性胃溃疡模型,按照实验要求进行小鼠分组。①孕酮对应激性胃溃疡的保护作用:小鼠分为4组,即对照组和0.4mg/kg,0.8mg/kg,1.6mg/kg孕酮注射组,每组10只。对照组在应激前0.5h肌肉注射生理盐水0.5mL,孕酮注射各剂量组分别在应激前0.5h肌肉注射0.4mg/kg、0.8mg/kg、1.6mg/kg孕酮,应激3h后计算胃溃疡指数及测定胃液pH值。②孕酮对应激性胃溃疡的治疗作用:小鼠分为5组,即应激后即刻组,生理盐水5h组,生理盐水7h组,孕酮5h组,孕酮7h组,每组10只。应激后即刻组于应激后即刻注射生理盐水0.5mL;生理盐水5h,7h组应激后注射生理盐水0.5mL分别恢复5,7h后计算胃溃疡指数。孕酮5h,7h组在应激后注射孕酮0.8mg/kg分别恢复5,7h后计算胃溃疡指数。并制备小鼠离体小肠,置于灌流槽,记录不同浓度的孕酮(5,50,100μmol/L)对小肠平滑肌收缩的影响。结果:实验过程中无动物意外死亡、丢失及补充,100只小鼠均进入结果分析。①与对照组相比,各孕酮注射组(0.4,0.6,0.8mg/kg)的溃疡指数都明显降低,且表现随孕酮浓度的增加抑制效果越明显[(40.91±23.30),(12.42±11.80),(12.64±8.86),(6.67±4.81)]。但各孕酮注射组的胃液pH值与对照组相比无明显变化。表明孕酮对应激性胃溃疡有明显预防保护作用,但对胃酸的分泌无影响。②小鼠束缚加冷水应激后3h即刻测得溃疡指数为(39.6±20.8),与即刻组相比,应激后注射生理盐水恢复5h、7h溃疡指数降低且7h后降低较明显[(27.6±17.5),(22.1±15.5)]。表明离开应激环境,小鼠胃粘膜有自我修复能力。应激后注射孕酮恢复5h溃疡指数为(19.1±10.5),注射孕酮恢复7h溃疡指数为(11.9±9.7),与应激性即刻相比胃溃疡指数明显减少。注射孕酮后7h的溃疡指数与注射生理盐水7h相比,溃疡指数明显减少。③正常对照组离体小肠收缩频率为(50.0±9.5)次/min,幅度为(3.24±1.3)mm,而向浴槽中滴加5,50,100μmol/L孕酮后,与对照组相比,孕酮各组的离体小肠的收缩频率和幅度明显降低,且呈现浓度依赖性[(37.7±11.7)次/min,(2.78±1.1)mm];[(34.08±2.6)次/min,(2.65±0.4)mm];[(25.13±2.4)次/min,(2.67±0.9)mm],孕酮能抑制离体小肠的收缩。结论:孕酮对应激性胃溃疡有保护作用,其机制可能与孕酮抑制胃肠平滑肌的收缩有关,而与胃酸的分泌无关。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

精神疾病患者家属教育的情况分析

目的：通过对精神疾病患者家属教育的调查，探讨家属教育的内容和教育方式。方法：采用自拟问卷对参加系列教育的家属进行调查分析。结果：患者和家属接受教育次数越多，对疾病知识了解越多；在患者的亲属中患者的父母参加教育比率较大。结论：家属教育对治疗疾病起着积极的作用，应更具有针对性，同时还应该注意教育方式。