Caspase-3和PLGF在早期胚胎停止发育患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的:探讨半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和胎盘生长因子(PLGF)在不明原因早期胚胎停止发育患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况。方法:选择30例不明原因早期胚胎停育患者(研究组)和30例正常早期妊娠妇女(对照组)为研究对象,采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL法)检测绒毛滋养细胞和蜕膜细胞的细胞凋亡情况;采用免疫组织化学SP法检测两组绒毛和蜕膜组织中Caspase-3和PLGF的表达水平。结果:①研究组绒毛滋养细胞的凋亡指数(50.16±5.18)%明显高于对照组(18.00±4.00)%(P<0.01),蜕膜细胞的凋亡指数(48.66±4.48)%也明显高于对照组(18.44±3.71)%(P<0.01);②Caspase-3在研究组绒毛组织中表达(0.425 8±0.044 2)明显高于对照组(0.304 3±0.040 1),P<0.01,其在蜕膜组织中的表达(0.417 5±0.051 5)亦明显高于对照组(0.310 7±0.034 2),P<0.01;PLGF在研究组绒毛(0.320 8±0.035 4)和蜕膜(0.317 7±0.021 6)组织中的表达均明显低于对照组(0.405 1±0.029 0,0.412 1±0.034 4),P均<0.01。结论:妊娠妇女胎盘组织内细胞凋亡比例增高,滋养细胞和蜕膜功能受损导致胎盘血管生成障碍可能是早期不明原因胚胎停育发生的基础。     

叉头框转录因子3a和β-连环蛋白在胚胎停育绒毛组织中的表达及意义

目的检测叉头框转录因子3a(FoxO3a)、β-连环蛋白(β-catenin)在胚胎停育绒毛组织中的表达情况,探讨二者在胚胎停育中的相互作用及其与凋亡的关系。方法选取2017年10月-2018年6月就诊于包钢集团第三职工医院妇产科门诊,经彩超动态监测证实为胚胎停育者36例绒毛组织为研究组,同期正常妊娠自愿要求负压吸引术流产者30例绒毛组织为对照组,采用免疫组织化学技术SP法检测FoxO3a和β-catenin在两组中的表达情况。结果与对照组相比,研究组绒毛滋养细胞中的FoxO3a表达降低、β-catenin表达升高,差异有统计学意义(P0.05),FoxO3a与β-catenin在胚胎停育中的表达呈负相关(P0.05)。结论胚胎停育滋养细胞中FoxO3a表达降低、β-catenin表达升高,二者可能共同参与胚胎停育的细胞过度凋亡。     

白血病抑制因子及其受体在早孕蜕膜和绒毛组织中表达的研究

目的探讨正常早孕蜕膜和绒毛组织白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)的表达. 方法采用原位杂交和免疫组织化学染色技术对18例正常早孕妇女蜕膜和绒毛组织LIF-mRNA 、LIF和LIFR蛋白的表达进行研究. 结果全部早孕蜕膜组织和绒毛滋养细胞中有LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白表达,同一组织和细胞LIF和LIFR基因表达强弱基本一致,LIFR在绒毛滋养细胞的表达强于蜕膜. 结论人类蜕膜和绒毛滋养细胞LIF和LIFR基因表达可能与胚泡着床、维持胎盘功能和促进胚胎发育有关.     

不明原因胚胎停育绒毛和蜕膜组织芳香烃受体和细胞色素P4501A1蛋白的表达及意义

目的:探讨芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)和细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)蛋白在胚胎停育患者绒毛及蜕膜中的表达。方法:分别选取30例不明原因胚胎停育患者作为病例组和30例正常早期妊娠人工流产妇女作为对照组,采用免疫组织化学方法检测2组患者绒毛和蜕膜组织中AhR和CYP1A1蛋白表达水平。结果:绒毛组织中,病例组AhR蛋白表达水平(0.58±0.03)高于对照组(0.25±0.04),病例组CYP1A1蛋白表达水平(0.60±0.01)高于对照组(0.22±0.03),差异均有统计学意义(P0.05)。蜕膜组织中,病例组AhR蛋白表达水平(0.56±0.03)高于对照组(0.26±0.04),病例组CYP1A1蛋白表达水平(0.57±0.01)高于对照组(0.24±0.03),差异均有统计学意义(P0.05)。结论:胚胎停育患者绒毛和蜕膜组织中AhR和CYP1A1蛋白表达明显增高,可能与不明原因胚胎停育的发生有关。     

胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达及意义

目的:探讨胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况,分析其与胚胎停育的关系。方法:随机选择早孕胚胎停育患者37例为Ⅰ组(其中Ⅰ1组为合并感染的胚胎停育22例,Ⅰ2组为未合并感染的胚胎停育15例),Ⅱ组正常早孕患者25例作为对照组。用免疫组化(sp)法测定蜕膜及绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况。结果:胚胎停育患者蜕膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P<0·05),TIMP-1的水平低于对照组(P<0·05);而MMP-9及TIMP-1的水平在各组之间均无差异(P>0·05)。结论:基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胚胎停育中起关键性作用,MMP-9/TIMP-1的平衡失调可能是导致胚胎停育的主要原因之一。     

HIF-1 a、VEGF及Cathepsin S在胚胎停育绒毛组织中的表达及意义

目的 检测缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)、血管内皮生长因子(VEGF)及组织蛋白酶S(cathepsin S)分别在胚胎停育及正常早孕绒毛组织中的表达情况,探索其在胚胎停育发生机制中可能的作用.方法 选取2018年3月28日-8月28日于山西医科大学第二医院妇产科因胚胎停育行人工流产术者20例的绒毛组织作为胚胎停育...     

p-ERK在早孕绒毛组织中的表达及意义

目的:研究人早孕绒毛组织中磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)的表达水平,探讨流产及其有关生殖过程发生的分子机制。方法:采用免疫组织化学、图像分析方法检测30例正常早孕绒毛组织(正常早孕组)和30例自然流产的早孕绒毛组织(自然流产组)中p-ERK的表达水平。结果:人早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞均有p-ERK的表达,自然流产组中p-ERK蛋白表达面积及强度均明显低于正常早孕组,两者差异有显著性意义(P<0.05)。结论:ERK/MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)通路可能是人早孕绒毛滋养细胞增殖、分化及侵入过程中的主要信号转导途径之一。     

稽留流产绒毛中线粒体膜电位和活性氧的变化

目的:通过对稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential MMP)、活性氧物质(reactive oxygen species ROS)的测定,探讨MMP、ROS与稽留流产的关系。方法:稽留流产患者20例作为研究组,正常早孕要求流产妇女20例作为对照组。研究组20例胚胎稽留宫内时间<4周。应用荧光分光光度计和流式细胞仪检测研究组及对照组绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(MMP)、活性氧物质(ROS)的水平。结果:与正常早孕妇女相比较,稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中MMP水平显著降低(P<0.05),ROS水平显著增高(P<0.05)。结论:绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位下降、活性氧物质增多可能是稽留流产发生的信号。     

Apelin/APJ系统及eNOS在胚胎停育患者绒毛组织中的表达

目的 探讨Apelin/APJ系统及eNOS在胚胎停育患者绒毛组织中的表达和临床意义。方法 选择2018年3月—2018年12月于山西医科大学第二医院妇产科门诊的20例不明原因胚胎停育病人为研究组,20例正常早期妊娠要求流产的女性为对照组。采用免疫组织化学法检测两组绒毛组织中的Apelin、Apelin受体APJ和eNOS的表达,采用荧光实时定量PCR方法检测2组绒毛组织中Apelin、 APJ和eNOS mRNA的相对表达量。结果 两组女性在年龄、停经天数、妊娠次数等相比,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化方法检测结果显示研究组绒毛组织中Apelin、APJ及eNOS的表达水平均较对照组低(P<0.05)。荧光实时定量PCR方法检测显示研究组绒毛组织中Apelin、APJ及eNOS mRNA的相对表达量较对照组低(P<0.05)。结论 Apelin、APJ及eNOS在胚胎停育病人绒毛组织中低表达,有可能导致胚胎血管减少,进而可能影响胚胎的生长发育。     

STAT3在正常早孕妇女与反复自然流产患者绒毛和蜕膜中的表达

目的:通过对反复自然流产(RSA)患者和正常早孕妇女绒毛、蜕膜中STAT3的测定,探讨不明原因反复流产患者的流产病因和胚胎、胎盘的生长机制。方法:采用免疫组化法检测40例RSA患者及20例对照组的绒毛和蜕膜组织中STAT3含量。结果:STAT3在RSA患者和正常妊娠妇女孕早期的绒毛和蜕膜中均高表达。RSA组与对照组绒毛中STAT3的表达差异无统计学意义(P>0.05);RSA组与对照组蜕膜中STAT3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究检测了RSA患者和正常早孕妇女绒毛、蜕膜中STAT3的表达,在胎盘形成过程中STAT3参与、促进滋养细胞的存活、生长和浸润,胚胎生长具有肿瘤的特征。STAT3在RSA患者和正常妊娠妇女孕早期绒毛和蜕膜中的表达差异无统计学意义,STAT3与反复自然流产的关系还需进一步研究。     

孕妇血清锌浓度与稽留流产关系研究

目的研究孕妇血清锌浓度在孕早期的变化情况,探讨孕妇血清锌浓度与稽留流产的关系。方法2007年6月至2008年6月采用原子光谱吸收法对笔者所在医院64例稽留流产孕妇和66例正常对照孕妇早孕的血清锌浓度进行检测。观察对照组各孕周血锌浓度变化情况,对比对照组和研究组血锌浓度。结果孕妇血清锌浓度在孕早期呈逐渐下降趋势,但其变化不显著（P〉0．05）。研究组孕妇血清锌浓度明显低于对照组（P〈0．05）。结论孕妇血清锌浓度对维持正常妊娠有重要作用,血锌浓度低可能会导致稽留流产。     

稽留流产病因研究中绒毛染色体检测的应用价值

目的:探讨绒毛染色体检测对稽留流产病因研究的价值。方法:采集161例稽留流产患者绒毛组织,采用培养法和直接法制备绒毛染色体标本,G显带分析。结果:稽留流产绒毛染色体161例中,158例成功制备绒毛染色体,3例因稽留时间问题培养失败。158例中发现核型异常82例,检出率为51.90%,三体型45例,占54.88%,其中常染色体三体占51.22%,16-三体17例,占20.73%。结论:染色体异常是早期稽留流产的主要原因,绒毛染色体检测是稽留流产病因诊断的重要手段,有助于指导再次妊娠。     

MMP-2及TIMP-1、TIMP-2在自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在早孕自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学染色的方法,对31例自然流产者（实验组）及36例人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中MMP-2和TIMP-2的表达进行分析;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对绒毛组织中MMP-2及TIMP-1的mRNA表达量进行分析。结果无论是绒毛组织还是蜕膜组织中MMP-2的表达两组之间均无统计学差异;但实验组两种组织中的TIMP-2强阳性（Ⅲ级）表达率均显著低于对照组（P〈0.01）;实验组TIMP-1 mRNA的表达量显著低于对照组（P〈0.05）。结论自然流产绒毛和蜕膜组织中MMP-2的正常表达及TIMP-1、TIMP-2的低表达导致MMP-2与TIMP-1及TIMP-2的比值升高,该比值失调可能与自然流产发生有关。     

妊娠相关血浆蛋白A和游离β-HCG在稽留流产和异位妊娠中的预测价值

目的：研究妊娠相关血浆蛋白A和游离β-HCG在稽留流产和异位妊娠中的预测价值。方法：回顾性分析早期妊娠孕妇128例,其中单胎正常妊娠组62例、稽留流产组37例,异位妊娠组29例,检测血清PAPP-A及游离β-HCG的浓度。结果：稽留流产组与异位妊娠组两组患者血清PAPP-A和游离β-HCG的水平明显低于正常妊娠组（P〈0.01）。异位妊娠组血清PAPP-A和游离β-HCG的水平亦明显低于稽留流产组（P〈0.01）。二者联合检测明显优于单项指标预测。结论：孕早期母血清联合PAPP-A和游离β-HCG水平,对早期妊娠不良结局有一定预测价值。     

不明原因自然流产绒毛组织TNFR1的表达

目的 探讨肿瘤坏死因子受体1在绒毛组织中的表达及其与不明原因早期自然流产的关系.方法 采用共聚焦激光显微镜和免疫组化技术,对31例妊娠6～10周不明原因早期自然流产患者(流产组)和30例同期妊娠的健康妇女(对照组)绒毛组织中肿瘤坏死因子受体1的表达进行半定量和定位检测.结果 共聚焦显微镜观察结果为:流产组绒毛间质、血管内皮、细胞滋养层、合体滋养层细胞肿瘤坏死因子受体1表达荧光强度分别为35.99±6.35、44.11±11.89、51.40±15.26和50.76±15.74,对照组分别为32.64±5.01、42.82±8.13、49.67±10.19和48.70±10.40.流产组绒毛间质肿瘤坏死因子受体1表达荧光强度高于对照组,有显著性差异(t=2.208,P<0.05),血管内皮、细胞滋养层、合体滋养层细胞的两组差异均无显著性(t分别为0.474、0.585、0.503,均P>0.05).免疫组化结果为:流产组绒毛间质、血管内皮、细胞滋养层及合体滋养层细胞肿瘤坏死因子受体1表达率分别为100.00%(31/31)、80.65%(25/31)、100.00%(31/31)和90.32%(28/31),对照组分别为75.00%(18/24)、58.33%(14/24)、100.00%(24/24)和95.83%(23/24),流产组绒毛间质肿瘤坏死因子受体1阳性表达率明显高于对照组,经Fisher's精确概率法检验,差异具有显著性(P=0.001).免疫组化还显示:流产组中,与合体滋养层接触的细胞滋养层和血管内皮细胞肿瘤坏死因子受体1阳性表达增强.结论 绒毛间质细胞肿瘤坏死因子受体1表达水平的升高,可能通过调节肿瘤坏死因子-α的效应,导致胎儿界面局部绒毛组织间质细胞的功能改变或损害;部分细胞滋养层及血管内皮细胞肿瘤坏死因子受体1表达水平的升高加速了细胞滋养层细胞的程序性死亡,使细胞滋养层生长受限制,可能与不明原因早期自然流产的发生有关.     

高通量测序与荧光原位杂交检测早期自然流产绒毛染色体异常的分析

目的探讨荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)、高通量测序(next generation sequencing,NGS)两种技术方法在自然流产绒毛染色体异常检测中的应用价值。方法回顾性分析石家庄市第一医院2017~2019年间早期自然流产患者112例,对其绒毛样本进行FISH和NGS分析,并利用统计学方法分析两种方法检测流产胚胎染色体异常的差异。结果FISH检测样本的成功率100.00%(112/112),其中检测异常54份,占比48.21%(54/112);NGS检测样本的成功率100.00%(112/112),其中检测异常58份,占比51.79%(58/112)。两种方法同时检测出绒毛染色体异常52例,同时检测出绒毛染色体无异常52例,FISH检测绒毛染色体正常而NGS发现有异常的6例,NGS检测绒毛染色体正常而FISH检测异常的2例。两种方法检验效果相同(Kappa=0.857,P<0.05)。结论染色体异常是导致自然流产的主要原因之一,FISH和NGS应用于临床流产物遗传学分析各具优势,因此在临床应用中还应结合不同患者实际情况慎重选择,提高检测的准确性、防止漏诊,为临床评估再生育风险提供参考。     

可溶性血管内皮生长因子受体在复发性流产绒毛组织及 外周血中的表达及意义

目的:研究可溶性血管内皮生长因子受体(sF lt-1)在复发性流产(RSA)患者外周血及绒毛中表达水平,探讨sF lt-1与复发性流产的相关性。方法:采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定30例复发性流产胚胎停育患者和30例正常早孕孕妇血清VEGF及sF lt-1水平,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定各组孕妇绒毛组织VEGF mRNA及sF lt-1 mRNA表达水平。结果:复发性流产胚胎停育组与正常早孕对照组血清VEGF水平分别为(2637.50±2145.09)ng/L和(982.67±675.47)ng/L,血清sF lt-1水平分别为(13 796.67±11 917.08)ng/L和(3 540.67±2 989.80)ng/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);两组绒毛组织VEGF mRNA及sF lt-1 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论:VEGF及sF lt-1表达异常与复发性流产具有相关性,其表达水平升高可能与RSA的发生有关。     

联合检测相关抗体在稽留流产诊断中的价值

目的:评价5种免疫与感染相关抗体联合检测在稽留流产患者中的诊断价值。方法:采用ELISA法检测177例稽留流产患者和156例正常妊娠妇女血清中的5种抗体水平(抗心磷脂抗体、抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、Torch IgM抗体和Torch IgG抗体),对单一和联合检测结果进行流行病学分析后进行评价并确定最佳抗体组合。结果:每种抗体水平在稽留流产患者血清中的阳性率均显著高于对照组(P<0.05),单一抗体检测的灵敏度较低,在10.2%～48.0%之间,约登指数也较低,在0.089～0.416之间;抗体联合检测的诊断价值高于单一抗体检测,其中5种抗体组合联合检测为最佳组合,灵敏度为89.3%,特异度为85.3%,约登指数为0.746,一致率为87.4%,阳性似然比为6.07,阴性似然比为0.125,阳性预测值为87.3%,阴性预测值为87.5%。结论:联合检测5种免疫与感染相关抗体对稽留流产具有较高的诊断价值,可提高稽留流产的检出率,有助于早期诊断。     

TNF-α、IL-6与复发性流产的相关性研究

目的:测定复发性流产(RSA)患者绒毛中TNF-α、IL-6水平,探讨TNF-α和IL-6与复发性流产发生的关系。方法:采用实时荧光定量逆转录多聚酶链式反应(RQ RT-PCR)方法测定62例复发性流产患者、50例正常早孕妇女绒毛组织中TNF-α、IL-6的表达水平。结果:与正常早孕妇女相比,复发性流产患者绒毛组织中TNF-α水平明显增高(P<0.01),IL-6水平明显降低(P<0.01),且两者水平呈负相关性(r=-0.433,P<0.05)。复发性流产患者绒毛组织中TNF-α水平,IL-6水平、流产次数与正常早孕妇女比较无统计学差异(P>0.05)。结论:TNF-α和IL-6可能参与了复发性流产的发病过程。