蒽贝素候选化学对照品的制备及分析研究

目的研究蒽贝素候选化学对照品的制备方法及其质量标准,为含蒽贝素药材及其相关产品的质量控制提供参考。方法酸藤子用有机溶剂提取,硅胶柱色谱和反相制备型高效液相色谱进行分离纯化、重结晶得到高纯度蒽贝素,通过波谱等确证化学结构,采用高效液相色谱法测定样品色谱纯度,炽灼残渣法测定灰分,以质量平衡法计算蒽贝素的含量。结果蒽贝素候选化学对照品高效液相色谱纯度测定均值为99.13%,炽灼残渣测定均值为0.02%,以质量平衡法计算含量为99.11%。结论制备得到的高纯度蒽贝素对照品符合中药化学对照品技术要求,可作为中药材或中药复方制剂质量控制的对照品;建立的分析方法准确、可靠,可为对照品质量控制提供科学依据。     

延胡索中去氢紫堇碱对照品的制备及含量测定

目的 研究中药延胡索中去氢紫堇碱对照品的制备及含量测定方法.方法采用硅胶柱色谱与半制备高效液相色谱组合分离技术,分离纯化去氢紫堇碱,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构,反相高效液相色谱法测定其含量.结果 制备的化合物鉴定为去氢紫堇碱,纯度为98.7%;含量测定在0.076 3～0.457 6 μg呈良好线性关系,r = 0.999 8,平均回收率为104.44 %,RSD为2.36%(n=6).结论该制备方法效率高,所得化合物纯度高,可用于大量制备.含量测定方法准确,简便,可靠,重复性好.     

藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备

目的:建立镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备方法.方法:运用硅胶柱色谱、Sephndex LH-20凝胶色谱柱等分离纯化的方法制备鼠李柠檬素,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构.结果:制备的化合物为鼠李柠檬素,纯度＞98％.结论:该制备方法效率高,所得鼠李柠檬素对照品纯度高,符合中药化学对照品的相关技术要求,可用于大量制备中药定性、定量分析使用的对照品.     

RP-HPLC鉴别三七粉中的醋酸地塞米松

 目的 检测三七粉中掺入的醋酸地塞米松。方法 采用反相高效液相色谱法,C₁₈柱,流动相为甲醇-水梯度洗脱或乙腈-四氢呋喃-水(25:18:57)等度洗脱，检测波长240 nm。结果 在两种液相条件下，供试品溶液中均检出醋酸地塞米松，且样品中的醋酸地塞米松与其他杂质峰能有效分离，通过比较供试品和对照品色谱保留时间和其紫外光谱信息，以及样品中峰纯度检查，供试品中含有醋酸地塞米松。结论 本测定方法简便、灵敏、专属性强。     

龙涎香中龙涎香醇的制备及其含量测定研究

目的制备龙涎香醇对照品,建立龙涎香醇含量测定方法。方法龙涎香醇通过石油醚超声提取、硅胶 柱层析、丙酮洗涤、半制备液相色谱的方法制备。采用气相-质谱联用（GC-MS）法测定龙涎香醇的纯度,采用 核磁共振（NMR）及超高液相-质谱联用（UPLC-MS）法,对龙涎香醇的结构进行确证。采用高效液相-蒸发光散 射（HPLC-ELSD）法,建立龙涎香醇的检测方法并评价龙涎香的质量。结果所制备的龙涎香醇纯度为 95.12%,符合国家对照品标准要求。13 批龙涎香样品中龙涎香醇的含量介于29.2%~63.6%之间。结论建立 了龙涎香醇对照品制备方法及龙涎香醇含量测定方法,可为龙涎香的真伪鉴别提供准确、可量化的方法。     

制备高效液相色谱法分离纯化大黄酚和大黄素甲醚

目的建立制备高效液相色谱分离纯化大黄酚和大黄素甲醚的方法。方法用稀硫酸将脱脂后的大黄中总蒽醌苷水解成苷元,再用热三氯甲烷提取苷元,依次用一定浓度的不同碱溶液将三氯甲烷提取液中的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等杂质除去,氢氧化钠沉淀三氯甲烷溶液中的大黄酚和大黄素甲醚,盐酸调pH值,析出沉淀,沉淀物经真空干燥,得大黄酚和大黄素甲醚混合物粗品,所得粗品甲醇溶解,用制备高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(21.2mm×250mm,7μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),体积流量为20mL/min,检测波长为254 nm,柱温为28℃,进样量为8 mL,基于峰,分别收集大黄酚和大黄素甲醚馏分,馏分经真空冷冻干燥得大黄酚和大黄素甲醚单体。结果大黄酚和大黄素甲醚纯度用面积归一化法和外标法定量,大黄酚纯度达到98.8%,大黄素甲醚纯度98.7%。1H-NMR鉴定结构,与文献数据一致。结论制备高效液相色谱法制备高纯度大黄酚和大黄素甲醚,操作简单,适于实验室大规模制备。     

复方苦豆子胶囊质量标准研究

目的建立复方苦豆子胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法分别对复方中山楂、决明子、苦豆子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对主药决明子中的大黄酚进行含量测定。结果薄层色谱中,供试品溶液在与对照药材或对照品相应位置上出现相同颜色的斑点,阴性无干扰;高效液相色谱中,大黄酚在0.0284～0.9088μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9997(n=6),平均加样回收率为99.97%。结论本试验采用的薄层色谱鉴别方法专属性强,高效液相色谱法精密度高、重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

芦丁的纯化及其含量测定

目的制备高纯度芦丁的目的是用作对照品或满足其它特殊需要的试剂。方法从槐米中提取芦丁,并将其制备成对照品。采用既简便又经济的酸提碱沉法从槐米中提取芦丁,经过精致,分离得芦丁对照品,并用一般方法、薄层层析法、核磁共振法进行鉴定,高效液相法测定其含量。结果经化学法、薄层层析法鉴定,核磁共振鉴定表明芦丁样品与芦丁标准品图基本一致;高效液相测得含量98.05%。结论此种实验室制备芦丁对照品的方法操作简单易行,产品纯度较高可作为对照品代替标准品用。     

油茶粕正丁醇组分水解产物化学成分的研究

目的 研究油茶粕正丁醇组分水解产物的化学成分.方法 采用盐酸水解法制备水解产物,利用薄层色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH - 20凝胶色谱以及制备高效液相色谱等进行分离纯化,通过理化常数和光谱分析以及和对照品对照鉴定化合物的结构.结果 从油茶粕正丁醇组分水解产物中分离并鉴定了10个化合物,分别为:齐墩果酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、羽扇豆醇(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、山柰酚(V)、山柰酚-3-O-13-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅵ)、山柰酚-3 -O-β -D-吡喃葡萄糖基(6→1)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、槲皮素(Ⅷ)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅸ)、槲皮素-3 -O-α -L-吡喃鼠李糖苷(X).结论 除化合物V外均为首次从油茶粕中分离得到,其中化合物Ⅵ、Ⅶ为首次从山茶属中分离得到.     

Progress in study on calibration and purity determination method of impurity reference substance in drugs

药物中的杂质是否能被全面准确地控制,直接关系到药品的质量可控与安全性.《中国药典》多采用主成分自身对照法规定有关物质的限度,而国外药典中多用到杂质对照品进行检测,这也就要求杂质对照品符合一定的质量标准后方可使用.对照品的标定中常涉及的项目包括纯度测定、结构确证、含量测定等,考虑到杂质对照品的微量性,标定时选择合适的分析方法十分重要,如进行纯度测定可使用高效液相色谱法、差示扫描量热法等试样用量少的分析仪器.     

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??OBJECTIVE To establish the reference standard of melatonin. METHODS The structure of the reference standard was identified by UV, IR, NMR, and ESI-MS spectrophotometry. The purity was calculated by normalization method and self-contrasted dilution method. Furthermore, loss on drying, residue on ignition, and hygroscopicity were tested. RESULTS The purity was 99.8% by normalization method and self-contrasted dilution method. COCLUSION The establishment of reference standards of melatonin can efficiently control the addtion of melatonin into functional foods.
     

金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法

目的建立金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法.方法结合萃取、聚酰胺柱层析、重结晶等方法对吴茱萸甲醇提取物进行分离纯化,通过MS、1HNMR、13CNMR、HPLC等波谱学方法对其分离产物进行结构鉴定和含量测定.结果该法分离所得金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷的纯度分别为99.6%和98.0%.结论该方法简便,产品纯度高,可作为中药药效物质基础研究中的对照品.     

桔梗皂苷D对照品的制备

目的建立桔梗皂苷D对照品的制备工艺。方法桔梗生药用70%甲醇提取,浓缩后经大孔树脂D101柱色谱,40%乙醇洗脱组分用硅胶柱色谱分离,以氯仿-甲醇系统梯度洗脱,收集含桔梗皂苷D的组分,最后经高效液相色谱制备纯化。结果HPLC检测分析,采用面积归一法计算,桔梗皂苷D纯度为98.8%。结论该工艺简单,收率高,可用于桔梗皂苷D标准品的制备。     

重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体的表达、复性与分离纯化

 目的 获得具有高纯度、高生物活性的重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体(瑞替普酶,reteplase,r-PA)。方法 reteplase基因克隆到表达质粒pJZ"-100中,转化Escherkhia coli BL21(DE3),在0.05mmol·L^-1异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG)诱导下获得高效表达,表达产物通过脉沖稀释法复性,复性后的蛋白质用ETI-Sepharose4B亲和色谱纯化。结果 表达产物占菌体总蛋白质的20%,脉冲稀释法复性后复性收率为28%,经纯化后纯度达96%以上,比活为580 000 IU·mg^-1。结论 建立了reteplase表达、复性与纯化工艺,以此工艺可获得高活性高纯度的reteplase。     

金花茶中黄酮类活性成分的GC-MS分析

目的:建立石墨烯-搅拌棒吸附萃取(SBSE)结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析金花茶中黄酮类活性成分并对总黄酮的相对含量进行测定。方法:自制稻草源活性炭制备石墨烯聚合物,实验中对影响SBSE的因素(萃取涂层选择、萃取温度和时间等)进行了优化,用GC-MS鉴定金花茶中黄酮类活性成分,在所得优化条件下采用峰面积归一化法对金花茶中总黄酮相对含量进行测定。结果:样品中黄酮类活性成分经鉴定有儿茶素,表没食子儿茶素(EGC),儿茶酚(C),槲皮素-7-O-葡萄糖苷,芦丁,异槲皮苷,花青素,槲皮素,山柰酚,儿茶素没食子酸酯(CG),儿茶素没食子酸酯(CG)等,经检测金花茶中总黄酮相对含量(主要为槲皮素和山柰酚)达到3.0%。同一样品经6次测定,以金花茶总黄酮的总峰面积值为考察指标,其RSD 1.0%。结论:建立的SBSE-GC-MS方法分离鉴定出24个成分,测定金花茶总黄酮相对含量重复性较好,适于金花茶黄酮类成分的分析检测,为金花茶黄酮类活性成分的进一步研究提供了理论参考。     

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??OBJECTIVE To establish a qualitative and quantitative HPLC method for the determination of impurity ??in tebutaline sulfate.METHODS The Kromasil C₁₈column(4.6 mm??150 mm,5 ??m)was used as the analysis column;buffer solution [dissolving 4.23 g of sodium hexanesulfonate in 770 mL of 0.050 mol??L^-1 ammonium formate solution (pH 3)]-methanol (77:23) was used as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL??min^-1, the column temperature was maitained at 30 ??, the detection wavelength was set at 276 nm,and the injectiong volume was 20 ??L.Area normalization method with correction factor was used for the quantitative analysis of the impurity ??. RESULTS Under the separation condition,the impurity ?? was completely separated from the principal components. The calibration curve showed good linearity in the concentration range of 0.10-579 ??g??mL^-1(r??1.000 0). The correction factor was 3.6.CONCLUSION The area normalization method with correction factor developed in the paper can be used for the qualitative and quantitative analysis of the impurity ??in terbutaline sulfate,which can not only solve the problem of the availability of impurity reference standards,but also reflect the actual contents of impurity.The method provides an efficient and convenient method for quality control of terbutaline sulfate.     

头孢噻吩杂质A国家标准物质的研制

目的 建立头孢噻吩杂质A的首批国家标准物质,为2020年版《中国药典》头孢噻吩的检测提供必需的标准物质.方法 首先,采用红外、质谱和核磁共振的方法时头孢噻吩杂质A进行结构确证.其次,采用2020年版《中国药典》头孢噻吩有关物质检查项下的方法,测定头孢噻吩杂质A的纯度.然后,测定头孢噻吩杂质A的干燥失重和炽灼残渣.最后,...     

中药体外抑菌实验检测方法的比较

目的：比较几种不同的中药体外抑菌检测方法。方法：采用肉汤倍量稀释法、琼脂倍量稀释法、生长曲线绘制方法检测双黄连对细菌的抑制作用。结果：常量肉汤倍量稀释法双黄连最低抑菌浓度为50 g/L;琼脂倍量稀释法检测双黄连最低抑菌浓度为12.5 g/L;生长曲线绘制法检测双黄连最低抑菌浓度为50 g/L,可以观察到不同浓度双黄连对细菌生长影响的不同作用。结论：生长曲线绘制法最能直接反映中药与细菌的相互作用。     

杨梅树皮中杨梅苷对照品制备及鉴定

目的：建立从杨梅树皮中制备杨梅苷对照品的方法。方法：采用聚酰胺柱层析和重结晶法对杨梅树皮甲醇提取物进行分离纯化,通过UV、IR、MS、1 H-NMR和13 C-NMR进行结构鉴定,通过TLC法和HPLC法对对照品进行纯度检测。结果：从杨梅树皮中分离纯化出的杨梅苷对照品质量分数〉98.0%。结论：该方法制备的杨梅苷对照品符合中药化学对照品的相关要求,可用于含黄酮类中药及其相关制剂的质量控制。