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色氨酸酶的催化功能及其在L-色氨酸酶法合成中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
色氨酸酶是一种依赖磷酸吡哆醛的多功能酶,由相同的4个亚基组成,每个亚基含有一个磷酸吡哆醛结合位点,催化活性需要NH4+或K+存在。它不仅能催化L-色氨酸的分解,而且能催化一系列α,β-消去反应和β-取代反应。其催化机制主要包括外部醛亚胺的形成和醌型中间物的生成。在高浓度底物条件下,色氨酸酶能催化丙酮酸、吲哚和氨合成L-色氨酸。通过β-取代反应,色氨酸酶催化L-丝氨酸、L-半胱氨酸合成L-色氨酸,这为酶法工业化生产L-色氨酸提供了重要途径。此外,色氨酸酶在制备硫醇类香料化合物中也发挥重要作用。 相似文献
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目的:研究聚D-色氨酸修饰玻碳电极的制备条件及该修饰电极的应用。方法:在含有2.50×10-3mol·L-1D-色氨酸的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,用循环伏安法,研究了聚合D-色氨酸的最佳条件;用示差脉冲伏安法测定盐酸氨溴索。结果:在玻碳电极上修饰D-色氨酸的最佳条件是:在2.5×10-3mol·L-1D-色氨酸的PBS(pH=4.0)中用循环伏安法修饰16圈。于PBS(pH=8.0)中测定盐酸氨溴索,测定的线性范围为:7.20×10-7—1.68×10-5mol·L-1 ,检出限为2.4×10-7mol·L-1 。结论:制得的聚D-色氨酸修饰电极具有较好的稳定性和重现性,且制作方法简便,用于盐酸氨溴索的测定具有较宽的线性范围和较低的检出限,建立了一种测定药物的新方法。 相似文献
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本文采用微最极细胞内记录方法观察了色氨酸对蟾蜍卵母细胞膜电位影响和时间效应和剂量效应,色氨酸对裸化卵母细胞膜电位的影响;色氨酸对卵母细胞膜电位起极化作用的离子关系等,其结果是以1mmol/L 色氨酸处理卵母细胞0~-1h 膜电位无明显变化,2h 后膜电位值便随培养时间延长而逐渐升高(超极化),随着色氨酸浓度升高其膜电位也逐渐升高。色氨酸对裸化卵母细胞膜电位有轻度超极化作用,但与对照组无明显差异(p>0.05):色氨酸虽然能使卵细胞膜电位明显超极化,但对细胞膜钠离子转运系数(TNa~ )无明显影响,而且膜电位变化与 TNa~ 变化无相关性。 相似文献
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作者之一曾合成DL-N-二氯乙酰基-7-硝基-色氨酸(Ⅰ_a)和DL-7-硝基-色氨酸盐酸盐(Ⅱ_a),及其相应乙酯即DL-N-二氯乙酰基-7-硝基-色氨酸乙酯(Ⅰ_b)和DL-7-硝基-色氨酸乙酯盐酸盐(Ⅱ_b),经组织培养筛选表明Ⅰ_a和Ⅰ_b对Hela瘤细胞有明显抑制作用。为进一步研究硝基位置对肿瘤抑制作用的影响,本工作又合成了其相应的5-硝基位置异构体,DL-N-二氯乙酰基-5-硝基-色氨酸(Ⅰ_c)和DL-5-硝基-色氨酸盐酸盐(Ⅱ_c),及其相应的乙酯Ⅰ_d 相似文献
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以L-半胱氨酸和吲哚为底物酶法合成L-色氨酸(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
以L-半胱氨酸和吲哚为底物,利用色氨酸酶基因工程菌WW-11酶法合成L-色氨酸。方法:以IPTG诱导基因工程菌色氨酸酶表达,将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源,通过纸层析和氨基酸自动分析仪分析并测定转化液中L-色氨酸的含量。结果:80mL反应液(L-半胱氨酸0.75g,吲哚0.75g)37℃反应48h,可积累L-色氨酸1.18g,L-半胱氨酸转化率为93.2%,吲哚转化率为90.1%。经分离纯化所得的L-色氨酸晶体,在熔点、旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致。结论:色氨酸酶基因工程菌能有效地催化L-半胱氨酸和吲哚合成L-色氨酸,这种酶合成法是工业化生产L-色氨酸较为有效的方法之一。 相似文献
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目的对海洋细菌Roseobacter sp.发酵液的乙酸乙酯萃取部分进行化学成分的研究。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等手段,利用理化和波谱分析方法,对海洋细菌Roseobacter sp.发酵液中的化合物进行分离鉴定。结果与结论从细菌Roseobacter sp.发酵液中分离得到8个含色氨酸的环二肽,分别鉴定为环[色氨酸-缬氨酸](Ⅰ),环[色氨酸-异亮氨酸](Ⅱ),环[色氨酸-脯氨酸](Ⅲ),环[色氨酸-丙氨酸](Ⅳ),环[色氨酸-苯丙氨酸](Ⅴ),环[色氨酸-天门冬酰胺](Ⅵ),环[色氨酸-丝氨酸](Ⅶ),环[色氨酸-甘氨酸](Ⅷ)。其中化合物(Ⅵ)为新的天然产物。 相似文献
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目的:以L-半胱氨酸和吲哚为底物,利用色氨酸酶基因工程菌WW-11酶法合成L-色氨酸。方法:以IPTG诱导基因工程菌色氨酸酶表达,将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源,通过纸层析和氨基酸自动分析仪分析并测定转化液中L-色氨酸的含量,结果:80mL反应液(L-半胱氨酸0.75g,吲哚75g)37℃反应48h,可积累L-色氨酸1.18g,L-半腕氨酸转化率为93.2%,吲哚转化率为90.1%,经分离纯化所得的L-色氨酸晶体,在熔点,旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致,结论:色氨酸酶基因工程菌能有效地催化L-半胱氨酸和吲哚合成L-色氨酸,这种酶合成法是工业化生产L-色氨酸较为有效的方法之一。 相似文献
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采用三波长法不经分离直接测定18-种氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量,色氨酸平均回收率为99.99%,RSD=0.32%(n=5).酪氨酸平均回收率为100.1%.RSD=0.62%(n=5). 相似文献
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喹啉酸(quinolinic acid,QA)是色氨酸经L-色氨酸和犬尿酸代谢通路而生成的内源性氨基酸。结果如下:10和100tμmol/L QA促进神经元生长,使树突和触突更丰富,突起间网络更明显,MTT值明显升高,而LDH漏出量明显降低;500和1000μmol/L对神经元无明显作用;1、3和5mmol/L呈浓度依赖性损伤神经元[第一段] 相似文献
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色氨酸代谢产物5-羟色胺是中枢神经系统的抑制性递质,升高时可被儿茶酚胺神经元摄取,取代储存的去甲肾上腺素,使中枢神经受抑制。Cas-cino 证实血清中游离色氨酸与肝昏迷的严重程度及进展呈平行关系。我们的实验也表明,肝昏迷患者血清中游离色氨酸明显高于无昏迷的肝硬化患者。目前用输入枝链氨基酸和白蛋白治疗肝昏迷可使游离色氨酸降低,使病人恢复清醒,因此,准确测定游离色氨酸已成为指导肝昏迷治疗、及判断预后和昏迷程度的重要指标之一。 相似文献
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L-色氨酸在碱性条件下消旋制得DL-色氨酸,以D-樟脑磺酸为手性拆分剂生成D-色氨酸樟脑磺酸盐,最后经水解制得D-色氨酸,总收率约40%. 相似文献
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上海医药工业研究院生物化学药物研究室继酶法拆分制备L型蛋氨酸和L型苯丙氨酸之后,又完成了酶法拆分制备L型色氨酸的工艺研究。L型色氨酸是结晶氨基酸大输液的重要原料之一,是由乙酰-DL-色氨酸经固定化氨基酰化酶(1200~1500单位)拆分精制而得,成品质量符合注射用要求,可供配制输液 相似文献