慢性肾小球肾炎患者血清中氧自由基对肾损害的探讨

测定慢性肾小球肾炎患者红细胞铜、锌超氧化物歧化酶（Ｃｕ，－ＳＯＤ）及血清过氧化脂质荧光参数（ＬＰＯ）的改变，结果表明慢性肾小球肾炎患者Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活力降低，血中ＬＰＯ增高；且随血肌酐的增高或内生肌酐清除率的降低，Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活力明显降低，ＬＰＯ增高。提示氧自由基对肾脏具有损伤作用，增加Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ及活力可能是治疗慢性肾小球肾炎的重要措施之一。     

酵母SOD的研究

确定了酵母ＳＯＤ高产菌适宜的培养基和培养条件，在此条件下，ＳＯＤ的发酵水平达９．６万ｕ／ｌ发酵液。摸索出一条酵母ＳＯＤ的制备工艺，不仅工艺简单，而且酶活性收率高。得到纯度较高的Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ，比活力３６７８ｕ／ｍｇ，活性回收收经为７６％，分子量为３２０００Ｄ，等电点为５．５，功能实验证明酵母ＳＯＤ具有显著的抗炎活性，做成化妆品对皱纹，粉刺和色素沉着有明显功效。     

β—环糊精修饰铜锌—超氧化物歧化酶的研究

β－环糊精（β－Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ，β－ＣＤ）用高碘酸钠氧化成为具有二醛钠结构的活性化合物，在一定条件下与铜锌－超氧化物歧化酶（Ｃｕ，Ｚｎ－ＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅ，Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ）分子赖氨酸残基上ε－ＮＨ２反应，经硼氢钠还原形成β－ＣＤ修饰的ＳＯＤ，用２，４，６－三硝基磺酸方法得测定其氨基修饰率为３２．４０％，剩余酶活力为６６．４８％，修饰ＳＯＤ在薄层平板ＳＤＳ－ＰＡＧＥ     

消化性溃疡患者血清LPO含量及SOD活性变化的初步研究

对８４例消化性溃疡患者血清ＬＰＯ含量及Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活性进行了测定，发现胃溃疡及复合性溃疡患者血清ＬＰＯ含明明显高于正常对照（Ｐ〈０．００１），血清Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活性则显低于正常对照（Ｐ〈０．０１）；十二指肠球部溃疡患者血清ＬＰＯ含量有升高趋势，而血清Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活性在正常范围，结果提示，胃溃疡的发生可能与氧自由基的作用有关。     

硫氮卓酮对失血性休克犬胰腺的保护作用及其机制的研究

杂种犬１１只，快速失血使平均动脉压达６．０ｋＰａ．维持９０ｍｉｎ，回输全部血液，２４０ｍｉｎ处死动物。硫氮卓酮（Ｄｉｌｔｉａｙｅｍ，Ｄｉｌ，ｎ＝６）组于休克３０ｍｉｎ时静脉输注Ｄｉｌ（６００１μｇ·ｋｇ－１．１５ｍｉｇ内输完）。休克组在相同时间输入等量生理盐水。结果显示，和休克组比较，Ｄｉｌ治疗能降低胰腺组织黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）活性，减少脂质过氧化产物丙二醛生成，增加谷胱甘肽过氧化物酶、Ｃｕ－Ｚｎ超氧化物酶（Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ）和Ｍｎ－ＳＯＤ活性。并减轻胰腺损伤程度。提示Ｄｉｌ能保护休克时的胰腺，其机制与减少自由基生成，增加自由基清除酶活性有关。     

β－环糊精对Cu，Zn－SOD的稳定作用

β－环糊精能增加Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ在溶液中的稳定性，能减少ＳＯＤ在酸性及高温条件下的活性损失，β－环糊精对Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ的紫外吸收光谱没有明显影响，但使ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳时的迁移率略减。     

β—环糊精对Cu,Zn—SOD的稳定作用

β－环糊精能增加Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ在溶液中的稳定性，能减少ＳＯＤ在酸性及高温条件下的活性损失。β－环糊精对Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ的紫外吸收光谱没有明显影响，但使ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳时的迁移率略减。     

突变的人铜、锌超氧化物歧化酶基因的克隆、测序及表达

目的：通过基因工程的方法将ｒｈＣｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ基因改造以得到更加稳定的酶。方法：以本实验室构建的 ｒｈＣｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ为模板,利用含有突变核苷酸的引物进行 ＰＣＲ扩增,将正确测定的含 ｒｈＣｕ, Ｚｎ－ＳＯＤ突变（ｒｈＣｕ,Ｚｎ－ＭＳＯＤ）基因的重组质粒重组到表达载体ＰＥＴ－２２ｂ（＋）中,重组质粒在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达ｒｈＣｕ,Ｚｎ－ＭＳＯＤ。结果：表达产物占菌体总蛋白的３８％,具有特异性ＳＯＤ酶活性。结论：从基因突变的角度改善酶的性能不仅具有理论意义,又有一定的实用价值。     

聚乙二醇修饰超氧化物歧化酶的研究

以氰尿酰氯活化单甲氧基聚乙二醇（ＭＰＥＧ Ｍｒ５０００）对猪血Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ进行修饰，制得ＭＰＥＧ２－ＳＯＤ。产物的酶活性保持８２．０％，期半衰期比修饰前延长至７．６倍，在动物脑中的ＳＯＤ活性较高。修饰ＳＯＤ抗炎活性增强，抗原性降低，稳定性提高。     

低抗凝肝素修饰超氧化物歧化酶的研究

用溴化氰或高碘酸钠活化低抗凝肝素（ＬＡＡＨ）对猪血Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ进行共价修饰，制得ＬＡＡＨ（ＣＮ）－ＳＯＤ和ＬＡＡＨ（ＩＯ４）－ＳＯＤ，在３３和３８％自由氨基酸修饰的情况下，酶活性分别保持９０．４和８５．１％ＳＯＤ经修饰后，半衰期分别比修饰前延长了１１．２４和８．５２倍，抗原性大大降低，抗炎活性显著增强，稳定性明显提高。     

超氧化物歧化酶药用研究的进展

超氧化物歧化酶 (ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ ,ＳＯＤ)是一种重要的氧自由基清除剂[1] ,能催化超氧阴离子发生歧化反应。从动物血、脏器及某些植物中提取的ＳＯＤ已广泛应用于保健品、食品添加剂及化妆品等领域 ,用重组技术生产的人源性ＳＯＤ对某些适应症已进入临床研究 ,现将有关ＳＯＤ药用研究进展综述如下。1　ＳＯＤ的生化及生物学物性ＳＯＤ是一种酸性金属蛋白质 ,存在于真核细胞胞液 (Ｃｕ ,Ｚｎ ＳＯＤ)、线粒体 (Ｍｎ ＳＯＤ)和原核细胞(Ｆｅ ＳＯＤ)中。由于Ｃｕ ,Ｚｎ ＳＯＤ中酪氨酸和色氨酸的含量很低 ,所以紫外…     

耐热碱性蛋白酶的纯化及其主要性质研究

由我国新疆沙漠土样中分离获得的栗褐芽胞杆菌ＣＰＵ９４０７，能产生耐热碱性蛋白酶，以葡萄糖１．０％，蛋白胨０．５％，酵母膏０．５％，ＭｇＳＯ４ ０．０２５％为培养基，在ｐＨ９．３ ３７℃振荡培养４８ｈ，发酵液酶活力为５７９６ｕ／ｍｌ，粗酶经（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀，ＤＥＡＥ－Ｃ（ＤＥ－３２）两次层析，Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００层析，得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳均一样品，比活４０５０ｕ／ｍｇ，是粗酶化     

二乙基二硫代氨基甲酸钠对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的影响

沙土鼠脑缺血６０ｍｉｎ后，脑组织氧自由基和ＭＤＡ含量无明显升高，而Ｍｎ－ＳＯＤ的活性下降，缺血６０ｍｉｎ再灌注５ｍｉｎ时，氧自由基显著升高。再灌注３０ｍｉｎ时，氧自由基显著升高，Ｍｎ－ＳＯＤ和Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ活性显著降低。缺血前１５ｍｉｎ，ｉｖＤＴＣ对缺血再灌注脑组织中氧自由基和ＭＤＡ升高有显著抑制作用，对Ｍｎ－ＳＯＤ活性有显著保护作用。且呈剂量依赖关系。     

高产SOD植物细胞的离体评估模型

用１μｍｏｌ／Ｌ甲基紫精对玫瑰茄培养细胞进行１６ｈ和２４ｈ暗诱导，其ＳＯＤ活力分别比对照增大７４．８７％和３２４．２４％，比活力分别增加６９．９９％和２９５．７３％，经２４ｈ暗诱导的细胞，在１ｍｍｏｌ／Ｌ甲基紫精的作用下，其电解质渗漏率比对照下降了４８％，且差异达到极显著水平。这表明细胞中ＳＯＤ含量与电解质渗漏率密切相关，ＳＯＤ含量高者，其电解质渗漏率低。以此为依据，建立了一种评价高产ＳＯＤ植物细     

病毒性肝炎患者LPO与SOD检测分析

本文对６３例病毒性肝炎患者过氧化脂质（ＬＰＯ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力进行了检测。其中急性肝炎（ＡＨ）８例。慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）２８例，慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）２２例，重症肝炎（ＦＨ）５例。结果ＬＰＯ浓度在ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＦＨ中分别为５．７８±０．８５ｎｍｏｌ／ｍｌ、３．６１±０．７３ｎｍｏｌ／ｍｌ、６．７９±０．９８ｎｍｏｌ／ｍｌ、１１．７１±１．２４ｎｍｏｌ／ｍｌ，均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。ＳＯＤ活力在ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＦＨ均低于正常对照组（Ｐ＞０．０５），提示ＬＰＯ升高与肝细胞损伤，疾病转归有一定关系。ＳＯＤ活力下降可能是病毒性肝炎ＬＰＯ升高的原因之一。     

胆石症患者手术前后血清超氧化物歧化酶活力的动态观察

报道采用黄嘌呤氧化酶法对４６例胆石症患者和３０例健康者进行血清总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、锰和铜锌超氧化物歧化酶（Ｍｎ－ＳＯＤ、ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）活力测定，动态观察胆石症患者手术前后Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力变化。结果表明，胆石症患者血清Ｔ－ＳＯＤ活力瑟健康者相近，Ｍｎ－ＳＯＤ活力明显升高。ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力明显降低；手术后Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力均     

甘蓝细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

通过对甘蓝细胞溶质ＳＯＤ的纯化及性质研究,开拓制备ＳＯＤ的廉价原料来源。经硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ＤＥ５２层析３个步骤,将昨细胞溶质ＳＯＤ纯化到均一程度。从１０００ｇ叶片中得到３．２ｍｇ酶,酶的比活力达９７００Ｕ／ｍｇ蛋白。经鉴定该酶是Ｃｕ．ｚｎ－ＳＯＤ。测得其Ｍｒ约为３２２００,亚基Ｍｒ约为１６０００。该酶的Ｎ－末端为丙酸,其可见光区与紫外光区的最大吸收峰分别在     

类黄酮—金属离子螯合模拟SOD的研究

槲皮素作用一种金属螯合剂，可认与Ｃｕ＾２＋，Ｍｎ＾２＋，Ｆｅ＾２＋等金属离子配合，槲皮素－金属离子螯合物不仅可以消除重金属离子的污染，而且还表现ＳＯＤ样催化活力，它们象ＳＯＤ一样能抑制肾上腺素的自氧化，并且对自由基引起的生物膜损伤具有保护作用，分析了游离金属离子及其螯合剂ＥＤＴＡ对羟自由基．ＯＨ生成的促进作用，评价了３种肽模拟ＳＯＤ的活力水平。     

肺心病时自由基代谢变化的临床意义

为进一步探明肺心病时自由基代谢变化的规律，寻求肺心病治疗的新方案，以３０例健康人作对照，对２９例肺心病人的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）总量（Ｔ－ＳＯＤ）、锰ＳＯＤ（Ｍｎ－ＳＯＤ）活力、还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）、丙二醛（ＭＤＡ）过氧化氢酶（ＣＡＴ）和总抗氧化能力（Ｔ－ＡＣＯ）等八项自由基指标进行了检测，结果肺心病时Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ、铜锌ＳＯＤ（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）、ＣＡＴ、ＧＳＨ五项指标均显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），肺心病急性期Ｍｎ－ＳＯＤ和ＧＳＨ显著低于缓解期（Ｐ＜０．０５），而Ｔ－ＡＣＯ及ＭＤＡ则高于正常人（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），Ｍｎ－ＳＯＤ／Ｔ－ＳＯＤ之比在肺心病时也有所升高但无统计学差异，ＭＤＡ在急性期的增高程度与缓解期无显著差别（Ｐ＞０．０５）。初步认为肺心病患者的自由基代谢变化。主要表现为自由基的形成与清除失衡，应用抗氧化剂是治疗过程中的一项有效措施。     

五种螯合剂对大鼠体内微量元素影响的观察

观察了５种常用螯合剂对大鼠体内微量元素排出量、组织分布的变化。结果表明，５种螯合剂可不同程度地增加机体必需微量元素Ｚｎ、Ｃｕ、Ｍｇ和Ｃａ经尿液排出量。ＥＤＴＡ和ＤＴＰＡ的影响尤为明显。ＥＤＴＡ和ＤＴＰＡ可使Ｚｎ经尿液的排出量增加１６－５２倍，ＤＴＰＡ使肝脏Ｚｎ含量减少１５．９％（Ｐ〈０．０５），肝脏Ｃｕ含量下降６０％（Ｐ〈０．０５）。ＥＤＴＡ和ＤＴＰＡ注射后，肾中Ｚｎ含量明显增高，相当对照大鼠３．