人碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆与表达

应用DNA重组技术将编码人碱性成纤维细胞生长因子（bbFGF）的基因克隆至原核高效表达质粒pBV_(221)的启动子下游。SDS-SAGE、ELISA和NTT活性监测结果表明:该重组质粒pBV-hbFGF在大肠杆菌DH5α中,经42℃诱导后,可表达出有较高生物活性的hbFGF。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子与重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗面部外伤效果比较

目的：比较重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF）与重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF）治疗面部外伤的效果。方法将该院收治的46例面部外伤患者随机分为观察组24例和对照组22例,清创后分别应用rh-aFGF和rh-bFGF 喷于创面并一期缝合,每日消毒后换药。观察两组患者伤口愈合时间及不良反应。结果观察组伤口愈合时间明显短于对照组,差异有统计学意义。治疗过程中,两组患者均未见疼痛及过敏等不良反应。结论与rh-bFGF相比,应用rh-aFGF 能缩短面部外伤伤口的愈合时间,且用药安全。     

非融合重组人碱性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌中的克隆及高效表达

目的:获得大肠杆菌中高效表达的非融合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF).方法:采用RT-PCR技术,以人胎儿脑组织的总RNA克隆出hbFGF基因,再以此为模板,设计引物,对hbFGF的TIR(翻译起始区)部分碱基进行改造和降低G C含量,最后将该新基因克隆于质粒载体pET-3C,转化于大肠杆菌中表达.结果:非融合rhbFGF在大肠杆菌中高效表达,占总蛋白量的30％以上.采用离子交换和亲和层析方法纯化后,生物活性与标准蛋白一致.结论:非融合rhbFGF及调整TIR区域的碱基序列能有效提高重组蛋白的表达效率.     

碱性成纤维细胞生长因子的表达与肿瘤发生、发展及预后关系

目的：介绍碱性成纤维细胞生长因(bFGF)在多种肿瘤中的表达情况，并探讨其参与肿瘤病理过程的途径：方法：分析、整理和归纳国内外相关文献。结果：bFGF在体内的表达与肿瘤的发生、发展及预后有密切关系。结论：bFGF对判定肿瘤的恶性程度、自然病程及预后方面有重要意义。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子纯化工艺的研究

对大肠杆菌表达的重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)进行了纯化工艺的研究。 3批纯化后的终产品经SDS PAGE检测 ,其纯度为 99.3% ,经HPLC(高效液相 )检测 ,其纯度为 10 0 % ,分子质量为 17.8ku ,其平均比活性为 2 .8× 10 6AU/mg ,其表达量为 97.5mg/ml.。     

人碱性成纤维细胞生长因子(hu-bFGF)在毕赤酵母中的分泌表达

通过PCR技术从pMD18-T/hu-bFGF质粒中扩增出hu-bFGF基因,并将其克隆到pGEM-T Easy克隆载体中。经测序鉴定后,目的基因通过XhoI和XbaI酶切后,以正确的阅读框插入到pGAPZ-αA的编码-αfactor信号肽序列的下游,构建成pGAPZ-αA/hu-bFGF重组分泌表达载体。表达载体用BlnI线性化处理后电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,转化子经Zeocin抗性筛选、菌落PCR鉴定、SDS-PAGE复筛获得分泌表达hu-bFGF的工程菌。Western Blot结果表明:重组蛋白能够与兔抗人bFGF抗体发生特异性反应,具有良好的抗原性。对工程菌培养条件的优化表明:以麦芽糖为碳源、培养基起始pH值为6.5、培养96 h时重组蛋白的表达水平最高。     

碱性成纤维细胞生长因子在胃癌中表达的临床意义

目的：探讨胃癌中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)表达和微血管密度（MVD）变化的临床意义。方法：应用免疫组化和形态计量检测68例胃癌和20例正常组织bFGF表达和MVD，结果：FGF的阳性率在胃癌与正常胃组织中分别为58．8％和70％（P＞0．05），强阳性率分别为32．4％和0％（P＜0．01）；bFGF表达与胃癌分化程度有关；MVD值增高与bFGF表达一致，且均与淋巴结转移有关，讨论,BFGF和MVD可作为胃癌诊断和预后判断的一个指标。     

碱性成纤维细胞生长因子与冠心病的关系

<正>碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)既具有促进细胞分化、增殖、血管生成等与丝裂作用有关的生物学效应,同时还具有抑制细胞凋亡,促进NO产生,拮抗心肌细胞损伤等非丝裂效应[1,2]。它在体内参与心血管系统的许多生理、病理过程,成     

碱性成纤维细胞生长因子在体表慢性溃疡中的临床应用

体表慢性感染、溃疡是外科常见病,传统治疗方法疗程长、效果差.生长因子与创面愈合的关系已为国内外学者关注[1,2].碱性成纤维细胞生长因子(贝复济bFGF)是人体内含有的一种微量活性蛋白,具有促进组织和细胞分离、分化的作用.我们于1997年10月开始使用贝复济治疗各种体表的慢性溃疡,现将临床观察结果报告如下.     

碱性成纤维细胞生长因子在美容术后创面修复中的应用

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(贝复济BFGF)对美容手术术后慢性愈合创面的促修复作用并探讨其促修复机制。方法：32例病人共64个术后创面．分左右两侧，一侧使用BFGF，一侧为对照组，待其自然愈合，观察对比其疗效。结果：应用BFGF侧较对照侧提前愈合3—5d。总有效率为100％。结论：BFGF可以显著地加速创面愈合，缩短创面愈合时间。     

碱性成纤维细胞生长因子在胃癌中的表达及意义(附170例分析)

目的研究胃癌(gastric carcinoma,GC)组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达规律。方法用免疫组织化学染色(SP法)检测慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)、胃黏膜肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)、异型增生(dysplasia,Dys)和胃癌组织标本中bFGF阳性表达情况。结果在CSG→IM→Dys→GC的过程中,bFGF的表达呈逐步递增趋势,bFGF的阳性表达率GC组与Dys、IM组,差异均具有统计学意义(P<0.05),胃癌组bFGF阳性表达率均高于相应癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌形成过程中,bFGF表达逐渐上调。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗萎缩性鼻炎临床观察

目的观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗萎缩性鼻炎治疗效果。方法对2008年5月至2012年5月治疗的82例萎缩性鼻炎随机分为两组,对照组41例采用常规综合治疗,治疗组41例在对照组常规综合治疗的基础上加用重组牛碱性成纤维细胞生长因子喷鼻腔。结果治疗组治愈9例,好转29例,有效率92．7％;对照组治愈4例,好转24例,有效率68．3％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗萎缩性鼻炎临床疗效显著。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠脊髓损伤后的表达及意义

目的:探讨脊髓损伤后的自我保护修复机制.方法:采用改良的Allen’s法建立SD大鼠T11节段脊髓损伤模型,观察术后不同时间段脊髓内碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达分布及变化情况.结果:脊髓损伤各时间段bFGF阳性神经元数较正常组显著增加.7 d达高峰,21 d恢复正常.结论:脊髓损伤后bFGF表达,提示其参与了脊髓损伤后神经元的保护作用.     

重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗急性放射性口腔炎的疗效观察

目的探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子(扶济复)对急性放射性口腔炎的临床价值。方法40例接受头颈部放疗的病人分为两组,用药组采用扶济复,对照组采用0.9%氯化钠和2.5%碳酸氢钠溶液交替含漱,所有病人均于放疗2周末开始用药,直至放疗结束。结果用药组放射性口腔炎的发病率明显低于对照组(P<0.005),用药组放射性口腔炎治疗的有效率高于对照组(P<0.05)。结论扶济复对治疗急性放射性口腔炎有明显疗效。     

大鼠肌内注射重组人碱性成纤维细胞生长因子的毒性研究

目的：观察大鼠重组人碱性成纤维细胞生长因子（rhbFGF)的毒性反应,提供毒性反应的靶器官及其损伤的可逆性,确定无毒反应剂量,为临床安全用药提供参考。方法：实验分4组,即溶剂对照组及8,32和128μg/L给药组,各组试验动物分别在15,30d和停药后30d活杀,中和抗体检测在20和25d各活杀6只动物。分别观察外周血各项指标,血清系列化10项指标及血清中大鼠抗入rhbFGF滴度等。结果：128μg/(kg.d)肌内注射30d,其主要毒性表现为外周血红细胞数和血红蛋白含量降低。病理检查显示,肾小球内细胞核大的足细胞数目增多,胞体增大,胞浆内出现大小不等的空泡,胸骨皮质及小梁较对照组略有增粗等。结论：128μg/(kg.d)是rhbFGF的明显中毒剂量,主要毒性靶器官是肾脏。32μg/(kg.d)剂量可产生轻度的毒性反应,而μg/(kg.d)剂量无明显毒性作用,为受试药安全剂量。     

胰岛素样生长因子Ⅱ及碱性成纤维细胞生长因子在肾上腺疾病组织中的表达

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在肾上腺疾病发生过程中所起的作用及临床意义。方法收集标本分为肾上腺嗜铬细胞瘤组、皮髓质增生组、皮质腺瘤组、正常肾上腺组织组各15例,采用免疫组织化学二步法检测各组IGF-Ⅱ及bFGF蛋白在各组的表达情况。结果IGF-Ⅱ及bFGF蛋白表达水平在四组中表达差异均有统计学意义（均P〈0．05）,表达率从高到低依次为人肾上腺嗜铬细胞瘤组、肾上腺皮髓质增生组、肾上腺皮质腺瘤组,而正常肾上腺组皆地低表达或不表达。各组中IGF-Ⅱ及bFGF蛋白表达均呈正相关（均P〈0．05）。前三组IGF-Ⅱ及bFGF蛋白阳性细胞面积与血压均存在正相关关系（均P〈0．05）。结论IGF-Ⅱ及bFGF蛋白在人肾上腺皮髓质增生症、皮质腺瘤,特别是嗜铬细胞瘤的发生发展中及其高血压的形成可能起重要作用,同时二者之间存在协同作用。     

血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在正常成人皮肤中的表达及其意义

目的探讨两种促血管生成因子血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在正常成人皮肤组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化SP法检测20例正常成人皮肤组织VEGF、bFGF的表达及分布.结果正常成人皮肤组织中,VEGF、bFGF阳性细胞均主要位于基底层,呈弱阳性表达.结论正常成人皮肤组织中,基底层是表达VEGF、bFGF的主要细胞,在维持真皮微血管的正常生理功能中可能发挥重要作用.     

重组人碱性成纤维细胞生长因子等电聚焦分析

目的：建立重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳法。方法：利用载体两性电解质和聚丙烯酰胺,采用毛细管灌胶不自制平板胶,并从凝胶浓度、电极溶液等方面优化重组人成纤维细胞生长因子的等电聚焦电泳条件。结果：pH梯度曲线线性因归方程为Y＝－1．2593X＋10．808,γ=0.9939。重组人成纤维细胞生长因子的等电点为9．4（n=5,RSD=1.0％）。结论：该法简便,实用,重复性好,为碱性多肽或蛋白的等电点测定提供了实验依据。     

碱性成纤维细胞生长因子在骨不连和骨折正常愈合组织中的表达差异

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子在骨不连和骨折正常愈合组织中的表达差异。方法于骨不连手术和骨折正常愈合取出内固定手术中收集骨痂及周围疤痕组织标本,利用ABC免疫组织化学方法检测碱性成纤维细胞生长因子在骨痂组织中的分布。结果骨折正常愈合取出内固定手术收集的骨痂中碱性成纤维细胞生长因子阳性指数明显高于骨不连手术。结论碱性成纤维细胞生长因子参与了修复过程,在骨折愈合中发挥着重要的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在创面修复中的应用

临床上各种慢性难愈合创面、烧伤创面 ,由于具有病因复杂、种类多、病程长等特点 ,是临床创面修复的一大难题[1] 。我们自 1999年以来采用外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｕｔｈｆａｃｔｏｒ ,ｂＦＧＦ)促进这类创面修复 ,取得显著临床效果 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　临床资料　本组病人 70例 ,男 6 7例 ,女 3例 ;年龄最小者 6个月 ,最大者 86岁 ;慢性溃疡 2 9例 ,肉芽创面 2 6例 ,烧伤创面 8例 ,挤压伤新鲜创面 7例 ;创面病程最长者达 2 76天。1 2　治疗方法与疗效判定1 2 1　药品　采用珠…