罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠胰岛素增敏作用及对解偶联蛋白基因表达的影响

目的 :观察罗格列酮对高脂喂养胰岛素抵抗 (IR)大鼠动物模型的胰岛素增敏作用及对解偶联蛋白(UCPs)基因表达的影响。方法 :2 4只大鼠随机分为普通饮食组 ,高脂对照组 ,罗格列酮组。后 2组给予高脂饲料喂养 ,制作胰岛素抵抗 (IR)模型。 4周后取罗格列酮组大鼠给予罗格列酮 (8mg·kg-1·d-1)灌胃 ,其他 2组给予安慰剂灌胃 2周。以高胰岛素 正葡萄糖钳夹实验评价胰岛素敏感性的变化 ,用半定量的RT PCR检测UCPs基因mRNA的改变。结果 :罗格列酮组与高脂对照组比 ,血清游离脂肪酸降低 (P <0 .0 5 ) ,葡萄糖输注率增加 (P <0 .0 1)。与高脂对照组比 ,罗格列酮组大鼠肌组织UCP 3基因mRNA表达增高 4 6 .2 % ,肝脏UCP 2基因表达增加 34.9% ,且体重增加明显。结论 :罗格列酮有降低游离脂肪酸、改善胰岛素敏感性的作用 ,但可引起体重增加。胰岛素增敏作用可能与UCPs基因表达增强有关     

解偶联蛋白2基因表达与胰岛β细胞分泌功能的关系及机制

目的 观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨解偶联蛋白2(UCP2)及相关的氧化应激在其中的作用及机制.方法 8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组,20只)和高脂饲料组(HF组,20只).饲养20周检测以下指标:(1)血浆硝基酪氨酸,丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹试验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注试验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较两组大鼠胰岛细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)以及UCP2mRNA表达的变化.(5)免疫组织化学染色及图像分析检测IRS-1,IRS-2在两组大鼠胰岛中的表达.结果 (1)HF组血浆硝基酪氨酸(0.17±0.01)μmol/L和MDA(22±5)nmol/L水平高于NC组(0.14±0.02)μmol/L,(13±3)nmol/L,(P均＜0.05),GSH水平(103±9)mg/ml明显低于NC组(142±9)mg/l,(P＜0.01);(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)较Nc组明显降低(P＜0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降(P＜0.01);(3)HF组胰岛细胞IRS-1及IRS-2mRNA表达分别降低42.3%、28.1%,UCP2表达增高32.5%(P均＜0.05).(4)HF组胰岛IRS-1和IRS-2的表达较对照组分别降低26.3%(P＜0.05)和11.2%(P＞0.05).(5)UCP2与胰岛细胞IRS-1 mRNA表达呈负相关(r=-0.621,P＜0.05);且与IRS-2mRNA表达也呈负相关(r=-0.416,P＜0.05).结论 长期高脂饲养能导致大鼠胰岛细胞胰岛素信号分子表达下降,β细胞胰岛素分泌功能受损,具体机制推测与UCP2相关的氧化应激增强有关.     

2型糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激与胰岛素抵抗的关系

日的探讨骨骼肌组织氧化应激在2型糖尿病（T2DM）胰岛素抵抗发生发展过程中的作用,方法SD（Sprague-Dawley）雄性大鼠以高脂、高胆固醇灌胃加糖水喂养（HFD）,诱发胰岛素抵抗（Insulin Resistance,IR）,记录饮食、饮水、体重变化,3月后两次腹腔内注射链脲佐菌素（STZ,20mg／kg）诱发高血糖症,继续高脂、高胆固醇、高糖喂养2月,造成实验性2型糖尿病大鼠模型,检测空腹血清的血糖（FGLU）、糖化血清蛋白（FMN）、胰岛素（INS）、C肽（C-P）、超敏C反应蛋白（CRP）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCHOL）水平和胰岛素抵抗指数（IR）及骨骼肌组织内的活性氧和抗氧化物酶活性．结果STZ＋HFD组大鼠的FGLU、FMN、INS、C-P、CRP、TG、TCHOL和IR明显高于HFD组（P〈0．05）,HFD组高于正常对照组（P〈0．05）,成模率可达到90％;骨骼肌组织中一氧化氮（NO）水平较正常对照组显著增加（P〈0.05）;还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）较正常对照组显著降低（P〈0.05）．总一氧化氮合成酶（TNOS）、诱导型一氧化氮合成酶（INOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽还原酶（GR）与对照组之间差异无统计学意义（P〈0．05）．结论高糖、高脂、高胆固醇饮食可能通过骨骼肌组织氧化损伤、干扰骨骼肌组织胰岛素信号转导通路而诱导了IR。     

间歇性低氧对大鼠解偶联蛋白2基因表达的影响

目的 探讨间歇性低氧对大鼠脂肪组织中解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响.方法 将40只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别置于模拟海拔4000米的常温、低氧氧舱中(0天、1天、7天和21天),每天8小时,应用半定量的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠白色脂肪组织(WAT)中UCP2 mRNA的表达水平.结果 大鼠置于低氧环境21天后,其WAT中UCP2 mRNA的表达水平较其他3组显著降低.结论 随着低氧时间的延长,UCP2 mRNA的表达水平降低;UCP2 mRNA表达的降低可能是对间歇性低氧改变的一种适应性反应.     

解偶联蛋白2对非酒精性脂肪肝病肝细胞氧化应激的影响

非酒精性脂肪肝是临床常见疾病,其发病机理尚未完全明确,氧化应激被认为是其机理之一,文章就解偶联蛋白2对非酒精性脂肪肝肝细胞氧化应激的影响作一综述。     

解偶联蛋白-2与2型糖尿病的关系

2型糖尿病（T2DM）是当今危害人类健康的主要疾病之一，其基本的病理生理改变是胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能缺陷，而造成这些变化的病因及发病机制尚未阐明。偶联蛋白（UCP）是线粒体内膜上的一种转运蛋白，它能降低线粒体内膜上的质子梯度，[第一段]     

解偶联蛋白2的研究进展

解偶联蛋白（uncoupling protein,UCP）属于线粒体载体蛋白的亚类,包括UCP1～UCP5。UCPs定位在线粒体的内膜上。它们通过驱散质子梯度使呼吸链的氧化作用与ADP的磷酸化作用解偶联,减少ATP的合成。它们在氨基酸组成上有一定程度的同源性。UCPs借助于其信号序列,通过Tim10／Tim12／Tim22通道向线粒体内膜定向转运。UCPs的共同特征是每个单体具有6个跨膜域,二聚体发挥转运功能。但其表达的主要组织不同,主要的作用也不尽相同。特别是近年来的研究发现,UCP2参与能量代谢、子宫内膜退化、活性氧的产生、衰老等过程。并且与非乙醇性脂肪肝、动脉粥样硬化、局部缺血以及缺血再灌注损伤、抗肥胖及2型糖尿病等有着密切的关联性,故引起人们的广泛重视。     

甲状腺激素对大鼠解偶联蛋白-2基因表达的影响

目的:探讨甲状腺激素对大鼠骨骼肌组织(SM)、肝组织(LV)和白色脂肪组织(WAT)中解偶联蛋白-2(UCP2)基因表达的影响。方法:正常雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、甲状腺功能亢进(甲亢)组和甲状腺功能低下(甲低)组,应用左旋甲状腺素钠和甲巯咪唑造成大鼠甲亢和甲低状态;用放免法检测血清总T3、T4的浓度;用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SM、LV和WAT中UCP2mRNA的表达水平。结果:与对照组相比,甲亢组大鼠SM、LV和WAT中UCP2mRNA的水平分别增加了65%、50%和40%,甲低组大鼠SM、LV和WAT中UCP2mRNA的水平分别降低了9%、24%和20%,差异均具有统计学意义,P<0.05。结论:过量甲状腺激素对SM、LV和WAT中UCP2基因的表达具有上调作用,甲状腺激素水平过低则下调SM、LV和WAT中UCP2基因的表达。     

胰岛素信号转导异常与骨骼肌胰岛素抵抗

骨骼肌是胰岛素作用的主要靶位。在餐后状态,80 %以上的葡萄糖由骨骼肌负责代谢。已知体内葡萄糖的跨膜转运是葡萄糖进一步代谢的限速步骤,胰岛素在其中发挥了重要作用。在胰岛素介导骨骼肌摄取葡萄糖的复杂生化过程中,其大致的步骤是:胰岛素-胰岛素受体-胰岛素受体底物-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B和(或)非典型蛋白激酶C -葡萄糖转运体-葡萄糖进入组织细胞。胰岛素信号转导异常以及参与葡萄糖代谢的相关分子的改变,是引起肌组织胰岛素抵抗的重要原因。1　胰岛素受体异常胰岛素受体(IR)由α、β亚基组成,α亚基表达于细胞膜的表面,能与胰岛…     

2型糖尿病患者高促甲状腺激素水平与胰岛素抵抗、氧化应激的关系

目的通过8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)探讨2型糖尿病患者高促甲状腺激素(TSH)水平与胰岛素抵抗(IR)及氧化应激(OS)的关系。方法选取124例住院治疗的2型糖尿病高TSH水平患者为研究组,选取124例同期住院治疗的2型糖尿病正常TSH水平患者为对照组。于入院第2天上午7:00~9:00空腹测量身高、体重、血压,计算体重指数(BMI);空腹采静脉血检测甲状腺功能、血糖、胰岛素、糖化血红蛋白(HbA1c)和8-iso-PGF2α。结果两组年龄、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、病程、Hb A1c比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组BMI(P=0.014)、8-iso-PGF2α(P<0.001)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(P<0.001)明显高于对照组。以Ln TSH为因变量的多元逐步回归分析显示,8-iso-PGF2α是影响高TSH水平的主要因素(P<0.001),HOMA-IR为次要因素(P=0.015)。结论 2型糖尿病患者高TSH水平与IR及OS有关,可作为2型糖尿病合并甲状腺功能减退症或亚临床甲状腺功能减退症抗氧化治疗的理论依据。     

多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗和氧化应激的关系

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗(IR)状态与氧化应激的关系.方法:PCOS患者80例,包括IR组患者43例和非IR组患者37例,另取因输卵管或男性原因不育而月经规律、内分泌激素正常的对照组患者30例,检测各组患者空腹血糖( FSG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)并检验...     

吡格列酮和非诺贝特对高脂饲养大鼠脂联素与胰岛素抵抗的影响

目的探讨吡格列酮、非诺贝特及两者联合应用对高脂饲养大鼠脂联素表达与胰岛素抵抗(IR)的影响。方法将75只SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组)15只,高脂饮食组(高脂组)60只。高脂组随机分为非诺贝特组(FF组)、吡格列酮组(PIO组)、联合组(FF-PIO组)和高脂对照组(HF组),各15只。分别测定体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标。采用Westernblot方法对各组大鼠腹部皮下脂肪中脂联素蛋白水平进行检测。结果HF组的体重、FFA、TG、FPG、FINS显著高于NC组,皮下脂肪中脂联素蛋白表达明显低于NC组(P<0.01)。与HF组比较,FF组的体重减轻、FFA、TG、TCH、FPG、FINS降低(P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加,但差异无显著性(P>0.05);PIO组FFA、FPG、FINS降低(P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加(P<0.05);FF-PIO组的体重、FFA、TG、TCH、FPG、FINS降低(P<0.05或P<0.01),皮下脂肪中脂联素增加(P<0.01)。结论吡格列酮、非诺贝特及联合应用可以一定程度地减轻肥胖对大鼠皮下脂肪中脂联素蛋白表达的抑制作用,改善肥胖引起的IR。     

肝脏和肌肉脂肪异位沉积与空腹高胰岛素血症的发生

目的:研究高脂高糖饲养大鼠血浆游离脂肪酸和肝脏、肌肉甘油三酯沉积与胰岛素抵抗的关系.方法:健康雄性9周龄SD大鼠20只,随机分为实验组(n=10)高脂高糖饲料饲养和对照组(n=10)普通饲料饲养.实验6 wk,比较2组大鼠血浆游离脂肪酸(FFA),血清胰岛素(FINS),空腹血糖(FPG),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及肝脏甘油三酯(TG)异位沉积的情况.结果:在实验6 wk与对照组比较,① FFA (mmoL/L,0.74±0.04 vs 0.62±0.05,P＜0.01);② FINS(mU/L,31.96±2.58 vs 12.64±1.35,P＜0.01);③ FBG (mmoL/L,5.32±0.55 vs 5.12±0.47,P＞0.01);④ HOMA-IR (7.57±1.11 vs 2.87±0.35,P＜0.01)均升高;⑤体内脂肪相对含量 (g,8.81±1.27 vs 6.65±0.88,P＜0.01);⑥油红染色病理切片计算机半定量分析,肝脏组织中TG含量高于正常对照组(99.5±4.7 vs 128.5±3.9,P＜0.01),肌肉(127.6±3.1 vs 134.7±2.9,P＜0.01)胰腺的TG沉积无明显差异(P＞0.05).结论:高脂高糖饲养可以诱导大鼠胰岛素抵抗,其胰岛素抵抗的形成与FFA的增加及肝脏和肌肉组织TG异位沉积有关.     

精子的氧化损伤与线粒体解偶联蛋白2(UCP2)表达的关联性

目的 通过研究过氧化氢（hydrogen peroxide, H₂O₂）处理对精子活性氧的（reactive oxygen species,ROS）产生,精子运动参数,精子DNA碎片化程度及UCP2 蛋白表达的影响,探讨精子的氧化损伤与UCP2 蛋白表达的相关性。方法 采用密度梯度离心法处理精液,选取离心后的沉淀精子为研究对象,以终浓度分别为50μmol/L,100μmol/L和200μmol/L的过氧化氢处理精子¹H,同时设立对照组（0μmol/L）。流式细胞仪检测各组精子活性氧（ROS）含量;计算机辅助精液分析系统（CASA） 分析各组精子运动参数;精子染色质结构分析试验（SCSA）检测精子DNA碎片化程度;Western blot法检测各组UCP2蛋白的表达情况。分析精子的氧化损伤与UCP2表达的关联性。结果 随着过氧化氢作用浓度的增加,各处理组的ROS含量,DNA碎片化程度和UCP2蛋白的表达均存在增加,且与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;同时各处理组精子运动参数等均呈下降趋势,尤其是100μmol/L和200μmol/L组,除侧摆幅度参数外,其他参数与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 过氧化氢作用后对精子造成氧化损伤（ROS升高）,导致精子运动参数下降和DNA碎片化程度增加,对应的UCP2 蛋白表达的增加,证明精子的氧化损伤与UCP2 蛋白的表达存在关联性,提示UCP2可能参与精子体内的抗氧化作用。     

糖皮质激素对大鼠解偶联蛋白mRNA表达的影响

目的:研究不同剂量的糖皮质激素对大鼠解偶联蛋白(UCP)基因表达的影响. 方法:用高脂饲料诱导SD大鼠肥胖模型,普通饲料饲养的大鼠设为普通大鼠.普通大鼠和肥胖大鼠均随机分为等渗盐水组、糖皮质激素小剂量组和大剂量组,连续20d分别腹腔注射等渗盐水2ml/kg、琥珀酸氢化可的松5和15mg/kg.观察不同剂量糖皮质激素对大鼠的影响,并应用实时荧光定量RT-PCR方法,测定各组大鼠棕色脂肪及骨骼肌UCP mRNA表达水平. 结果:普通大鼠和肥胖大鼠的棕色脂肪和骨骼肌中的UCP1、UCP2 mRNA表达水平在小剂量和大剂量糖皮质激素组均下降(P<0.05).普通大鼠棕色脂肪的UCP3 mRNA糖皮质激素小剂量组和大剂量组分别下降至34.71%和29.00%,但在肥胖大鼠棕色脂肪中UCP3 mRNA表达水平却上升至186.48%和204.76%.小剂量糖皮质激素使普通大鼠骨骼肌的UCP3 mRNA升至132.28%,大剂量糖皮质激素使其下降至76.42%,肥胖大鼠骨骼肌的UCP3 mRNA在小剂量和大剂量糖皮质激素组分别下降到42%和32.30%. 结论:糖皮质激素能有效地调节大鼠UCP mRNA的表达,这种调节在能量代谢中起一定的作用,但UCP引起的体质量变化更多取决于能量的摄入和消耗,UCP是否为糖皮质激素干预后大鼠体质量下降的一个重要因素尚须进一步研究.     

水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响

目的：探讨水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响。方法：利用高脂饮食（ＨＦ）胰岛素耐受（ＩＲ）大鼠模型,观察水飞蓟宾对ＩＲ的治疗作用,与胰岛素增敏剂ＣＳ－０４５进行对照研究。用等热量ＨＦ饲养正常大鼠４周,分别以水飞蓟宾和ＣＳ－０４５灌胃治疗３周,测定动物体质量、血压、血糖、胰岛素、血脂、组织糖原、三酰甘油（ＴＧ）及胰岛素敏感性（Ｋ值）。结果：ＨＦ饲养４周时,大鼠胰岛素、血脂明显升高,肝脏和肌肉ＴＧ含量升高,糖原含量下降,胰岛素敏感性下降（Ｋ值为５．６３±０．７２）,与正常对照组（７．７７±０．３５）比较,差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）,７周时Ｋ值进一步下降。水飞蓟宾和ＣＳ－０４５治疗３周后,胰岛素敏感性改善,Ｋ值为５．０９±０．３９ｖｓ６．２２±０．５６（Ｐ＜０．０１）,组织糖原含量明显增加（Ｐ＜０．０１）。结论：水飞蓟宾能改善ＨＦ大鼠的胰岛素敏感性,其机制可能与水飞蓟宾促进糖原合成有关。     

Relationship between tyrosine phosphorylation and protein expression of insulin receptor and insulin resistance in gestational diabetes mellitus

Summary： The relationship between tyrosine phosphorylation （TP） and protein expression of insulin receptor （InsR） and insulin resistance （IR） in patients with gestational diabetes mellitus （GDM） was investigated. The InsR expression and TP in skeleton muscle tissue were determined by Western blotting and immunoprecipitation in women with GDM （GDM group, n=22）, normal pregnant women （normal pregnancy group, n=22） and normal non-pregnant women （normal non-pregnant group, n=13）. Fasting plasma glucose （FPG） and fasting insulin （FINS） were measured by oxidase assay and immunoradioassay. The results showed that the levels of FPG （5.61±0.78 mmol/L）, FINS （15.42±5.13 mU/L） and Ho- meostasis model assessment-IR （HOMA-IR） （1.21±0.52） in GDM group were significantly higher than those in normal pregnancy group （4.43±0.46 mmol/L, 10.56±3.07 mU/L and 0.80±0.31 respectively） （P〈0.01）. The levels of FINS and HOMA-IR in normal pregnancy group were significantly higher than those in normal non-pregnant group （7.56±2.31 mU/L and 0.47±0.26 respectively） （P〈0.01）. There was no significant difference in the InsR expression level among the three groups （P〉0.05）. TP of InsR with insulin stimulation was significantly decreased in GDM group （0.20±0.05） as compared with normal pregnancy group （0.26±0.06） （P〈0.01）. TP of InsR with insulin stimulation in normal pregnancy group was lower than that in normal non-pregnant group （0.31±0.06） （P〈0.01）. TP of InsR with insulin stimu- lation was negatively related with HOMA-IR in GDM group （r=-0.525, P〈0.01）. There was no correlation between the protein expression of InsR and HOMA-IR in GDM group （r=-0.236, P〉0.05）. It was suggested that there is no significant correlation between the protein expression of InsR in skeletal muscle and IR in GDM, but changes in TP of InsR are associated with IR in GDM.     

黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制研究

目的 :探讨黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制。方法 :2 4只 SD大鼠随机分为正常对照组、高脂对照组、高脂黄芪干预组 ,每组各 8只 ,分别予以标准饲料和高脂饲料 ,干预组同时灌服黄芪。 7周后采用葡萄糖 -胰岛素耐量试验测量大鼠胰岛素敏感性值 (K) ,并观察不同部位脂肪组织质量的变化及其与 K值的关系。应用 TU NEL 法观察腹腔脂肪细胞凋亡的变化。结果 :7周后 ,高脂干预组大鼠经黄芪治疗后与正常对照组相比 K值减小 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量及脂肪细胞凋亡数未见明显差异 ,但与高脂对照组相比 K值明显增大 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量明显减少 (P<0 .0 1 ) ,脂肪细胞凋亡增加 (P<0 .0 1 )。 结论 :胰岛素抵抗与脂肪组织分布关系密切 ;黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制可能是通过调控脂肪细胞凋亡 ,影响脂肪细胞的分布 ,从而改善胰岛素抵抗     

慢性应激对大鼠海马线粒体解偶联蛋白4及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨慢性应激对抑郁模型大鼠海马线粒体解偶联蛋白4（UCP4）及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 应用慢性轻度不可预见性的应激制作抑郁症大鼠模型,随机分成2组：对照组、模型组.用流式细胞术分别检测海马组织细胞凋亡率、线粒体膜电位;用酶标仪检测乳酸脱氢酶（LDH）含量;用免疫组化检测神经细胞数目;用Western blot法检测UCP4及Bcl-2蛋白表达水平.结果 慢性应激干预后,模型组中海马神经细胞凋亡率[（4.35±0.19）％]和LDH含量[（445.5±91.70）U/mg）]明显升高,与正常对照组[（0.34±0.06）％,（167.2±63.40） U/mg）]相比,差异有统计学意义（P＜0.01）.与对照组相比[（72.50±4.25）个],模型组中海马组织神经细胞数目[（45.30±2.54）个]和线粒体膜电位有所下降.模型组中UCP4及Bcl-2蛋白水平表达下调.结论 抑郁症大鼠海马组织存在明显的神经元凋亡坏死,这可能与线粒体膜电位下降,UCP4及Bcl-2蛋白表达下调有关.