区域性脑灌注与婴幼儿脑保护的研究进展

婴幼儿复杂先天性心脏病和主动脉弓重建术后发生的脑损伤仍是对机体的一个严重威胁。区域性脑灌注（regional cerebral perfusion,RCP）是婴幼儿深低温停循环（deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）中的一种有效脑保护方法,     

内皮祖细胞在缺血性脑卒中诊治中的研究进展

内皮祖细胞是一种兼有造血干细胞和内皮细胞部分特征和功能的干细胞。内皮祖细胞可作为缺血性脑卒中的生物学标志物,与缺血性的损伤程度和预后有紧密联系,还具有促进血管发生、形成新的血管以及保护神经、修复缺血性脑卒中后受损神经的作用。     

婴幼儿深低温停循环下的脑损伤研究进展

<正>近20年来,婴幼儿先天性心脏病术后的病死率显著下降,而中枢神经系统(CNS)的并发症相比之下就显得极为重要。深低温停循环技术(DHCA)是在治疗儿童复杂心血管畸形手术中广泛采用的一种体外循环(CPB)方法。近年来有关DHCA术后CNS特别是脑并发症的研究报道亦渐增多。兹对脑损伤的机制及脑保护问题作一综述。     

甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑保护作用的研究

目的 观察甲基强的松龙（MP）对深低温停循环（DHCA）大鼠脑N-甲基-D-天门冬氨酸受体R1（NMDAR1）表达的影响,探讨MP对DHCA大鼠脑保护作用的机制。方法 制作大鼠DHCA模型。雄性SD大鼠175只,随机分为假手术组、DHCA模型组和MP处理组。观察DHCA60 min,再灌注2、6、12 h及1、2、3、7 d时NMDAR1蛋白表达的变化以及脑组织超微结构变化。结果 免疫组化结果显示,DHCA模型组和MP处理组大鼠NMDAR1蛋白表达均升高,于1 d到达高峰,后逐渐降低,于再灌注7 d恢复至正常水平。MP处理组大鼠再灌注后2、6、12 h,1、2 d5个时间点NMDAR1表达明显低于模型组（P〈0.01）。脑组织超微结构观察发现MP能抑制DHCA脑细胞凋亡。结论 MP对DHCA大鼠脑组织具有保护作用,其作用机制之一可能是与抑制NMDAR1蛋白表达有关。     

巴曲酶对血管内皮细胞影响的研究进展

已知国内外对巴曲酶进行了大量的动物和临床探究,在保护血管内皮细胞方面取得了较大的进展,例如从细胞形态学、内皮标记物、黏附分子以及血管内皮祖细胞等均具有保护血管内皮细胞的作用,具体机制并没有很明确的阐述。血管内皮细胞结构功能的转变与恢复可能与巴曲酶对其微循环的改善有重要关系,通过保护血管单元促进内皮祖细胞受刺激形成新生血管来改善循环,提高内皮细胞功能可能是其重要的研究机制。     

血管内皮祖细胞移植对脓毒症大鼠的保护作用研究

目的:探讨血管内皮祖细胞移植对脓毒症大鼠的保护作用.方法:盲肠结扎穿孔法构建脓毒症大鼠模型,尾静脉移植血管内皮祖细胞,观察假手术组、模型组及血管内皮祖细胞移植组大鼠的尾动脉平均动脉压、体温、呼吸频率及脉率等主要生命体征,HE染色法检测肺部损伤情况、PAS染色法检测肾脏损伤情况,并用荧光显微镜观察大鼠肺部及肾脏血管内皮祖细胞的聚集情况.结果:盲肠结扎大鼠的尾动脉平均动脉压下降,体温、脉率及呼吸频率上升,但血管内皮祖细胞移植大鼠的生命体征都得到改善;肺部HE染色及肾脏PAS染色显示血管内皮祖细胞移植组肺部炎症细胞浸润及肾小球基底膜损伤均较模型组减轻,追踪血管内皮祖细胞的定位发现,在肺部及肾脏都有血管内皮祖细胞的聚集.结论:血管内皮祖细胞移植可以迅速聚集在血管损伤部位,对脓毒症大鼠的器官功能受损具有保护作用.     

深低温停循环与脑保护的研究进展

深低温停循环技术（deep hypothermic circulatory arrest，DHCA）是治疗复杂心脑血管疾病的重要辅助手段。DHCA于1959年首次应用于心脏直视手术，现已被许多医疗中心应用于复杂先心病矫治、成人大血管手术、复杂颅内动脉瘤夹闭及器官移植手术中。随DHCA应用的日趋广泛，有关DHCA术后中枢神经系统并发症的报道亦渐增多，目前已成为医技人员改善患者术后生存质量所关心的主要问题，本文仅就近年来有关DHCA中脑保护方法的进展作一综述。     

内皮祖细胞的培养与扩增研究进展

内皮祖细胞移植已经成为治疗缺血性疾病的一种新策略,但内皮祖细胞数量不足成为限制其治疗应用的主要障碍。如何培养和有效扩增内皮祖细胞具有十分重要的意义。内皮祖细胞获取的方法繁多,他汀类药物、雌激素、促红细胞生成素等对增加内皮祖细胞数量有着积极的作用,现就此内容进行综述。     

黄体酮通过调控内皮祖细胞水平促进老年脑创伤大鼠血管再生

目的观察黄体酮对老年大鼠脑创伤后内皮祖细胞的影响,并分析黄体酮促进脑创伤大鼠血管再生影响的作用机制。方法采用液压打击造成大鼠颅脑创伤模型,应用流式细胞仪测定大鼠循环血中内皮祖细胞数量,通过免疫组织vWF染色观察皮质区和海马区血管密度。结果黄体酮干预后3d、7d循环血中内皮祖细胞数量明显高于对照组(P0.05)。黄体酮治疗组微血管密度明显高于创伤组(P0.05)。结论黄体酮可有效增强脑创伤大鼠的循环血液内皮祖细胞的动员,促进损伤区和同侧海马的血管生成,为临床治疗脑创伤患者提供了新思路。     

人工标记示踪血管内皮祖细胞与糖尿病性视网膜病变的治疗

血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPC）是血管内皮的前体细胞,亦称为血管母细胞（angioblasts）。1997年,Asahara等人首次从成年人外周血中分离培养出内皮祖细胞（EPC）,并证实血管内皮祖细胞不仅参与胚胎期的血管发育,在成体血管新生中起重要作用。内皮祖细胞不仅可直接应用于血管发育异常性疾病的治疗,而且也可作为促血管生长因子的载体,用于活体的基因治疗。可以设想通过体外移植血管内皮祖细胞,增强某些缺血性疾病的血管生长,为治疗缺血性疾病提供了新的思路。     

深低温停循环中不同脑灌注方式脑保护的实验研究

目的 比较深低温停循环（DHCA）中不同脑灌注方法下脑组织氧代谢、脑组织温度变化及脑皮质超微结构改变,评价不同灌注方式的脑保护效果。方法 健康成年杂种犬15只,随机分为3组。Ⅰ组单纯行DHCA,Ⅱ组DHCA＋RCP,Ⅲ组DHCA＋SACP。转流降温至鼻咽部温18℃时停循环90min,期间采用不同脑灌注保护技术,然后复温,再灌注90min。结果 降温期颈静脉氧饱和度（SjvO2）上升;停循环后各组SjvO2均有不同程度下降,DHCA90min时,Ⅲ组SjvO2明显高于Ⅰ、Ⅱ组,差异显著（P=0．000）。停循环期各组脑组织温度均有缓慢升高,以Ⅰ组最为明显,与Ⅱ、Ⅲ组相比有显著性意义（P=0．000）;电镜观察DHCA组的脑组织超微结构损害最重,RCP组次之,SACP组脑组织超微结构基本正常。结论 单纯DHCA、DHCA＋RCP中脑氧供需不平衡,RCP不能提供足够的脑营养,对DHCA期脑氧代谢无明显改善,但可保持脑部低温,有助于脑保护。SACP能保持脑氧供需平衡,提供充足的氧和营养供应,有效保持脑部低温．有明显的脑保护意义。     

不同灌注方法对深低温停循环下脑保护的实验研究

目的探讨不同灌注方法在深低温停循环下（DHCA）的脑保护的作用。方法实验动物选用健康白乳猪幼猪（农科院提供）40只。随机分为4组,每组10只。A组：单纯DHCA组;B组：DHCA＋逆行性脑灌注（RCP）;C组：DHCA＋单侧顺行性脑灌注（U—SACP）;D组：DHCA＋双侧顺行性脑灌注（B—SACP）。对照分析四组组间分别于CPB前（T1）、DHCA后30min（T2）、60min（T3）、90min（T4）和复温再灌注30min（T5）氧摄取率的变化。采用原位末端标记法（TUNEL染色法）观察和测定脑组织神经细胞凋亡的情况。结果与A组相比,B组、C组和D组可显著减少幼猪DHCA后神经细胞凋亡数目（P〈0．05）,T2、T3和T4 3个时间窗脑氧摄取率明显低于A组,差异有显著意义（P〈0．05）。A组可见明显神经细胞凋亡改变,B组仅见中等程度神经细胞凋亡改变,C组和D两组见少量神经细胞凋亡改变,A组与B组,C组和D组、B组与C组和D组差异具统计学意义（P〈0．05）,但是C组和D组差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论SACP与RCP脑保护作用均优于DHCA,U—SACP与B—SACP脑保护作用好于RCP,但是两者差距没有统计学意义。     

深低温停循环不同时间点犬脑皮质半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3mRNA的表达

目的利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3 mRNA(Caspase-3 mR-NA)在深低温停循环(DHCA)过程中的表达,探讨DHCA对神经细胞凋亡的影响,为深低温停循环后脑损害的研究和防治提供资料。方法选择健康成年杂种犬10只,建立DHCA模型,分别于体外循环0 min、停循环0 min、停循环30 min、停循环60 min、复温再灌注45 min取脑皮质迅速冻存,待全部动物实验结束后统一行实时荧光PCR定量检测Caspase-3mRNA的表达情况。结果体外循环后特别是降温后Caspase-3 mRNA的拷贝数先下降,DHCA 0 min达最低值,随着DHCA过程的延长,Caspase-3 mRNA的表达逐渐增强,复温再灌注45 min达最大值,不同时间点Caspase-3 mRNA的拷贝浓度间差异有显著性意义(F=42.71,P<0.001)。复温再灌注45 min后Caspase-3 mRNA的拷贝数均显著高于此前各时间点(P<0.01)。结论DHCA中随着缺氧的加重可诱导Caspase-3 mRNA的表达,随着DHCA时间的延长,Caspase-3 mRNA表达升高。复灌后表达达最高值。     

主动脉弓部手术中的脑保护方法

目的报告累及主动脉弓动脉瘤手术中脑保护的方法。方法 105例累及弓部动脉瘤体外循环中,99例采用深低温停循环顺行性脑灌注,2例深低温停循环上腔静脉逆行脑灌注,4例单纯深低温停循环。结果 105例深低温停循环病例中,短暂性脑损伤11例,永久性脑损伤3例,吻合口岀血6例,肺部渗漏1例,肾功能不全1例,低心排2例,感染3例,死亡11例。结论累及主动脉弓部动脉瘤手术脑保护时,选择适当的脑保护方法,减少因缺血造成的神经系统损伤是体外循环管理的关键所在。     

中枢神经系统损伤与保护方法的评估

目的 通过系列的动物实验及临床观察，探讨如何对心脏手术围术期中枢神经系统的损伤程度以及不同方法的。方法 对体外循环(CPB)、停循环以及上腔静脉逆行灌注(RCP)期间的血液灌注进行观察，检测组织生化酶学和活体脑组织钙离子荧光强度，并进行组织病理及电镜检测。采用便携式眼底镜在临床手术患者进行前瞻性观察。结果 眼底血管造影、彩色多普勒超声波检查和同位素^99mTc—ECD均证实：逆行灌注期间的大脑灌注与单纯停循环相比，RCP能够明显减轻停循环后一氧化氮(NO)的产生量以及钙超载的发生，维持组织较高的Na^ —K^ ATP酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力，较少丙二醛产生，从而减轻停循环后神经细胞的缺血缺氧程度。便携式眼底镜在临床手术患者同样观察到逆灌期间的血液灌注。结论 激光共聚焦显微镜技术和核磁共振仪检测脑组织中钙超载以及NO产生量、多种酶学检测结合组织病理检查可作为动物实验中对神经细胞损伤程度评价的手段。同位素^99mTc—ECD、眼底血管荧光造影、彩色多普勒超声波检查可以评定脑组织的灌注状况，是直观而敏感的观察脑灌注的方法。     

左旋精氨酸对犬深低温停循环脑组织代谢的影响

目的 利用犬深低温停循环(DHCA)动物模型,观察左旋精氨酸(L-arg)预处理对深低温停循环中犬脑组织代谢的影响.方法 健康成年杂种犬15只,随机分为3组(n=5).对照组:生理盐水假处理;L-arg预处理组:停循环前60 min给予L-arg 100 mg/kg预处理;联合处理组:停循环前60 min给予L-arg 100 mg/kg、7-Ni 25 mg/kg联合处理.按临床方法建立体外循环转流降温至鼻咽部温18 ℃停循环,90 min后恢复循环复温.分别于停循环前30 min、停循环时(0 min)、停循环45 min、停循环90 min、复温再灌注60 min抽取颈静脉、颈动脉血测乳酸含量,取脑顶叶皮质测ATP酶活性.实验犬处死后立刻取脑测干湿重.结果 L-arg预处理和联合处理脑乳酸净生成及ATP消耗均小于对照组(P＜0.05),二处理组间差异无统计学意义(P＞0.05).联合处理组DHCA后脑组织含水量最低,L-arg处理次之,对照组最高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DHCA前给予L-arg预处理能降低脑组织代谢水平,有助于脑保护.     

内皮祖细胞与高血压关系的研究进展

血管内皮结构与功能完整使心血管系统处在稳态状态。内皮受损且修复功能受限可导致许多心血管疾病的发生、发展。内皮祖细胞（EPCs）是血管内皮细胞前体细胞,在维持内皮稳态,促进血管内皮修复方面发挥重要作用。近年来对EPCs的研究发现,其与高血压病发生、发展有密切联系,其数量减少和功能紊乱都可能导致人类患高血压病风险增高。而高血压作为独立危险因素对血管内皮祖细胞有损伤作用。该文对EPCs与高血压关系的研究进展进行综述。     

逆行灌注氧合浓缩红细胞对深低温停循环鼠脑的影响

目的观察逆行灌注浓缩红细胞对深低温停循环鼠脑的影响。方法将SD大鼠随机分成假手术组(Shamop组,n=12)、单纯深低温停循环组(DHCA组,n=12)和逆行灌注浓缩红细胞组(DHCArcp组,n=12),建立深低温停循环模型(18℃,90min)。模型成功后取脑作光镜和电镜分析并测量脑组织湿/干重比。结果光镜和电镜结果均证明DHCArcp组比单纯DHCA组脑组织损伤程度轻(P<0.05);两组脑组织的湿/干重比值没有明显差异(P>0.05)。结论逆行灌注氧合浓缩红细胞具有脑保护作用,并且不增加术后的脑水肿。     

主动脉瘤手术中脑氧饱和度监测的临床应用

目的探讨主动脉瘤手术患者术中脑氧饱和度的变化与脑部并发症发生的相关性,评价两种脑保护方法的效果。方法30例主动脉瘤手术患者中主动脉夹层Stanford A型24例,Stanford B型4例,升主动脉及主动脉弓部瘤1例,假性胸腹主动脉瘤1例。在深低温停循环（DHCA）合并选择性顺行脑灌注（ASCP）下行主动脉弓部替换22例（ASCP组）;在单纯DHCA下行胸降主动脉替换8例（DHCA组）。于术中应用近红外光谱分析技术（NIRS）进行持续脑氧饱和度（TOI）监测。结果出现脑部并发症患者8例。并发症组与非并发症组术中转机前TOI分别为70％±5％和69％±8％,分别降至58％±8％和55％±8％,两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。停循环期间DHCA组TOI从77％±6％降至52％±7％,ASCP组TOI从75％±6％降至71％±7％;两组间TOI的下降程度差异有统计学意义（P〈0．05）。结论轻度的TOI降低与脑部并发症的发生无明显相关性。DHCA合并ASCP与单纯的DHCA相比,具有更好的脑保护效果。     

深低温停循环大脑海马区差异性miRNAs表达变化及机制探讨

目的深低温停循环（DHCA）是复杂先天性心脏病矫治手术期间应用的一项重要技术。然而DHCA后的脑损伤严重但其分子机制尚不清楚。最近研究提示microRNAs（miRNAs）涉及各种脑损伤的发生及进展。本研究利用miRNAs基因芯片技术检测小猪DHCA脑损伤模型中的miRNAs表达变化,探讨脑损伤miRNA转录后调节机制。方法 6只小猪（体重2.0～2.5 kg）构建DHCA模型,三只DHCA组,三只假手术组,取海马组织提取总RNA进行miRNAs芯片分析,后行qRT-PCR验证,生物信息学分析一系列miRNAs涉及的脑部疾病。预测特异性miRNAs的潜在靶点,而后通过分子功能注释系统（MAS）对预测靶点进行基因本体注释系统（GO）功能分析及京都基因与基因组百科全书分析系统（KEGG）探讨涉及的信号通路。结果结果 DHCA后,海马区有35个miRNAs表达改变。13个miRNAs显著上调（包括miR-23a,miR-27a,miR-182等）,22个miRNAs显著下调（包括miR-10b,miR-200c,miR-210,miR-150等）。对这些miRNAs靶点预测的生物信息学分析揭示多个靶点和生物功能涉及DHCA的病理生理过程,其中包括信号转导,转录调节,凋亡和炎症反应。结论 DHCA后脑损伤涉及一系列miRNAs的表达改变,为其损伤机制的研究提供了新的理论依据和研究思路。