小鼠肾脏足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的变化

目的通过观察高糖环境培养的肾小球足细胞裂孔隔膜（GPSD）核心蛋白nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨糖尿病肾病蛋白尿的发生机制。方法以RT—PCR方法检测不同浓度（5、10、20和40mmol／L）葡萄糖培养液培养小鼠足细胞24h后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平。结果足细胞nephrin mRNA的表达在5mmol／L葡萄糖培养液培养24h后即显著减弱（P〈0.05）,在其它浓度葡萄糖培养液培养24h后几乎无表达（均P〈0.01）;podocin和CD2AP mRNA的表达在10mmol／L葡萄糖培养液培养24h后显著下降（P〈0．01）。但随着培养液的葡萄糖浓度增加,podocin和CD2AP mRNA的表达却逐渐上调。结论口糖环境抑制足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是糖尿病肾病蛋白尿发生、发展机制之一。     

缬沙坦对糖尿病小鼠肾小球组织Notch通路活化及足细胞丢失的影响

目的探讨应用缬沙坦对糖尿病小鼠肾小球组织中Notch通路活化及足细胞丢失的影响。方法建立糖尿病小鼠模型给予缬沙坦治疗,观察小鼠肾小球细胞凋亡及足细胞脱落情况,采用Western blot检测Notch胞内域1(Notch intracellular domain 1,NICD1)、Hesl、Heyl、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3蛋白表达情况,Real-time PCR检测Hesl和Heyl mRNA表达情况。结果缬沙坦可降低糖尿病小鼠肾小球细胞凋亡及足细胞脱落,减少糖尿病小鼠肾小球组织中NICDl、Hesl、Heyl、Bax、cleaved caspase-3的表达,增加Bcl-2表达(P<0.05)。结论缬沙坦可通过抑制糖尿病小鼠肾小球组织中Notch通路的活化,减少足细胞凋亡和脱落。     

高糖引起小鼠肾小球足细胞podocalyxin蛋白的表达下调

目的:探讨高糖对肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达的影响及其信号途径.方法:免疫组织化学法检测db/db(自发糖尿病小鼠)肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达,野生型小鼠(WT鼠)为对照,计算机图像半定量分析.以体外培养的足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖培养不同时间点对足细胞表达podocalyxin蛋白的影响; 检测细胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号途径的活化,及其特异性阻断剂PD98059对podocalyxin蛋白变化的阻断效应.结果:免疫组织化学半定量分析显示db/db小鼠肾小球podocalyxin蛋白表达明显少于对照组[(0.18±0.07)比(0.25±0.05), P＜0.05].培养的足细胞表达基础水平的podocalyxin蛋白,高糖培养不同时间点其表达均下降,以第6天最明显(为对照组的5.5%, P＜ 0.01),正常糖和甘露醇组没有明显变化.高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,于培养30 min时ERK1/2开始活化,6 h达高峰,持续活化至24 h,至48 h时接近基础水平;高糖培养不能活化P38和 JNK.正常糖和甘露醇在各个时间点均不影响丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路.ERK1/2特异阻断剂PD98059可以消减高糖引起的podocalyxin表达下降的效应.结论:自发糖尿病小鼠的肾小球足细胞podocalyxin蛋白表达下降.高糖经ERK1/2信号通路下调体外培养的足细胞podocalyxin蛋白表达.     

雷公藤内酯醇和缬沙坦对高糖诱导小鼠足细胞活性的影响

目的观察不同浓度高糖对小鼠足细胞活性的抑制作用,以及不同浓度雷公藤内酯醇（TP）和缬沙坦（Val）对高糖抑制后小鼠足细胞活性的影响,探讨高糖对足细胞的损伤作用,以及有效的药物干预浓度范围。方法将培养成熟的小鼠足细胞随机分为对照组（11.1mmol/L葡萄糖）和不同浓度高糖组（16.1、21.1、26.1、31.1、36.1mmol/L）,以上述浓度培养48h后采用CCK-8检测足细胞活性的变化。取活性变化最大的浓度为高糖诱导浓度,在此基础上随机分为不同浓度的TP组（4、8、16、32、64ng/ml）和Val组（2×10-8、2×10-7、2×10-6、2×10-5、2×10-4mol/L）,以上述浓度干预48h后,采用CCK-8检测足细胞活性的变化。结果（1）与对照组相比,除16.1mmol/L高糖组外,其余各高糖组的足细胞活性显著减少,其中以26.1mmol/L葡萄糖组减少最为明显（P＜0.01）。（2）与26.1mmol/L葡萄糖组相比,TP组（除4ng/ml组外）和Val组（除2×10-8mol/L组外）足细胞活性部分恢复,其中以16ng/mlTP组和2×10-5mol/LVal组足细胞活性恢复最为明显（P＜0.01）。结论一定浓度范围的TP和Val可部分恢复受高糖抑制的小鼠足细胞活性。     

缬沙坦抑制高糖环境下足细胞损伤的机制探究

目的通过观察缬沙坦对高糖环境下足细胞EMT过程中ILK、MMP9、NEPH1 mRNA表达的影响,探讨缬沙坦保护受高糖损伤足细胞的可能机制。方法将培养分化成熟的足细胞随机分为5 mmol/L葡萄糖培养组(对照组)和25 mmol/L葡萄糖培养组(高糖组),在25 mmol/L葡萄糖培养液中分别加入2×10~(-7)mol/L(低Val组)、2×10~(-6)mol/L(中Val组)和2×10~(-5) mol/L(高Val组)缬沙坦。体外培养48 h后,倒置显微镜观察细胞形态,并采用PCR半定量分析技术检测ILK、MMP9、NEPH1的表达。结果高糖组细胞NEPH1的表达较对照组显著减少(P0.01)。而各剂量缬沙坦干预组NEPH1的表达与高糖组相比均显著升高。与对照组比较,高糖组足细胞ILK和MMP9的表达显著升高,而各剂量缬沙坦干预组足细胞ILK和MMP9的表达对比高糖组均明显减少(P0.01),其中以高Val组的干预作用最显著(P0.01),高Val组ILK和MMP9的表达与对照组无明显差异(P0.05)。结论缬沙坦可能通过抑制ILK通路保护高糖环境下受损的足细胞。     

肾衰饮对糖尿病肾病大鼠足细胞标志蛋白、足细胞裂孔膜蛋白影响

目的 研究肾衰饮对糖尿病肾病（DKD）大鼠足细胞标志蛋白（PCX）、足细胞裂孔膜蛋白（Nephrin）的影响。方法 选取SPF级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、DKD组、厄贝沙坦组、肾衰饮低剂量组、肾衰饮中剂量组、肾衰饮高剂量组。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD大鼠模型。厄贝沙坦组采用厄贝沙坦2.7 mg/mL灌胃;肾衰饮低、中、高剂量组分别采用肾衰饮2.79、5.58、11.16 g/mL灌胃;空白组、DKD组采用等体积生理盐水灌胃。连续给药8周后检测各组大鼠尿蛋白（PRO）、总胆固醇（TC）、血肌酐（Scr）、甘油三酯（TG）、血尿素氮（BUN）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、葡萄糖（GLU）、谷丙转氨酶（ALT）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷草转氨酶（AST）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理形态学变化;酶联免疫吸附试验检测血清碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF）、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织PCX、Nephrin蛋白表达水平。结果 与空白组比较,DKD组大鼠GLU、...     

高糖环境对肾小球足细胞及TNFR1的影响

目的:探究高糖环境下小鼠肾小球足细胞及炎症因子TNFR1的改变,期望为糖尿病肾病(DN)的防治提供新的思路。方法:将离体培养的小鼠肾小球足细胞分别设为正常对照组(D-葡萄糖5.5 mmol/L)、高渗组(D-葡萄糖5.5 mmol/L+甘露醇39.5 mmol/L)、高糖组(D-葡萄糖45 mmol/L)。刺激48 h后,用western blotting检测高渗组、高糖组足细胞胰岛素信号通路的关键蛋白、纤维化标志蛋白、炎症水平的变化,以及炎症因子TNFR1的表达情况;刺激72 h后,观察高糖组足细胞形态及细胞核的变化。结果:刺激48 h后,pIRS-1~(Ser307)在高渗组和高糖组表达均高于正常组,pAKT~(Ser473)在高糖组表达低于正常组,足细胞胰岛素抵抗水平上升; CollagenⅠ、Fibronectin及IL1β在高渗组和高糖组表达均高于正常组,足细胞纤维化水平及炎症水平上升;此外,炎症因子TNFR1在高渗组和高糖组表达也高于正常组。刺激延长至72 h,与正常对照组比较,高糖组足细胞形态发生改变并开始出现凋亡。结论:高糖可影响足细胞的形态及生存,提高足细胞炎症水平。甘露醇和高糖均促进炎症因子TNFR1的表达,推测DN伴随的高渗、高糖均可影响TNFR1在足细胞的表达。TNFR1可能成为DN防治的新靶点。     

黄芪多糖对高糖刺激小鼠肾小球足细胞Nephrin和Desmin表达的影响

目的 模拟体外高糖病理微环境, 探讨黄芪多糖对实验鼠肾脏肾小球足细胞Nephrin及Desmin表达的影响.方法 试验 (1) :将培养的实验鼠肾脏肾小球足细胞分为5个组, 分别是D-葡萄糖30 mmol/L+黄芪多糖干预组 (0.0 g/L, 0.1 g/L, 0.2 g/L, 0.4 g/L及0.8 g/L) ;干预时间为72 h, 筛选出黄芪多糖干预的最佳浓度点0.Z g/L.试验 (2) :将培养的实验鼠肾脏肾小球的足细胞分7个组, 分别是D-葡萄糖30 mmol/L+黄芪多糖的干预 (干预浓度是0.Z g/L) , 干预的时间分别是0 h, 3 h, 6 h, 12 h, 24 h, 48 h及72 h;筛选出干预的最佳时间点Y h.试验 (3) :根据上述试验 (1) 、 (2) 结果, 将培养的小鼠肾小球足细胞分为:正常对照组、甘露醇高渗对照组、高糖组和黄芪多糖干预组 (黄芪多糖的干预浓度是0.Z g/L, 干预的时间是Y h) , 采用流式细胞术与实时聚合酶链反应 (real-Time Polymerase Chain Reaction, real-Time PCR) 分别检测七组足细胞Nephrin、Desmin蛋白与m RNA的表达.结果 随着黄芪多糖干预梯度浓度的递增, 实验鼠肾脏肾小球的足细胞Nephrin蛋白表达逐渐上调, Desmin蛋白表达逐渐下调, 呈浓度依赖性 (P<0.05) ;随着黄芪多糖干预时间的延长, 实验鼠肾脏肾小球的足细胞Nephrin的表达逐渐上调, 但肾小球的足细胞Desmin的表达逐渐下调, 呈时间依赖性.相比正常对照组和甘露醇高渗对照组, 高糖组小鼠肾小球足细胞Nephrin蛋白和m RNA表达均下降, Desmin蛋白和m RNA表达均增加 (P<<0.05) ;而相较高糖组, 黄芪多糖干预组Nephrin蛋白和m RNA表达明显上升, Desmin蛋白和m RNA表达明显降低 (P<0.05) .结论 在高糖刺激下, 黄芪多糖干预可上调肾小球足细胞Nephrin表达, 降低肾小球足细胞Desmin表达, 是黄芪治疗DN蛋白尿的可能作用靶点.     

缬沙坦治疗糖尿病肾病的疗效观察

目的:观察血管紧张素Ⅱ,Ⅰ型受体拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦(Valsartan)对伴大量白蛋白尿的临床糖尿病肾病的治疗作用。方法:32例2型糖尿病患者,24h尿白蛋白排泄率(24hUAER)>200μg/min,均伴高血压,维持原糖尿病治疗不变,分组比较应用缬沙坦(80mg/d)或贝那普利(10mg/d)治疗8周前后平均动脉压(MAP)、24hUAER、HbA1c、尿酸(UA)等指标的变化。结果:缬沙坦治疗组和贝那普利治疗组24hUAER分别由703.2±987.9μg/min降至664.2±970.6μg/min(P<0.01)和由778.6±1005.0降至734.9±996.0μg/min(P<0.01)。二者疗效相似,且均与血压变化不相关。结论:AT1Ra缬沙坦可以降低临床糖尿病肾病的蛋白尿,其肾脏保护作用除了与降血压有关,还有不依赖降压效应的其他机制。     

缬沙坦治疗合并高血压的慢性肾小球肾炎疗效观察

目的探讨缬沙坦治疗合并高血压的慢性肾小球肾炎的疗效。方法对2008年3月～2011年2月在我院康复病房住院的慢性肾小球肾炎患者105例使用缬沙坦治疗前后相关情况进行分析。结果使用缬沙坦治疗后患者的收缩压、舒张压较治疗前差异具有统计学意义（P〈0．05）;使用缬沙坦治疗后患者的24h尿蛋白较治疗前差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论缬沙坦对于合并有高血压的慢性肾小球肾炎患者具有降压和降低尿蛋白的作用。     

缬沙坦与卡托普利对高血压胰岛素抵抗的影响

目的 :观察缬沙坦及卡托普利对高血压胰岛素抵抗 (ISR)的影响。方法 :将 5 4例伴有空腹胰岛素增高的轻中度高血压病患者随机分为 2组。缬沙坦治疗组 (V组 ) 2 6例 ,每d服缬沙坦 1次 ,80～ 16 0mg ;卡托普利治疗组(C组 ) 2 8例 ,每d服卡托普利 2次 ,每次 2 5～ 5 0mg。疗程为 3个月。测定治疗前后血压、空腹及餐后 2h血糖和胰岛素 ,计算胰岛素敏感指数 (ISI)。健康体检者 2 0人为正常对照组。结果 :治疗前 3组空腹血糖差异无统计学意义 ;V、C组餐后 2h血糖、空腹及餐后 2h胰岛素升高 (P <0 .0 5 ) ,ISI降低 (P <0 .0 5 ) ;治疗后以上指标均改善(P <0 .0 5 ) ,但均未达正常对照组水平 (P <0 .0 5 )。V、C组降压效果差异无统计学意义。结论 :缬沙坦和卡托普利在降血压的同时均能改善高血压ISR ,但短期治疗不能使胰岛素敏感性恢复正常。     

洛沙坦和缬沙坦对肾性高血压尿酸代谢的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂洛沙坦和缬沙坦对肾性高血压尿酸代谢的影响.方法 30例慢性肾炎患者,内生肌酐清除率(Ccr)＞0.5 ml*s-1/1.73m2,中度高血压.分组比较应用洛沙坦(50mg/d)或缬沙坦(80mg/d )治疗4周的前后平均动脉压(MAP)、血尿酸(μmol/L)、Ccr、24h尿尿酸等指标的变化. 结果洛沙坦治疗组尿尿酸排泻明显增加(P＜0.01),血尿酸无明显变化.结论洛沙坦可以增加肾性高血压的尿酸排泄,其对尿酸代谢的影响包含了不依赖降压效应的其他机制.     

缬沙坦治疗慢性心力衰竭的疗效观察

目的:研究缬沙坦治疗慢性心力衰竭的疗效及安全性。方法:将60例心力衰竭患者随机分成培朵普利组和缬沙坦组,每组各30例,在接受强心`、利尿、扩血管的基础上每天分别口服一次培朵普利4mg和缬沙坦80mg,共治疗6个月。治疗前后测血压、左室舒张末期前后径(LVEDD)和左室射血分数(LVEF)。结果:治疗6个月后培朵普利组和缬沙坦组血压均明显下降(P<0.05),LVEDD无明显扩大(P>0.05),LVEF增加显著(P<0.05)。培朵普利组和缬沙坦组间血压、LVEDD、LVEF无明显差异(P>0.05)。缬沙坦组出现干咳、血管神经性水肿、味觉异常等副作用者明显少于培朵普利组。结论:缬沙坦治疗慢性心力衰竭患者与培朵普利相似,但不良反应发生率低。     

缬沙坦对永久性心脏起搏患者血浆脑钠肽的影响

目的研究应用缬沙坦对永久性心脏起搏患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响,以了解ARB类药物对该类患者心功能的影响。方法入选2006年1月至2007年10月于我院行永久性心脏起搏的患者120例,其中VVI起搏62例DDD起搏58例,所有患者随机分为服用缬沙坦组(干预组)及未服用缬沙坦组(非干预组),每组根据起搏模式不同分为VVI起搏亚组及DDD起搏亚组,每个亚组以心室起搏百分比50%为界分为高起搏百分比组和低起搏百分比组。分别于服药前、服药后6个月检测血浆BNP浓度。结果干预组血浆BNP浓度显著低于与非干预组(P<0.05),缬沙坦对低起搏百分比患者的影响优于高起搏百分比患者(P<0.05),对DDD的影响优于VVI(P<0.05)。结论缬沙坦延缓永久性心脏起搏患者血浆BNP浓度的增加,延缓心衰症状的出现,提高生活质量。其中对低起搏百分比患者的影响优于高起搏百分比患者,对DDD的影响优于VVI。     

缬沙坦对糖尿病肾病的保护作用

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦(Valsartan)对微量白蛋白尿的早期糖尿病肾病的治疗作用.方法40例不伴高血压的Ⅱ型糖尿病患者,24h尿白蛋白排泄率(24UAER)20～200μg/min,维持原糖尿病治疗不变作为对照组,在原糖尿病治疗基础上加用缬沙坦(50mg/d)作为治疗组,观察治疗12周前后平均动脉压(MAP)、24h UAER、HbA1C、内生肌酐清除率(Ccr)、血尿酸(UA)等指标的变化.结果对照组治疗前后各指标均无显著性变化,治疗组24hUAER从81.9(45～120)μg/min降至62.4(28～89)μg/min(P＜0.05),而其余指标无显著性变化.结论AT1 Ra缬沙坦可以减少糖尿病肾病的蛋白尿,且其肾脏保护作用不依赖于降压作用.     

缬沙坦逆转老年高血压心肌肥巴厚的作用

目的观察缬沙坦对老年原发性高血压(EH)左室肥厚(LVH)的逆转作用.方法对35例EH并LVH的患者口服缬沙坦80～240 mg,每日1次,疗程1 a.于治疗前、治疗3个月、治疗6个月和1 a后分别用彩色超声心动图测量有关参数.结果缬沙坦不仅能有效降低老年高血压患者的收缩压和舒张压,而且能逐渐降低左室重量指数(LVMI),P＜0.001.结论长期使用缬沙坦治疗老年原发性高血压合并左室肥厚,能明显使左心室肥厚回缩,提高左心室收缩功能,进一步降低心脏危险因子,从而改善预后.     

缬沙坦对高血压患者胰岛素抵抗、hs-CRP的疗效

目的探讨缬沙坦对高血压患者的胰岛素抵抗、hs-CRP的疗效。方法选择98例轻中度原发性高血压患者,随机分为两组,治疗组给予缬沙坦,80mg/d,对照组给予硝苯地平缓释片10mg,2次/d。疗程为12周。在治疗前后测定空腹hs-CRP、血糖、胰岛素水平,用HOMA-IR公式计算胰岛素抵抗指数,比较治疗前后hs-CRP、空腹胰岛素、HOMA-IR变化。结果两组患者治疗12周后,收缩压、舒张压均有显著下降,与治疗前比较其差异有统计学意义（P〈0.01）;缬沙坦组治疗后血清hs-CRP、空腹胰岛素水平、HOMA-IR明显降低,与治疗前比较其差异有统计学意义（P〈0.05）,对照组治疗后hs-CRP、空腹胰岛素水平、HOMA-IR与治疗前比较其差异无统计学意义（P〉0.05）。缬沙坦组治疗后hs-CRP、空腹胰岛素水平、HOMA-IR水平与对照组治疗后比较其差异有统计学意义（P〈0.05）。结论缬沙坦能有效控制血压,降低hs-CRP水平,改善胰岛素抵抗。     

缬沙坦对早期糖尿病鼠肾脏巨噬细胞浸润的影响

目的研究缬沙坦对早期糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法单侧肾切除SD大鼠随机分为3组：对照组（NC）、糖尿病组（DM）、治疗组（DV）组。治疗组于注射STZ当天起给予缬沙坦50mg/（kg.d）灌胃,疗程为8周。第8周时,观测肾组织形态学及肾功能变化,并采用免疫组化方法观察肾脏组织巨噬细胞浸润情况。结果DM组大鼠尿蛋白持续上升 肌酐清除率（Ccr）下降,肾脏组织巨噬细胞浸润增加。DV组以上指标均明显改善,DV组与DM组两组之间差异有统计学意义。结论缬沙坦对糖尿病大鼠早期肾脏损害有保护作用,其机制可能部分与抑制肾组织巨噬细胞浸润有关。