培养基的不同储存条件对细菌检测结果的影响

营养琼脂培养基是日常工作中最常用的细菌计数用培养基,按照国家标准[1],营养琼脂培养基配制后宜新鲜使用或保存于冰箱冷藏室48 h内使用,而在实际工作中较难做到。为此,我们用不同温度和时间来存放配制好的营养琼脂培养基,并观察各种存放条件对细菌检测效果的影响,现将结果报道如下。1材料与方法1.1材料营养琼脂培养基干粉购自杭州天和微生物试剂有限公司;实验用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌由本室分离鉴定,用半固体培养基保存于4℃冰箱。1.2方法[2]按常规法配制倾注的营养琼脂培养基用密封筒包装,分别于冰箱冷藏室(4℃)、恒温箱(18~22℃)及室…     

小牛血清甘油低温保存菌种方法介绍

目的 :寻求一种有效易行的菌种保藏方法 ,以适用于繁忙的实验室工作。方法 :选择 1989年 6月购自北京中国药品生物制品检定所的真空冷冻干燥菌株 2 8株 ,用小牛血清甘油液低温保存法与传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法进行比较。结果 :球菌的复苏情况与杆菌相似 ,保存期 12个月复苏良好 ,生物学性状稳定。比较传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法 ,大大延长细菌的保存期 ,特别是球菌可以从通常的血琼脂斜面液蜡的 4个月的 37.5 %提高到 14个月的87.5 % ,间隔半年时间冻融 6次以下对菌株继续低温保存影响不大。基质量少 (约 0 .4 m l)冻融时间短 ,菌体受伤程度低 ,有利复苏。复苏增菌不需另配营养基质 ,直接在小牛血清甘油液中进行 ,污染少 ,操作简便。结论 :小牛血清甘油保存菌种对大部分常用细菌保存期可达 12个月以上 ,而且球菌和杆菌差异不大 ,非常适合球菌的保存。     

不同琼脂浓度对常见细菌动力试验的影响

在微生物检验中,动力试验是重要鉴定项目之一。我们对常见的25种细菌,用不同琼脂浓度半固体进行穿刺动力试验,现将结果报道如下。 材料与方法 一、材料 1.培养基:血平板、SS琼脂平板、普通营养琼脂平板、TCBS平板、不同琼脂浓度半固体。 2.菌株来源:(1)埃尔托型霍乱弧菌稻叶型、小川型,副溶血性弧菌为舟山市本地从腹泻病人的粪便中分离得到,(2)淋病双球菌、志贺氏菌从舟山医院门诊病人的分泌物及粪便中分离得到,(3)不凝集弧菌从河水中分离得到,(4)其他肠杆菌细菌、假单胞菌、气单胞菌,G~ 球菌及黄杆菌均为“WHO”浙江省临床微生物质控标本菌种。     

菌种保存的最佳方法

菌种在科学实验、教育、传染病的致病机理及遗传变异的研究中起着重要的作用。本文报导采用高层半固体琼脂与冷冻干燥二种保存菌种方法,与原来菌种保存常用半固体琼脂加液体石蜡(3个月移种一次)比较,既节约原材料与时间,又可避免因多次移种而引起菌株污染及变异,是目前保存菌种的二种最佳方法。     

低温对常见致病弧菌菌种保存的影响

致病弧菌是人和水产动物的常见病原菌。其中 ,比较常见的有霍乱弧菌、副溶血弧菌等。由于对人的健康和水产动物危害严重 ,有关研究也越来越多。病原学研究必然用到菌种 ,菌种的保藏是这些工作不可分割的一部分。菌种保藏有多种方法 ,但对于基层实验室来说 ,比较普遍的方法是接种半固体或营养琼脂斜面后 ,放 4～ 6℃冰箱保存。但用这种方法保存弧菌 ,在较短时间 ,用常规方法即检测不到[1,2 ] ,通常认为已经死亡。近年来研究发现 ,霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌等细菌 ,在低温水中能变成另 1种存活形式即活的非可培养状态 ,处于这种状态的细…     

5种营养琼脂培养基细菌生长情况比较

营养琼脂培养基是微生物实验中最为常见的培养基。为了解不同单位生产的营养琼脂培养基对细菌生长情况是否存在影响 ,我们选用了枯草芽胞杆菌黑色变种作为试验菌株 ,对 5种营养琼脂培养基进行了实验比较。材料与方法1　枯草芽胞杆菌黑色变种ＡＴＣＣ9372 ,取其第七代琼脂斜面新鲜培养物接种加有 0 0 0 1%氯化锰的营养琼脂培养基上 ,于 5 6℃培养 5天 ,放置室温 3天 ,镜检芽胞达 95 %以上 ,用 0 0 3Ｍ磷酸盐缓冲液 (ｐＨ7 2 )洗下 ,转入放有玻璃珠的瓶内振摇 5分钟 ,将芽胞悬液放 80℃水浴中 10分钟后 ,离心 (30 0 0ｒｐｍ ,15分钟 ) ,取沉…     

微生物菌种保藏方法及标准菌种管理

目的阐明微生物菌种保藏及管理的重要性。方法液体石蜡保藏法,沙土保藏法,冷冻真空干燥保藏法,斜面低温保藏法,半固体穿刺保藏法,脱脂奶保藏法。结果菌种保藏方法得当,菌种管理工作有条不紊。结论菌种的保藏及标准菌株的管理工作更加科学化、合理化。     

从饮用井水中检出一群紫色细菌

紫色细菌属于红色无硫菌科 ,是无硫紫色细菌 ,它是利用有机物作为电子供体进行光合作用产生紫色色素的自养微生物。从生活饮用水中通过人工培养直接检出紫色细菌较罕见 ,为便于水质微生物检测工作 ,现将检验结果报告如下 :1　材料与方法1 1　样品来源　检测水样来源于我县 2 0 0 0年 5月抽检某中学自备大口深井生活饮用水。 2 0 0 1年 5月再次抽检该中学大口深井生活饮用水 ,两次检出紫色细菌。1 2　实验用培养基及试剂　营养琼脂 (不含葡萄糖 )、ＷＳ琼脂、ＳＳ琼脂 ,麦康凯琼脂、ＥＭＢ琼脂 ,三糖铁琼脂 ,半固体琼脂购于湖南省益阳生化试…     

微生物菌种保藏方法及标准菌种管理

目的阐明微生物菌种保藏及管理的重要性。方法液体石蜡保藏法，沙土保藏法，冷冻真空干燥保藏法，斜面低温保藏法，半固体穿刺保藏法，脱脂奶保藏法。结果菌种保藏方法得当，菌种管理工作有条不紊。结论菌种的保藏及标准菌株的管理工作更加科学化、合理化。     

放射免疫沉淀试验检测小肠结肠炎耶氏菌对鼠疫F_1的交叉反应性观察

利用放射免疫沉淀试验(RIP)检测鼠疫F_1抗体有很高的敏感性与特异性。本文将小肠结肠炎耶氏菌抗原用鼠疫抗血清吸收后用RIP和IHA试验测定残留效价,观察小肠结肠炎耶氏菌对鼠疫F_1的交叉反应性。材料与方法一、吸收抗原本室保存小肠结肠炎耶氏菌100株、标准株7株,均以半固体培养基传代保存,将菌株移种营养琼脂斜面培养物转种琼脂平皿,37℃     

菌种保存方法的比较

对于以微生物为对象的研究工作,具体的研究材料乃是属于某一系统的微生物即菌株。每株菌种性质各不相同,其基础的研究及其应用或关于病原微生物的研究也必须靠菌种重复实验结果。要使菌种长期保存,并遗传性质不变,必须选择更好更稳定保存方法,现介绍两种日常菌种保存方法:1 材料与方法1.1 材料l.1.1 高层半固体琼脂 成份:蛋白胨1％,氯化钠0.5％,琼脂粉0.3％,pH7.4～7.6,在小试管中制成2/3以上高层半固体琼脂,15磅15min备用。1.1.2　000号无菌橡皮塞1.1.3　菌种管处理 先经清洁液浸泡,清水冲洗,肥皂水煮沸用自来水冲洗后,蒸馏水浸泡过夜,以达中性,然后管口塞上棉花,160℃～170℃2h灭菌备用。1.1.4 保护剂牛奶准备 从牛奶场直接接取原牛奶,经     

首次自德检出紫色色杆菌的鉴定报告

本文报告在德化县 1份泉水和井水的细菌学检验中 ,首次检出紫色色杆菌 ,该菌经镜检、培养和生化反应予以证实。现报告如下 :1　材料与方法1.1　样品来源　检测水样来自 2 0 0 0年 11月德化县某单位送检的泉水和 2 0 0 0年 12月某农户送检的井水。1.2　实验用培养基和试剂　营养琼脂 (不含葡萄糖 )、麦康凯琼脂、SS琼脂、KIA琼脂、营养肉汤和半固体琼脂均购自江苏省永信微生物试剂厂 ,血琼脂、生化管、生化试剂和染色液自配。1.3　分离鉴定　参照《生活饮用水标准检验法》(GB5 75 0 -85 ) [1 ] 和《微生物学和微生物学检验》[2 ] 进行。2…     

生化快速检测法鉴定沙门菌和志贺菌

1 材料与方法，1．1 材料，1．1．1 沙门菌、志贺菌两用增菌液，SS琼脂，麦康克琼脂，三糖铁琼脂，动力靛基质尿素(MIU)琼脂，赖氨酸培养基及对照，氰化钾培养基及对照，ONPG，山梨醇、水杨素、苯丙氨酸脱氨酶培养基，葡萄糖铵培养基，0．7％～0．8％半固体琼脂，以上试剂均购自浙江天和微生物有限公司。均在有效期内。     

固体培养基螺旋接种和涂布接种方法比较研究

目的评价固体培养基螺旋接种代替涂布接种方法的可能性。方法以国内外6个厂家的7种固体培养基(麦康凯琼脂、亚硫酸铋琼脂、HE琼脂、沙门菌显色培养基、平板计数琼脂、营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂),分别用螺旋平板法与传统的涂布平板法对7株不同菌株(鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、福氏志贺菌)进行比对测定。结果对用2种接种方法在各培养基上生长的菌落数进行方差统计,金黄色葡萄球菌菌株在平板计数琼脂和营养琼脂上差异有统计学意义(P0.05),其余各菌株基本上在7种培养基上差异均无统计学意义(P0.05)。结论对大部分菌株的接种,螺旋平板法可代替传统的涂布平板的接种方法。     

非O1群霍乱弧菌半固体培养基生存11年观察

198 5年 7月 ,从 1例急性腹泻患者粪便中分离出 1株非Ｏ1群霍乱弧菌 (ＶＢＯ12型 ) ,将其置半固体培养基室温保存。1998年 9月对其再次进行生物学特性检验、抗生素敏感试验、毒力试验 ,结果如下。将菌种分别接种于 4号琼脂 ,碱性胆盐琼脂及血琼脂平板 ,37℃ 18ｈ培养后 ,菌落形态与菌体形态与初分离时基本相同 ,并且生长旺盛。生化反应结果与初分离时完全相同。氧化酶 ( ) ,粘丝试验 ( ) ,乳糖 (- ) ,蔗糖 ( ) ,葡萄糖 ( ) ,甘露糖 (- ) ,阿拉伯糖 (- ) ,靛青质 ( ) ,动力 ( )。耐盐试验结果与初分离时相同。无ＮａＣｌ胨水 ( ) ,3%ＮａＣｌ…     

应用飞行时间质谱仪快速鉴定细菌的初步研究

目的　研究基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对细菌快速鉴定的影响因素。方法　应用 8种细菌 ,比较了不同培养基 (哥伦比亚血琼脂、伊红美兰琼脂、普通营养琼脂 )及培养时间对细菌质谱图的影响。结果　不同的培养基及培养时间会对细菌质谱图产生影响。结论　选择合适的培养基及培养时间可以提高细菌检测的准确率     

两种培养基对医院空气微生物检测结果的影响比较分析

目的 比较不同培养基对医院空气微生物检测结果的影响,探讨日常工作中简便、实用的检测方法.方法 采用普通营养琼脂和血营养琼脂两种培养基对医院环境空气进行采样检测,并对结果进行比较分析.结果 用普通营养琼脂进行检测,细菌总数超标率为16.50%,未检出金黄色葡萄球菌和溶血件链球菌;用血营养琼脂进行检测,细菌总数超标率为17.48%,检出金黄色葡萄球菌4株,溶血性链球菌1株.细菌总数超标率两者之间无显著性差异(P＞0.05),两种培养基生长的平均菌落数在≤lefu/皿至＞5efu/皿,各区间分布的样品个数结果无显著性差异(P＞0.05),致病菌的检测后者优于前者(P＜0.05).结论 用血营养琼脂进行医院空气微生物检测优于普通营养琼脂.     

一种纳米材料抑菌效果及毒性试验观察

20 0 1年 12月对一种以纳米硅基氧化物 (ＳｉＯ2 -ｘ)、纳米载银抗菌粉、纳米载锌抗菌粉为主要成份的复方抑菌剂进行了抑菌效果和毒性试验。效果较好。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　菌种　大肠杆菌 (80 99)、金黄色葡萄球菌(Ａ7ＣＣ6 5 38)和白色念珠菌 (Ａ7ＣＣ10 2 31) ,由山东省卫生防疫站菌种室提供。1 1 2　培养基　营养琼脂、沙堡氏琼脂培养基由山东省卫生防疫站培养基室提供。1 2　方法1 2 1　抑菌试验　按《消毒技术规范》中 2 1将大肠杆菌 (80 99)、金黄色葡萄球菌 (Ａ7ＣＣ6 5 38)和白色念珠菌 (Ａ7ＣＣ10 2 31)制成试验所需浓…     

不同微生物干燥培养基的质量比对

干燥培养基因使用方便、易保存的优点而得到了推广应用。目前用于细菌培养的营养琼脂、用于霉菌与酵母菌检验的虎红培养基、供肠道致病菌分离用的弱选择性培养基伊红美蓝以及用于分离志贺菌与沙门菌的强选择性培养基SS琼脂是微生物实验室常用的培养基。为了保证检验结果的准确性，本中心实验室对这4种培养基的质量进行监控，通过比对试验比较了常用的2种品牌商品化干燥培养基的质量。     

TTC在食品菌落总数测定中的应用

在食品菌落总数的测定中 ,菌落计数直接影响检验结果的准确性。为区别平板上菌落与食品残渣 ,在营养琼脂中加入２．３．５ -氯化三苯四氮唑 (ＴＴＣ) ,使菌落显色 ,以提高工作效率 ,减小计数误差。１材料与方法１．１材料０．５ｇ／１００ｍｌＴＴＣ溶液 :取ＴＴＣ０．５ｇ溶于纯水中并稀释至１００ｍｌ,通过滤菌器除菌后 ,盛于棕色瓶内 ,避光、避热保存 ;营养琼脂培养基 :供一般细菌培养用。１．２方法国标法 :菌落总数测定按国家食品卫生微生物检验方法ＧＢ４７８９．２ -９４［１］操作 ;ＴＴＣ法 :当营养琼脂培养基溶解后冷却至４６℃时…