前列腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移 的影响

目的探究前列腺素E2（PGE2）对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子（VEGF）的调控作用以及对人脐静 脉内皮细胞（HUVEC）趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑 制剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑制剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑制 剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水 平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法, 观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。结果随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增高,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）;0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液 可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）;HUVECs的迁移运动也 随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）;研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮 抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。结论PGE2可以通过作用NR8383细胞表面对应的EP2/EP4受体 调控VEGF的合成,促进HUVEC趋化和成管效应。     

酸脂清组方对实验大鼠急性痛风性关节炎模型PGE2、IL-6的影响

目的 通过观察酸脂清组方对高尿酸血症伴有关节肿胀急性痛风性关节炎大鼠PGE2（前列腺素E2）、IL-6（白介素-6）的影响,研究其抗炎作用机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分成四组,对照组、模型组采取不同的干预方法干预6天,第7天造模,造模后24小时时从下腔静脉取血测血清UA（尿酸）、PGE2、IL-6的含量.结果 酸酯清治疗组与模型组比较,UA降低（P＜0.01）、PGE2降低（P＜0.05）,血IL-6含量用药后变化无显著性.结论 酸脂清组方可能通过降低PGE2的含量发挥对实验大鼠急性痛风性关节炎模型的治疗作用.     

PGE2通过Gαs-cAMP-PKA通路上调子宫内膜癌细胞VEGF的表达

目的:探讨PGE2(prostaglandinE2,PGE2)对子宫内膜癌Ishikawa细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号转导通路?方法:用PGE2?4种EP受体激动剂(17-phenyltrinor prostaglandin E2?butaprost?sulprostone和prostaglandin E1 alcohol)?EP2受体拮抗剂AH6809?PKA抑制剂H89?腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536处理Ishikawa细胞,通过Western blot实验检测VEGF蛋白表达水平的变化?结果:PGE2明显提高Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达水平,10 μmol/L PGE2处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比升高31.56%(P < 0.05);10 μmol/L EP1-4受体激动剂处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂处理组上升了87.80%(P < 0.05);10 μmol/L EP2受体拮抗剂AH6809处理Ishikawa细胞后,Ishikawa蛋白的表达水平较PGE2处理组下调了45.66%(P < 0.05)?25 μmol/L AC抑制剂SQ22536?10 ?滋mol/L PKA抑制剂H89处理Ishikawa细胞后,VEGF蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了29.00%(P < 0.05)和57.50%(P < 0.05)?结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调Ishikawa细胞VEGF蛋白的表达?     

PGE2上调AREG表达促进胆管癌细胞生长的机制研究

目的:探讨AREG蛋白在前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)促进人胆管上皮癌细胞CCLP1增殖能力中的作用和机制?方法:用PGE2?4种EP受体激动剂(17-phenyltrinor Prostaglandin E2?Butaprost?Sulprostone和Prostaglandin E1 Alcohol)?EP2受体拮抗剂AH6809?PKA抑制剂H89?AC抑制剂SQ22536处理CCLP1细胞,通过Western blot?WST等实验检测AREG蛋白表达水平以及CCLP1细胞增殖能力的变化?结果:10 μmol/L PGE2处理CCLP1细胞后,AREG蛋白的表达水平与对照组相比升高了44.2%(P < 0.05);20 μmol/L AREG中和抗体Mab262和SAB1402118分别处理1 h后的WST实验结果显示,PGE2诱导的CCLP1细胞增殖可被AREG中和抗体抑制,分别下降了18%?20%(P < 0.01)?10 μmol/L 4种EP受体激动剂处理CCLP1细胞的结果表明,EP2受体激动剂具有明显促进AREG蛋白表达的作用(表达水平上调了20.1%,P < 0.05),而EP1?EP3?EP4无明显促进表达作用;10 μmol/L EP2受体拮抗剂AH6809处理CCLP1细胞后,AREG蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组下调了20%(P < 0.05)?用PKA抑制剂H89处理后,AREG蛋白的表达水平和CREB蛋白的磷酸化水平较PGE2处理组分别下降了54.4%?45%(P < 0.05);用CMV500-DN-CREB质粒转染CCLP1细胞抑制了CREB的表达和磷酸化后,AREG的表达量较对照组明显下降约65%(P < 0.01)?结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号转导通路上调CCLP1细胞AREG的表达,从而促进CCLP1细胞的增殖?     

母鼠牙周炎与早产及仔鼠出生体质量关系的实验研究

目的探讨母鼠牙周炎与早产及仔鼠出生体质量之间的关系。方法将45只雌性SD大鼠随机分为3组（n=15）：单侧或双侧结扎下颌第一磨牙并向龈沟内注射牙龈卟啉单胞菌（Pg）建立轻度牙周炎模型组（A组）和重度牙周炎模型组（B组）;另外一组为空白组（C组）,不结扎,不注射Pg。8周后,3组雌性大鼠均与雄性大鼠交配受孕,观察3组大鼠的怀孕周期、新生仔鼠的数量、体质量和窝质量,同时检测产后大鼠外周血中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、前列腺素E2（PGE2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的水平。结果 （1）3组大鼠孕周期和新生仔鼠的体质量差别无统计学意义（P〉0.05）;A、B组各出现1、2只死胎,B组出现1例早产,新生仔鼠的数量和窝质量均低于C组（P〈0.05）。（2）A、B组大鼠外周血中的TNF-α和PGE2水平均高于C组（P〈0.05）,且B组的TNF-α水平高于A组（P〈0.05）,但3组大鼠的MMP-9水平无明显差别（P〉0.05）。（3）3组大鼠新生仔鼠数量和窝质量与大鼠外周血中TNF-α及PGE2水平呈负相关（P〈0.05）,但与MMP-9无明显相关（P=0.0518）。结论孕鼠分娩仔鼠数量的减少和窝质量的减轻（即疑似低出生体质量）可能与牙周感染有关,且牙周感染越严重新生仔鼠的数量越少,窝质量也越轻。     

前列腺素E1促进大鼠急性心肌梗死模型血管内皮生长因子表达及量效关系研究

目的 探讨前列腺素E1（PGE1）对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌血管生成及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，以及PGE1剂量与心肌细胞分泌VEGF蛋白之间的初步量效关系。方法SD大鼠经10％戊巴比妥钠麻醉后，开胸结扎冠脉左前降支，建立大鼠AMI模型。PGE1治疗各亚组应用不同剂量PGE1每日静脉注射，分别在手术后2周和4周处死大鼠，取心脏标本切片，HE染色及VEGF、CD34免疫组化染色后显微镜观察。定量分析心肌VEGF蛋白水平及毛细血管密度，并测定血浆VEGF蛋白浓度。结果 PGE1治疗组VEGF蛋白的表达、毛细血管密度、血浆VEGF浓度显著增加，明显高于对照组和假手术组（均P〈0．05）。随PGE1剂量的增加，VEGF蛋白水平相应升高。但PGE1治疗组各亚组之间毛细血管密度无明显差异（P〉0．05）。结论前列腺素E1可以增加AMI大鼠心肌VEGF蛋白表达和梗死区域毛细血管密度，促进侧支循环建立。前列腺素E1引起的心肌VEGF蛋白表达升高作用呈剂量依赖性，前列腺素E1剂量与心肌细胞分泌VEGF蛋白之间具有一定量效关系。     

糖尿病大鼠股骨头缺血性坏死血浆ET-1、PGE2、TXB2、6-Keto-PGF1α的变化

目的 观察糖尿病（DM）大鼠股骨头缺血性坏死（ANFH）血浆内皮素（ET-1）、前列腺素E2（PGE2）、血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）水平的变化，分析其在ANFH发病机制中的作用。方法 SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）60mg／kg建立速发型STZ-DM模型，测定DM大鼠及对照大鼠血浆ET-1、PGE2、TXB2及6-Keto-PGF1α水平，观察股骨头病理学变化。结果 DM组与对照组比较，ET-1、PGE2、TXB2水平以及TXB2/6-Keto-PGF1α（T／K）比值均有显著升高，而6-Keto-PGF1α水平显著降低。结论 血浆ET-1、PGE2、TXB2以及T／K值的平衡失调可能参与并促使DM大鼠股骨头发生微血管病变，最终导致缺血坏死。     

辣椒素对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的研究辣椒素(capsaicin)是否对在体大鼠局部心肌缺血再灌注损伤有保护作用及其可能的机制。方法采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支45min、再灌注120min建立局部心肌缺血再灌注损伤模型。将40只成年健康雄性大鼠随机分为4组:对照组、辣椒素组、辣椒平组、S-3144(P物质受体拮抗剂)组,所有用药分别于缺血前10min和5min经右颈总动脉单次注射入左心室。连续监测心电图及左室功能变化,测定血清磷酸肌酸激酶同工酶(CKMB)浓度,Evans-blue-TTC双染色法测定心肌梗死面积。结果组内比较,缺血再灌注期各时点左室发展压(LVDP)均比结扎前低(P<0.05);除辣椒素组外,各组内再灌注120min时心率比再灌注前各时点均低(P<0.05)。组间比较,辣椒素组再灌注120min时心率明显高于其他3组(P<0.05),再灌注60min、120min时LVDP高于其他3组(P<0.05);实验终点时,辣椒素组CKMB浓度明显低于其他3组(P<0.05),心肌梗死面积小于其他3组(P<0.05);辣椒平组和S-3144组CKMB浓度、心肌梗死面积与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论辣椒素对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且可能是通过激活辣椒素受体(TRPV1)引起P物质释放,进一步激活P物质受体起作用。     

低温时蛙皮素对IL-1β致热大鼠的降温作用及与PGE_2的相关性

目的：探讨4℃时蛙皮素（BN）的降温作用及其机制。方法：在4℃环境下,以IL-1β致热大鼠为研究对象,采用放免法对下丘脑和血浆中前列腺素E2（PGE2）含量进行同步检测。结果：在IL-1β诱导发热大鼠中,下丘脑及血浆中PGE2含量显著升高（P〈0.01、P〈0.05）;BN降低大鼠正常体温,PGE2含量亦随之显著降低（P〈0.01、P〈0.05）;预先侧脑室注射BN能翻转大鼠IL-1β性发热,且PGE2含量亦明显下降（P〈0.01、P〈0.05）。结论：低温时BN能降低大鼠正常体温和抑制IL-1β性发热,其机制可能是通过抑制PGE2合成与释放实现的。     

精氨酸加压素反转前列腺素E2引起的大鼠视前区冷敏神经元活性增强

目的 研究精氨酸加压素(AVP)对前列腺素E2 (PGE2)引起大鼠视前区冷敏神经元活性变化的影响.方法 在制作了大鼠视前区脑片以后,应用全细胞膜片钳技术记录视前区神经元的放电频率,鉴别它们的温度敏感性,然后分别记录PGE2(1μmol)、AVP(1μmol)+ PGE2(1μmol)或AVP(1μmol)+ PGE2(1μmol)+ AVPV1a受体阻断剂(1μmol)对冷敏神经元放电频率的影响.结果 1)加入PGE2后,有61.5％(8/13)的大鼠视前区冷敏神经元的放电频率明显上升,其平均增幅为(69.6±39.7)％.2)洗脱PGE2的作用后,往PGE2激活的冷敏神经元浴液中加入了PGE2和AVP混合液后,这些神经元的平均放电变化却转为下降(P＜0.05),说明AVP反转了PGE2引起的冷敏神经元放电活性增强.3)洗脱PGE2和AVP混合液的作用后,继续加入了PGE2、AVP和AVPV1a受体拮抗剂,神经元的平均放电变化与PGE2和AVP混合液引起的放电变化差异有统计学意义(P＜0.05),而且与PGE2引起的放电变化相似(P＞0.05),表明AVP V1a受体拮抗剂阻断了AVP对PGE2引起冷敏神经元放电频率变化的影响.结论 PGE2可引起大鼠视前区冷敏神经元活性增强,AVP通过激活V1a受体反转了PGE2引起的冷敏神经元活性增强.     

Roles of cyclooxygenase-2 in microvascular endothelial cell proliferation induced by basic fibroblast growth factor

Background The level of basic fibroblast growth factor （bFGF） increases rapidly after cerebral ischemia. However, the molecular mechanisms for the effects of bFGF on cerebral microvascular endothelial cells （cMVECs） have not yet been fully elucidated. In this study, a murine cMVEC line, bEnd.3, was employed to study the effects of bFGF on cyclooxygenase （COX） expression and its downstream effects in cMVECs. Methods After treatment with bFGF, RT-PCR and Western blotting analyses were carried out to evaluate the changes in COX-2 mRNA and protein expression, respectively. MTT assays were performed to measure cell proliferation. The prostaglandin E2 （PGE2） and vascular endothelial growth factor （VEGF） concentrations in the culture medium were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Results COX-2 mRNA and protein expressions in bEnd.3 cells were induced by bFGF in time- and dose-dependent manners. The bFGF-induced COX-2 upregulation led to enhanced PGE2 production by bEnd.3 cells, and this effect was abolished by the selective COX-2 inhibitor NS-398. bFGF also increased VEGF production by bEnd.3 cells, and this effect was blocked by NS-398 and the EP1/2 （PGE2 receptors） antagonist AH6809. Furthermore, exogenous PGE2 increased VEGF production in bend.3 cells, and AH6809 blocked this effect. Conclusion bFGF increases VEGF production in an autocrine manner by increasing COX-2-generated PGE2 in cMVECs and subsequently stimulates MVEC proliferation and angiogenesis.     

应用红外可视脑片膜片钳技术观察精氨酸加压素对大鼠PO/AH区温度敏感神经元放电活动的影响

目的应用红外可视脑片膜片钳技术观察精氨酸加压素对大鼠视前区-下丘脑前部（PO/AH）温度敏感神经元放电活动的影响。方法应用红外微分干涉相差技术和膜片钳技术实时观察57只雄性SD大鼠下丘脑PO/AH区神经元形态,鉴定温度敏感性。精氨酸加压素（AVP）和V1a受体阻断剂胞外给药,观察对温度敏感神经元放电活动的影响。结果红外可视条件下,下丘脑PO/AH区神经元的胞体清晰可见。AVP引起热敏神经元放电频率升高（P〈0.01）,冷敏神经元放电频率下降（P〈0.01）;V1a受体阻断剂能降低热敏神经元的放电频率（P〈0.01）和提高冷敏神经元的放电频率（P〈0.05）。结论 AVP通过V1a受体影响PO/AH区温度敏感神经元的放电活动,而引起体温降低。     

脊髓5-HT3受体激活对大鼠伤害性行为的双向调节作用

目的探讨脊髓5-HT3受体对大鼠伤害性行为反应的影响。方法采用鞘内给予受体特异性激动剂和拮抗剂,观察动物给药前后对辐射热产生缩爪反应潜伏期（HWL）的变化。结果鞘内注射5-HT3受体特异性激动剂2-甲基-5-羟色氨（2-m-5-HT）,浓度依赖性地延长HWL,该延长作用可被5-HT3受体拮抗剂ICS205930完全阻断;鞘内单独注射GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱（Bic）对动物的HWL无显著影响（P〉0.05）,但Bic和2-m-5-HT共同注射后,2-m-5-HT对HWL的延长作用不仅完全被阻断,而且动物的HWL较注射前显著缩短（P〈0.05）,该缩短作用也可被ICS20593完全阻断。结论脊髓5-HT3受体对伤害性信息具有双向调节作用,经GABAA受体介导抗伤害性效应,阻断GABAA受体后,激活5-HT3受体产生痛觉易化。     

伏核神经细胞GalR2介导针刀干预神经病理性痛大鼠的镇痛作用

  目的  研究伏核（nucleus accumbens，NAc）神经细胞甘丙肽受体2（galanin receptor 2，GalR2）激活介导针刀干预神经痛的作用机制。  方法  采用左侧坐骨神经部分结扎（chronic constriction injury，CCI）制作神经痛动物模型，通过测定大鼠对伤害性热刺激诱导的后爪缩爪潜伏期（hind paw withdrawal latency，HWL）和机械刺激诱导的后爪缩爪阈值（hind paw withdrawal threshold，HWT）来检测痛觉阈值。Western blot法检测针刀治疗对CCI大鼠伏核神经细胞GalR2表达的影响，并于CCI大鼠伏核内微量注射甘丙肽受体的阻断剂后，检测其对针刀干预神经痛的痛觉阈值的影响。  结果  CCI大鼠伏核内注射2 nmoL甘丙肽受体的非特异性阻断剂Galantide减弱了针刀疗法引起的HWL（左侧:P < 0.001；右侧:P < 0.05）和HWT（左侧:P < 0.01；右侧:P < 0.05）的延长，但注射1 nmoL的Galantide没有显著性差异（P > 0.05）。针刀治疗引起CCI大鼠伏核神经细胞GalR2的表达上调（P < 0.01），且注射2 nmoL的GalR2的特异性阻断剂M871后削弱了针刀疗法引起的HWL（左侧:P < 0.001；右侧:P < 0.001）和HWT（左侧:P < 0.001；右侧:P < 0.01）。  结论  CCI大鼠伏核神经细胞GalR2激活可能介导了针刀干预神经痛的镇痛作用。     

组胺H_3受体拮抗剂对吗啡成瘾大鼠复吸行为的影响

目的研究不同剂量的组胺H3受体拮抗剂在吗啡成瘾大鼠复吸行为中的影响。方法将将大鼠分成4组,组胺H3受体拮抗剂低剂量组、中剂量组、高剂量组、生理盐水对照组。以吗啡剂量递增法、自然戒断和药物点燃等方法复制以上各组大鼠模型,用条件性位置偏爱法判断复制模型成功与否。结果组胺H3受体拮抗剂低剂量组在注射拮抗剂（5mg/kg）后经吗啡点燃,表现出明显偏爱于白箱（P〈0.01,与黑箱比较）;组胺H3受体拮抗剂中剂量组在注射拮抗剂（10mg/kg）后经吗啡点燃,表现出明显偏爱于白箱（P〈0.01,与黑箱比较）;组胺H3受体拮抗剂高剂量组在注射拮抗剂（20mg/kg）后经吗啡点燃后,无明显偏爱表现（P〉0.05,与黑箱比较）;生理盐水对照组在注射生理盐水后经吗啡点燃后,表现出明显偏爱于白箱（P〈0.01与黑箱比较）。结论低剂量和中剂量组胺H3受体拮抗剂在吗啡成瘾大鼠复吸中无明显作用。高剂量组胺H3受体拮抗剂在吗啡成瘾大鼠复吸中有明显作用。     

前列腺素受体4 与肾脏疾病相关性研究进展

前列腺素受体4（prostaglandin receptor 4,EP4）是内源性脂质介质前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）的作用受体,属G-蛋白偶联受体（G protein coupled receptor,GPCR）的一种。EP4 在体内分布广泛,几乎在所有组织、脏器表达。在肾脏,肾小球旁颗粒细胞、肾小球上皮细胞、远曲小管和皮质集合管上皮细胞均有EP4 的高度表达。因EP4 可同时与Gs、Gi 蛋白途径偶联,与血管张力、氧化应激、炎症、细胞增殖等生理功能和病理生理过程密切相关。目前通过对全身性及肾组织特异性EP4 敲除小鼠模型的研究和选择性EP4 激动剂/拮抗剂的作用研究,证明EP4 在肾脏发挥重要作用,其PGE2-EP4 信号通路同时能产生保护和不良的影响。该 文将EP4 与肾脏疾病,包括肾性高血压、肾缺血/ 再灌注损伤、肾源性尿崩症、肾小球肾炎、肾小球硬化、慢性肾脏病及常染色体显性遗传性多囊肾病发生发展的相关性进行分析和总结。     

氯沙坦与螺内酯对心肌梗死大鼠早期基质金属蛋白酶-9的影响

目的观察氯沙坦、螺内酯对急性心肌梗死早期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨其作用机制,为临床提供依据。方法建立大鼠心肌梗死模型,早期应用醛固酮受体拮抗剂螺内酯20 mg·d~(-1)·kg~(-1)(螺内酯组)、血管紧张素-ⅡAT_1受体拮抗剂氯沙坦10 mg·d~(-1)·kg~(-1)(氯沙坦组)进行干预,另设假手术组(Sham组)和急性心肌梗死组(AMI组),利用免疫组化的方法 ,观察各组心肌MMP-9蛋白的表达。结果与Sham组比较,AMI组MMP-9蛋白水平升高(P<0.01);与AMI组比较氯沙坦、螺内酯组平台期心肌MMP-9蛋白表达降低(P<0.01),且氯沙坦组较螺内酯组下降更明显(P<0.01)。结论氯沙坦、螺内酯有助于改善急性心肌梗死后心脏重构。     

不同时辰电针足三里对急性胃黏膜损伤大鼠PGE_2、EGF、TGF-α的影响

目的研究前列腺素E2(PGE2)、表皮生长因子(EGF)和转化生长因子α(TGF-α)在大鼠急性胃黏膜损伤中的作用,并探讨不同时辰与胃黏膜保护因子之间的相关性。方法 40只SD大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、辰时电针组、戌时电针组,每组10只。采用无水乙醇灌胃法制成急性胃黏膜损伤模型,用ELISA法检测大鼠血清与胃黏膜中PGE2的含量,并用免疫组化法检测大鼠胃黏膜上EGF与TGF-α表达变化。结果大鼠血浆PGE2与胃黏膜PGE2、EGF、TGF-α水平下降;辰时及戌时电针组电针4d后血浆PGE2与胃黏膜PGE2、EGF、TGF-α均水平升高,戌时电针组血浆中PGE2、EGF、TGF-α表达增高(P0.01)。结论急性胃黏膜损伤病变与内源性PGE2、EGF和TGF-α的协同保护作用有关,选择合适时辰治疗可提高临床治疗效果和指导评价预后。