中西医结合治疗子宫肌瘤

目的 :比较离舌橐吾( Ligularia veitchiana (Hemsl.) Greenm)的两种苯并呋喃衍生物5, 6-二甲氧基-2-异丙基-苯并呋喃(5,6-dimethoxy-2-isopropenyl-benzofuran)( 1 ),5-乙酰基-6-甲氧基-2-异丙基-苯并呋喃(5-acetyl-6-methoxy-2-isopropenyl-benzofuran)( 2 )对人肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02的毒性,并分析其可能机制。 方法 :用台盼蓝排染法检测化合物细胞毒性、用DCFH-DA荧光分光光度计法检测细胞活性氧含量、用钼酸铵比色法检测过氧化氢酶活性。 结果 :化合物 1和2 对L02的IC₅₀值分别为(171.2 ± 3.3) μg · mL^-1和(79.0 ± 4.1) μg · mL^-1,高于对HepG2的IC₅₀值(84.2±6.5)μg · mL^-1和(65.2 ± 1.9) μg · mL^-1,表明肿瘤细胞比正常细胞对化合物更加敏感。用化合物 1和2 IC₅₀处理细胞48 h,测得HepG2细胞活性氧分别是对照组的1.6倍和3.2倍;L02细胞活性氧分别是对照组的1.2倍和1.8倍。化合物 1和2 处理后,HepG2细胞过氧化氢酶活力分别从对照组的(17.2±1.7)U ·mg^-1Pr.下降到(12.8±0.4)和(6.4±0.1)U ·mg^-1Pr.;L02细胞过氧化氢酶活力分别从对照组的(17.7±1.2) U ·mg^-1Pr.下降到(14.3±1.5) 和(8.6±0.5)U ·mg^-1Pr.;HepG2过氧化氢酶活力降低幅度大于L02。 结论 :二化合物对HepG2的毒性和活性氧的增幅均大于L02,同时HepG2过氧化氢酶活力降幅也大于LO2。据此推测二化合物细胞毒性与活性氧有关。     

黄亮橐吾的苯并呋喃类化合物

目的　研究黄亮橐吾根和根茎的化学成分。方法　利用硅胶、Sephadex L H- 2 0柱色谱分离等方法进行分离和纯化,根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果　从黄亮橐吾的根和根茎中分离到8个化合物,分别鉴定为:泽兰素(euparin, )、6 -甲氧基泽兰素(6 - methoxy- euparin, )、2 -羟基- 4 ,5 -二甲氧基苯甲醛(4,5 -dimethoxy- 2 - hydroxybenzaldehyde, )、2 -乙酰- 5 ,6 -二甲氧基苯并呋喃(2 - acetyl- 5 ,6 - dimethyoxybenzofuran, )、对羟基苯乙酮(4- hydroxyacetophenone, )、2 - isopropenyl- 5 ,6 - dim ethoxy- 2 ,3- hydrocum aran( )、8β- hydroxy- 7(11) - erem ophilen- 12 ,8α- olide ( )、羽扇豆醇(lupeol, )。结论　8个化合物均为首次从黄亮橐吾中分离得到。主要成分为苯并呋喃类化合物,特别是化合物 和 是两个重要的成分,具有杀虫和昆虫拒食活性,这和黄亮橐吾民间用于驱虫有相关性。     

厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制

目的:研究厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制,为CT2-3在治疗结肠癌中的应用奠定基础。方法:体外培养SW480和LoVo细胞,不同浓度(10,20,40,80μmol·L~(-1))CT2-3和厚朴酚分别干预24,48 h,采用细胞增殖-毒性检测(CCK-8)法检测CT2-3和厚朴酚对结肠癌细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验检测CT2-3对结肠癌细胞克隆形成能力的影响;进一步采用流式细胞术和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CT2-3对结肠癌细胞凋亡和DNA损伤标志物磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)蛋白表达的影响;采用活性氧(ROS)试剂盒检测CT2-3对结肠癌细胞内ROS产生的影响;最后用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CT2-3对结肠癌细胞内线粒体凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X基因(Bax)表达的影响。结果:给药24,48 h,厚朴酚对两株结肠癌细胞SW 480和LoVo的半数抑制浓度(IC_(50))均80μmol·L~(-1),CT2-3对SW480细胞的IC_(50)分别为(54.59±1.73)μmol·L~(-1)和(29.82±1.13)μmol·L~(-1),对LoVo细胞的IC_(50)分别为(66.68±2.11)μmol·L~(-1)和(46.70±1.81)μmol·L~(-1);与空白组比较,CT2-3(20,40μmol·L~(-1))组结肠癌细胞克隆形成能力显著下降(P0.01),且呈浓度依赖性。CT2-3组凋亡细胞显著增加(P0.01),γH2AX蛋白相对表达显著增加(P0.01);CT2-3组细胞内ROS水平显著增加(P0.01);CT2-3组细胞Bcl-2 mRNA相对表达显著下调(P0.01),Bax mRNA相对表达显著上调(P0.01)。结论:CT2-3对结肠癌细胞具有显著抑制作用,其机制可能是通过激活Bcl-2/Bax信号通路使线粒体功能受损,促进ROS的产生,进一步诱导DNA损伤,从而导致结肠癌细胞凋亡。     

云芝多糖对活性氧清除机制的增强作用

 目的:介绍云芝多糖影响活性氧酶促清除机制的研究现状，为云芝多糖的临床应用和深入研究提供信息。方法:围绕云芝多糖对超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶作用的研究资料，分析探讨云芝多糖多方面药理作用的生化机制。结果:体内外实验的资料表明，云芝多糖能增强超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，提高机体防御活性氧损伤的能力。结论:云芝多糖对活性氧酶促清除机制的增强作用与其抗种瘤、免疫调节等作用密切相关，具有重要意义。     

褐藻素诱导肝癌HepG2细胞凋亡和自噬的机制

目的：通过c-Jun氨基末端激酶（c-jun N-terminal kinase,JNK）信号通路来研究蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物的抗炎作用机制。方法：采用噻唑蓝比色法（MTT法）测定倍比稀释的蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物（浓度区间为0~640 mg·L^-1）作用于密度为5×10⁴个/mL的RAW264.7细胞24 h后的细胞活力,计算出药物对细胞的无毒浓度;测定JNK抑制剂SP600125（终浓度分别为25,12.5,6.25 μmol·L^-1）作用于细胞密度为5×10⁴个/mL的RAW264.7细胞24 h后的细胞活力,计算出SP600125作用的安全有效浓度;测定蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物（终质量浓度分别为5,2.5,1 mg·L^-1）作用于LPS诱导细胞密度为5×10⁴个/mL的RAW264.7细胞12,24,36,48 h后的细胞活力,计算出药物抑制细胞增殖的浓度。采用蛋白质印迹（Western-blot）法测定蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物（5 mg·L^-1）作用于LPS诱导的RAW264.7细胞24 h后p-JNK（磷酸化c-Jun氨基末端激酶）蛋白、JNK蛋白和环氧化酶-2（COX-2）蛋白的表达变化。结果：蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物作用于LPS诱导的RAW264.7细胞,测定p-JNK,JNK,COX-2相对灰度值分别为：0.12±0.03,0.48±0.03,0.18±0.04,无药物作用的LPS诱导的RAW264.7细胞,测定p-JNK,JNK,COX-2,相对灰度值分别为：0.68±0.05,0.83±0.04,0.58±0.04,两组数据比较具有明显差异（P<0.01）。蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物抑制LPS诱导的RAW264.7细胞增殖,下调p-JNK,JNK,COX-2等炎性蛋白的表达。结论：蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物抗炎机制通过JNK信号通路来完成。     

白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721基因表达的影响

目的:检测白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721细胞生长及肝癌相关基因表达的影响。方法:利用MTT比色法检测白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖方面的影响;利用以肝癌cDNA抑制性消减文库构建的肝癌相关基因微阵列,检测白花蛇舌草作用肝癌细胞SMMC-7721 36 h后基因的表达变化。结果:白花蛇舌草作用肝癌细胞SMMC-7721后36 h,观察到有1个基因的表达上调,14个基因表达下调。结论:证实白花蛇舌草对肝癌细胞的作用是通过影响多基因的表达改变实现的。本研究发现的差异表达基因为进一步研究白花蛇舌草抗肝癌的分子机制提供了线索,并为中草药筛选提供了一种可能的依据方法。     

5F对肝癌细胞毒性、细胞凋亡及细胞周期的影响

目的调查半边旗(PsL)提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人类肝癌细胞Hep3B的抗癌效果。方法在不同的时间段,采用5F(0～80μg/ml)处理Hep3B细胞。通过MTT法检测细胞毒性,通过Annexin V-EGFP染色及caspase-3活性检测细胞凋亡,通过碘化丙锭染色检测细胞周期。结果 5F以剂量、时间依赖方式抑制Hep3B细胞增殖,Hep3B细胞Annexin V-EGFP阳性染色及caspase-3活化确定了5F诱导的细胞凋亡,5F阻滞细胞于G2期。结论 5F抑制Hep3B细胞增殖与细胞G2期阻滞及细胞凋亡有关。     

补骨脂素药理作用及肝毒性机制的研究进展

补骨脂素是源于补骨脂Psoralea corylifolia的香豆素成分,具有抗骨质疏松、神经保护、抗肿瘤、雌激素样、抗炎等多重药理作用,有着良好的临床应用潜力.随着对补骨脂用药安全问题的不断关注,近年来关于补骨脂素的肝脏毒性研究也逐渐增多.通过查阅近20年国内外相关文献,对补骨脂素的药理作用和肝毒性研究概况进行整理和...     

绞股蓝对肝癌细胞表达Bcl-2及Bax的影响

目的:研究绞股蓝(GpM)对人肝癌细胞促凋亡作用的分子机制。方法:采用W estern b lot分析GpM作用Huh-7细胞后表达的Bc l-2和Bax蛋白水平。结果:20mg/m l GpM作用于细胞24小时后,Huh-7细胞中Bc l-2表达明显降低,而Bax表达显著上调。结论:GpM作用于人肝癌细胞Huh-7,是通过下调Bc l-2和上调Bax的表达而诱导细胞凋亡的。     

牡丹皮多糖2b对高糖所致大鼠系膜细胞增生及活性氧产生的影响

目的探讨高糖对大鼠系膜细胞(MC)增生及活性氧产生的影响,以及牡丹皮多糖2b(PSM2b)对其的干预作用。方法采用MTT法和比色法,分别检测不同浓度PSM2b各组体外高糖培养的MC增生和细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)的活力和丙二醛(MDA)的水平。结果PSM2b对高糖所致的MC增殖有显著的抑制作用,其抑制作用呈浓度依赖性,并且能够提高上清液中SOD活力,降低MDA含量。结论高糖可导致MC增生和活性氧产生增多,而PSM2b能进行有效的干预。     

基于活性氧的雌雄同株植物五味子雌花/雄花比例的调控

目的:探讨活性氧对五味子雌花/雄花比例的影响,为五味子栽培提高产量奠定基础。方法:在花芽分化前期喷施不同浓度的H2O2、百草枯、连二甲亚硫酸钠溶液。结果:连二甲亚硫酸钠可使雌花/雄花比例由7.6%提高到42.3%,而H2O2、百草枯作用不明显。结论:不同的活性氧载体物质对五味子雌花/雄花的比例调控效果不同,连二甲亚硫酸钠溶液喷施五味子叶片效果最好。     

活性氧自由基参与三氧化二砷心脏毒性的机制研究进展

三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)是目前国际上公认的治疗急性早幼粒细胞白血病的首选靶向药物之一,但As2O3导致的心脏毒性仍是临床面临的一个严峻问题.近年来,活性氧自由基参与As2O3心脏毒性的机制成为研究热点.活性氧自由基是As2O3诱导的心脏毒性机制的一个重要交互点,有望成为预防As2O3心...     

The Essential Oil of Bergamot Stimulates Reactive Oxygen Species Production in Human Polymorphonuclear Leukocytes

Bergamot (Citrus aurantium L. subsp. bergamia) essential oil (BEO) is used in folk medicine as an antiseptic and anthelminthic and to facilitate wound healing. Evidence indicates that BEO has substantial antimicrobial activity; however its effects on immunity have never been examined. We studied the effects of BEO on reactive oxygen species (ROS) production in human polymorphonuclear leukocytes (PMN) and the role of Ca²⁺ in the functional responses evoked by BEO in these cells. Results show that BEO increased intracellular ROS production in human PMN, an effect that required the contribution of extracellular (and, to a lesser extent, of intracellular) Ca²⁺. Bergamot essential oil also significantly increased ROS production induced by the chemotactic peptide N‐formyl‐Met‐Leu‐Phe and reduced the response to the protein kinase C activator phorbol myristate acetate. In conclusion, this is the first report showing the ability of BEO to increase ROS production in human PMN. This effect could both contribute to the activity of BEO in infections and in tissue healing as well as underlie an intrinsic proinflammatory potential. The relevance of these findings for the clinical uses of BEO needs careful consideration. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

风湿宁胶囊对活性氧介导的T细胞活化和滑膜凋亡的影响

目的研究细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）水平对胶原诱导性关节炎（colla．geninducedarthritis,CIA）大鼠T细胞活化和滑膜细胞凋亡的影响,探讨风湿宁胶囊（FSN）在类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）治疗中的作用机制。方法将60只大鼠随机分为正常对照组,CIA模型组,雷公藤多苷片组,FSN低、中、高剂量组[剂量分别为0．33、0．66、1．32g,（kg·d）],每组10只。采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群水平,ELISA法检测干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素-4（inter．1eukin-4,IL-4）含量,紫外分光光度法检测羟自由基水平,Westernblot法检测滑膜天冬氨酸特异的半胱氨酸酶（cysteinylaspartatespecificproteinase,Caspase）-3、9蛋白表达。结果与模型组比较,FSN各给药组均可升高ROS水平（P〈0．01）,FSN中剂量组能够显著降低CD4＋／CD8＋水平（P〈0．01）,FSN各组的IFN-γ含量明显降低（P〈0．01）,FSN高剂量组的IL-4含量明显升高（P〈0．01）。同时,FSN各给药组的Caspase-9、Caspase-3表达亦显著上升,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;且FSN低、中剂量组Caspase-9蛋白平均灰度值显著高于雷公藤多苷组（P〈0．05,P〈0．01）。结论FSN调节CIA大鼠免疫功能亢进及抑制滑膜细胞增殖的机制可能与上调体内ROS水平有关。     

五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子鞭毛超微结构损伤的保护作用

目的：观察五子衍宗丸含药血清对活性氧致大鼠精子鞭毛超微结构损伤的保护作用。方法：采用次黄嘌呤（0.6mM）-黄嘌呤氧化酶（0.05U/mL）活性氧发生体系,收集大鼠附睾精子,体外与活性氧及五子衍宗丸含药血清（低、中、高剂量）共孵育15min和60min,采用环境扫描电镜观察精子鞭毛超微结构的变化。结果：与活性氧组共孵育60min后,部分精子鞭毛质膜连续性中断,部分膜脱落,鞭毛暴露。各浓度五子衍宗丸含药血清（低、中、高剂量组）组精子鞭毛质膜完整。结论：五子衍宗丸含药血清体外对活性氧造成的精子鞭毛质膜损伤具有一定的保护作用。     

苦菊提取物对HepG2细胞的抗氧化作用及其机制研究

目的：考察苦菊提取物（CEE）对H₂O₂致HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨苦菊提取物在HepG2细胞中抗氧化作用机制。方法：通过MTT法和DCFH-DA荧光染色,检测H₂O₂处理HepG2细胞的活性和胞内ROS水平;在抗氧化反应元件（ARE）报告基因转染稳定的HepG2细胞内检测ARE-Luciferase活性;并通过荧光定量RT-PCR测定HepG2细胞内含有ARE序列相关基因的mRNA表达水平。结果：H₂O₂处理HepG2细胞后,细胞存活率下降,胞内ROS水平上升,而加入不同浓度的CEE则可明显改善上述结果。不同浓度的CEE处理转染ARE报告基因的HepG2细胞,可使细胞内的ARE活性呈浓度依赖性增强。此外,CEE可使HepG2细胞中含ARE序列的调控基因GCLC,GCLM和HMOX-1的mRNA表达水平上调,并呈浓度依赖性。结论：CEE通过降低ROS水平,抑制H₂O₂诱导的HepG2细胞损伤,而CEE对HepG2细胞的抗氧化保护作用机制可能与其激活HepG2细胞内Nrf2-ARE通路相关的抗氧化防御系统密切相关。     

黄芪活性提取成分对膜脂质过氧化损伤的防护作用

采用3种活性氧产生体系诱发膜脂质过氧化为实验模型,观察了黄芪活性提取成分对膜脂质过氧化作用的防护效能。结果表明,黄芪活性提取成分对多种自由基均有良好的清除作用,其中黄芪总黄酮和黄芪总皂甙的作用最佳。     

胆木化学成分对HUVEC细胞活性氧和通透性的影响

目的:研究胆木化学成分对HUVEC细胞通透性、ROS生成水平的影响,探讨胆木对HUVEC的保护作用。方法:设有对照组和观察组,通过FITC标记的右旋糖酐(Dextran)试剂盒检测胆木成分对AngⅡ诱导HUVEC单层通透性的影响;以DCFH-DA试剂盒检测胆木化学成分对ROS的抑制作用,采用LPS诱导HUVEC细胞的ROS。结果:胆木生物碱及酚酸类成分对LPS引起的ROS水平增加有抑制趋势,10μg/mL的喜果苷促进作用有统计学意义(P<0.05)。胆木成分具有促进HUVEC细胞通透性增加的作用,其中异常春花苷内酰胺、喜果苷和原儿茶酸对HUVEC细胞通透性有明显的促进作用。结论:胆木抗炎作用可能与其促进活性氧生成及通透性增加有关。