Th17/Treg细胞失衡参与类风湿关节炎发病机制的研究进展

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以滑膜炎和血管炎为特征的自身免疫性疾病,T淋巴细胞浸润是其发病的关键,Th17和Treg细胞具有同源性,皆由初始CD4+ T细胞分化而来。其中Th17 细胞促进炎症反应,而Treg细胞抑制炎症反应,维持自身免疫耐受。RA的发生与免功能疫紊乱、免疫细胞过渡活化以及免疫细胞亚群比例失衡密切相关。Th17/Treg失衡存在整个RA疾病过程中,最终导致滑膜炎症、关节破坏、骨侵蚀等,加重RA病程的发展。调节Th17/Treg之间的平衡是治疗RA的一个靶点。笔者将对Th17/Treg失衡在RA发生发展中的调节作用进行综述。     

豨莶草对胶原诱导性大鼠关节炎的治疗作用

目的 基于白细胞介素（IL）-23/辅助性T细胞17（Th17）炎症轴探讨豨莶草对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型的治疗作用。方法 建立CIA大鼠模型,将建模成功大鼠随机分为模型组、豨莶草组、豨莶草+IL-23组,每组10只;另外10只作为阴性对照组。观察大鼠形态并称量体质量,运用水容积法测定大鼠足趾肿胀度、5级评分法测关节炎指数;苏木精-伊红染色（HE）检测滑膜组织形态学情况;酶联免疫吸附（ELISA）、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测大鼠腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平;流式细胞术检测腹主动脉血和滑膜组织中Th17细胞百分比。结果 与阴性对照组相比,模型组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高（P＜0.05）;与模型组相比,豨莶草组大鼠体质量升高,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均降低（P＜0.05）;与豨莶草组相比,豨莶草+IL-23组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高（P＜0.05）。结论 豨莶草可通过抑制IL-23/Th17炎症轴从而降低炎症水平,实现对CIA大鼠的治疗。     

柚皮苷抑制胶原诱导小鼠关节炎症作用机制的实验研究

目的检测柚皮苷干预后胶原诱导(CIA)小鼠关节炎症相关指标的变化。方法选择雄性DBA1/J小鼠35只,随机分为正常组(5只)和实验组(30只)。实验组炎症评分达2分以上再分为骨碎补组(10只)、CIA模型组(10只)、柚皮苷组(10只)。各组均以灌胃方式给药,每天1次,连续20次。给药20 d后处死小鼠,ELISA方法测定小鼠血清中IL-6、TNF-α的水平,HE染色观察滑膜炎症表达情况,免疫组化法检测小鼠膝关节滑膜组织中HIF-1α、CXCR4蛋白的表达情况。结果给药第11天开始,柚皮苷组炎症评分低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第15天开始,柚皮苷组与骨碎补组炎症评分均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第19天,骨碎补组与柚皮苷组炎症评分均有降低表现,且柚皮苷组炎症评分较骨碎补组低,差异有统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组较CIA模型组的IL-6、TNF-α水平均下降,差异有统计学意义(P0.01)。柚皮苷组的IL-6水平较骨碎补组低,TNF-α水平较骨碎补组高,但差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷组HIF-1α、CXCR4的IOD值低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组HIF-1α、CXCR4的IOD值与CIA模型组比较差异无统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间差异无统计学意义(P0.05)。柚皮苷、骨碎补组染色阳性区域Area值均低于CIA模型组,差异有统计学意义(P0.05);骨碎补组与柚皮苷组2组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论柚皮苷对HIF-1α上游的炎症因子IL-6、TNF-α及下游的CXCR4都具有一定调控作用,显著的降低了CIA小鼠炎症反应。     

抗TNFα单克隆抗体在II型胶原诱导的关节炎模型中的应用

目的制备胶原诱导的关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,对AT132进行药效评价。方法制备Ⅱ型胶原诱导的CIA模型,且对新药AT132进行药效评价。HE染色观察膝关节和踝关节的病理变化。ELISA法检测血清中CⅡ、TNFα的表达。流式细胞仪检测小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达。结果 (1)模型组小鼠关节表现为小指关节、足爪、足趾肿胀以及变形,AT132组小鼠关节则表现为轻微的红肿。(2)模型组小鼠膝关节和踝关节病理结果表现为炎性细胞的浸润、滑膜增生、血管翳和破骨细胞的出现,软骨和骨的破坏。AT132组病理结果表现为轻微炎性细胞的浸润和滑膜增生。(3)ELISA法检测结果发现:模型组中CⅡ的表达明显上升,AT132给药组中CⅡ的表达明显下降(P0.01)。(4)流式细胞仪检测结果发现:模型组小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达明显增加,AT132组小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达明显降低(P0.01)。结论 CIA模型造模成功率为100%,AT132能够有效地治疗关节炎小鼠。     

白细胞介素1对Ⅱ型胶原诱导类风湿性关节炎模型的影响

以Ⅱ型 （ｔｙｐｃⅡｃｏｌｌａｇｅｎ，ＣⅡ）免疫接种ＤＢＡ／１小鼠，诱发其多发性关节炎发生，并以白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１，ＩＬ－１）皮内注射，观察ＩＬ－１对关节炎发生的影响。方法采用ＣⅡ加弗氏完全佐剂（ｃｏｍｐｌｅｔｅｆｒｅｕｎｄ’ｓａｄｊｕｖａｎｔ，ＣＦＡ）给小鼠行皮内注射，并于ＣⅡ免疫接种后第１８天开始，给部分小鼠皮内注射ＩＬ－１，观察其发病情况，采用ＥＬＩＳＡ方法检测血清抗Ｃ     

高迁移组蛋白1-A盒对大鼠胶原诱导的关节炎的治疗作用

目的 探讨高迁移组蛋白1-A盒(A-box of high mobility group protein-1,A-BOX)对类风湿性关节炎的治疗作用.方法 以胶原诱导的关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型为研究对象,在胶原造模4周后,进行关节炎症状评分,并将实验动物随机分为三组(每组12只),腹腔内分别注射A-BOX(每只大鼠注射0.62 mg,A-BOX组)、甲氨蝶呤(1 mg/Kg,MTX组)和生理盐水(阴性对照组),每周一次,连续治疗4周.治疗后进行关节炎症状评分、踝关节病理学及X线摄片检查.结果 所有造模大鼠均出现了关节炎症状,造模后关节炎评分为(7.25±0.70),显著高于正常大鼠(P＜0.01).治疗4周后,阴性对照组症状评分为(7.77±0.44),显著高于MTX组(6.25±1.03)(P＜0.05)和A-BOX组(6.12±0.99) (P＜0.01).MTX组与A-BOX组无显著差异(P＞0.05).病理学显示,A-BOX组滑膜增生、血管新生和炎症评分分别为(0.00±0.00),(1.14土0.69)和(1.71土0.75);MTX组分别为(0.71±0.48),(1.57±0.78)和(1.42±0.53),均显著低于阴性对照组的(2.28±0.45),(1.85±0.69)和(2.14±0.89)(P＜0.05).A-BOX组未见滑膜增生,评分低于MTX组(P＜0.05);两组间其他改变无显著差异(P＞0.05).X线摄片A-BOX组、MTX组及阴性对照组评分分别为(1.85±1.06),(1.85±1.06)和(3.28±0.48),均有统计学差异(P＜0.05).结论 A-BOX对大鼠CIA治疗作用稍优于MTX,具有药物开发前景.     

糜蛋白酶联合锡类散灌肠治疗溃疡性结肠炎的疗效及对患者炎症反应和免疫功能的影响

目的：观察糜蛋白酶联合锡类散保留灌肠疗法对溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效,以及对血清炎症因子和外周血辅助性 T 细胞（Th17）、调节性 T 细胞（Treg）的影响。方法：收集 158 例 UC 患者临床资料,随机数字表法分为治疗组83 和对照组 75 例。对照组给予美沙拉嗪肠溶片口服、保留灌肠,同时灌肠液中加入庆大霉素、氟美松,治疗组在对照组基础上加用糜蛋白酶、锡类散保留灌肠。根据 Mayo 评分标准,两组患者分为轻、中、重度 3 个亚组。治疗两个疗程后评价两组患者临床有效率、Mayo 评分、内镜评分改善情况。检测正常人群和治疗前后两组患者血清炎症因子（ESR、CRP、TNF-α、IL-6）的表达,流式细胞仪检测 Th17 细胞和 Treg 细胞的表达。结果：治疗组患者总有效率为 94.0%,观察组为77.3%,治疗组有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后治疗组患者 Mayo 评分、内镜 Baron 评分为（2.25±1.39）、（1.13±0.95）,对照组为（3.61±1.61）、（1.60±0.99）,治疗组变化更明显（P<0.05）。TNF-α 和 IL-6 表达水平、Th17 细胞数与 UC 分级呈显著正相关,Treg 细胞数与 UC 分级呈显著负相关（P<0.01）。治疗后血清 ESR、CRP、TNF-α、IL-6 表达值下降,治疗组为（11.17±8.01）mm/h、（6.55±5.47）mg/L、（56.42±19.97）ng/L、（154.81±32.29）ng/mL,观察组为（18.07±8.62）mm/h、（16.49±8.32）mg/L、（74.08±20.07）ng/L、（177.47±30.01）ng/mL。Th17 细胞数减少：治疗组（3.18±1.02）、观察组（4.20±1.08）;Treg 细胞数增加：治疗组（8.61±1.52）、观察组（7.50±1.67）;治疗组较对照组变化更明显（P<0.05）。结论：糜蛋白酶联合锡类散保留灌肠疗法治疗 UC 临床效果显著,能明显减轻 UC 患者炎症反应,调节免疫功能。     

Th17/Treg免疫失衡与原因不明复发性流产关系的研究进展

原因不明复发性流产可能由母亲对胎儿的免疫排斥反应所引起。传统Th1/Th2细胞模式已不足以解释母-胎免疫耐受机制,由此提出了Th1/Th2/Th17和Treg的细胞模式。妊娠期间Th17/Treg细胞比例失衡,影响母体外周血及子宫蜕膜局部细胞因子间的网络平衡,打破母-胎免疫耐受致病理妊娠。淋巴细胞主动免疫治疗可在一定程度上调整Th17/Treg比例及其细胞因子的分泌水平,提高妊娠成功率。原因不明复发性流产与免疫因素已成为当前流产研究的热点。本文讨论了Th17/Treg比例失衡与原因不明复发性流产关系的研究进展。     

妊娠浓度孕激素对去势小鼠外周血T淋巴细胞免疫功能的影响

性激素是免疫系统的重要调节因子.女性一生中,伴随着初潮、妊娠和绝经,某些自身免疫性疾病或缓解或加重,可能与雌二醇和孕酮的生理波动造成Th1/Th2细胞偏移,继而体内体液免疫系统功能增强有关.有关雌二醇与免疫系统的关系是研究热点口[1-3],而孕酮作为性激素的另一重要成员,其对免疫系统的影响则鲜有报导.     

阿奇霉素对肺移植术后闭塞性细支气管炎小鼠Th17/Treg平衡的影响

目的 探讨阿奇霉素对肺移植术后闭塞性细支气管炎的影响及对辅助性T（Th）17细胞/调节性T细胞（Treg）平衡的作用。 方法 无特定病原体（SPF）级C57BL/6小鼠24只、Balb/c小鼠48只。以C57BL/6小鼠为供体,Balb/c小鼠为受体,将Balb/c小鼠随机分成4组,每组12只,分别为实验对照组（C组）、阿奇霉素对照组（Cazm组）、移植组（T组）、移植治疗组（Tazm组）。T组和Tazm组建立气管异位移植模型模拟肺移植术后闭塞性细支气管炎。于移植后1 d起,给予Cazm组和Tazm组小鼠阿奇霉素30 mg/kg每周灌胃3次,分别于移植后14 d和28 d取出移植气管,收集外周血。取出移植气管行苏木素-伊红（HE）染色观察病理学变化,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测外周血细胞ROR-γt和Foxp3信使核糖核酸（mRNA）的表达,采用酶链免疫吸附试验（ELISA）法检测血浆Th17、Treg相关细胞因子的水平变化。 结果 气管异位移植后,与C组气管相比,T组和Tazm组移植气管出现闭塞并有炎症浸润,Tazm组程度要轻于T组。与T组相比,Tazm组ROR-γt mRNA表达水平降低（P < 0.05）,两者Foxp3 mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。与T组相比,Tazm组细胞因子白细胞介素（IL）-6、IL-17水平降低（均为P < 0.05）。 结论 阿奇霉素持续治疗可延缓移植后闭塞性细支气管炎的进展,可能与抑制Th17细胞分化及其介导的炎症作用相关。     

槲皮素对小鼠胶原诱导性关节炎症的影响

目的探讨槲皮素对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠关节炎症的影响。方法 6-7周龄的DBA/1 J小鼠随机分为4组,每组10只,对照组,模型组,甲氨喋呤组,槲皮素组。除对照组外,其余小鼠给予牛属Ⅱ型胶原+完全弗氏佐剂进行CIA小鼠第一次免疫,第21天给予牛属Ⅱ型胶原+不完全弗氏佐剂进行加强免疫,次日各组开始给药30天,观察小鼠体重、关节炎指数、足掌厚度、关节病理变化指标。结果与模型组相比,槲皮素可显著改善CIA小鼠关节炎指数、足掌肿胀,对CIA小鼠体重无明显影响,可显著改善CIA小鼠踝关节的病理表现,减轻踝关节的骨破坏。结论槲皮素可有效的减轻CIA小鼠关节滑膜炎症,减轻关节骨破坏,槲皮素是治疗类风湿性关节炎的潜在有效药物。     

Th17细胞和调节性T细胞在肝包虫病免疫逃避中的作用

目的 探讨辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg细胞)在肝包虫病免疫逃避中的作用.方法 前瞻性分析2008年8月至2009年9月新疆医科大学第一附属医院74例受试者的临床资料,将74例受试者分为4组:健康对照组20例,肝囊型包虫病组21例,肝复发囊型包虫病组15例和肝泡型包虫病组18例.应用ELISA法检测各组受试者血清中Treg相关细胞因子转化生长因子(TGF-β1)和IL-10,Th17细胞相关细胞因子IL-17和IL-23的表达,并用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t法和Pearson相关性检验分析其结果.结果 IL-17在健康对照组、肝囊型包虫病组、肝复发囊型包虫病组和肝泡型包虫病组的表达分别为(16±5)、(13±4)、(13±5)和(11±3)ng/L,4组比较,差异有统计学意义(F=6.35,P<0.05);而肝囊型包虫病组与肝复发囊型包虫病组比较,差异无统计学意义(t=0.22,P＞0.05).IL-23在健康对照组、肝囊型包虫病组、肝复发囊型包虫病组和肝泡型包虫病组的表达分别为(139±50)、(106±53)、(107±48)和(72±27)ng/L,4组比较,差异有统计学意义(F=6.74,P<0.05);而肝囊型包虫病组与肝复发囊型包虫病组比较,差异无统计学意义(t=0.02,P＞0.05).IL-10在健康对照组、肝囊型包虫病组、肝复发囊型包虫病组和肝泡型包虫病组的表达分别为(3.1±0.8)、(4.3±2.0)、(4.2±1.4)和(5.5±2.2)ng/L,4组比较,差异有统计学意义(F=9.78,P<0.05);而肝囊型包虫病组与肝复发囊型包虫病组比较,差异无统计学意义(t=0.14,P＞0.05);TGF-β1在健康对照组、肝囊型包虫病组、肝复发囊型包虫病组和肝泡型包虫病组的表达分别为(26±7)、(37±7)、(33±9)和(38±7)μg/L,4组比较,差异有统计学意义(F=6.73,P<0.05);而3种肝包虫病组比较,差异无统计学意义(t=0.56,1.81,P＞0.05).Th17/Treg(IL-17/IL-10)在健康对照组、肝囊型包虫病组、肝复发囊型包虫病组和肝泡型包虫病组的表达比例分别为5.7±2.6、3.6±1.5、3.4±1.9和2.1±0.7,4组比较,差异有统计学意义(F=13.76,P<0.05);而肝囊型包虫病组与肝复发囊型包虫病组比较,差异无统计学意义(t=0.23,P＞0.05).血清中,IL-17和TGF-β1呈负相关(r=-0.23,P<0.05);IL-17和IL-23呈正相关(r=0.70,P<0.05);IL-10和TGF-β1呈正相关(r=0.46,P<0.05).结论 Th17/Treg相关细胞因子平衡在肝泡型和肝囊型包虫病患者中明显向Treg应答偏倚,Th17/Treg相关细胞因子失衡可能参与肝包虫所致免疫逃避.     

Mineral density and histomorphometric assessment of bone changes in the proximal tibia early after induction of type II collagen-induced arthritis in growing and mature rats

Bone changes in both actively growing (6-week-old) and mature (6-month-old) rats with collagen-induced arthritis (CIA) were investigated in order to clarify the mechanisms of osteoporosis near inflamed joints in patients with early rheumatoid arthritis (RA) and juvenile RA. In female Sprague-Dawley rats, the proximal tibiae from the CIA and control groups early after immunization, when any influence of immobilization due to joint pain and swelling is minimal, were studied using dual X-ray absorptiometry and histomorphometry after double-labeling with tetracycline. Arthritis developed within 10–14 days after immunization in both growing and mature rats. Physical activity, growth, and body weight continued to resemble that of the control group for at least 10 days. The bone mineral density in the proximal tibia did not differ significantly between the CIA and control groups. In growing rats, a highly significant increase in bone resorption, and decreases in bone formation and trabecular bone volume became evident histomorphometrically before visible signs of arthritis had developed. In mature rats, bone formation was markedly decreased without an increase in bone resorption. The differences in the reaction between growing and mature rats reflected a difference in the number of remodeling sites (units) and an uncoupling between osteoblasts and osteoclasts. We conclude that osteoporosis near inflamed joints results from an imbalance between bone resorption and formation caused by immune reactions in the CIA rats. Moreover, a decrease in bone formation may, in part, precede the clinical onset of arthritis. Received: December 27, 1999 / Accepted: September 4, 2000     

人脐带间充质干细胞移植对大鼠流产模型妊娠结局的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(WJ-MSCs)移植对大鼠流产模型妊娠结局的影响及机制。方法将48只孕鼠随机分为6组,每组8只。生理盐水对照组(a):孕6~8d皮下注射生理盐水0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;乙醇对照组(b):孕6~8d皮下注射75%乙醇0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;流产模型组(c):孕6~8d皮下注射溴隐亭0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;实验组d1、d2、d3分别于孕6~8d皮下注射溴隐亭0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射WJ-MSCs 1×105个、1×106个、1×107个(生理盐水使用量为1ml/kg,将细胞制成混悬液后注射)。各组大鼠均于孕14d处死并取材,观察各组大鼠胚胎吸收率,RT-PCR检测蜕膜组织白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和IL-17mRNA的相对表达量。ELISA检测各组外周血IL-10、IFN-γ和IL-17的含量。结果 c组和d1组的平均胚胎吸收数和平均胚胎吸收率均显著高于a、b、d2、d3组(P0.05)。c组、d1组与a、b、d2、d3组比较,IL-10mRNA表达显著降低(P0.05),IFN-γ和IL-17mRNA表达显著升高(P0.05)。c组、d1组与a、b、d2、d3组比较外周血IL-10含量显著降低(P0.05),IFN-γ和IL-17含量显著升高(P0.05)。c组与d1组间,a、b组与d2、d3组间的观察指标比较均无显著性差异(P0.05)。结论一定浓度的WJ-MSCs移植入大鼠流产模型体内,可以降低胚胎吸收率,改善大鼠流产模型的妊娠结局;其机制可能与WJ-MSCs上调IL-10、下调IFN-γ和IL-17的含量有关。     

青蒿琥酯对大鼠胶原诱导性关节炎骨质疏松的保护作用

目的 探讨青蒿琥酯是否能抑制CIA大鼠骨质破坏及预防骨质疏松及其可能的机制。方法 随机将大鼠分为对照组、CIA 模型对照组、MTX组、青蒿琥酯组、甲基泼尼松龙组及rhTNFR:Fc组并灌胃给药。行大鼠四肢关节钼靶拍片,并予影像学评分。收取大鼠血液和尿液测定血钙、血磷、尿钙、尿磷的含量,同时测定血、尿液中脱氧吡啶啉（DPD）含量、血清碱性磷酸酶、骨保护钙素含量,并采用骨密度仪对大鼠全身骨骼进行扫描。结果 青蒿琥酯组与MP、MTX和CIA比较有统计学意义（P<0.01), 21w时与10w周比较无统计学意义。rhTNFR:Fc组在与健康组比较均无统计学意义,与其他药物干预组比较均有统计学意义（P<0.05); CIA模型对照组、甲氨蝶呤组、甲基泼尼松龙组各项检测指标与造模后21w与10w比较有统计学意义（P<0.01)。骨密度检测提示甲基泼尼松龙及甲氨蝶呤组在第10w及21w均不能抑制骨质疏松的发生,而青蒿琥酯组和rhTNFR:Fc组于第10w及21w均可预防骨质疏松的发生。影像学亦显示青蒿琥酯组和rhTNFR:Fc组可预防CIA大鼠发生骨质疏松。结论 青蒿琥酯有预防CIA大鼠骨质疏松及抑制骨质破坏的作用,其可能的机制是抑制TNF-α的分泌、作用于OPG/RANK/RANKL信号系统从而阻断破骨细胞的生成和活化。     

尿毒症患者血液透析前后血清miR-155表达水平及其与Th17/Treg细胞平衡的关系

目的:探究血清微小RNA-155(miR-155)在尿毒症患者血液透析(HD)前后的表达水平及其与辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:选取2017年9月至2019年12月本院收治的86例尿毒症患者的临床资料进行研究,将患者按照HD前后分为HD前组和HD后组,并以同期本院94例体检健康...