川芎嗪对离体灌注大鼠肝脏缺氧的保护作用

目的:探讨川芎嗪对离体灌注大鼠肝脏组织在缺氧情况下的保护作用。方法:将离体大鼠肝脏的灌注模型分为缺氧对照组和缺氧川芎嗪保护组（160mg川芎嗪）。分别测量基础对照、缺氧和缺氧恢复3个阶段的血红蛋白（Hb）浓度和氧合血红蛋白（HbO2）浓度,并且利用计算机辅助扫描系统得出Hb和HbO2浓度的空间分布图。结果:缺氧可使Hb浓度增加,川芎嗪未改变由缺氧引起Hb增加。缺氧可以造成HbO2浓度降低,川芎嗪可以显著减小HbO2浓度减低的幅度（P<0.01）。所测的三维空间分布图显示:缺氧可导致肝脏组织中的功能区破坏,川芎嗪对功能区起到保护作用。结论:中药川芎嗪对离体灌注的大鼠肝脏有明显的抗缺氧保护作用。     

Reactive oxygen species in health and disease

With the advent of the use of oxygen as the terminal electron acceptor in aerobic respiration, came the curse in the form of reactive oxygen species (ROS). However, the evolving organism had developed elaborate defence machinery to escape from these reactive byproducts of its own metabolism, and also developed a mechanism for the utilization of these species in physiological processes to gain a survival advantage. ROS have been increasingly implicated in the ageing process and in different diseases such as cancer, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, reperfusion injury, etc. They are also important in cellular phenomenon such as signal transduction pathways. We review the mechanisms of production of ROS in the cell, their interaction with cellular macromolecules, pathways of ROS-induced cell death, the mechanisms for protection from ROS-induced damage as well as the key biological and disease processes where ROS play an important role.     

活性氧对低氧诱导因子的调节

需氧生物的生存离不开氧的供应.如果在物质氧化产生能量过程中,氧未被完全还原成水,可导致氧自由基的产生,氧自由基也可转变成一些非自由基氧活性物质.由于功能上的相似性,这些物质被统称为活性氧(ROS).ROS增多可造成蛋白质、DNA和脂质损伤.许多证据表明,氧分压改变、激素、细胞因子和化学物质等均可引起的ROS增加,作为细胞信号分子,ROS可参与细胞功能的调节.低氧诱导因子(HIF)是各种低氧诱导基因调节的关键转录因子,它的活性复合体是由2个亚单位组成的异构体.最近研究发现,无论是缺氧或非缺氧情况,ROS均参与HIF活性的调节.本文主要就ROS的产生及其对HIF活性调节方面的文献进行综述.     

氧自由基增强脂肪细胞IL-6表达的实验研究

目的:研究脂肪细胞中氧自由基(ROS)对白细胞介素-6(IL-6)表达的调节,并探讨其机制。方法:培养3T3-L1细胞,并诱导其分化成为脂肪细胞,以MTT比色法检测细胞的活性。分别以定量PCR、多重免疫分析及夹心ELISA法检测PAI-1的mRNA和蛋白表达的水平。采用抑制剂干预的方法,寻找影响IL-6表达的信号分子。结果:作为一种重要的ROS,H2O2可剂量依赖性的增加IL-6的产生。Akt、JAK/STAT及ERK1/2的活化可能参与到H2O2对于IL-6的调节过程中。结论:ROS可能通过磷酸化激活Akt、JAK/STAT及ERK1/2,上调脂肪细胞IL-6的表达,从而参与肥胖、心血管疾病以及肿瘤等病理生理过程。     

异氟烷改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡

目的:研究异氟烷对离体鼠肝在缺氧-复氧状态下肝流量和肝氧耗的作用.方法:建立离体鼠肝灌流模型.将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2 kPa,缺氧状态用0.2 kPa),另外加入葡萄糖10 mmol/L维持营养,加入1%牛血清白蛋白维持胶体渗透压,控制在生理pH值和温度,实时监测氧分压和肝流量变化.不同浓度异氟烷随混合气带入离体鼠肝灌注的人工肺.结果: (1)异氟烷对基础状态下鼠肝流量无明显影响,但可改善缺氧后复氧状态下鼠肝流量的减少.(2)异氟烷对基础状态下鼠肝氧耗有降低作用,但在复氧状态下却改善了鼠肝氧耗的下降.结论:异氟烷能改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡,保护肝脏功能.     

Reactive oxygen species contribute to the induction of superoxide dismutase during heat shock in cultured rat neonatal cardiomyocytes

Objective To explore the influence of reactive oxygen species (ROS) during heat shock on the activity of superoxide dismutase (SOD) and the endurance of cardiomyocytes against hypoxia-reoxygenation damage. Methods Cultured rat neonatal cardiomyocytes were divided into 5 groups (n=6/group): normal control, anoxic control, heat shock, heat shock + SOD (150 U/ml) and exogenous ROS pretreated. Myocytes were first incubated in a CO(2)incubator (37℃) with Hank’s solution for 30 min, followed by specific pretreatment. Heat shock was performed by incubating the cells in a 43℃ incubator for 30 min; exogenous ROS were generated by the reaction of xanthine oxidase with xanthine. After the dishes were returned to normal incubation conditions for 24 h, myocytes underwent hypoxia (3 h) and reoxygenation (1 h). Results Compared with control groups, ROS production increased after the cells experienced heat shock (1.28±0.34 nmol/mg·protein vs 0.80±0.23 nmol/mg·protein and 0.74±0.20 nmol/mg·protein, P&lt;0.05) or ROS pretreatment (3.30±0.58 nmol/mg·protein, P&lt;0.05). 24 hours later, accompanied by attenuated cellular injury, significantly increased SOD activity was found in heat shock (2.55±0.43 U/mg·protein vs 0.77±0.12 U/mg·protein and 0.63±0.09 U/mg·protein, P&lt;0.05) and exogenous ROS pretreated (2.34±0.31 U/mg·protein, P&lt;0.05) groups following reoxygenation. Moreover, opposite results were found when myocytes were treated with SOD during heat shock. Conclusions The release of ROS during heat shock triggers delayed myocardial protection by altering the activity of SOD. ROS may play an important pathophysiological role in heat shock induced myocardial protection.     

内皮素对心脏功能和细胞能量代谢影响的实验研究

目的:观察内皮素1(ET-1)对心脏功能、心肌血流、细胞能量代谢和对底物摄取的影响,以探讨烧伤后循环血液中ET水平增高的病理作用.方法:采用多核磁共振波谱等技术,观察离体灌流的工作大鼠心脏冠脉流量、心输出量、左心室内压、心率、心肌细胞能量代谢和对底物的利用等指标对ET-1的剂量依赖性反应.结果:ET-1使冠脉流量进行性下降,心输出量和心肌收缩力呈双相变化,心肌细胞内磷酸化势能降低,对外源性乳酸利用障碍.结论:病理水平的ET-1对离体灌流的工作大鼠心脏具有直接正性肌力作用和间接的负性肌力作用,并影响细胞的能量代谢过程;对循环血液中ET-1水平较高的患者应用醋酸钠比乳酸钠可能更易于心肌细胞的摄取和利用.     

内皮素-1对肝硬化大鼠不同病期离体肝脏及血管环调节作用的研究

目的　探讨不同浓度内皮素 1(ET 1)对早、晚期肝硬化大鼠离体肝脏及血管环调节作用及其变化规律。方法　皮下注射CCl4制备大鼠肝硬化模型 ,在造模 9周末和 14周末采用离体肝灌注和离体血管环技术研究不同浓度ET 1对早、晚期肝硬化大鼠肝血流动力学及血管环的调节作用。结果　晚期组 (n =8)肝硬化大鼠基础状态门静脉压 (Ppv) (2 36± 0 2 9)高于早期组 [1 5 4± 0 2 1,(n =8) ],均高于正常对照组 [1 18± 0 13,(n =8) ],各组间Phv差异无显著意义。给予ET 1后 ,门静脉灌注压 (PVP)随ET 1浓度增加而升高 ,晚期组较早期组升高更为明显 ,均高于正常对照组 ,而离体血管环对不同浓度ET 1的浓度累积反应曲线随病期进展而右移 ,同一病期血管环随ET 1浓度增加而收缩性增强 ,但均低于正常对照组 ,0 1nmol/LET 1对晚期组有轻度扩血管作用。结论　ET 1可明显增加肝循环阻力 ,在肝硬化大鼠此种阻力增加作用强于正常大鼠 ,且随肝硬化程度加重而增强 ,而外周血管对ET 1的反应性随病期进展而下降 ,表明ET 1在门脉高压的形成和维持中发挥重要作用。     

低浓度葡萄糖诱导ECV304细胞损伤机制的初探

目的 探讨低浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞损伤的可能机制.方法 以人脐静脉内皮细胞株ECV304为细胞模型,用低浓度葡萄糖刺激ECV304细胞,流式细胞仪测定12h内不同时间点细胞ROS产量,之后用低浓度葡萄糖及NADPH氧化酶抑制剂apocynin联合刺激ECV304细胞12 h,用流式细胞仪测定ROS产量,MTT法测定细胞活力,光泽精化学发光法测定NADPH氧化酶活性.结果 低浓度葡萄糖能够显著增加ECV304细胞ROS产量,ROS产量具有时间依赖性和葡萄糖浓度依赖性,低糖能增加NADPH氧化酶的活性.用NADPH氧化酶抑制剂apocynin预处理细胞,能使2.8mmol/L组活性氧产量降低44%,细胞活力提高32%,0mmol/L组活性氧产量降低60%.结论 低糖可以显著增高ECV304细胞氧化应激水平而参与内皮细胞损伤,其部分机制可能与NADPH氧化酶激活有关.     

线粒体源性氧自由基参与二氮嗪预处理的心肌保护作用

目的：研究线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪预处理中氧自由基（ROS）的来源。方法：传代培养的未成熟SD大鼠心肌细胞，随机分为对照组、二氮嗪（30μmol/L)预处理组、二联苯碘（DPI，10μmol/L)处理组、myxothiazol(0.2μmol/L)处理组。实验结束时全自动生化仪检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性，硫代巴比妥酸法测细胞内丙二醛（MDA）含量，台盼蓝染色法统计死亡率，电镜下观察线粒体的形态。结果：二氮嗪预处理可降低细胞死亡率、细胞内MDA含量及培养液中LDH的释放量，减轻细胞内线粒体水肿程度。二氮嗪的这种保护作用可以被线粒体氧化呼吸链阻断剂myxothiazol阻断。结论：二氮嗪预处理对心肌细胞的保护作用与线粒体电子传递链氧化产生的氧自由基有关。     

异甜菊醇在大鼠离体肝灌流中的药代动力学研究

目的研究异甜菊醇在大鼠肝脏内的代谢情况。方法给予SD大鼠离体肝灌流（112）行异甜菊醇的初步药动学研究（体外试验）。分离5只大鼠肝脏然后用含有异甜菊醇的介质进行循环灌流,在时间为0、1、3、5、10、15、20、25、30、40、50、60rain时收集灌流液样品,每间隔10min收集胆汁样品,样品用HPLC—UV分析。尿液（前面实验收集）、灌流液和胆汁样品用β-葡萄糖醛酸酶（1-3U／μL）培养再进行HPLC—UV分析。结果40～50min后的灌流液中,HPLC法检测不到异甜菊醇,而胆汁中完全没有检测到。灌流液和胆汁分别经过β-葡萄糖醛酸酶／硫酸根培养后,色谱方法与灌流液的一样保持不变,胆汁样品中得到了明显的异甜菊醇峰。60min中的药动学参数正T1/2、AUClast、Vz（ods）、CLH、EH（肝脏提取率）和回收率（R0-60代谢率）分别为：（17．82±2．5）min、（258．18±33．2）min·μg／mL、（425．35±32．1）mL、（17．7±2．2）mL／min、（0．59±0．07）和（18．08±2．5）。结论经过40—50min灌流后异甜菊醇主要在肝脏中积累,以葡萄苷酸化形式从胆汁排泄,很可能大部分经过胆汁排泄慢慢的消除到粪便中。     

Reactive oxygen species in paraventricular nucleus involved in cardiac sympathetic afferent reflex in rats

INTRODUCTION Cardiacsympatheticafferentreflex(CSAR)isapositive feedback,sympatho excitatoryreflex,whichcontributestoanincreaseinsympatheticoutflow insomepathophysiologicalconditionssuchaschronic heartfailure(CHF)andarterialhypertension.Thepar aventricularnucleus(PVN)isanimportantintegrative centerinthecontrolofcardiovascularactivity.Ourpre viousstudiesrevealedthatAngⅡinthePVNenhanced theCSARinnormalratsandratswithCHF,andthisen hancementwasattenuatedbymicroinjectionoftheAngⅡAT1r…     

Effects of Amrinone on Cardiac Contraction and Relaxation in Isolated，Perfused Rat Heart

(马业新)(赵华月)ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＡｍｒｉｎｏｎｅｏｎＣａｒｄｉａｃＣｏｎｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄＲｅｌａｘａｔｉｏｎｉｎＩｓｏｌａｔｅｄ，ＰｅｒｆｕｓｅｄＲａｔＨｅａｒｔ￥ＭＡＹｅ－ｘｉｎ；ＺＨＡＯＨｕａ－ｙｕｅ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｎｔｅｒｎ...     

Metabolic vs. functional effects of endothelin on isolated perfused working rat hearts

Ithasbeenpreviouslyobservedthatburntraumaincreasesthesynthesis,secretionandplas-malevelofendothelin(ET)whichhasbeenre-centlyrecognizedasthestrongestendogenousvas-cularcontractor[l'2J.ETisalsofoundtobein-volvedintheprocessofsystemicinflammatoryre-sponsepostburnbyincreasingvascularpermeabili-tyandpromotingtheadhesionbetweenneutrophilsandendothelia.However,controversieshavepre-sentedaboutitseffectsoncardiacfunction,andthereisnoreportonitsmetaboliceffectsonmy-ocardium.Thisstudywasdesignedtoinves…     

活性氧介导紫花牡荆素诱导卵巢癌HO-8910细胞调亡

目的:探讨紫花牡荆素(Casticin,CAS)诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡是否涉及活性氧生成和线粒体膜去极化。方法:体外培养HO-8910细胞。AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针FCM检测细胞活性氧生成;Rh123探针FCM分析细胞线粒体跨膜电位。结果:CAS诱导HO-8910细胞凋亡率增高,呈剂量依赖性。CAS以浓度依赖方式增高HO-8910细胞内活性氧水平。CAS处理细胞的Rh123平均荧光强度显著降低,表明CAS具有诱导细胞线粒体膜去极化作用。N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)部分拮抗CAS诱导细胞凋亡,并能减弱CAS诱导活性氧生成和线粒体膜去极化作用。结论:CAS诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡作用机制可能与促进细胞活性氧生成介导的线粒体膜去极化相关。     

核黄素对离体大鼠心肌再灌注损伤时冠脉内皮的影响

目的　观察离体大鼠心肌缺血再灌注时冠脉内皮变化及核黄素 (riboflavin ,RBF)对其影响 ,并探讨其作用机制。方法　取 30只SD大鼠 ,2 5 0～ 30 0g ,随机分成 3组 ,即正常对照组 (NC组 ,n =10 )、缺血再灌注组 (I/R组 ,n=10 )、核黄素预处理组 (RBF预处理组 ,n =10 ) ,采用Langendorff离体心脏灌流装置 ,通过降低灌流量后复灌造成心脏I/R模型 ,测定缺血前、缺血后和再灌各个时段冠脉流出液中vWF、NO水平及CPF ,实验结束后取心肌组织测定NOS、SOD活性和MDA含量。结果　RBF预处理组与I/R组比较 ,冠脉流出液中NO含量显著增加 (P <0 .0 1) ,vWF含量降低 (P <0 .0 1) ,CPF明显升高 (P <0 .0 1) ,同时 ,心肌中TNOS、eNOS、SOD活性升高 (P <0 .0 1) ,MDA含量下降 (P <0 .0 1)。结论　RBF可以减轻离体大鼠心肌缺血再灌注损伤 ,其机制可能与其保护冠脉内皮免于受损及NO介导的冠脉扩张效应 ,改善低灌注状态 ,增强心肌抗氧化能力有关。