复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防作用

背景：卡氏肺孢子虫肺炎是由卡氏肺孢子虫寄生于肺部引起的一种严重的致命性肺炎。复方磺胺甲恶唑是目前用于治疗卡氏肺孢子虫肺炎的一线药物,治疗量往往有明显的不良反应,小剂量预防用药临床疗效及毒副作用尚不清楚。 目的：观察复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防效果。 方法：选择肾移植后1个月且无复方磺胺甲恶唑过敏者。肾移植后1个月至半年或1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)。观察移植肝肾功能,感染情况,药物不良反应。 结果与结论：2006年起,随访125例肾移植术后早期患者,73例术后1个月起常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后半年者,1例停药4个月后感染卡氏肺孢子虫肺炎死亡,47例服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后1年者,无感染卡氏肺孢子虫肺炎者,5例因复方磺胺甲恶唑过敏或医从性差未服用复方磺胺甲恶唑者,2例分别在术后4,5个月感染卡氏肺孢子虫肺炎,1例死亡。结果提示,肾移植术后1个月至1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d),可有效预防卡氏肺孢子虫肺炎,临床无明显不良反应。     

卡氏肺孢子虫的分类、命名、体外培养及其动物模型的建立

以往所称的“卡氏肺孢子虫” (Pneumocystiscarinii,Pc)能感染包括人和实验动物在内的多种哺乳动物 ,免疫力低下的宿主感染后能引起致命的卡氏肺孢子虫肺炎 (Pneumocystiscariniipneumonia,PCP )或称肺孢子虫病(Pneumocystosis)。国际上已将原感染人体的卡氏肺孢子虫 (Pneumocystiscarinii)更名为Pneumocystisjeroveci,国内张瑞娟、朱淮民( 2 0 0 3)将其译为耶氏肺孢子虫 ,然尚未被广泛应用。其生物学分类也由原来动物界的原虫定为真菌界的真菌类。重新命名和跨界的分类归属具有重要意义 ,然而 ,国内有关“卡氏肺孢子虫”的报道 ,尚未启…     

卡氏肺孢子虫感染大鼠血清中蛋白及血液中嗜酸粒细胞的变化分析

卡氏肺孢子虫肺炎（pneumocystis carinii pneumonia,PCP）是由卡氏肺孢子虫（pneumocystis carinii,PC）引起的一种呼吸系统机会性感染,多见于免疫功能低下患者。据报道,未经药物预防的爱滋病（AIDS）患者约80％感染PCP。     

mtLSU-巢式PCR检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的实验研究

目的对mtLSU-巢式PCR方法检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值以及基因序列进行评价。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫;实验组10只,对照组1只;诱导至第7周时收集实验组及对照组大鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,采用mtLSU-巢式PCR方法对人源与鼠源肺孢子虫共有的基因进行扩增和序列测定,同时采用镜检法对实验组大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测,评估两种方法的敏感性。结果采用mtLSU-巢式PCR方法对实验感染大鼠肺组织和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为100%（10/10）、90%（9/10）。而GMS染色镜检法检测的阳性率分别为80%（8/10）、60%（6/10）。所测Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU基因序列长度为155bp,与GenBank的大鼠源肺孢子虫（U20170）及人源肺孢子虫（DQ473446）同源性均为100%（154/154、155/155）。结论 mtLSU-巢式PCR方法应用于大鼠卡氏肺孢子虫检测敏感性高,特异性强;获得与人源耶氏肺孢子虫相同的Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU的基因序列。     

中药防治肺孢子虫肺炎的研究进展

肺孢子虫肺炎是由肺孢子虫引起的主要寄生于肺脏的一种致命性肺炎,常见于肿瘤放化疗者、器官移植术者或长期应用激素,尤其是艾滋病患者等免疫功能低下人群。随着肺孢子虫肺炎发病机制的逐步阐明,我国部分中药用于该病的防治取得了较好的疗效,具有广阔的应用前景。本文对近年来几种主要的抗肺孢子虫肺炎中药在防治肺孢子虫肺炎中的研究进展进行了综述。     

肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎36例资料回顾(英文)

背景:卡氏肺孢子虫肺炎是常见的肾移植后早期并发症,起病隐匿,进展快,若诊治不及时,死亡率高,认识和掌握肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的发生发展规律和干预措施具有重要的临床意义。目的:回顾性分析肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎的病因、临床特点、诊疗措施及预后。方法:回顾分析36例南方医科大学珠江医院器官移植科收治的肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎患者的临床资料,分析一般状况、临床表现、治疗方案及人、肾预后情况,总结和认识该病诊断干预措施。结果与结论:36例患者中男22例,女14例,33例痊愈且移植肾功能保持良好,3例患者并发严重急性呼吸窘迫综合征死亡。36例患者卡氏肺孢子虫肺炎发生在肾移植后6个月内31例,7～18个月5例。15例(41.7%)通过纤维支气管镜下支气管灌洗液或肺组织活检检出卡氏肺孢子虫,21例未检出。多数患者经过减少免疫抑制剂、给予复方磺胺甲恶唑及支持治疗后痊愈且移植肾功能良好。提示卡氏肺孢子虫肺炎多发生在肾移植后6个月内,临床症状典型,病原体难以发现,早期诊断主要依据临床病史、症状和影像学检查,尽早、足量给予复方磺胺甲恶唑,减少免疫抑制剂,充分的支持治疗能改善预后。     

双氢青蒿素对卜氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF—α水平的影响

目的 研究双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液TNF－α水平的影响。方法 以醋酸可的松皮下注射Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型，用60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠，杀鼠取肺，用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞，用LPS刺培养72h，同时设有感染组和正常对照，用TNF－α水平则低于感染组。结论 卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的TNF－α，但双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生TNF－α水平降低。     

实验性卡氏肺孢子虫肺炎的病理学研究

Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射醋酸考的松诱发卡氏肺孢子虫肺炎，自第６～１２周，每周解剖病鼠２只观察，全部给药鼠均发病。肺部病变表现为：（１）肺印片查见卡氏肺孢子虫包囊和滋养体。（２）组织病理学改变：第６～８周ＨＥ染色切片呈间质性肺炎伴中度淋巴细胞浸润，肺泡内缺乏泡沫样渗出物，第９～１２周肺泡内出现泡沫样渗出物，ＰＡＳ染色该渗出物呈阳性反应，ＧＭＳ染色查见染成黑色的包囊。（３）停用醋酸考的松后４～６周，肺部炎症明显好转，提示大鼠卡氏肺孢子虫肺炎有自愈可能。电镜显示包囊、滋养体及受损肺泡上皮细胞的超微结构。     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α水平的影响

目的研究双氢青蒿素治疗对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液 TNF- α水平的影响。方法以醋酸可的松皮下注射 Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用 60 m g/ kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞 ,用 L PS刺激培养 72 h,同时设有感染组和正常对照。用 TNF- α试剂盒分别检测血清和培养上清液 TNF- α的水平。结果感染组和治疗组 TNF- α水平均高于正常对照 ,治疗组 TNF- α水平则低于感染组。结论卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的 TNF- α,但双氢青蒿素治疗后 PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生 TNF- α水平降低。     

肾移植后合并卡氏肺孢子虫肺炎：10年同一机构378例中的12例

背景：在肾移植后早期,由于免疫抑制剂用量较大,患者的免疫功能明显受到抑制,卡氏肺孢子虫肺炎在此期间相对高发。 目的：分析肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎的临床特点、诊治及预防。 方法：收集佛山市第一人民医院肾内科2000-11/2010-07肾移植378例中并发卡氏肺孢子虫肺炎12例患者的临床资料,分别对其发病时间、易感因素、诊断方法、临床表现及治疗方案、预防效果进行回顾性分析。 结果与结论：发病时间为移植后5.3(3~11)个月。12例患者均有发热,体温达38.0~40.2 ℃,气促及紫绀。9例轻微咳嗽,5例少量白痰,1例红色泡沫痰。5例合并细菌感染,2例合并真菌感染,2例合并巨细胞病毒感染,1例合并结核。服用他克莫司患者感染发生率为7.8%(7/89),服用环孢素A患者感染发生率为1.7%(5/289)。9例使用呼吸机,2例使用呼吸机无创性连续鼻或口鼻面罩治疗。8例痊愈,2例治疗中出现血小板减少致脑出血死亡,1例合并真菌感染死亡,1例合并血气胸死亡。治疗期间,无排斥反应发生。说明早期诊断,联合用药,减少免疫抑制剂用量是提高卡氏肺孢子虫肺感染治愈率的关键。     

中国耶氏肺孢子虫基因型的初步分析

为研究我国耶氏肺孢子虫的基因分型,利用巢式PCR方法扩增24例肺孢子虫肺炎(PCP)患者支气管肺泡灌洗液中的耶氏肺孢子虫(Pneumocystis jiroveci)核糖体DNA内转录间隔区(ITS1-5.8S rDNA-ITS2)基因。纯化回收目的片段,将其克隆到PMD18-T载体,并导入JM109细胞系中,每个标本制备3~5个克隆,提取质粒测序。从19例患者的标本中检出ITS1-5.8S rDNA-ITS2基因,其中12份标本的25个克隆的测序结果可用于基因分型。经与Lee等(1998)的分型标准进行比对,本组病例耶氏肺孢子虫的ITS1分为B、E、I、N4型,最常见的为E型;ITS2分为a、b、e、h、i、n6型,最常见的为i型;ITS基因分9型,以Bi多见,有2份标本存在混合感染。     

寄生虫学

弓形虫不同地理株致密颗粒蛋白基因的比较研究；zs株弓形虫p22基因片段在巨噬细胞中的表达；急性弓形虫感染所致昆明鼠不孕的实验研究；弓形虫p24基因敲除转染质粒pGB／P5-P3的构建；大鼠天然抗体相关的弓形虫抗原基因的免疫筛选与克隆；弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体的构建及筛选；大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的实验病理学研究；卡氏肺孢子虫病鼠氧化损害与中药防治的实验研究；肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎12例临床研究；人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡；旋毛虫新生幼虫cDNA文库的免疫筛选；广州管圆线虫成虫cDNA文库抗原基因的筛选；用组织化学方法鉴别日本血吸虫细胞来源的研究；日本血吸虫EST序列的电子延伸及结果分析。     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：检测双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法：以醋酸可的松皮下洲Wistar大鼠建立PCP动物模型，对60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠，杀鼠取肺，用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞，可PI和TUNEL法检测其凋亡，同时设有正常大鼠对照组。结果：感染组和治疗组大鼠肺泡巨噬．细胞凋亡率显著高于正常对照组，治疗组大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率明显低于感染组。结论：卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞发生凋亡，经双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞凋亡降低。     

卡氏肺孢子虫病的诊断及其进展

卡氏肺孢子虫病诊断方面的研究表明，辅助诊断方法缺乏特异性，在确定病人是否有肺感染，感染的程度及疗效的考核上都有一定作用。但ＰＣ感染的最后确诊主要靠病原体检测。取材方法：对于肺感染者应以导痰为首选，其次是ＢＡＬ和ＴＢＬＢ。儿童可采用经皮穿刺肺吸引的方法取材。在前述方法无法实施的紧急情况下，才考虑开胸肺活检。肺外感染者可在病变局部穿刺取材。制片法：可用穿刺物或肺组织等做直接涂片，印片，或悬液滴片等简捷方法，也可采用组织切片。染色方法：常用Ｇｉｅｍｓａ、初检、ＴＢＯ或ＧＭＳ法进一步确诊。ＩＦ可提高检出率。ＰＣＲ技术检测孢子虫病更敏感和特异，有操作简便，易于推广应用等优点。     

大理市下关镇市售猪肉、牛肉肉孢子虫感染情况调查

目的了解云南省大理市下关镇的市售猪肉和黄牛肉的肉孢子虫感染情况,为肉孢子虫的预防控制提供科学依据。方法选择下关镇泰兴农贸市场、农溪农贸市场、滇纺农贸市场、桥北农贸市场和西窑农贸市场共5个市场作为调查点,取猪或牛的腹肌、肋间肌、后腿肌、臀肌等部位为调查部位,每头猪（或牛）取一个部位,每个部位约取10g肌肉,共73份;在光学显微镜下鉴别虫种;对阳性样本,取5g左右的肌肉,计算每克肉中肉孢子虫包囊数;计算各市场猪肉和黄牛肉的感染率及感染度,分析大理市下关镇的感染现状。结果大理市下关镇市售猪牛肉的肉孢子虫（Sarcocystis）总感染率为31.51%;共发现4种孢子虫,即猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）、米氏肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana）、毛状肉孢子虫（Sarcocystis hirsuta）、枯氏肉孢子虫（Sarcocystis cruzi）,其感染率分别为29.51%、1.64%、33.33%和16.67%,各市场的肉孢子虫感染率无差别;后腿肌检出率最高,为39.39%,但各部位的肉孢子虫感染差异无统计学意义;各农贸市场的肉孢子虫的平均感染度为1.35条/g。结论大理市下关镇泰兴农贸市场、农溪农贸市场、滇纺农贸市场、桥北农贸市场和西窑农贸市场的市售猪肉、牛肉的肉孢子虫感染率及感染度均较高,该地区存在人群感染的巨大隐患。     

实时定量PCR技术诊断PCP的研究进展

肺孢子菌肺炎(PCP)是一种由耶氏肺孢子菌引起的致死性肺炎,常见于免疫功能低下人群,早期诊断有助于临床治疗.目前常用的病原学检查漏诊率较高;定性PCR检测虽然敏感,但有时难以区分隐性感染和显性感染.实时定量PCR是近年来发展的一种精确、敏感、污染少的核酸定量技术.本文综述结果表明,实时定量PCR技术能快速、敏感、特异地...     

实验感染大、小鼠和临床疑似病例肺孢子虫mt LSU rRNA基因检测

为探讨PCR技术对实验感染大、小鼠肺孢子虫肺炎(PCP)和临床疑似病例诊断的可行性。用皮下注射地塞米松法诱导SD大鼠和ICR小鼠PCP并收集临床疑似病例24h深部痰液。受试动物解剖后,制备肺印片,经瑞姬氏复合染色镜检确定肺孢子虫(Pc)感染的阳性率;同时,以针对虫体mtLSUrRNA基因设计的引物,PCR扩增鼠肺组织和支气管灌洗液(BALF),以及痰液样本中的DNA;比较实验动物样本镜检和PCR两种方法的检测结果;测定PCR的敏感性和特异性。结果表明,SD大鼠和ICR小鼠肺印片的阳性率分别为68.8%(1116)和85.7%(1821),肺组织PCR检测的阳性率分别为75%(1216)和80.9%(1721),肺泡灌洗液PCR的阳性率分别为81.2%(1316)和23.8%(521)。肺印片镜检和PCR技术检测结果无显著性差别;可见,PCR对虫体mtLSUrRNA基因的检测具有显著的特异性和敏感性,至少可以检测出0.6pg的肺孢子虫DNA;6例临床疑似病例样本中2例显示肺孢子虫PCR阳性反应。     

卡氏肺孢子虫病1例

卡氏肺孢子虫是一种机会性致病原虫,主要在机体免疫低下或缺陷时易引起肺部感染。国内发病极少,现报道1例。 患婴女性,11个月,出生6个月后经常患上呼吸道感染及湿疹,9个月时因全身皮肤出现淤点淤斑而入院。外周BPC1.5×10~9·L~(-1),经骨髓穿刺诊断为:特发性血小板减少性紫癜。强的松等药物治疗,病情无明显缓解。治疗一个半月后,出现发热、咳、喘,肺闻及干湿罗音,X线诊断为肺     

寡核苷酸探针RNA原位杂交法检测肺孢子虫的研究

目的探讨RNA原位杂交法在肺孢子虫病理检测中的应用。方法采用小亚单位RNA位点来源的寡核苷酸探针、地高辛加尾标记、Wistar雌性大鼠皮下注射地塞米松建立肺孢子虫肺炎动物模型,取肺组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交,并将结果与瑞氏-吉姆萨染色法进行比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第3周检到虫体,呈游离分布;7～8周时检测到大量包囊;9～10周时滋养体大量出现;组织内肺孢子虫的检出率（32/32）高于瑞氏-吉姆萨染色法（25/32）。结论 RNA原位杂交法是一种敏感特异的肺孢子虫病理检测方法。     

兔源肺孢子虫种系发育的研究进展

肺孢子虫属（Pneumocystis）含多种具宿主种特异性的肺孢子虫，它们可以诱导严重免疫功能低下宿主产生肺孢子虫肺炎。断乳兔可自发发生肺孢子虫肺炎，引起典型的肺部病理组织学改变。本文就兔源肺孢子虫光镜与电镜结构、基因和种系发育学特点进行综述，并与其他种肺孢子虫进行比较，从生物学与种系发育学上证据表明兔源肺孢子虫应是一新种肺孢子虫，同时也证实了肺孢子虫具有遗传多样性。