震颤行为定量检测仪的研制与初步临床应用

震颤行为是巴金森氏病的一种常见的临床表现，目前在临床中对震颤行为的定量描述方法和定量分级标准尚未形成。作者介绍了利用光电位置检测技术构成的计算机化的震颤行为定量检测仪的原理和初步临床应用情况。     

甲状旁腺激素荧光免疫层析定量检测技术的研制及应用研究

研制一种操作简易、灵敏度高的荧光免疫层析试纸条,用于定量检测甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,将标记抗体LA001与荧光微球结合于聚酯膜结合垫上,检测抗体CA001包被在硝酸纤维素膜上作为检测线(T),另将质控抗体(羊抗鼠IgG)包被在相互平行的硝酸纤维素膜上作为质控线(C),过量的鼠源标记的荧光微球在质控线处聚集产生质控荧光信号,待测样中的PTH在T处形成包被抗体-PTH抗原-标记抗体的夹心复合物并产生荧光信号,通过荧光检测仪计算出定量结果。试纸条检测PTH灵敏度最低可达0.8pg/mL,与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)无交叉反应,不同批次试剂4 oC放置6个月稳定性好,批内变异系数(coefficient of variation,CV)为5.32%,批间CV值为6.74%。与电化学发光免疫法(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)比较相关性较好,R2=0.993,差异无统计学意义,甲状旁腺组织结果与非甲状旁腺组织结果则有明显差异(P0.01)。采用该荧光免疫层析试纸条,不仅可以提供较高的灵敏度和特异度,而且操作简单,适合临床工作的需要。     

促甲状腺素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制

目的:研制人血清中促甲状腺素(TSH)的化学发光免疫检测试剂盒.方法:采用辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与固相包被的抗TSHα亚单位的另一mAb配对,以鲁米诺作为底物,采用两步法建立了双位点夹心法人血清TSH的化学发光免疫定量分析法.结果:该方法灵敏度为0.0788 mIU/L,批内CV平均为4.7%,批间CV平均为8.4%,平均回收率为93.05%.该检测与LH、FSH和HCG无交叉反应.部分实验样品的测试结果显示该试剂与国外同类试剂(雅培architect i2000)的测定结果明显相关(r＝0.984).结论:该方法具有较高的灵敏度、重复性和准确度,与其他同类产品相比简便、快捷、成本低,适于临床检测和科研应用.     

流式细胞仪国产鞘液的研制

流式细胞仪(ＦＣＭ)已成为当代分析细胞学领域检测细胞分子特征的主要工具之一,在医学、生物学和肿瘤学等学科中得到广泛应用〔１,２〕。ＦＣＭ所用的鞘液是维持仪器正常运转的主要消耗试剂,其主要作用是经荧光染色的单细胞悬液和鞘液同时进入流动室,在气体压力的作用下,形成包绕细胞悬液的壳液流,使细胞依次排列成单行,一个跟一个地以均等的速度通过检测区,而得到精确测量〔３〕。与仪器配套的Ｃｏｕｌｔｅｒ鞘液消耗量大(从开机到停机一直连续使用),需用外汇进口,不仅价格较高,而且周期较长。为解决这一问题,我们经过两年半的反复试验,研…     

斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究

目的 制备高特异性的抗雌三醇(E3)单克隆抗体(mAb),建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法.方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA.应用mAb技术制备抗E3的mAb;以硝酸纤维素膜为固相载体,抗E3 mAb为包被抗体,建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法.结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株.mAb效价为1×105～5×105,亲和常数为5.1×108 ～ 5.2×109 L/mol.检测敏感度为2 ng/mL,检测范围2～200 ng/mL.结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法.     

荧光免疫层析定量检测髓过氧化物酶方法的建立

目的：通过荧光免疫层析技术初步建立MPO荧光免疫层析定量检测方法。方法：采用羧基荧光微球,利用EDC一步法偶联标记抗体,对过程中EDC量、标记蛋白量与标记时间、保护液进行研究,选出最佳条件,并对线性范围、灵敏度、精密性等进行性能评价。结果：确定偶联过程中EDC 160 μg,标记蛋白125 μg、标记1.5 h;线性范围3.125~600 ng/ml,最低检出限0.9 ng/ml;精密性质控品(高、中、低)批内、批间变异系数均小于10%;通过与国外试剂盒（ELISA法）检测比对45份临床血清,相关性良好,R2=0.979 5。结论：成功建立荧光免疫层析快速定量检测MPO的方法,为冠心病的辅助诊断提供一种技术手段。     

荧光免疫层析法定量检测胃蛋白酶原及应用

目的 建立一种一次操作即可同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ荧光免疫层析的方法,检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的含量,用于辅助诊断慢性萎缩性胃炎和早期胃癌.方法 将鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ (PGⅠ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线1(T1),将鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线2(T2),将羊抗兔IgG多克隆抗体喷到硝酸纤维素膜表面作为质控线(C);用荧光素分别标记鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)抗体、鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体和兔IgG抗体,将所制得的以上三种抗体荧光素标记物按一定比例混合,均匀喷到玻璃纤维素膜上制得荧光标记物垫;以双抗体夹心法反应模式制备同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ的荧光免疫层析法试纸条,并使用酶联免疫法试剂进行比对,对方法的线性、精密度、最低检出限、回收率、相关性等方面进行分析.结果 荧光免疫层析法检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ,进行Logistic曲线四参数拟合,R2均为0.99,拟合度较高;精密性CV分别为3.59％、3.40％;荧光免疫层析法与酶联免疫法的相关性较好(PG Ⅰ和PGⅡ分别为r=0.99,r =0.99);最低检出限分别为0.81 ng/mL和0.72ng/mL.结论 所建立的在一个检测条上同时测定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)含量的荧光免疫层析法方法,具有较好的特异性和较高的灵敏度,PG Ⅰ和PGⅡ无相互干扰,结果准确、操作便捷,便于我国基层疾控中心及医疗结构对胃蛋白酶原的检测.     

用国产透板型酶标光度计作人血清甲胎蛋白的ELISA定量检测

<正> 甲胎蛋白(AFP)的定量检测,常用放射免疫法(RIA)及放射火箭电泳自显影法(REID),酶联免疫测定技术(ELISA)的开展,又带来了新的途径。我们应用国产透板型酶标光度计,建立了可靠而简便的ELISA定量检测人血清AFP的方法。     

聚苯乙烯珠的研制——在放射免疫及酶免疫试验中的应用

<正> 近年来国外在放射免疫及酶免疫试验中应用聚苯乙烯珠为载体者日益增多。美国Abbott药盒全部采用聚苯乙烯珠,国内北京曾研制了扁平式的聚苯乙烯珠用于SPRIA检测HBsAg,但存在表面吸附及洗涤时有死角,且不易标准化。我们于1981年4月至     

应用免疫酶斑点法检测HBsAg的研究

本文报道用免疫酶斑点法(Immune Enzyme Dot Assay,IEDA)检测技术检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。实验证明该法敏感、特异,与Abott药盒检测结果比较:总符合率为97.2％,灵敏度为93.9％,特异性为100％。结果还表明,该法简单、快速、经济、所需标本量少,并且实验结果可长久保存,是目前用于HBsAg检测的一种较为先进的方法。     

化学发光免疫分析在HBVM定量检测的临床应用

目的：评价电化学发光免疫分析在HBVM定量检测的临床应用价值。方法：应用ELECSYS 2010型全自动电化学发光免疫分析系统定量检测了HBsAg(8074例)、HBeAg(8036例)、抗-HBc(8042例)、抗-HBe(8036例)、抗-HBs(8074例)和抗-HBeAgM(628例)对检测结果进行统计分析。结果：HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe、抗-HBs和抗-HBc-IgM阳性率分别为10．63％、3．68％、61．38％、36．21％、39．26％和14．65％;该分析灵敏度高,能检测出微量HBsAg和抗-HBc-IgM,对乙肝病人的病程、疗效、预后起到全程动态监测作用。结论：电化学发光免疫分析定量检测HBVM对乙型肝炎的早期诊断、病程监测和疗效观察等具有重要的临床应用价值。     

定量检测破伤风类毒素酶联免疫吸附法的建立及初步应用

目的：建立定量检测破伤风类毒素（TT）抗原的双抗体夹心ELISA法,并探索其初步应用。方法：以TT抗毒素为包被抗体,大鼠抗TT多抗为检测抗体,采用相应酶标抗体检测TT抗原含量,建立双抗体夹心ELISA法,并进行方法学验证。结果：TT含量在0～0.062 5 Lf/ml范围内线性关系良好（r>0.99）。该方法与白喉类毒素、百日咳类毒素、百日咳丝状血凝素及百日咳黏附素无明显交叉反应,重复性好,特异性较强,精密度及准确度验证均符合常规质控要求。该法准确检测范围为0.000 625～0.040 000 Lf/ml,定量限度为0.000 625 Lf/ml。采用该方法对TT抗原进行吸附率检测,分别采用该法和絮状单位测定法测定6批TT的絮状含量,2种检测方法高度相关（r=0.94）。结论：建立的定量检测TT的双抗体夹心ELISA法为破伤风疫苗生产过程中TT质量控制提供了有效技术手段。     

“双特异抗体”的研制及快速检测细菌的免疫酶技术的建立和应用

<正> 免疫酶技术自七十年代问世以来,已广泛应用于生物学的各个领域。在方法学上虽有不少的改进,但由于影响因素较多,加之大多用于可溶性抗原或抗体的检测。用于检测细胞型抗原,研究报道甚少,而且有一定条件     

增智明目仪的研制及应用

增智明目仪的研制及应用原玉郎，刘万书，黄斌，吴胜望，徐进敏，胡秀文空军电讯工程学院门诊部解放军４５１医院笔者将现代视觉电生理理论与祖国传统医学相结合，融光疗与电疗为一体，研制成一种具有明目健脑功能的新型医疗保健仪器──增智明目仪（原名增视明目仪）。经...     

应用国产微孔滤膜筛选单克隆抗体的免疫酶斑点法的建立

本文介绍了应用微孔滤膜为载体建立的简易、特异、较敏感且经济的免疫酶斑点法,即可筛选单克隆抗体,也可用于临床免疫检验。文中介绍了操作方法。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光酶免疫法检测乙肝五项的相关性调查

目的 探讨FQ-PCR检测HBV-DNA与CLEIA检测乙肝五项之间的相关性.方法 将以FQ-PCR法检测筛选的HBV-DNA阳性结果的血清用CLEIA法对其进行乙肝病毒血清学标志物（即乙肝五项）的检测.结果 大三阳与小三阳所占全部样本的比例最高,其低中高HBV-DNA水平的比例分别为17.2％,17.2％,65.5％和81.8％,15.2％,3.0％,而且差异有统计学意义（P＜0.05）;HBeAg与HBeAb阳性标本的HBV-DNA水平不同,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 FQ-PCR检测HBV-DNA水平与CLEIA检测的乙肝五项水平在判断患者乙肝病毒感染病程方面的相关性较好,但乙肝五项定量结果数值与HBV-DNA载量数值并没有直接相关的关系.     

高通量酶免系统定量检测甲胎蛋白的临床应用评估

目的 对高通量酶免系统定量检测血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)进行临床应用评估.方法 收集肝癌、肝炎、肝硬化患者血清共184份,健康查体者血清200份.验证高通量酶免系统测定AFP的重复性和正确度,与电化学发光法(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)结果进行比对,评价其临床应用价值.结果 高通量酶免系统测定4种浓度AFP的总变异系数(coefficient of variation,CV)分别为13.1％、13.7％、11.4％、10.3％,正确度能力比对试验(proficiency testing,PT)结果为100％,线性范围是(0.0 ～200.0)μg/L.高通量酶免系统和ECLIA检测结果呈直线相关(Y=1.14X+0.83,R2 =0.92),两方法检测标本的阳性率分别为67.39％和69.02％,差异无统计学意义(P =0.453).检测血清AFP诊断原发性肝癌的最佳临界值为195.7 μg/L.原发性肝癌与转移性肝癌患者的诊断界值为99.44μg/L,与肝炎肝硬化患者的诊断界值为379.15 μg/L.结论 高通量酶免系统测定血清AFP结果可靠、稳定,可用于筛查和诊断原发性肝癌.     

电化学发光免疫分析法在AFP定量检测中的应用

为了解电化学发光免疫分析 (ECLIA)双抗体夹心法定量检测血清甲胎蛋白 (AFP)的临床应用及其优越性 ,参照NCCLS的评价方案对定量检测AFP含量的ECLIA法和放射免疫分析 (RIA)法进行精密度评价、线性评价和回收试验的比较 ,并采用两种方法平行检测 6 5例病人血清标本的AFP含量 ,对其进行相关性分析。结果表明 :两种方法都有较好的重复性 ,但ECLIA法明显优于RIA法 ;ECLIA法和RIA法具有良好的相关性 (r=0 .981 ,P <0 .0 5 ) ;回收率均在 95 %以上 ,ECLIA法明显高于RIA法 (t=4 .6 9,P <0 .0 5 ) ;ECLIA法的线性范围 (>5 0 0 μg/L)较RIA法 (<5 0 0 μg/L)要宽。ECLIA法定量检测AFP的准确性和精确度都明显优于RIA法 ,较RIA法更能满足临床需要     

多功能心电生理实验教学仪研制及应用

开发一种简单、实用、多功能的心电生理实验教学仪,功能包括同步多道心电信号采集、计算机数据测量处理、信号储存、回放、打印、复制及多媒体教学,可应用于临床心功能学及临床心脏电生理学等实验教学及科研。