细胞因子对骨髓间充质干细胞增殖及其向心肌细胞分化的影响

目的探讨干细胞因子（SCF）和粒细胞集落刺激因子（G-CSF）预处理对骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖分化的作用。方法将sD大鼠随机分成对照组、SCF组、G—CSF组和SCF＋G—CSF联合处理组。流式细胞仪检测第4代MsCs细胞周期。用DAPI（25mg／m1）标记的P4MSCs与心肌细胞共培养。在共培养的第1天至第5天用免疫荧光技术分别检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链（MHC）、肌钙蛋白T（TnT）的表达，统计向心肌样细胞分化的MSCs百分率。结果（1）SCF和G—CSF联合应用能明显诱导MSCs进入S期，单因子SCF组和G-CSF组与对照组相比，也明显的促进MSCs由G0／G1期进入S期（P〈0．01）。（2）MSCs与心肌细胞共培养后，SCF和G—CSF联合组MSCs表达心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性百分率均显著增高，单细胞因子组MSCs的心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性表达亦较对照组高。结论SCF和G—CSF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。     

高迁移率族蛋白B1与炎症反应

早期主要将高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)作为非组蛋白DNA结合蛋白进行广泛研究.近年来发现HMGB1这一传统的DNA结合蛋白具有强大的致炎细胞因子活性.HMGB1可由活化的单核细胞、巨噬细胞、成熟树突细胞和活化的自然杀伤细胞等主动分泌,也可由坏死细胞被动释放,从而触发机体的免疫炎症反应.HMGB1本身也具有细胞毒性,全身给予HMGB1可以剂量依赖方式致小鼠死亡;巨噬细胞、中性粒细胞等暴露于HMGB1时可诱导致炎细胞因子肿瘤坏死因子和白介素1β等产生增多.HMGB1拮抗剂治疗对脓毒症和内毒素血症的致死性有显著的拮抗作用,潜在拓宽了临床危重感染患者的治疗时间窗.此外,HMGB1还参与轴突生长,且与肿瘤发生和预后相关.     

辛伐他汀对动脉粥样硬化大鼠高迁移率族蛋白1表达的影响

目的 观察辛伐他汀对动脉粥样硬化大鼠高迁移率族蛋白1(HMGB-1)的蛋白及基因表达及斑块形态学的影响,以揭示辛伐他汀抑制炎症反应,对动脉粥样硬化的保护作用机制. 方法 30只大鼠随机分为3组:空白对照组、动脉粥样硬化组和辛伐他汀组,辛伐他汀灌胃进行干预,给药4周.免疫组织化学染色法观察大鼠主动脉血管动脉粥样硬化斑块内HMGB-1的蛋白表达情况,实时聚合酶链反应法检测大鼠主动脉组织HMGB-1的基因表达变化,酶联免疫吸附试验检测大鼠血清HMGB-1蛋白表达. 结果 (1)HMGB-1在动脉粥样硬化斑块内的表达呈强阳性,辛伐他汀组HMGB-1表达较单纯动脉粥样硬化组减少.(2)与空白对照组比较,在动脉粥样硬化斑块内动脉粥样硬化组HMGB-1基因表达水平明显升高,差异有显著性(P＜0.01);辛伐他汀干预组HMGB-1基因表达低于动脉粥样硬化组(P＜0.01),高于空白对照组(P＜0.01).(3)与空白对照组比较,动脉粥样硬化组及辛伐他汀组血清HMGB-1蛋白表达水平均明显升高,差异有显著性(P＜0.01),辛伐他汀组血清HMGB-1表达低于动脉粥样硬化组(P＜0.05). 结论 (1)动脉粥样硬化大鼠主动脉血管HMGB-1的蛋白及基因表达均明显增强.(2)辛伐他汀能够减轻动脉粥样硬化大鼠的斑块形成,降低HMGB-1的蛋白及基因表达,通过减轻炎症反应的途径起到保护作用.     

病毒性肝炎患者高迁移率族蛋白1的水平及其临床意义

目的研究晚期炎症介质高迁移率族蛋白1（HMGB1）在慢性肝炎及重型肝炎中的临床意义。方法选择慢性乙型病毒性肝炎患者56例、重型乙型病毒性肝炎患者28例、健康对照者20例,应用ELISA法检测血清HMGB1水平;同时检测相关生化指标、肝纤维化指标、凝血酶原时间（PT）。结果重型肝炎组HMGB1水平高于慢性肝炎组及正常对照组（P〈0.01）,且慢性肝炎组高于正常对照组（P〈0.01）;慢性肝炎组HMGB1水平随病情严重程度增加而增高（P〈0.01）。HMGB1水平与谷丙转氨酶、总胆红素、天冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶、透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、PT水平呈正相关,与白蛋白水平呈负相关。结论血清HMGB1含量可作为评价慢性病毒性肝炎病情严重程度的可靠指标。     

骨髓间充质干细胞体外对1型糖尿病大鼠淋巴细胞增殖能力的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外对1型糖尿病(T1DM)大鼠淋巴细胞增殖能力的影响。方法选取清洁级SD大鼠12只,取6只分离、培养BMSCs,另外6只建立T1DM模型后制备其淋巴细胞,实验分为A组(1 ml淋巴细胞)、B组〔1 ml淋巴细胞+100μl植物血凝素(PHA)〕、C组(1 ml淋巴细胞+1×106BMSCs+100μl PHA)、D组(1 ml淋巴细胞+1×105BMSCs+100μl PHA)、E组(1 ml淋巴细胞+1×104BMSCs+100μl PHA),每组5孔,培养3 d后通过噻唑蓝比色法观察BMSCs对淋巴细胞增殖能力的影响。结果五组样本的吸光值由大到小分别为:B组>A组>E组>D组>C组,A组的吸光度低于B组(P<0.05);随着BMSCs数目的增加,样本吸光度逐渐降低(P<0.05);A、B组的吸光度均高于E、D、C组;A、B、C、D、E组的淋巴细胞处于G0/G1期的百分比分别为:98.2%、89.5%、97.2%、97.1%、97.0%,仅B组淋巴细胞有10.5%处于S期;五组淋巴细胞凋亡水平从小到大依次为:B组相似文献   

骨髓间充质干细胞分泌因子抑制急性肝衰竭肝细胞HMGB1的胞浆移位

目的:骨髓间充质干细胞分泌的因子(mesenchymal stem cell-derived molecules,MSC-CM)对急性肝衰竭小鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)肝细胞胞浆移位和释放的影响.方法:D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GaIN)和脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导建立Balb/c小鼠急性肝衰竭模型;贴壁筛选法培养纯化小鼠BMSCs,传至第2-3代更换0.05%胎牛血清培养液24h获得MSC-CM.36只健康Balb/c小鼠随机均分为肝衰竭对照组和MSC-CM治疗组.Kaplan-meier法进行生存分析,生化检测1wk内不同时间点各实验组丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)/谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST),24h取肝脏进行肝脏病理检测.ELISA检测血清HMGB1、白介素-1(interleukin-1,IL-1、肿瘤坏死因子-(tumor necrosis factor-,TNF-、IL-6和IL-10水平,免疫组织化学分析HMGB1的肝细胞表达和胞浆移位.结果:MSC-CM治疗组1wk生存率为88.9%,显著高于对照组的16.7%(P<0.05),MSC-CM治疗组24h的ALT/AST峰值显著低于对照组(P<0.01).MSC-CM治疗组在6、12和24hHMGB1水平以及24h的TNF-、IL-1、IL-6水平显著低于肝衰竭对照组(P<0.01),而抗炎因子IL-10显著高于对照组(P<0.01).MSC-CM治疗组肝脏炎症坏死和肝细胞HMGB1胞浆移位较对照组明显减轻.结论:MSC-CM治疗抑制急性肝衰竭肝细胞HMGB1胞浆移位和释放,减轻肝脏炎症反应,降低死亡率.     

同种异体骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭HMGB1的影响

目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对急性肝衰竭动物高迁移率族蛋白B1(high mobility group Box1,HMGB1)的影响.方法:D-氨基半乳糖(D-GaIN)和脂多糖(LPS)诱导建立小鼠急性肝衰竭模型;贴壁筛选法培养纯化Balb/c小鼠BMSCs,传至第4代使用.90只健康Balb/c小鼠随机均分为3组:正常组、肝衰竭组、BMSCs治疗组.分别于12、24、48h检测各实验组ALT/AST水平,48h取各组肝脏行病理学检查.Western blot检测动物血清HMGB1含量.结果:急性肝功能衰竭小鼠经BMSCs移植治疗后生存率为83.3%,与肝衰竭组小鼠存活率16.7%相比差异有显著性意义(P<0.05).肝衰竭组与BMSCs治疗组12hALT/AST水平显著上升,24h达到高峰,48h开始下降,肝衰竭组与BMSCs治疗组12、24、48hALT/AST水平显著高于正常组(P<0.01),BMSCs治疗组12、24、48hALT/AST水平明显低于肝衰竭组,差异有显著性意义(P<0.05).肝脏组织病理学结果显示BMSCs治疗组肝细胞变性及坏死程度以及炎症浸润程度轻于肝衰竭组.免疫印迹显示,正常组血清中测不到HMGB1,肝衰竭组血清中HMGB1的含量显著高于BMSCs移植组血清中HMGB1的含量(P<0.01).结论:BMSCs移植能够抑制肝衰竭中HMGB1水平,BMSCs通过抑制HMGB1减轻肝脏炎症反应治疗急性肝衰竭,降低肝衰竭死亡率.     

高迁移率族蛋白1蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的　研究胰腺癌 (PC)组织中高迁移率族蛋白 1(High mobility group box1,HMGB1)蛋白表达 ,并探讨其与癌分化程度、肿瘤大小、浸润、淋巴及血道转移的关系。方法　用免疫组织化学SABC方法 ,检测 73例胰腺癌组织、10例癌旁组织、6例正常胰腺组织 HMGB1蛋白表达。结果　HMGB1在胰腺癌中呈强阳性表达 (76 .7% ) ,在癌旁组织中仅有微弱表达 ,正常胰腺组织无表达 ;HMGB1的阳性率与癌分化程度无关 (P>0 .0 5 ) ;与肿瘤的大小、浸润、淋巴及血道转移呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HMGB1在胰腺癌中呈强阳性表达 ,可作为胰腺癌生长、转移及预后的重要判定指标。     

慢性乙型肝炎患者高迁移率族蛋白1mRNA的表达及其临床意义

目的:通过检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)高迁移率族蛋白1(HMGB1) mRNA的表达情况,研究HMGB1在乙型肝炎中的临床意义．方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 对54例慢性乙型肝炎患者和10例健康对照者PBMCs HMGB1 mRNA的表达进行检测, 同时应用ELISA法检测外周血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和内毒素(LPS)水平,比较各组HMGB1 mRNA表达水平的差异及其与 TNF-α、LPS、总胆红素(TBIL)、凝血酶原活动度(PTA)的关系．结果:PBMCs HMGB1 mRNA的表达水平在慢性重型肝炎组分别高于慢性肝炎组(0．89± 0．06 vs 0．70±0．10,P<0．01)和正常对照组 (0．89±0．06 vs 0．58±0．08,P<0．01),慢性肝炎组高于正常对照组(0．70±0．10 vs 0．58±0．08． P<0．01)．在23例慢性重型肝炎患者中,11例未恢复患者PBMCs HMGB1 mRNA表达水平明显高于12例恢复的患者(0．93±0．04 vs 0．85± 0．05,P<0．01)．其中12例已恢复的慢性重型肝炎患者,患者恢复期PBMCs HMGB1 mRNA 的表达水平较发病期明显下降(0．72±0．07 vs 0．85±0．05,P<0．01)．HMGB1 mRNA表达水平与外周血浆LPS、TNF-α及TBIL均呈显著正相关(r=0．74,0．64,0．71,均P<0．01),与PTA呈负相关(r=-0．82．P<0．01)．结论:HMGB1在乙型肝炎发病过程中可能起重要作用,HMGB1 mRNA的表达水平高低与病情轻重密切相关．     

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1表达

目的通过检测类风湿关节炎（RA）患者外周血单个核细胞（PBMC）、血浆中高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达,为寻找治疗RA的新靶点提供依据。方法采集38例活动期RA患者、24例相对稳定期RA患者和20例健康对照者外周血。RT．PCR检测PBMC HMGB1mRNA表达,Western blot检测PBMC、血浆HMGB1蛋白表达。结果与相对稳定期RA患者、健康对照者相比,活动期RA患者PBMC HMGB1mRNA表达水平差异无统计学意义（F=1．23,P〉0．05）,而HMGB1蛋白表达水平下降（F=70．91,P〈0．01）,血浆HMGB1水平显著增高（P〈0．001）。相对稳定期RA患者与健康对照者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。活动期RA患者血浆HMGB1水平与ESR（r．=0．478。P〈0．001）、C-反应蛋白（rs=0．574,P〈0．05）呈正相关。结论HMGB1与RA发病密切相关,并可能成为新的治疗靶点。     

丙酮酸乙酯对实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1表达及细胞因子的影响

目的:观察丙酮酸乙酯(EP)对实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1表达及炎症因子的影响.方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、EP治疗组,每组12只;模型组、治疗组大鼠用DSS溶液复制实验性结肠炎大鼠模型,观察各组实验大鼠DAI评分、大体形态学及组织病理学评分(HPS)改变,采用应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Westernblot)检测结肠组织HMGB1表达;酶联免疫吸附法检测细胞因子(TNF-α、IL-6)的含量.结果:DAI和HPS在DSS模型组中高于空白对照组(7.20±2.28vs0.45±0.16,13.60±0.72vs6.4±0.85,P<0.01),在空白对照组结肠组织中HMGB1低表达,但在模型组表达显著上调(P<0.01);模型组血清TNF-α、IL-6水平高于空白对照组(190.40±24.55vs43.65±8.79,238.75±26.58vs74.3±7.92,P<0.01);与DSS模型组相比,EP可以缓解大鼠体质量的减轻,减少腹泻及便血的发生,并且能够显著下调结肠组织DAI、HPS、HMGB1mRNA和蛋白的表达,下调血清TNF-α、IL-6水平(P<0.05).结论:HMGB1参与了实验性结肠炎大鼠的发病过程,应用EP治疗可有效抑制实验性结肠炎大鼠结肠组织HMGB1的表达,可以明显下调TNF-α、IL-6等促炎因子的水平,有助于减轻实验性结肠炎大鼠炎症反应.     

人高迁移率族蛋白B1在风湿免疫性疾病中的研究进展

人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是细胞核内典型的非组蛋白。HMGB1在细胞和组织中分布十分广泛,受到炎症刺激后能从坏死或损伤细胞被动释放,并可诱导树突状细胞上调其成熟的表面抗原。本文详细介绍了HMGB1的结构、功能特点及HMGB1在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、肌炎、系统性硬化症、干燥综合征等风湿免疫性疾病中的表达情况。随着对HMGB1研究的不断深入,HMGB1在风湿性疾病诊断、治疗等中的潜力将进一步得到发展。     

冠心病患者高迁移率族蛋白1的表达与意义

目的 探讨冠心病患者危险程度与血清高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)的相关性.方法 ELISA法检测冠心病患者及健康对照人群血清HMGB1蛋白水平.结果 急性冠脉综合征(ACS)患者中HMGB1蛋白水平明显高于稳定型心绞痛(SAP)患者(P<0.05)及健康对照人群(P<0.05),SAP患者HMGB1蛋白水平明显高于健康对照人群(P<0.05).结论 血清HMGB1水平可作为评价冠心病危险程度的指标之一.     

STAT1/SOCS1在高迁移率族蛋白1诱导的大鼠滑膜细胞中的表达

目的 探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对滑膜细胞增殖的影响及机制.方法 ①常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组和肿瘤坏死因子(TNF)-α组,培养6、12 h和24 h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)免疫细胞化学法(ICC)检测HMGBI mRNA及蛋白在滑膜细胞中的表达变化;②常规培养的滑膜细胞,随机分为正常对照组、HMGB1组,分别培养6、12 h和24 h,RT-PCR检测磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT1)mRNA表达;ICC和流式细胞术(FCM)检测p-STAT1、细胞激酶信号抑制剂(SOCSl)蛋白的表达;ICC检测PCNA蛋白的表达.结果 ①TNF-α刺激6、12、24 h显著上调HMGB1mRNA的表达[0.86,0.92,1.06 vs 0.70,P<0.01];其蛋白表达亦增强,HMGB1蛋白不仅表达于细胞核,而且出现于胞质中;② HMGB1作用6、12、24 h显著增强STAT1 mRNA及蛋白的表达量[0.30,0.69,1.05 vs 0.24,P<0.01]及[1.34±0.09,1.55±0.16,1.74±0.13 vs 1.00±0.15,P<0.01];SOCS1蛋白量分别为1.43±0.10、1.58±0.05和1.24±0.15,呈先升高后下降.③ p-STAT1与SOCS1蛋白表达呈负相关(r=-0.484,P=0.04).结论 HMGB1是滑膜细胞增殖过程中的重要细胞因子,其可能通过上调STAT1的表达和活性,促进细胞增殖.     

心房颤动患者高迁移率族蛋白1血清水平

目的探讨心房颤动(AF)患者血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平是否升高。方法入选的55例阵发性AF患者,33例持续性AF患者,选择36例年龄和性别匹配的无AF体检者作为对照组,采用ELISA法检测血清HMGB1和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果持续性AF患者血清HMGB1水平较对照组和阵发性AF患者显著增高(8.62±2.18 ng/m l vs 2.22±0.63 ng/m l,5.29±1.43 ng/m l,P均<0.05)。阵发性AF患者血清HMGB1水平较对照组高(P<0.05)。AF患者血清HMGB1水平与hs-CRP水平呈显著正相关(n=88,r=0.629,P<0.05)。结论 AF患者血清HMGB1水平显著上升。     

Serum high mobility group box chromosomal protein 1 is associated with clinicopathologic features in patients with hepatocellular carcinoma

BACKGROUND/AIMS: The role of high mobility group box chromosomal protein 1 in hepatocellular carcinoma is unknown. The aim of study was to evaluate contributions of high mobility group box chromosomal protein 1 in hepatocellular carcinoma, and analyse the correlation between high mobility group box chromosomal protein 1 and clinicopathologic outcomes. PATIENTS/METHODS: High mobility group box chromosomal protein 1 levels were analysed by Western blot analysis. Edmondson grade, TNM stage and the Cancer of the Liver Italian Program score were used as analysis variables. RESULTS: The serum high mobility group box chromosomal protein 1 levels in hepatocellular carcinoma (84.2 +/- 50.4 ng/ml) was significantly higher than those in chronic hepatitis (39.8 +/- 10.5 ng/ml), liver cirrhosis (40.2 +/- 11.6 ng/ml) and healthy control (7.0 +/- 5.9 ng/ml, p < 0.0001, respectively), and positive correlation were found between high mobility group box chromosomal protein 1 and alpha-fetoprotein (r = 0.952, p < 0.0001), and between high mobility group box chromosomal protein 1 and the size of tumour (r = 0.904, p < 0.0001). High mobility group box chromosomal protein 1 were significant differences among Edmondson grade I, II, III, IV; TNM stage I, II, III, IV and Cancer of the Liver Italian Program score 0-1 points, 2-4 points, > 4 points (p < 0.0001, respectively). CONCLUSIONS: These results suggest that high mobility group box chromosomal protein 1 may be a useful marker for evaluating the tumour stage and predicting prognosis in hepatocellular carcinoma. Targeting high mobility group box chromosomal protein 1 production or release might have potential approaches for hepatocellular carcinoma treatment.     

高迁移率族蛋白1与肾脏疾病

高迁移率族蛋白1(HMGB1)作为一种重要的炎性介质,可通过炎症细胞的主动分泌和坏死细胞的被动释放进入胞外介导炎症反应.近年来,HMGB1在狼疮肾炎、ANCA相关性血管炎肾损害、急性肾损伤、间质性肾炎、肾脏缺血/再灌注损伤等发生发展过程中所发挥的重要作用备受关注,并对慢性肾脏病和透析患者的炎症、营养状态等有良好的指向作用,本文就相关的研究进展进行综述.     

高迁移率族蛋白-1在小鼠溃疡性结肠炎发病中的作用研究

目的探讨高迁移率族蛋白-1（HMGBl）在溃疡性结肠炎（UC）发病机制中的作用。方法BALB／c小鼠32只,随机分成2组,即UC模型组（H=24）和正常对照组（n=8）。以3％葡聚糖硫酸钠（DSS）制备小鼠UC模型,造模第24h、96h、168h,分别处死造模组（各8只）;对照组正常饮水。观察其病理变化;ELISA法检测血清HMGBl水平;Western—blot法检测结肠组织HMGBl蛋白的表达。结果随着造模时间的延长,UC组织学评分上升,造模168h时其结肠黏膜表现与人类UC相类似。UC组血清HMGBl水平在造模24h时比正常组略升高[（4．49±0．53）μg／L比（5．09±0．61）μg/L,P〉0．05],在96h达高峰[（14．74±0．60）μg／L,P〈0．01],168h时峰值下降[（9．03±0．78）μg／L,P〈0．01]。UC组小鼠结肠组织HMGBl蛋白表达水平在造模24h时较正常略升高（0．49±0．03比0．56±0．02,P〉0．05）,在造模96h明显升高（0．76±0．03,P〈0．05）,至168h时仍维持在较高水平（0．77±0．04,P〈0．05）。结论HMGB1在UC小鼠血清中水平升高,结肠组织中也表达明显增强,提示HMGB1作为晚期炎症因子可能参与UC的疾病过程。