逆转录病毒介导I型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因转导…

目的：探讨将Ｉ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）／丙氧鸟苷基因治疗系统应用于卵巢癌的治疗。方法，应用产病毒包装细胞（ＶＰＣ）／ＨＳＶ－ｔｋａ和ＶＰＣ／ＨＳＶ－ｔｋｃ的培养液分别感染卵巢上皮癌细胞系ＡＯ和３ＡＯ，以Ｇ＝４１８筛选转导阳性克隆，并以丙氧乌苷杀伤阳性隆。结果：ＶＰＣ／ＨＳＶ／ｔｋｅ增减液对Ａ铁感染滴度为９．３±１０００００；以１：１０００稀释度的ＶＰＣ／ＨＰＳ－ｔｋｃ增减     

单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因/羟甲基无环鸟苷系统对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤的作用

目的观察单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因（ＨＳＶ１ｔｋ）／羟甲基无环鸟苷（ＧＣＶ）系统对人卵巢癌的体内治疗作用。方法先将人卵巢癌细胞ＡＯ及携有ＨＳＶ１ｔｋ基因的ＡＯ细胞（ＡＯ／ＨＳＶ１ｔｋｃ）注射于裸鼠皮下,形成肿瘤后再移植于裸鼠网膜,并以病毒生产细胞（ＶＰＣ／ＨＳＶ１ｔｋｃ）的培养液对ＡＯ网膜移植瘤进行体内转染,然后以ＧＣＶ对体外ＡＯ／ＨＳＶ１ｔｋｃ转移的肿瘤及经体内转染的ＡＯ肿瘤进行治疗。结果ＨＳＶ１ｔｋ／ＧＣＶ基因治疗系统对ＡＯ裸鼠网膜移植瘤的抑制率为４６．８％,而ＡＯ／ＨＳＶ１ｔｋｃ裸鼠网膜移植瘤经ＧＣＶ治疗后,多数仅残留显微镜下可见的癌灶。结论ＧＣＶ在腹腔内对携有ＨＳＶ１ｔｋ基因的肿瘤具有更为显著的杀伤效应;ＨＳＶ１ｔｋ／ＧＣＶ基因治疗系统在卵巢癌的治疗上可能具有良好的应用前景。     

单纯疱疹病毒胞腺嘧啶核苷激酶基因羟甲基无环岛苷系对人卵 …

观察单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激素酶基因羟甲基无环鸟苷系统对人卵巢癌的体内治疗作用。方法先将人卵巢癌细胞ＡＯ及携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的ＡＯ注射于裸鼠皮下,形成肿瘤后再移植于裸鼠网膜,并以病毒生物细胞的培养液对ＡＯ网膜移植瘤进行体风转染,然后以ＧＣＶ对体外ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ转移的肿瘤及经体内转染的ＡＯ肿瘤进行治疗。     

羟甲基无环鸟苷对携有单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的：观察羟甲基无环鸟苷（ＧＣＶ）对携有Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因（ＨＳＶ１－ｔｋ）的人卵巢上皮癌ＡＯ细胞的体内杀伤效应。方法：于裸鼠背部左右两侧皮下分别接种ＡＯ细胞及携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的ＡＯ细胞（ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ），成瘤后每日腹腔注射ＧＣＶ。结果：经ＧＶＣ治疗后，裸鼠背部两侧肿瘤平均重量分别为：左侧ＡＯ肿瘤０．６８１ｇ；右侧ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ肿瘤０．０８７ｇ。经ＧＣＶ作用后仍然存活的多数ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ细胞胞浆呈肥大、坏死表现。但其核内染色质却多呈异染色质状态。结论：ＧＣＶ在裸鼠体内代谢后仍可高效杀伤携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的卵巢癌细胞，从而抑制肿瘤生长。但仍然存活的肿瘤细胞增殖活跃，如加用Ｓ期特异的化疗药物可能进一步提高远期疗效。     

羟甲基无环鸟苷对携有单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激…

目的：观察羟甲基无环鸟苷（ＧＣＶ）对携有Ｉ型单纯疱疹病毒胸腺嘧淀核苷激酶基因（ＨＳＶ１－ｔｋ）的人卵巢上皮癌ＡＯ细胞的体内杀伤效应，方法；于裸级部左右两侧皮下分别接种ＡＯ细胞及携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的ＡＯ细胞（ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ），成瘤后每日腹腔注射ＧＣＶ。结果：经ＧＶＣ治疗后，裸鼠背部两侧肿瘤平均重量分别为：左侧ＡＯ肿瘤０．６８１ｇ；右侧ＡＯ／ＨＳＶ１－ｔｋｃ肿瘤０．０８７ｇ。经ＧＣＶ作用后     

腺病毒/HSV_1-tk/GCV、ACV系统对卵巢上皮癌细胞旁观者效应的研究

目的：研究腺病毒／ＨＳＶ１－ｔｋ／ＧＣＶ、ＡＣＶ系统对卵巢上皮癌细胞旁观者效应。方法：常规重组腺病毒扩增纯化后,测病毒滴度。Ｘ－ｇａｌ染色法测定转染效率,ＰＣＲ检测ＨＳＶ１－ｔｋ的表达,混合细胞培养实验观察旁观者效应。结果：重组腺病毒扩增纯化后测定滴度分别为Ａｄ／ｔｋ*"６２×１０９ｐｆｕ／ｍｌ,ＡｄＬａｃＺ*"１４×１０９ｐｆｕ／ｍｌ。当感染复数为１００时,近１００％的细胞可被感染。ＰＣＲ结果显示,Ａｄｔｋ转染ＴＹＫ后,可见４０４ｂｐ的特异性条带,在同一ＭＯＩ中,有１０％的Ａｄｔｋ／ＴＹＫ细胞存在,ＧＣＶ就可杀死近５０％左右的混合细胞。ＡＣＶ的作用约为ＧＣＶ的１／１０。结论：重组腺病毒Ａｄ／ｔｋ可有效地感染人卵巢上皮癌细胞,腺病毒／ＨＳＶ１ ｔｋ／ＧＣＶ、ＡＣＶ系统存在着旁观者效应。     

腺病毒／HSV1—tk／GCV,ACV系统对卵巢上皮癌细胞旁观者效应的研究

研究腺病毒／ＨＳＶ１－ｔｈＧＣＶ、ＡＣＶ系统对卵巢上皮癌细胞旁观者效应。方法：常规重组腺病毒扩增纯化后，测病毒滴度。Ｘ－ｇａｌ染色法测定转染效率，ＰＣＲ检测ＨＳＶ１－ｔｋ的表达，混合细胞培养实验观察旁观者效应。结果：重组腺病毒扩增纯化后测定滴度分别为Ａｄ／ｔｋ６．２＊１０＾９ｐｆｕ／ｍｌ，ＡｄＬａｃＺ１．４＊１０＾９ｐｆｕ／ｍｌ。当感染复数为１００时，近１００％的细胞可被感染。ＰＣＲ结果显示，Ａｄ     

腺病毒介导胸苷激酶基因治疗卵巢癌的动物试验研究

目的：探讨腺病毒介导Ｒｏｕｓ肉瘤病毒驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ）基因人氧鸟苷（ＧＣＶ）治疗卵巢癌的有效性和毒性，方法：首先以卵巢浆液性腺癌细胞系Ｏｖ－ｃａ－２７７４建立荷人卵巢癌裸鼠腹水瘤模型，再分别单用ＡＤＶ／ＲＳＫ－ｔｋ或ＧＣＶ（单药组）或联合应用ＡＤＶ／ＲＳＫ－ｔｋ及ＧＣＶ（联合用药组）进行治疗，观察空白对照组，单药组及联合用药级裸鼠的平均生存时间及药物毒怀，结果：单药     

羟甲基无环鸟苷对携有Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶基 …

目的 观察羟甲基无环鸟苷（ＧＣＶ）对转导携有Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ１－ｔＫ）的ＡＯ、３ＡＯ细胞外杀伤作用。方法 分别在携有ＨＳＶ１ｔＫ基因的ＡＯ、３ＡＯ细胞培养液中加入不同浓度的ＧＣＶ,绘制剂量效应曲线,并以荥光细胞洲活分选仪（ＦＡＣＳ）测定凋亡细胞比例及细胞周期比例,以光镜及电镜观察细胞形态变化,以ＤＮＡ我染色观察细胞核内染色质变化。结果 ＧＣＶ在体外对于携有ＨＳＶ１－ｔｋ基因的Ａ     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因转染联合药物对卵巢癌细胞的杀伤效应

目的：探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）基因转染联合抗病毒药物羟基无环鸟苷（ＧＣＶ）对人卵巢癌细胞系的杀伤效应。方法：采用基因工程技术，将ＨＳＶ－ＴＫ基因的ＤＮＡ序列插入逆转录病毒载体ｐＬＮＳＸ的ＨｉｎｄⅢ位点，构建重组体ｐＬＮＳ／ＨＳＶ－ＴＫ，并采用磷酸钙介导贴壁细胞基因转染法将重组体导入ＰＡ３１７包装细胞，建立重组逆转录病毒载体分泌细胞株ＰＡ３１７／ＴＫ。并采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ系统对人类卵巢癌ＡＯ细胞系的生长抑制率。结果：重组逆转录病毒载体ｐＬＮＳ／ＨＳＶ－ＴＫ能有效地将ＨＳＶ－ＴＫ基因导入ＡＯ细胞系内并使其获得对ＧＣＶ的敏感性。当培养液内ＧＣＶ达４０μｍｏｌ时，其对转ＨＳＶ－ＴＫ基因后ＡＯ细胞的生长抑制率为９８．０％。结论：ＡＯ细胞转染ＨＳＶ－ＴＫ基因后，能有效地被ＧＣＶ杀灭。