缺氧诱导因子-1α和Ets-1在脑膜瘤中的表达及相关性研究

目的研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）和Ets-1（E26transformation-specific 1）在脑膜瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法分别检测56例脑膜瘤和9例正常脑膜HIF-1α和Ets-1的表达,采用逆转录聚合酶链反应（RT-polymerase chain reaction,RT-PCR）方法检测25例新鲜脑膜瘤和9例正常脑膜组,运用统计学方法分析HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤表达的相关性。结果 HIF-1α和Ets-1在正常脑膜不表达或低表达,脑膜瘤中HIF-1α阳性表达率53.6%（30/56）,Ets-1呈阳性表达率48.2%（27/56）;脑膜瘤恶性倾向组HIF-1α的阳性表达率高于脑膜瘤良性组（P〈0.05）;HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤的表达呈正相关（γs=0.317、P〈0.05）。脑膜瘤中HIF-1α和Ets-1的mRNA含量高于正常脑膜组（P〈0.05）,脑膜瘤恶性倾向组HIF-1α和Ets-1的表达高于脑膜瘤良性组（P〈0.05）,HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤的mRNA水平呈正相关（γ=0.532、P〈0.01）。结论 HIF-1α和Ets-1的表达与脑膜瘤恶性度有关,二者在脑膜瘤发生发展过程中有协同作用,可作为脑膜瘤预后的潜在指标。     

乳癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达

目的：探讨乳癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。方法：选取68例乳癌组织石蜡标本（其中有淋巴结转移癌43例；组织学分级Ⅰ级16例，Ⅱ级27例，Ⅲ级25例）。应用免疫组化S-P法检测其巾HIF-1α、VEGF的表达。结果：乳癌组织中HIF-1α蛋白阳性表达率54.4％（37／68），VEGF阳性表达率61.8％（42／68）；有淋巴结转移的乳癌组织中2者表达高于无转移组（P〈0．05）；癌组织分化越差，2者表达越高。乳癌组织中HIF-1α与VEGF的表达有高度一致性。结论：HIF-1α在乳癌组织中存在着过表达，HIF-1α可作为乳癌治疗的新靶点。     

烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究

目的 探讨40％Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子—1α(HIF—1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法 采用40％TBSAⅢ度烫伤大鼠模型，蛋白免疫印迹法(Western—blot)测定HIF—1α蛋白水平表达，免疫组化法定位显示HIF—1α表达。结果 烫伤后大鼠心肌组织内HIF—1α蛋白表达量明显升高。左、右心室HIE—1α蛋白表达不同，HIF—1α蛋白表达增加主要定位于细胞核。结论 严重烧伤可以诱导心肌组织HIF-1α蛋白表达增加。左心室对照组HIF—1蛋白含量明显高于右心室。HIF—1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内，诱导下游因子表达。     

在肝癌细胞中HBx对缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的揭示在常氧和缺氧状态下，缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在HepG2中的表达及HBx对HIF-1α表达的调节。方法 对肝癌细胞HepG2及HBx转染的HepG2分别进行常氧和缺氧培养，其中缺氧状态用1％O2、5％CO2和94％Nz模拟，缺氧时间分别为1h，2h，4h，8h，16h，32h。采用免疫印迹检测HIF-1α表达。结果 在常氧状态下，HepG2细胞中HIF-α几乎无表达而HBx转染的HepG2明显表达。二者在缺氧1h开始均表达，8h达到高峰，16h后逐渐下降，测量二者缺氧8h时的表达，发现HBx转染的HepG2细胞中HIF-1α的表达增高。结论 在常氧状态下，HBx可诱导HIF-1α在HepG2细胞中表达。在缺氧状态下，HIF-α在HepG2细胞中表达与缺氧的时间相关且HBx可增强缺氧状态下HIF-1α在HepG2细胞中表达。提示HBx可能通过HIF-1α通路在肝癌的形成过程中发挥重要的作用。     

缺氧诱导因子1α的多态性对食管鳞癌血管生成的影响

目的：血管生成是恶性肿瘤形成与发展中的重要事件，缺氧诱导因子1及其调节的VEGF的表达对食管鳞癌的血管生成和临床病理学特征具有重要的意义。该研究旨在研究缺氧诱导因子1α的常见多态性C1772T对食管鳞癌血管生成的影响。并初步探讨其机制。方法：用PCR-RFLP法研究95例食管鳞癌、104例正常对照的缺氧诱导因子1α的常见多态性C1772T的基因型(突变者经直接测序确认)；免疫组化法测定不同基因型肿瘤组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、内皮源性生长因子VEGF、微血管密度MVD；比较不同基因型肿瘤的HIF-1α、VEGF、CD34(用以标记MVD)的表达差异。结果：在病例和对照中，只发现C/C和C/T两种基因型．食管鳞癌组C1772T的突变率为11．58％(11／95)，正常对照组为10．58％(11/104)，两组相比没有统计学差异；C/T组和C/C组肿瘤组织相比，HIF-1α表达无差异，VEGF的表达上调，MVD明显增加。结论：HIF-1α基因单核苷酸多态性C1772T与食管鳞癌的VEGF高表达和增强的血管生成有关。     

缺氧诱导因子-1α在大鼠缺血再灌注脑组织中的表达

目的观察缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor—1α，HIF—1α）在大鼠缺血再灌注脑组织中的表达，探讨其表达的意义。方法SD大鼠随机分为正常组、单纯缺血组、缺血再灌注组，应用免疫组织化学方法检测HIF-1α在大鼠大脑中动脉缺血区的表达。结果正常组未见HIF—1α表达，缺血再灌注组HIF—1α的表达显著高于单纯缺血组（P〈0．05）。结论局灶性脑缺血可诱导HIF-1α的表达且HIF-1α在发生缺血再灌注后表达增加。     

牛磺酸对缺氧大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察牛磺酸对高原缺氧条件下大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨牛磺酸对视网膜缺氧适应的影响.方法 SD大鼠分为4组,平原对照组(C)、模拟5 500 m高度缺氧组(H)与平原牛磺酸组(T)、模拟5 500 m高度缺氧牛磺酸组(HT),分别以基础饲料和添加了2.4%牛磺酸的饲料喂养1周,营养干预后平原对照组、平原牛磺酸组在平原继续饲养,模拟缺氧组、模拟缺氧 牛磺酸组放入低压舱模拟5 500 m高原缺氧,分别在处理0、2、6、12、24、48、72 h后取视网膜.应用RT-PCR、免疫组化和Western blot方法检测视网膜中HIF-1α在mRNA和蛋白水平的表达.结果缺氧后视网膜中HIF-1α免疫阳性神经元数目明显增多,主要分布在视网膜内层,内核层(INL)中细胞免疫阳性率从缺氧2 h开始增加,到72 h阳性率下降到与对照无显著性差异.mRNA与蛋白的表达在缺氧早期高于后期.牛磺酸处理后细胞免疫阳性率增加,HIF-1αmRNA与蛋白的表达量也明显增强.结论牛磺酸能通过缺氧诱导因子途径促进视网膜缺氧适应性调节,保持正常的视觉功能.     

金雀异黄素抑制氯化钴诱导的人视网膜色素上皮细胞缺氧诱导因子1α表达的研究

目的：研究氯化钴(CoCl2)诱导体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达以及金雀异黄素(Gen)对其表达的影响。方法：采用免疫组化和激光共聚焦显微镜研究HIF-1α的表达。结果：CoCl2可明显诱导人RPE细胞HIF-lα的表达，0．5h达高峰，随后逐渐下降。Gen可呈浓度依赖性地抑制氯化钴诱导的HIF-1α蛋白表达。结论：Gen可抑制CoCl2诱导的人RPE细胞HIF-1α蛋白表达。     

缺氧诱导因子-1 α、VEGF在脑出血灶周的表达研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor--1α,HIF-1α)、(vascular endothelialgrouth foutor,VEGF)在脑出血灶周中的表达,并探讨其表达的意义.方法应用免疫组织化学技术检测37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α、VEGF的表达.结果37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α阳性率为40.6%,HIF-1α在出血量＞60mL时高表达,其阳性率为88.9%,与其他出血量(30～45mL,45～600mL)阳性率的表达比较有显著意义(P＜0.05).HIF-1α表达与手术时间明显相关,随着手术时间的推迟而增加,差别有显著性意义(P＜0.05).HIF-1与VEGF的表达呈正相关(n=15,r=0.79)(P＜0.01).结论脑出血后HIF-1α的表达与出血量及手术时间相关,为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据;HIF-1 α与脑出血后微循环的重建有关.     

缺氧诱导因子-1α在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中HIF-1α的表达情况,初步探讨HIF-1α在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学检测膀胱移行细胞癌组织中HIF-1 α的蛋白表达,并分析其表达与肿瘤临床分期、病理分级及复发的关系.结果 12例正常膀胱组织未发现HIF-1α阳性表达,57例膀胱移行细胞癌组织中有30例HIF-1 α表达阳性,阳性表达率占52.63%.其表达与肿瘤的病理分级无关,但与肿瘤的临床分期及复发明显相关.结论 在膀胱移行细胞癌中,HIF-1α的表达均明显上调,HIF-1α在膀胱移行上皮细胞癌的侵袭等生物学过程中具有重要的作用,HIF-1α可能可以用于临床监控膀胱肿瘤的进展.     

应用噬菌体展示技术筛选缺氧诱导因子-1α相关肽

目的：应用噬菌体展示12肽库筛选低氧诱导因子—α(HIF—α)相关肽。方法：以抗HIF—α单克隆抗体(HIF—αmAb)为配基，采用亲和免疫法从随机12肽库中筛选与抗体特异结合的噬菌体。在筛选过程中，逐轮提高HIF—αmAb的稀释度并增强洗脱强度。3轮筛选后，随机挑取10个克隆测序。通过膜斑点印迹(Dot-ELISA)进行特异性结合鉴定。结果：经过3轮筛选后，特异性结合的噬菌体得到有效的富集，并且Dot-ELISA反应阳性逐轮增强。测序后发现有4个克隆的序列完全相同，其12肽氨基酸序列为GPHHYWYHLRLP。结论：噬菌体展示肽库技术可以用于筛选HIF—1相关肽，并为后续的活性鉴定打下基础。     

低氧诱导因子1αmRNA表达与神经细胞缺氧复氧损伤的关系

目的：探讨低氧诱导因子1α（HIF－1α）与神经细胞缺氧复氧损伤的关系。方法：氯化钴处理PC12细胞模拟缺氧，去除氯化钴模拟复氧，用乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒和RT－PCR技术检测缺氧0，1，2，4，8，12，16h以及复氧4，8，12h LDH漏出与HIF－1α mRNA水平。结果：（1）氯化钴处理细胞后，LDH漏出逐渐增加，8h达高峰，随后逐渐下降；HIF－1α mRNA水平逐渐增加，4h达高峰，随后逐渐下降；（2）氯化钴处理4h,去除氯化钴后，LDH漏出于8h明显增加，HIF－1α mRNA表达于4h明显减少，8，12h略有升高。结论：HIF－1α对神经细胞缺氧复氧损伤具有保护作用。     

卵巢上皮性肿瘤中缺氧诱导因子-1α的表达及意义

目的探讨卵巢上皮性肿瘤中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其与肿瘤微血管密度（MVD）的相互关系及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测87例卵巢上皮性肿瘤组织中HIF-1α表达，CD34抗体标记新生血管内皮细胞，计数肿瘤组织中MVD。结果卵巢上皮性癌、交界性肿瘤组织中的HIF-1α表达和MVD值均明显高于良性肿瘤。卵巢上皮性癌组织中，HIF-1α的表达与临床分期呈正相关。与组织类型、病理分级、年龄无相关性；而MVD与临床分期、病理分级均相关，与组织类型、年龄无相关性。HIF-1α表达水平与MVD之间存在显著相关性。结论HIF-1α在卵巢癌的发生、发展过程中可能起着重要作用。与卵巢癌血管生成密切相关。     

缺氧诱导因子1α与宫颈癌关系的研究进展

缺氧诱导因子1(HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,是一种重要的缺氧应答调控因子,其生物学效应由HIF-1亚基实现的。HIF-1在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管形成、细胞增殖与凋亡等很多方面都起着重要作用。本文就HIF-1的生物学特性,HIF-1在宫颈癌发生中的作用和其对预后的影响等研究进展进行综述。     

人突变型低氧诱导因子1α对大鼠后肢缺血模型血管新生的影响

目的:探讨564与402双位点突变的HIF-1α基因(Ad-HIF-1α-564Ala-402Ala,简称Ad-H564/402)在大鼠下肢急性缺血模型中的表达及对血管新生的影响.方法:①将先期构建的Ad-H564/402在HEK293A细胞中进行扩增,用氯化铯浓度梯度离心法进行腺病毒纯化.用电子显微镜、PCR及测序的方法鉴定并用分光光度计法测定病毒滴度;②构建急性大鼠下肢缺血模型,随机分为4组,分别以Ad-LacZ,Ad-H0,Ad-H564/402和生理盐水(NS)转染术侧下肢骨骼肌,于转染后1,3,5,7 d,应用RT-PCR测定骨骼肌中HIF-1α mRNA的表达量;③基因转染后28 d,选择性下肢动脉造影及血管铸型观察血管密度.结果:①经扩增、纯化后基因突变区信息保存完好,最终滴度达到(6.29±0.26)×1014OPU(optical particle u-nit,光学颗粒单位)/L.②突变体基因Ad-H564/402的相对表达量高于野生型HIF-1α基因(P=0.000);且以第7日最高(P=0.000);经两两比较,不同基因组间及不同转染天数间的表达量均有显著的统计学差异(P=0.000).③基因转染28 d后造影及血管铸型结果显示:Ad-H564/402组的绒毛小血管数大于Ad-H0组及其他各组.结论:①外源性突变体Ad-H564/402基因可促进体内HIF-1α mRNA的表达.②外源性突变体Ad-H564/402基因可促进缺血骨骼肌的侧支血管形成及微血管新生.③突变体Ad-H564/402基因的生物学功能较野生型基因Ad-H0更强.     

低密度脂蛋白诱导动脉平滑肌细胞表达MIP-1αmRNA

目的探讨天然和氧化低密度脂蛋白(n-LDL,ox-LDL)能否诱导培养的兔主动脉平滑肌细胞表达巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α mRNA.方法将培养的兔主动脉平滑肌细胞暴露于n-LDL、ox-LDL后,分别用原位分子杂交法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其MIP-1α mRNA的表达.结果培养的兔主动脉平滑肌细胞能表达低水平的MIP-1α mRNA,天然及氧化低密度脂蛋白能增强平滑肌细胞表达MIP-1α mRNA,组间差异有极显著性意义(P＜0.01).结论n-LDL和ox-LDL通过诱导平滑肌细胞表达MIP-1α,从而在动脉粥样硬化早期病变的形成过程中起重要作用.     

缺氧诱导因子1α对乳腺癌生物学行为的影响

目的 探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在乳腺癌组织中的表达状态以及其与临床病理因素之间的关系。方法 对行乳腺癌根治术后甲醛固定的石蜡包埋组织进行连续切片和HIF-1α免疫组化染色。结果 45例乳腺癌的HIF-1α阳性率为82．22％；HIF-1α表达与乳腺癌的组织类型、PR标志、ER标志、TNM分期、癌性坏死之间无相关性，但与淋巴结是否转移、炎症反应程度及病程长短之间有一定关系。结论 HIF-1α过表达与乳腺癌不良生物学行为有一定关系。     

常氧条件下调控表达缺氧诱导因子1α对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

为探讨在体外常氧条件下，诱导表达缺氧诱导因子la（H1F-la）对肝癌细胞（HepG2）增殖及侵袭能力的影响。利用Tet-on基因调控系统构建能诱导表达HIF-la的HepG2^Tet-on＋HIF-lα细胞系；常氧条件下，噻唑兰法检测HIF-la对细胞增殖、黏附能力的影响，Transwell法检测其对HepG2细胞侵袭能力的影响。     

缺氧诱导因子-1α在肿瘤中的表达研究进展

<正>国际肿瘤研究机构编制的《全球肿瘤发病率和死亡率估计》中报道,2018年全球有1 810万新发癌症病例和960万癌症死亡病例,其中肺癌是最常见的诊断癌症(占总病例的11.6%),是癌症死亡的主要原因(占总癌症死亡的18.4%).在男性中发病率和死亡率排在首位的肿瘤是肺癌,其次是前列腺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌;在女性中乳腺癌是最常见的肿瘤,其次是结直肠癌、肺癌、宫颈癌[1].肿瘤的治疗方法主要有手术治疗、放疗、化疗、分子靶向药物治疗和免疫治     

缺氧诱导因子1α对直肠癌HT-29细胞增殖的影响

目的:探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对直肠癌细胞增殖的影响,阐明其可能机制。方法:野生型直肠癌细胞系HT-29（Wt-HT-29）及转染HIF-1α特异性小干扰RNA（siRNA）的转染型HT-29细胞系（Si-HT-29）分别在常氧及缺氧状态下培养,通过Western blotting方法检测各组细胞在常氧及缺氧状态下HIF-1α和己糖激酶Ⅱ（HK-Ⅱ）的表达情况,采用MTT法检测各组细胞的生存率,采用ATP试剂盒检测细胞ATP生成量。结果:Western blotting结果,缺氧状态下野生型HT-29细胞中HIF-1α和HK-Ⅱ表达量高于转染型细胞。以常氧状态下野生型HT-29细胞的ATP生成量及细胞数量分别作为ATP及MTT数据的100%,将常氧状态下转染型HT-29细胞、缺氧状态下野生型及转染型HT-29细胞的ATP生成量及细胞数量与常氧状态下野生型HT-29细胞比值的百分数作为各组的ATP生成量及细胞生存率。常氧状态下转染型HT-29细胞的ATP生成量及细胞生存率分别为93.6%和92.0%,与野生型HT-29细胞比较差异无统计学意义（P>0.05）。在缺氧状态下野生型及转染型HT-29细胞的生存率分别为85.0%和61.3%,二者比较差异有统计学意义（P<0.05）;同时在缺氧状态下野生型及转染型HT-29细胞ATP生成量分别为81.2%和42.9%,二者比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论:HIF-1α能诱导直肠癌细胞表达HK-Ⅱ,增加ATP生成,从而发挥促增殖作用,HIF-1α可能成为直肠癌新的治疗靶点。