血清总蛋白测定下不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白对比分析

目的 探讨改良双缩脲双试剂法在全自动生化分析仪中直接测定脂浊标本血清总蛋白.方法 用酒石酸作为络合剂防止形成氢氧化铜沉淀,血清空白增加方法的敏感性而同时使脂血症对光普的最小干扰.结果 改良双缩脲双试剂法测定脂浊标本血清总蛋白与单试剂法测定结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 改良双缩脲双试剂法能有效的清除脂肪的干扰,具有很好的准确度和精密度,适合于自动分析,提高工作效率.     

血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的 将双缩脲单试剂改为双试剂法，观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰。方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素．溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白。结果脂血标本对原法干扰十分明显，本法可完全消除脂血的干扰；总胆红素每增加50μmol／L，原法总蛋白增加0．4g／L，本法不受影响；溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响，1g／L血红蛋白对原法总蛋白增加2．85g／L。对本法总蛋白增加0．93g／L；外观正常标本二种方法无显著差异。结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上，消除了脂血、黄疸的干扰，明显减少溶血的影响，有利于自动生化仪的分析。     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

用高浓双缩脲试剂直接测定脑脊液总蛋白

脑脊液总蛋白测定的方法虽有多种但各有其缺点.如比浊法灵敏度低,并在高浓度(1g/L 以上)时蛋白沉淀极易聚合不稳定.染料结合法都有与白、球蛋白呈色不一致及比色皿难洗净的缺点。免疫学方法虽灵敏高度、特异性强、但不适用于常规工作.我们配制的高浓双缩脲试剂可直接测定脑脊液中总蛋白,适用于手工及自动分折仪法,现报道如下.     

不受高脂血症影响的双缩脲试剂

历来所用的双缩脲试剂(BR),在遇到某些高脂血清时,因脂血增加540nm 处的内源性吸光度而产生正干扰.而这种干扰常用Chromy 报道的用丙酮处理脂血标本.鉴于处理脂血标本手续较烦,我们通过实验用KOH 代替NaOH,按Doumas 配方配制     

双缩脲反应测定血清总蛋白方法的标准化

双缩脲法定量测血清总蛋白已有70余年的历史.1974年,美国临床化学协会(AACC)标准化委员会的总蛋白研究组,用双缩脲法进行了血清总蛋白的室间研究.1978年,国际临床化学协会(IFCC)标准委员会在提出人血清蛋白标准74/1的暂     

改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用

目的研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法，以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法采用改良试剂，测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验，以确定所建立方法的基本性能；与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果。结果样品与试剂比例为5：220μl，线性范围达140g／L。回归方程：Y=484．0＋48．06X，r=0．9993。批内CV（20次）0．24％，日间CV（20d）1．07％。回收率95．6％～103％，平均99．5％。检测限2．36g／L。血红蛋白（Hb）2．1g／L以下，胆红素（Bil）148μmol／L以下，三酰甘油（TG）aS．2mmol／L以下，葡聚糖30g／L以下干扰不显著。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关，回归方程：Y=-2．4354＋1．0374X，r=0．9882。结果间差异无统计学意义，t=0．156，P=0．877。测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义。结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白，能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰，提高结果准确性。     

关于《改良双缩脲试剂两点终点法测定血清总蛋白的研究与应用》一文的探讨

编辑老师: 笔者拜读了发表于2005年第28卷第11期<华检验医学杂志>齐振普老师的文章"改良双缩脲试剂两点终点法测定血清总蛋白的研究与应用"[1],收获很大,同时,笔者也有一些疑惑,现与作者讨论如下.     

A single nonaqueous diazo reagent for the rapid determination of bilirubin in serum without lipemic interference

A nonaqueous reagent for directly determining serum bilirubin with 3,3'-dimethoxydiphenyl-4,4'-tetrazonium chloride in acidified dimethylsulfoxide is described. Conjugated or unconjugated bilirubin may be determined after extraction in acidified chloroform-ethyl acetate. The procedure is accurate (r² 0.97; recovery 100% for total, 98% for extracted bilirubin) and precise (C.V. 3.0% at 65 mg bilirubin per 1. The reagent develops endpoint color at 590 nm in less than 2 min, and the developed absorbance is stable for several hours. The method is intended for special applications where gross lipemia is encountered. Standardization with pure bilirubin in dimethylsulfoxide or chloroform is identical to standardization with aqueous bilirubin in protein standards.     

A novel approach to remove interference of therapeutic monoclonal antibody with serum protein electrophoresis

ObjectivesMultiple myeloma (MM) is characterized by malignant growth of plasma cells, usually producing a monoclonal antibody (mAb). New treatments for MM include therapeutic monoclonal antibodies (tmAbs), but patients treated with tmAb demonstrate interference on serum electrophoresis (SPE) and immunoprecipitation electrophoresis (IEP). Evaluation of treatment efficacy and determination of MM remission include SPE and IEP which identifies mAb, but cannot differentiate between disease associated mAb and tmAb. We hypothesized that tmAb could be removed from patient sera before testing by SPE and IEP to provide accurate diagnoses for clinicians.Design and methodsWe developed the Antigen Specific therapeutic monoclonal Antibody Depletion Assay (ASADA), that utilizes magnetic beads coated with the cognate antigen of the tmAbs, to deplete two different tmAb (daratumumab, elotuzumab) from saline and patient sera and assessed for complete removal of tmAb by SPE and IEP.ResultsWe found that tmAb could be efficiently removed from saline and patient sera. ASADA demonstrated acceptable analytical specificity and sensitivity in IEP. Recovery of appropriate quantitative values by SPE was demonstrated with clinically acceptable precision. A single bead cocktail could be used to treat both daratumumab and elotuzumab.ConclusionsThis demonstrates proof of principle that ASADA can be used to remove current and future tmAb from patient sera, regardless of platform. This research provides for accurate diagnosis, disease monitoring, and remission status in MM patients being treated with tmAb.