类风湿关节炎患者外周血Th17细胞的检测及意义

目的 探讨Th17细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的水平及意义.方法 分离RA患者和健康者外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选CD4~+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(A-CD3、A-CD28),然后加佛波酯/离子霉素(PMA/Ion),经固定,透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术(FCM)检测CD4~+T细胞内白细胞介素(IL)-17~+/干扰素(IFN)-γ~+、IL-17~+/IL-6~+水平.分组:①健康对照组;②RA病情稳定组;③RA病情活动组.结果 免疫磁珠阴选CD4~+T细胞纯度>90%.RA病情活动组IL-17表达水平(1.54±0.41)显著高于RA病情稳定组(0.70±0.21,P<0.01),二者又显著高于健康对照组(0.42±0.12,P<0.01).用A-CD3、A-CD28、IL-23刺激后,CD4~+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激组显著增加(P<0.05).CD4~+T细胞IFN-γ表达水平呈现与IL-17表达相似的特点,而RA患者与健康对照组IL-6表达水平差异无统计学意义.RA患者IL-17胞内表达水平与IFN-γ、IL-6无显著相关.结论 RA患者外周血CD4~+T细胞中存在异常增高的Th17细胞,且其水平与病情活动相关,有望作为判断RA患者病情活动的指标之一.     

CHB患者Th17-Treg失衡中IL-21的作用及机制

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周Th17/调节性T细胞(Treg)失衡中IL-21的作用及其初步机制。方法流式细胞仪分别检测59例CHB患者和20例健康人外周血细胞中Th17细胞和Treg细胞频数,同时以ELISA法检测血清细胞因子IL-21、IL-17、IL-10、TGF-β水平。体外分别以IL21、IL-2刺激CHB患者外周血单核细胞(PBMC),以实时PCR检测培养细胞转录因子RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平,以ELISA法检测培养上清细胞因子IL-17、IL-10和TGF-β水平。结果与正常人群相比,IL-21、IL1 7、TGF-β水平显著升高(P均0.05),CHB患者外周Th17/Treg比例显著升高(P0.05),IL-21水平与Th1 7/Treg比例呈正相关(P=01.008)。与IL-2相比.IL-21刺激CHB患者PBMC的RORγt mRNA表达水平明显升高(P=0.016)而Foxp3 mRNA表达水平明显降低(P=0.018),相对应的培养上清中,IL-1 7水平显著上升(P=0.049)而IL-10、TGF-β水平明显降低(P=0.017,P=0.004)。结论 C、HB患者中IL-21能通过提高RORγt mRNA表达,同时抑制Foxp3 mRNA表达进而促进Th1 7/Treg失衡。     

Th17细胞在严重全身性感染患者外周血中的表达及临床意义

目的:检测严重全身性感染患者外周血Th17/CD4+T细胞的比例及单个核细胞(PBMC)中RORγtmRNA和IL-17 mRNA的表达水平,探讨Th17细胞在严重全身性感染患者外周血中的临床意义。方法:采用流式细胞分析法检测20例严重全身性感染患者、20例感染性休克患者及20例健康体检者外周血Th17/CD4+T细胞比例,RT-PCR法检测PBMC中RORγt mRNA及IL-17 mRNA的水平。结果:严重全身性感染组及感染性休克组外周血Th17/CD4+T细胞比例、RORγtmRNA及IL-17 mRNA水平均高于健康对照组,且严重全身性感染组高于感染性休克组(均P0.05)。结论:严重全身性感染及感染性休克患者外周血Th17/CD4+细胞比例增加,RORγt及IL-17蛋白表达水平升高,Th17细胞参与了炎症的发生、发展。     

原发性非小细胞肺癌患者外周血中Th17的检测及其临床意义

目的通过检测非小细胞癌(NSCLC)患者与健康对照组外周血中Th17细胞及相关因子的表达水平,探讨其在NSCLC中的临床意义。方法流式细胞术检测外周血中Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的比例;RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17及孤独核受体γt(RORγt)mRNA的表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血浆中IL-17的水平。结果 NSCLC患者外周血Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的比例较对照组显著升高(P<0.01);PBMC中IL-17及RORγt mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.01);外周血浆中IL-17的水平显著高于对照组(P<0.01)。不同病理类型之间Th17细胞比例、IL-17 mRNA及IL-17的表达水平无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ期患者Th17细胞比例、IL-17 mRNA及IL-17的表达水平较Ⅰ^Ⅱ期患者显著增高(P<0.01)。结论 Th17细胞可能通过RORγt和IL-17参与NSCLC的发生,Th17相关指标对NSCLC的治疗及预后有指导意义。     

美托洛尔对慢性心力衰竭患者外周血Th17细胞及其相关因子表达水平的影响研究

目的探讨美托洛尔对慢性心力衰竭(CHF)患者外周血Th17细胞及其相关因子表达水平的影响。方法选择2014年1—6月在福建省晋江市医院心血管内科住院的CHF患者60例,随机分成常规治疗组和美托洛尔组,各30例;另选取30例体检健康者作为健康对照组。常规治疗组患者给予常规治疗;美托洛尔组患者在常规治疗组基础上加用美托洛尔,两组患者均治疗6个月。采用流式细胞术检测各组受试者治疗前后外周血单核细胞(PBMC)中CD+3CD+4IL-17+Th17细胞百分率,采用实时荧光定量PCR技术检测PBMC中正调控Th17细胞分化的核转录因子视黄酸相关核孤独受体γt(RORγt)、负调控Th17细胞分化的细胞因子信号传送阻抑蛋白3(SOCS3)和Th17细胞相关炎性因子白介素6(IL-6)、白介素17(IL-17)、白介素23(IL-23)及CX型趋化因子配体1(CXCL1)、CXCL5、CXCL8的mRNA表达,采用心脏彩超仪检测CHF患者左心室功能,包括左心室射血分数(LVEF)和左心室舒张末期直径(LVEDD)。结果治疗前常规治疗组和美托洛尔组患者PBMC中CD+3CD+4IL-17+Th17细胞百分率高于健康对照组(P0.05);常规治疗组和美托洛尔组患者PBMC中CD+3CD+4IL-17+Th17细胞百分率比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后美托洛尔组患者PBMC中CD+3CD+4IL-17+Th17细胞百分率低于常规治疗组(P0.05)。治疗前常规治疗组和美托洛尔组患者PBMC中RORγt、IL-6、IL-17、IL-23及趋化因子CXCL1、CXCL5、CXCL8 mRNA表达水平高于健康对照组,SOCS3 mRNA表达水平低于健康对照组(P0.05);而常规治疗组和美托洛尔组患者RORγt、IL-6、IL-17、IL-23及趋化因子CXCL1、CXCL5、CXCL8 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。治疗后美托洛尔组患者PBMC中RORγt、IL-6、IL-17、IL-23、CXCL1、CXCL5、CXCL8 mRNA表达水平均低于常规治疗组,SOCS3 mRNA表达水平高于常规治疗组(P0.05)。CXCL1、CXCL5、CXCL8与IL-17 mRNA表达水平均呈正相关(r值分别为0.438、0.345、0.423,P0.01)。两组CHF患者治疗前LVEF和LVEDD比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后美托洛尔组患者LVEF高于常规治疗组,LVEDD小于常规治疗组(P0.05)。结论 CHF患者存在强烈的Th17细胞免疫反应,而美托洛尔能降低PBMC中CD+3CD+4IL-17+Th17细胞百分率及RORγt、IL-6、IL-17、IL-23、CXCL1、CXCL5、CXCL8的表达,升高SOCS3的表达,具有抑制Th17细胞分化、下调Th17细胞功能、改善慢性炎症的作用,这可能是美托洛尔从机体免疫方面改善CHF患者心功能的作用机制之一。     

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγt和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者外周血高迁移率族蛋白1(HMGB1)及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平,同时分析其与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)和类风湿因子(RF)的关系,初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系.方法 收集80例RA患者外周血标本,其中静止期32例、活动期48例,健康志愿者50名.采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中HMGB1、RORγt和白细胞介素(IL)-17的mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度,采用单因素方差分析和Spearman相关分析进行统计学处理.结果 RA患者PBMC中HMGB1、RORyt和IL-17 mRNA的表达水平均高于健康对照组(P<0.05).且活动期[HMGB1(0.424±0.262)pg/ml,RORγt(0.34±0.25)pg/ml,IL-17(1.42±0.38)pg/ml]明显高于静止期(P<0.01).o血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果,RA组明显高于健康对照组(P<0.05),且与CRP、ESR、RF呈正相关(P<0.05).结论 检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平,有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用,也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路.     

重症胸部创伤大鼠Th1／Th2平衡变化的实验研究

目的检测重症胸部创伤大鼠受伤后7d外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）水平,研究其Th1、Th2细胞功能的动态变化。方法雄性SD大鼠20只随机分为对照组与创伤组,创伤组大鼠进行胸部撞击建立重症胸部创伤模型,对照组进行假撞击。分别于受伤前及受伤后第1、3、5、7天取全血各1．0ml,分离PBMC体外培养72h,收集上清液冻存,ELISA法集中检测IFN-γ、IL-4浓度。结果两组大鼠伤后IFN-γ、IL-4水平均迅速升高,但创伤组IFN-γ水平低于对照组,而IL-4水平高于对照组。两组大鼠IFN-γ上升倍数／IL-4上升倍数（△IFN-γ/△IL-4）比值伤后均升高,创伤组在伤后第3天恢复1．0左右、并继续降低至0．34,对照组伤后7d内始终高于1．0。结论轻度创伤可以诱导大鼠Th1细胞功能加强;重症创伤大鼠在伤后早期以Th1细胞功能增强为主,创伤急性期后随着Th2细胞功能持续增强、Th1细胞功能受到抑制,发生Th1细胞向Th2细胞的漂移。     

穿心莲内酯对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的免疫调节作用

目的 探讨穿心莲内酯对体外培养慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)表达Th1细胞因子IFN-γ mRNA及Th2细胞因子IL-4 mRNA和IL-10 mRNA的影响及其抗HBV的活性.方法 分别应用穿心莲内酯10mg/L(实验组)及0.1%二甲基亚砜(对照组)加入细胞培养液中刺激CHB患者PBMC.不同浓度穿心莲内酯(实验组)及阿德福韦(对照组)刺激HepG2.2.15细胞系,实时荧光定量PCR检测处理后PBMC的IFN-γ tuRNA、IL-4 mRNA及IL-10mRNA表达水平及HepG2.2.15细胞系HBV DNA复制水平.结果 穿心莲内酯10 mg/L处理16 h后,实验组PBMC的IFN-γ mRNA表达水平高于对照组(Z=-2.78,P=0.05),IL-4 mRNA及IL-10 mRNA的表达水平明显低于对照组(Z=-3.82,P<0.01),IFN一γ/IL-4 mRNA的比例较对照组明显提高(Z=-3.82,P<0.01),不同浓度穿心莲内酯对HepG2.2.15细胞系HBV DNA复制无明显影响(t=11.88,P>0.05),而阿德福韦对HBV DNA有抑制作用(t=15.95,P<0.05).结论 穿心莲内酯对CHB患者PBMC内IFN一γ mRNA、IL-4 mRNA及IL-10 mRNA的表达水平有调节作用,改善Th1/Th2平衡,对HBV DNA无直接抑制作用.     

类风湿关节炎CD4+T细胞白细胞介素-9白细胞介素-17干扰素-γ的表达及意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4+T细胞胞内白细胞介素(IL)-9、IL-17、干扰素-y的表达及意义.方法 取RA患者活动期25例、稳定期25例和健康人20名外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选获得CD4+T细胞,通过流式细胞术(FCM)检测CD4+T细胞内IL-9、IL-17、干扰素-γ水平;应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-9、IL-17、孤核受体(RORγt)、干扰素-γ mRNA水平.采用方差分析法进行组间比较,采用Pearson相关分析法进行相关性分析.结果 免疫磁珠阴选CD4+T细胞纯度达90％以上.RA患者病情活动组IL-9、IL-17、干扰素-γ的水平显著高于病情稳定组,分别为(1.62±0.23)％与(1.15±0.24)％(P＜0.01)、(1.47±0.20)％与(1.04±0.26)％(P＜0.01)、(8.1±0.6)％与(6.9±1.0)％(P＜0.01);RA组显著高于健康对照组(P＜0.01);RA病情活动组IL-9、IL-17、RORγt、干扰素-γmRNA水平高于病情稳定组,分别为(3.0±0.6)与(1.8±0.4)(P＜0.01)、(4.2±0.9)与(2.3±0.7)(P＜0.01)、(4.1±0.7)与(2.9±0.3)(P＜0.01)、(4.0±0.8)与(2.3±0.6)(P＜0.01),RA组IL-17、RORγt、干扰素-γ mRNA表达又显著高于健康对照组(P＜0.01);RA患者胞内IL-9水平与胞内IL-17(r=0.632,P=0.001)、干扰素-γ(r=0.515,P=0.008)、DAS28 (r=-0.519,P=-0.009)、外周血ESR水平(r=-0.857,P=0.038)呈正相关,而与C反应蛋白水平(r=0.38,P=0.61)无明显相关性.结论 RA患者体内IL-9、IL-17和干扰素-γ表达增高,可能参与RA炎症.     

间充质干细胞在成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者中免疫抑制作用的研究

目的探讨脐带间充质干细胞(MSCs)对LADA患者单核细胞衍生的树突状细胞(DCs)的免疫调节作用。方法选取5例LADA患者外周血DCs与MSCs进行共培养(MSCs+DCs组),之后刺激自体T细胞。流式细胞术检测DCs组成熟和活化水平、CD3+T、Treg、Th17细胞比例,ELISA法检测细胞培养上清中TGF-β、前列腺素E2(PGE-2)、IL-10和IL-6水平,流式多因子检测法测定细胞培养上清T细胞因子水平,全转录组测序分析筛选新的治疗靶点。结果 MSCs与DCs共培养后,调节性DCs(regDC)增加,同时TGF-β、PGE-2、IL-10和IL-6数量显著增加。两组与T细胞共培养结果显示,MSCs+DCs组IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13和TGF-β表达水平升高(P0.05),INF-γ、TNF-α和IL-17A表达水平降低(P0.05);MSCs+DCs组T细胞增殖活化水平显著降低,MSCs+DCs组Th17细胞比例降低(P0.05),Treg细胞比例增加(P0.05)。结论在LADA中,MSCs能在体外诱导未成熟DCs(imDCs)分化生成CD11b~(high)1a~(low)CD11c~(low)regDCs,表现出免疫抑制作用,这些DCs有助于抑制T细胞介导对胰岛β细胞的破坏,促进MSC发挥抗炎作用。     

活化的类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Toll样受体4诱导Th17细胞分化

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs) Toll样受体4(TLR4)通过诱导Th17细胞分化参与RA疾病发生发展的意义.方法 采集22例RA患者和20名健康对照外周血,流式细胞术检测Th17细胞频率,脂多糖刺激PBMCs 2 d,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBMCs TLR4 mRNA水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清液白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量.收集上清液与CD4+脐带血单个核细胞(CBMCs)培养3d,RT-qPCR检测CBMCsIL-17 mRNA水平.ELISA检测上清液IL-17含量.统计学处理采用成组t检验.结果 与健康对照组比较,RA患者Th17细胞频率[(0.53±0.14)％与(1.57±0.68)％]、TLR4 mRNA显著升高(P均＜0.01);PBMCs经脂多糖刺激后,RA患者TLR4 mRNA升高3.5倍,而健康对照组下降到0.11倍;RA患者PBMCs产生的IL-6、TNF-α较健康对照组明显增加(P＜0.01);RA患者PBMCs上清液诱导CD4+CBMCs IL-17 mRNA水平、IL-17含量与健康对照组相比均显著升高(P＜0.01);而未经脂多糖刺激,2组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RA患者PBMCs的TLR4表达及对脂多糖的刺激的反应性增加,且具有较强的诱导Th17细胞分化能力.     

外源性细胞因子对柯萨奇病毒性心肌炎小鼠脾Th17细胞的影响

目的:观察转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6和IL-23对柯萨奇病毒性心肌炎(VMC)小鼠脾中Th17细胞分化增殖的影响。方法:以6周龄雄性Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒液建立VMC模型,1周后磁珠分离脾脏CD4+T淋巴细胞,分成对照组、TGF-β+IL-6组和TGF-β+IL-6+IL-23组进行体外培养。5d后应用流式细胞术测定刺激后Th17细胞的百分比;逆转录-聚合酶链式反应测定细胞中IL-17mRNA的表达;ELISA测定细胞培养上清液IL-17的水平。结果:与对照组比较,TGF-β+IL-6组Th17细胞数稍增加[(1.64±0.43)%∶(1.96±0.35)%],IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度稍增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。而TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞数显著增加(4.08±0.77)%、IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度均明显高于前2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外源性TGF-β联合IL-6对VMC小鼠脾中已分化的Th17细胞无增殖作用,而添加外源性IL-23则能显著增加Th17细胞数及其效应分子IL-17的表达。     

甘草酸苷对乙型肝炎疫苗无应答者PBMC细胞因子mRNA表达的影响

目的:观察甘草酸苷(Glycyrrhizin,GL)对乙型肝炎疫苗无应答者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)细胞因子mRNA表达的影响,探讨GL增强机体免疫功能的作用机制.方法:分离乙型肝炎疫苗无应答者的PBMC,加入HBsAg和/或GL的条件下体外培养,CCK-8法测定PBMC的增殖能力,real-time PCR测定刺激后IFN-γ、IL-4、IL-10 mRNA的表达水平,并与应答组比较.结果:GL可刺激提高乙型肝炎疫苗无应答者PBMC的增殖能力,使之与应答者无显著性差异(F=3.104,P=0.138).HBsAg+GL+无应答组PBMC的IFN-γ、IL-10mRNA表达水平均高于HBsAg+无应答组,差异有统计学意义(q分别为34.93和26.18,均P<0.05),趋向于应答者分泌水平,GL+无应答组IFN-γ与IL-10的表达均高于HBsAg+无应答组(q分别为10.18和9.19,均P<0.05),但低于HBsAg+GL+无应答组(q分别为24.75和16.98,均P<0.05);而IL-4mRNA变化在无应答者3组间无统计学意义(P=0.304).结论:GL可以调节乙型肝炎疫苗无应答者的免疫状态,创造有利于保护性抗体产生的环境.     

类风湿性关节炎患者血清Th17细胞变化特征及其相关细胞因子IL-17表达研究

目的通过对类风湿性关节炎(RA)患者血清中Th17细胞变化特征及其相关细胞因子IL-17表达情况进行检测分析,并对其与DAS28评分的相关性进行研究,初步探讨它们在RA发生和发展中的作用,为RA的靶向治疗提供新的科学依据。方法选取RA患者40例作为观察组,30例健康者作为对照组。流式细胞术检测两组血清中Th17细胞水平,ELISA法检测两组血清中IL-17水平,两组间比较采用t检验;采用DAS28评分评估患者的病情,各变量间的相关性采用Pearson相关性分析。结果观察组血清中的Th17水平和IL-17水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组Th17水平与DAS28评分呈明显正相关,IL-17水平与DAS28评分亦呈明显正相关。结论 Th17细胞及其分泌的主要细胞因子IL-17在RA的慢性炎症及随后的关节损伤中起着至关重要的作用,Th17细胞水平及IL-17表达水平与疾病的严重性密切相关,对疾病进展的预测和靶向治疗具有重要指导意义。     

辅助性T细胞9/白细胞介素-9调控类风湿关节炎中辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫平衡的研究进展

RA是以滑膜炎为病理基础的自身免疫病,辅助性T细胞(Th)17和调节性T细胞免疫失衡在其发病机制中发挥重要作用.随着对IL-2从促炎因子到调节免疫耐受因子的重新认识,与IL-2共享γ链的IL-2家族成员IL-9作为一种多效性因子受到越来越多的关注,同时发现其主要来源于一种新型T细胞亚型Th9细胞.许多研究认为Th9/IL-9可能通过调控Th17/调节性T细胞免疫平衡从而参与RA滑膜炎症和病情活动,与RA发生发展有关.本文对Th9/IL-9调控RA患者Th17/调节性T细胞免疫平衡的最新研究进展予以综述.     

扩张型心肌病与Th1／Th2细胞因子失衡的研究

目的探讨Th1／Th2细胞因子失衡与扩张型心肌病（DCM）之间的关系。方法用RT—PCR方法检测DCM患者与健康对照者外周血单个核细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA的表达水平,比较DCM患者与健康对照者之间IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10mRNA的表达变化之间的关系。结果DCM组Th1／Th2比值明显低于对照组（P均〈0．05）,IL-4和IL-10表达较对照组明显增高,而IFN-γ和IL-2较对照组表达明显降低。结论DCM组存在Th1细胞向Th2细胞漂移现象,Th2细胞介导的体液免疫应答在DCM发病机理中起优势作用。     

炎症性肠病患者外周血Th17细胞的变化及其临床意义

背景:Th17细胞是一类能特异性产生白细胞介素-17(IL-17)的CD4~+T细胞亚群,研究显示其参与了多种自身免疫性疾病的发病过程。目的:研究炎症性肠病(IBD)患者外周血Th17细胞比例和IL-17mRNA表达的变化,探讨Th17细胞在IBD发病机制中的意义。方法:纳入10例健康体检者(正常对照组)和53例IBD患者,其中克罗恩病(CD)25例,溃疡性结肠炎(UC)28例,以流式细胞术检测外周血Th17细胞比例,实时PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)IL-17 mRNA表达水平。结果:IBD患者外周血Th17细胞比例明显高于正常对照组,其中活动期又明显高于缓解期,差异均有统计学意义(P0.05);其PBMC中IL-17 mRNA表达水平亦显著高于正常对照组(P0.05),但活动期与缓解期之间差异无统计学意义。结论:IBD患者外周血Th17细胞比例和IL-17 mRNA表达水平明显升高,Th17细胞参与了IBD的发生、发展过程,可能对临床疾病活动度的判断有一定意义。     

类风湿关节炎患者Th17/Treg相关细胞因子水平变化及其临床意义的研究

目的:通过检测类风湿关节炎(RA)患者血清及关节液中Th17与Treg细胞相关细胞因子IL-17、IL-6、IL-23、TGF-β的水平,探讨其在RA发病机制中的作用及其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定45名RA患者和23名正常对照者血清及8名RA患者关节液中IL-17、IL-6、IL-23和TGF-β的水平,分析其与临床及实验室指标的关系.结果:RA患者血清中IL-6、IL-17、IL-23水平明显高于正常对照组,关节液中IL-17水平较血清中明显升高.血清IL-17及IL-23水平与关节肿胀数、DAS28评分等病情活动指标正相关.严重骨破坏组血清IL-17和IL-6水平明显升高,单因素回归分析显示血清IL-17水平对骨侵蚀有显著影响.结论:RA患者Th17与Treg细胞相关细胞因子IL-17、L-6,IL-23水平明显升高,与病情活动及骨质破坏相关,可能参与了RA的发病和病情进展.     

老年支气管哮喘患者Tim-3 mRNA表达水平及作用机制

目的探讨老年支气管哮喘(EBA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中黏蛋白域蛋白(Tim)-3 mRNA、Ⅰ型辅助性T细胞(Th1)、Ⅱ型辅助性T细胞(Th2)、白细胞介素(IL)-2和IL-4的表达水平及Tim-3 mRNA在老年支气管哮喘发生发展中的作用。方法 EBA缓解期患者20例(缓解组),轻-中度急性发作期患者20例(发作组),另选同期健康志愿者20例(对照组),定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测两组哮喘患者PBMC细胞中Tim-3 mRNA的表达水平,流式细胞术检测外周血中Th1和Th2细胞的分布,酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血中IL-2和IL-4的含量,分析Tim-3 mRNA表达水平与IL-2和IL-4的相关性。结果发作组和缓解组Tim-3 mRNA表达、Th1和Th2的细胞数、IL-4的含量均高于对照组,且发作组的Tim-3 mRNA的表达、Th1和Th2的细胞数、IL-4的含量均高于缓解组,IL-2的变化趋势则反之(均P<0.05)。发作组和缓解组中Tim-3 mRNA的表达水平与IL-2呈负相关,与IL-4呈正相关(均P<0.05)。结论 EBA患者PBMC中Th1和Th2细胞数增加,Tim-3蛋白可能参与EBA的发生发展。     

MAPKERK1/2信号通路在狼疮肾炎外周血单个核细胞表达白细胞介素-6 mRNA中的作用

目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶-细胞外调节激酶1/2(MAPKERK1/2)信号通路在狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)中自发高水平表达白细胞介素(IL)-6 mRNA中的作用.方法分离培养患者PBMC,利用蛋白免疫印迹法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测MAPKERK1/2磷酸化活化程度和IL-6 mRNA表达水平,并与正常人群比较.结果26例LN患者与21名健康对照者比较,LN患者PBMC MAPKERK1/2信号通路呈高度活化状态,体外培养可自发表达高水平IL-6mRNA,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).应用特异性阻断剂PD98059阻断LN患者PBMC MAPKERK1/2信号通路活化可显著抑制IL-6 mRNA的自发高表达.结论LN患者PBMC中MAPKERK1/2信号通路异常活化,并在PBMC自发高水平表达IL-6 mRNA中起作用.