Faecalibacterium prausnitzii产物对大鼠脾细胞促炎因子IL-17分泌的抑制作用

背景：Faecalibacterium prausnitzii（F.prausnitzii）在炎症性肠病（IBD）患者肠道内减少,与IBD发生有一定相关性。目的：研究Fprausnitzii及其产物体外对大鼠脾细胞分泌促炎因子白细胞介素（IL）-17的抑制作用和机制。方法：以IL-6、转化生长因子（TGF）-B或骨髓来源树突细胞（BMDC）分别刺激大鼠脾细胞。将脾细胞分为阳性对照组、Fprausnitzii上清液组、Fprausnitzii组、长双歧杆菌组、丁酸钠组,以未进行任何干预的脾细胞作为阴性对照。以ELISA法检测细胞培养液中IL-10、IL-12、IL-17、IL-23含量。结果：以细胞因子或BMDC刺激后,与阴性对照组相比,阳性对照组脾细胞IL-17含量均明显升高[（309．24±21．30）pg／mL对（182．20±89．12）pg／mL;（20．54±2．12）pg／mL对（17．36±0．38）pg／mL]（P〈0．05）。与阳性对照组相比,Fprausnitzii上清液可明显抑制细胞因子或BMDC诱导的脾细胞IL-17含量[（58．11±19．20）pg／mL对（309．24±21．30）pg／mL;（17．25±0．42）pg／mL对（20．54±2．12）pg/mL]（P〈0．05）。结论：Fprausnitzii可通过其产物调节免疫反应,可能与抑制Th17细胞活化有关。     

miRNA-126靶向抑制A549细胞迁移和侵袭能力的研究

目的研究microRNA-126（miR-126）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞迁移和侵袭能力的影响。方法利用脂质体介导法将十勾建的miR126过表达质粒转染至NSCI．C细胞株A549细胞（A549／miR-126组）,并设空质粒转染组（A549／MOCK组）和空白对照组（A549组）。利用RT-PCR技术检测3组细胞中EGFI。7（miR126的靶标）的表达水平,采川细胞划痕实验观察细胞迁移能力差异,采用Transwell小室法分析3组细胞侵袭能力的差异。结果RT—PCR检测A549／miR-126组、A549／MOCK组和A549组细胞中EGFI。7mRNA分别为2．32±0．088、1．43±0．026和1．00±0．000,差异有统计学意义（P〈0．01）;细胞划痕实验显示A549／miR—126组、A549jM（）CK组和A549组细胞平均迁移距离分别为3．0μm、2．65μm和0．5μm,平均抑制率分别为0、11．25％和83．75％,差异有统计学意义（P〈O．05）;Transwell小室实验显示,A549／miR126组24hr侵袭细胞数为（28．6±2．322）个,36h侵袭细胞数为（29．2±3．7683）个,A549／M（）CK组24h为（49．8±3．7014）个,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-126可上调EGFL7mRNA的表达,并可能通过表达产物EGFI。7蛋白抑制A549细胞的迁移和侵袭能力。     

失眠伴便秘型肠易激综合征患者睡眠特征及胃动素、生长抑素的临床观察

目的观察失眠伴便秘型肠易激综合征患者的睡眠特征及胃动素、生长抑素水平,为临床治疗提供依据。方法对同期连续就诊的失眠伴便秘型肠易激综合征患者及失眠不伴便秘型肠易激综合症患者（各12例）进行多导睡眠检测,同时设立健康志愿者（8人）作为对照。采用多导睡眠仪对上述试验者进行整晚监测,第二天晨起用放免法测定血浆胃动素、生长抑素水平。结果失眠伴便秘和不伴便秘组的睡眠时间、深睡眠时间、深睡眠比例、快眼动（REM）时间以及睡眠效率均较正常对照组显著减少;在总记录时间、REM次数、REM比例三组无显著性差异。失眠伴便秘患者胃动素较正常对照组明显升高（271．89pg／mL±51．25pg／mLvs240．85pg／mL±41．41pg／mL,P〈0．05）,升高幅度较失眠不伴便秘患者（315．49Pg／mL±19．32pg／mL）低;其生长抑素水平亦较对照组明显升高（505．49pg/mL±30．49pg／mLvs438．32pg／mL±23．67pg／mL,P〈0．05）。结论失眠与便秘型肠易激综合征关系密切。失眠伴有便秘型肠易激综合征患者胃动素、生长抑素水平增高。     

严重急性呼吸综合征病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应

目的研究SARS冠状病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）的炎症反应。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测第24、48、72和96小时SARS冠状病毒N蛋白对人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）生长活性的影响。采用ELISA检测SARS冠状病毒N蛋白作用后A549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、转化生长因子-β1（TGF-β1）的浓度变化。用RNA提取试剂盒提取总RNA，RT-PCR半定量法检测A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA及基质金属蛋白酶（MMP）-9 mRNA的表达。结果不同浓度N蛋白对A549细胞生长均有抑制作用（表现在作用48h后），其中以20μg／mL浓度抑制性最强，其72h、96h的A值分别为0．672±0．027、0．799±0．092，与同一时间点空白对照组A值0．737±0．024、0．968±0．007相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。加入N蛋白后，4、6和12hA549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、TGF-β1浓度上升，其中IL-6的6h和12h浓度分别为（119．35±5．60）ng／L和（116．29±10．49）ng／L，II，10的4、6和12h浓度分别为（56．75±6．28）、（64．99±7．45）和（61．28±3．56）ng／L，TGF-β1 4、6和12h的浓度分别为（159．47±5．38）、（178．83±9．13）和（173．40±14．71）ng／L，与同一时间点对照组相比，差异有统计学意义。加入N蛋白后，A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达迅速上升，2h即有明显升高，6h进一步升高；MMP-9 mRNA的表达在2h时无明显上升，6h时有明显升高。结论Ⅱ型肺泡上皮细胞是SARS冠状病毒的重要靶细胞，同时也是效应细胞；SARS冠状病毒结构蛋白导致A549细胞各种炎性介质的分泌增加，表现在炎性因子的浓度提高和相应的mRNA表达水平增加，可能是机体异常免疫反应的发病机制。     

慢性心房颤动患者电复律前后血浆脑钠钛浓度变化

目的分析慢性心房颤动患者电复律前后脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）浓度变化的临床意义。方法回顾性分析96例慢性心房颤动患者（实验组）入院时、电复律后24h、30d血浆BNP浓度及左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）,同时检测70例无心房颤动患者（对照组）入院时的血浆BNP浓度。结果实验组与对照组入院时的BNP浓度比较,差异有统计学意义[（197±32）pg／mL比（53±12）pg／mL．P〈0．05],实验组电复律前与电复律后12h、30d的血浆BNP浓度比较差异有统计学意义[（197±2）pg／mL比（83±13）pg／mL,P〈0．05;（197±32）pg／mL比（79±11）pg／mL,P〈0．05],电复律成功组BNP浓度明显低于电复律失败组,差异有统计学意义[（79±11）pg／mL比（114±15）pg／mL,P〈0．05]。结论检测血浆BNP浓度有助于评估心房颤动预后。     

肝癌相关抗原kineetin基因重组蛋白致敏的树突状细胞对T细胞增殖活化的影响

目的观察肝癌相关抗原kineetin基因重组蛋白（kinectln—MBP）致敏的树突状细胞（DC）对T细胞增殖活化能力的影响。方法从正常人外周血中分离单个核细胞,用rhGM—CSF、rhIL-4联合诱导扩增DC;用kinectin-MBP（kinectin—MBP组）、麦芽糖结合蛋白（MBP组）分别致敏DC,对照组不处理。采用ELISA法检测细胞上清液中的IL-12、IFN-γ,MTT法检测各组DC刺激自体T淋巴细胞增殖的能力。结果kinectin—MBP组上清液中IL-12、IFN-γ含量分别为（615．32±7．93）、（544．28±7．17）pg／ml,MBP组分别为（382．13±5．21）、（308．46±6．44）pg／ml对照组组分别为（299．40±10．22）、（228．03±6．70）pg/ml,三组相比,P均〈0．05。kinectin—MBP组T淋巴细胞增殖指数为53．14±0．62,MBP组为22．14±0．31,对照组为10．86±0．65,三组相比,P均〈0．001。结论体外诱导扩增的DC经kinectin-MBP致敏后具有很强的刺激自体T细胞增殖的能力。     

Notchl信号在食管癌中的表达

目的检测Notchl和JAGl在食管癌的表达,分析Notch在食管癌中的作用和意义。方法应用RT-PCR检测126例食管癌组织和52例癌旁正常食管组织中Notchl和JAG1的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系。结果癌组织与癌旁组织中Notchl表达率分别为21．4％（27／126）和61．5％（32／52）,两者比较差异有显著性（P〈0．05）;癌组织中Notchl标准化系数低于癌旁组织,标准化系数中位数分别0．63和0．82,两者比较差异有显著性（P〈0．05）。JAGl在癌旁组织的表达率为10％（5／52）,在癌组织中无表达。Notchl表达与肿瘤大小、分化程度的相关性均有显著性差异（P〈0．05）。结论Notchl表达失调可能与食管癌发生发展相关。     

大鼠脐带间充质干细胞对肝细胞及卵圆细胞体外增殖与功能的影响

目的：探讨大鼠脐带间充质干细胞（UMSC）对原代大鼠肝细胞及肝卵圆细胞增殖与功能的影响。方法采用2-乙酰氨基芴加肝脏三分之二切除术建立肝卵圆细胞增殖模型,通过原位二步胶原酶灌流法分离到单个肝脏细胞,再经过 Percoll 密度梯度离心分离到肝卵圆细胞。原代大鼠肝细胞/肝卵圆细胞各分为3组：UMSC 组、原代大鼠肝细胞组/肝卵圆细胞组及 UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组/UMSC 与肝卵圆细胞共培养组,分别于第1、3、6、8天通过MTT 法检测各组细胞增殖能力,于第3天通过 ELISA 法检测各组细胞培养上清液中白蛋白含量。结果UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组在第3、6、8天的 A 值均比相应时间点的 UMSC 组 A 值与原代大鼠肝细胞组 A 值之和大（P ＜0．05）;UMSC 与肝卵圆细胞共培养组在第3、6、8、10天的 A 值均比相应时间点的 UMSC 组 A 值与肝卵圆细胞组 A 值之和大（P ＜0．05）。UMSC 无白蛋白分泌能力,UMSC 与原代大鼠肝细胞共培养组培养上清液中白蛋白水平为（266．21±50．44）ng/mL,较原代大鼠肝细胞组（130．79±22．10）ng/mL 高（P ＝0．013）;UMSC 与肝卵圆细胞共培养组培养上清液中白蛋白水平（（49．64±3．56）ng/mL）较肝卵圆细胞组（13．54±1．53）ng/mL 高（P ＝0．000）。结论UMSC 在体外可以促进原代大鼠肝细胞及肝卵圆细胞的存活和增殖,并可增强其分泌白蛋白的作用。     

早产孕妇血清IL-6、IL-17和宫颈分泌物fFN水平变化及意义

目的：观察早产孕妇血清白细胞介素6（ IL-6）、IL-17和宫颈分泌物胎儿纤维连接蛋白（ fFN）水平变化,并探讨其意义。方法采用ELISA法检测38例先兆早产孕妇（ A组）、30例早产孕妇（ B组）和35例同期门诊行产前诊断的正常妊娠孕妇（ C组）的血清IL-6、IL-17和宫颈分泌物fFN。结果 A组血清IL-6、IL-17及宫颈分泌物fFN分别为（57．2±13．4）pg／mL、（36．4±7．1）pg／mL、（81．9±15．4）ng／mL,B组分别为（91．3±16．2）pg／mL、（68．3±10．3）pg／mL、（115．6±11．8）ng／mL,C组分别为（26．5±6．7）pg／mL、（17．6±2．5）pg／mL、（7．5±3．6）ng／mL;B组＞A组＞C组,P均＜0．05。结论早产孕妇血清IL-6、IL-17及宫颈分泌物fFN均升高,联合检测对早产具有预测作用。     

Notch胞内域1对高糖诱导小鼠肾小球足细胞凋亡的影响

目的通过体外高糖培养小鼠肾小球足细胞,检测Notch胞内域1（NICDl）的表达与肾小球足细胞凋亡的关系并了解其他信号通路是否介导高糖对Notch通路的激活,以探讨治疗糖尿病肾病的潜在方向。方法高糖培养小鼠足细胞,于刺激0、12、24、48、72h后收集细胞,检测NICDl蛋白表达情况。将细胞分为7组：正糖组、高糖组、高糖＋1分泌酶抑制剂（GSI,抑制NICDl活化）组、高糖＋p38细胞分裂素活化蛋白激酶抑制剂组、高糖＋Janus激酶2抑制剂组、高糖＋转化生长因子B,I型受体抑制剂组和高糖＋磷酸肌醇3激酉每／蛋白激酶B抑制剂组。分别采用免疫细胞化学和Westernblotting法检测NICDl的表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法（TUNEL）观察足细胞凋亡情况。两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析。结果高糖培养足细胞NICDl蛋白较正糖组（0．079±0．010）增加,12h开始增加（0．443±0．075）,48h达峰（0．746±0．034）,72h略下降（0．658±0．056,F=6．235,P〈0．01）。流式细胞术及TUNEL显示48h时足细胞凋亡率升高,给予GSI后抑制NICDl的活化及足细胞凋亡（P〈0．01）;给予Janus激酶2（0．193±0．096）和转化生长因子B,I型受体抑制剂（0．225±0．067）可抑制高糖对NICDl蛋白的活化（t=6．781、4．287,均P〈0．叭）。结论高糖通过Notch通路诱导足细胞凋亡,高糖对Notch通路的激活可能通过Janus激酶／转录激活因子和转化生长因子β1／Smad通路。     

黄芪注射液对咳嗽变异性哮喘的免疫调节作用

目的:观察黄芪注射液联合沙美特罗替卡松对咳嗽变异性哮喘(CVA)患者诱导痰IL-10和IL-6表达的影响。方法:将96例CVA患者分为对照组(沙美特罗替卡松治疗48例)和观察组(黄芪注射液联合沙美特罗替卡松治疗48例),健康体检者40例作为正常对照。使用ELISA法测定2组患者血IL-10和IL-6表达水平。结果:对照组和观察组治疗前IL-10表达水平分别为(8.24±1.91)pg/mL和(8.16±1.97)pg/mL(P0.05),但均显著低于正常对照组(22.36±5.71)pg/mL(P0.01)。治疗14 d后对照组和观察组IL-10表达水平分别为(10.35±2.58)pg/mL和(16.32±3.27)pg/mL,均显著高于治疗前(P0.05和P0.01),且治疗后观察组IL-10表达水平显著高于对照组(P0.01)。对照组和观察组治疗前IL-6表达水平分别为(44.17±7.23)pg/mL和(44.22±7.14)pg/mL(P0.05),但均显著高于正常对照组(13.24±3.52)pg/mL(P0.01)。治疗后对照组和观察组IL-6表达水平分别为(36.53±5.42)pg/mL和(25.68±4.75)pg/mL,均显著低于治疗前(P0.05和P0.01),但治疗后观察组IL-6表达水平显著低于对照组(P0.01)。观察组治疗有效率显著优于对照组(93.7%vs 79.2%,P0.05)。观察组和对照组不良反应发生率分别为10.4%和8.3%(P0.05)。结论:黄芪注射液联合沙美特罗替卡松可显著升高CVA患者IL-10表达水平,降低IL-6表达水平,且临床疗效较好。     

姜黄素调控炎症对内皮细胞增殖凋亡的影响

目的明确姜黄素对炎症诱导的血管内皮细胞损伤的保护机制。方法将人单核／巨噬细胞系（THP-1）分为空白对照组、高脂高糖组、高脂高糖＋姜黄素预处理组（高脂高糖浓度为25mmol／L葡萄糖＋500μmol／L棕榈酸）,分别给予相应处理24h,更换培养基继续培养24h,利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清及实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）分析THP-1细胞内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的表达,同时将上清作用脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）,HUVECs分为空白对照组、空对照条件培养基组、高脂高糖条件培养基组、姜黄素处理条件培养基组,并行噻唑蓝法（MTT）检测HUVECs增殖、流式细胞仪检测凋亡,Westernblotting分析磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果高脂高糖组THP-1细胞内受体相互作用蛋白140（RIPl40）、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中炎症因子TNF-α和IL-6浓度明显高于空白对照组（t=8．55、9．44、9．73、16．01、19．22,均P〈0．05）。相对于高脂高糖组,姜黄素预处理组THP-1细胞内RIPl40、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中TNF-α和IL-6浓度明显下降（t=3．59、5．96、5．59、6．95、23．91,均P〈0．05）;高脂高糖条件培养基组HUVECs细胞活力明显低于空对照条件培养基组（24h,1．22±0．07比1．85±0．14,t=6．58,P〈0．05;48h,1．72±0．02比2．49±0．09,t=10．08,P〈0．05）,而姜黄素处理条件培养基组能够改善高脂高糖条件培养基对HUVECs增殖的抑制作用（24h,1．22±0．07比1．72±0．11,t=2．13,P〈0．05;48h,1．72±0．02比2．33±0．11,t=6．92,P〈0．05）;与空对照条件培养基组比较,高脂高糖条件培养基组能够明显增加HUVECs凋亡率、p-ERK表达及降低Bcl-2表达（t=9．82、9．69、4．61,均P〈0．05）,姜黄素处理条件培养基组与高脂高糖条件培养基组比较,下调RIPl40表达后能明显降低HUVECs凋亡率、p-ERK表达及增加Bcl-2表达（t=6．35、7．17、3．26,均P〈0．05）。结论姜黄素能够通过抑制高脂高糖诱导的炎症来调控HUVECs的增殖凋亡。     

LPS诱导的HepG2细胞NOTCH与LPS-TLR4-NF-κB炎症信号通路的“会话”研究*

目的 探讨在脂多糖（LPS）刺激下HepG2细胞Notch与LPS-TLR4-NF-κB炎症信号通路的相互影响。方法 给予LPS处理HepG2细胞,提取细胞RNA,采用qRT-PCR法检测HepG2细胞Notch信号通路受体及其配体mRNA水平,给予γ分泌酶抑制剂（DAPT）、LPS或LPS联合DAPT处理细胞,采用Western blot法检测Notch受体胞内区域（NICD）和LPS-Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。结果 经LPS处理HepG2细胞后,Notch 1和Jag 1 mRNA水平分别升高了2.25倍（P<0.001）和2.47倍（P<0.001）,NOTCH 3仅增加的0.0700倍（P>0.05）,Jag 2仅增加了0.420倍（P>0.05）,Dll 4增加了0.947倍（P<0.01）,而NOTCH 2却降低了0.857倍（P<0.01）,NOTCH 4降低了0.283倍（P>0.05）,Dll 1降低了0.750倍（P<0.01）、Dll 3降低了0.393倍（P>0.05）;与对照组比,LPS处理组NICD和NF-κB蛋白表达水平显著增加,而DAPT处理组NICD和NF-κB蛋白表达显著减少。结论 本研究结果揭示了在LPS刺激下,HepG2细胞Notch与TLR4-NF-κB信号通路之间的相互作用,抑制Notch信号通路可以显著改善LPS-TLR4引起的炎症反应。     

依那普利对心力衰竭患者血压及交感活性的影响

目的 研究不同剂量依那普利治疗后,在不同血压水平对充血性心力衰竭患者交感神经活性的影响.方法 选取2012年1月至2013年4月在江苏省泰兴市人民医院住院的心力衰竭患者,在未服降压药物的情况下,血压110/70 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）以上,纽约心脏协会心功能Ⅲ级或不必卧床的Ⅳ级.所有患者在入院时进行病史资料采集,并检测血浆肾上腺素、去甲肾上腺素、肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮浓度.入选后予依那普利口服,起始剂量5 mg/d,根据血压情况,逐渐加量至10 mg/d.三周后按平均收缩压≥100 mm Hg和＜100 mm Hg分为A组和B组.对于A组患者,从第4周开始,增加药物剂量,至平均收缩压＜100 mmHg,并维持至第6周.B组患者继续原治疗方案至第6周.在第3周和第6周分别进行上述神经内分泌因子活性检测,比较不同时间段两组神经内分泌因子的活性.结果 48例患者入选,其中A组26例,B组22例.两组治疗前临床特点、交感活性及治疗后左心室射血分数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.治疗6周后,A组血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）剂量较B组大,差异有统计学意义[（14.3±4.5） mg vs.（7.5±2.4） mg,P＜0.05].两组肾上腺素、去甲肾上腺素浓度比治疗前显著降低,差异有统计学意义[A组肾上腺素：（256.1±77.3） pg/mL vs.（168.7±53.3）,P＜0.05;A组去甲肾上腺素：（1 734±534） pg/mL vs.（844±399） pg/mL,P＜0.05;B组肾上腺素：（248.7±62.3） pg/mL vs.（218.1±60.3） pg/mL,P＜0.05;B组去甲肾上腺素（1 645±619）pg/mL vs.（1 084±431） pg/mL,P＜0.05],且A组下降更明显.两组治疗前后血浆肾素、血管紧张素、醛固酮变化不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 血管紧张素转换酶抑制剂治疗后,达到相同目标血压时,较大治疗剂量患者交感活性下降明显,而治疗剂量较小者交感活性虽有下降,但下降幅度小,提示对于后者应当采取各种措施进一步降低交感活性.     

CCN 3对骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的影响

目的：探讨肾母细胞瘤过度表达基因（CCN3）对骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）向内皮细胞分化的影响。方法：以含50ng/ml血管内皮生长因子培养基诱导 BM-MSCs向内皮细胞分化作为阳性对照组,以含100ng/ml重组CCN3蛋白并50ng/ml血管内皮生长因子培养基诱导BM-MSCs向内皮细胞分化作为CCN3组,并以单纯完全培养基培养BM-MSCs为阴性对照组,采用细胞免疫荧光化学法和半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检查诱导16 d后假性血友病因子（vWF）表达以评价内皮细胞分化,以半定量 RT-PCR法检测 BM-MSCs 诱导分化前后Notch1基因mRNA表达。结果：BM-MSCs 诱导分化16d 后,阳性对照组可见部分细胞 vWF 荧光染色阳性, CCN3组阳性染色细胞明显多于阳性对照组,且 vWF mRNA 表达明显强于阳性对照组[吸光度（OD）值比：（0.550±0.090）比（0.358±0.080）,P＜0.01],阴性对照组未见阳性染色细胞;此外,诱导分化前,三组Notch1基因mRNA均呈低表达,组间两两比较无明显差异（P 均＞0.05）,诱导分化16d后阳性对照组和 CCN3组 Notch1基因 mRNA表达明显强于阴性对照组[OD值比：（0.232±0.047）、（0.352±0.029）比（0.132±0.033）,P均＜0.01],但与阳性对照组相比,CCN3组 Notch1基因 mRNA表达明显更高（P＜0.01）。结论：肾母细胞瘤过度表达基因通过激活 Notch1信号通路可增强骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的能力。     

BNP与老年心力衰竭患者LVEF、心功能分级及预后相关性研究

目的分析老年心力衰竭(心衰)患者血浆脑钠肽(BNP)水平与左室射血分数(LVEF)、6分钟步行试验距离(6MWT)、NYHA心功能分级及预后的相关性。方法选取2009年2月至2013年11月在上海市徐汇区中心医院老年病科治疗的老年心衰患者100例,男性48例,女性52例,年龄55~72岁,平均年龄(68.26±5.23)岁。根据血浆BNP水平分为4组,A组[(8.0~93.9)pg/mL]22例;B组[(94.0~349.9)pg/mL]30例;C组[(350.0~988.9)pg/mL]21例;D组[(989.0~5000.0)pg/mL]27例。检测患者血浆BNP水平,测量各组患者LVEF、6MWT、心功能分级以及随访出院2个月后不良心脏事件发生情况。结果与A组[(135.13±32.24)pg/mL]比较,B组[(323.14±52.37)pg/mL]、C组[(568.47±132.13)pg/mL]、D组[(1687.57±432.66)pg/mL]血浆BNP水平呈逐渐增高趋势,差异具有统计学意义(P均0.05)。与A组[(49.56±8.63)%]比较,C组[(42.24±4.41)%]、D组[(35.03±3.87)%]下降,差异具有统计学意义(P均0.05)。随着血浆BNP水平升高,6MWT呈下降的趋势,差异具有统计学意义(P均0.05),心功能也逐渐下降,MACE发生率增加。老年心衰患者血浆BNP水平与LVEF呈负相关(r=-0.893,P0.05),与6MWT呈负相关(r=-0.913,P0.05),与心功能NYHA分级呈正相关(r=0.927,P0.05),与2个月MACE发生率呈正相关(r=0.909,P0.05)。结论老年心衰患者血浆BNP水平与LVEF、心功能分级、6MWT及预后密切相关,为临床诊断老年心衰以及评估心衰严重程度提供重要参考。     

肾素-血管紧张素-醛固酮系统与急性心肌梗死短期预后关系的研究

目的研究肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)与急性心肌梗死短期预后的相关性。方法纳入2012年6月~2012年12月江西省人民医院急性心肌梗死患者33例(AMI组)及健康体检者30例(对照组),比较两组RAAS系统中血清肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)的水平差异。3个月后对AMI组患者行彩色超声心动图测定左室功能[包括:左室舒张末径(LVEDD)、左室收缩末径(LEVSD)和射血分数(LVEF)],观察其与RAAS的相关性;同时按照AngⅡ水平将AMI组分为低AngⅡ亚组(AngⅡ≤249.1 pg/ml,n=19)和高AngⅡ亚组(AngⅡ249.1 pg/ml,n=14),观察3个月随访期间两组心血管事件(MACE)的发生情况。结果与健康组相比,AMI组患者PRA[(6.5±2.4)ng/(ml.h)vs.(0.5±0.4)ng/(ml.h)]、AngⅡ[(226.9±66.3)pg/ml vs.(47.4±11.9)pg/ml]、Ald[(401.8±91.2)vs.(294.1±43.4)pg/ml]水平均较高,差异有统计学意义(P0.01);AMI组患者AngⅡ水平与患者3个月后的LVEDD(r=0.788,P0.01)及LEVSD呈正相关(r=0.770,P0.01),与LVEF呈负相关(r=-0.782,P0.01);AMI患者中高AngⅡ亚组3个月内心血管事件发生率显著高于低AngⅡ亚组(100%vs.42.11%,P0.01)。结论心肌梗死患者存在RAAS过度激活,AngⅡ水平与心肌梗死后左室重构、心功能及心血管事件等预后情况明显相关。     

Hepatoma cells up-regulate expression of programmed cell death-1 on T cells

AIM： To investigate the effect of hepatoma cells on up-regulation of programmed cell death-1 （PD-1）, and the function of PD-1 on T cells. METHODS： HepG2 or HepG2.2.1.5 cells were cocultured with a lymphoma cell line-Jurkat cells. PD-1 expression was detected by flow cytometry. IL：2, INF-γ and IL-10 in culture supernatant were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Cytotoxic action of T cells was determined by MIF reduction assay-direct mononuclear cell cytotoxicity assay. RESULTS： The PD-1 expression on Jurkat cells increased by 16.17% ± 2.5% and 17.43% ± 2.2% after HepG2 or HepG2.2.1.5 cells were co-cultured for 48 h. The levels of IL-2, INF-γ and IL-10 in the culture supernatant were 202.9 ＋ 53.0 pg/mL, 88.6 ± 4.6 pg/mL and 63.7± 13.4 pg/mL respectively, which were significantly higher than those （102.9 ± 53 pg/mL, 39.3 ± 4.2 pg/mL, and 34.6 =E13.7 pg/mL） in the control group （P 〈 0.05）. The OD value for MTT assay in the blocking group （0.29 ± 0.06） was significantly higher than that （0.19 ± 0.09） in the control group （P 〈 0.05）. CONCLUSION： PD-1 expression on Jurkat cells is upregulated by hepatoma cells, cytokines and cytotoxic action are elevated after PD-1/PD-L1 is blocked.     

阿托伐他汀对血管紧张素Ⅱ引起的大鼠心肌连接蛋白43重构的防治作用

目的 观察阿托伐他汀对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)升高致大鼠心肌缝隙连接蛋白(connexin,Cx)43重构的模型的防治作用.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机按随机数字表法分为对照组(A组)、盐酸异丙基肾上腺素(B组)、盐酸异丙基肾上腺素加阿托伐他汀组(C组),每组IO只.喂养8周后处...     

人激肽释放酶重组腺相关病毒对人脐静脉内皮细胞的影响

目的:构建携带人激肽释放酶(kallikrein,KK)基因的重组腺相关病毒载体,并导入体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察其对缓激肽(BK)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响。方法:(1)将KK基因定向克隆入腺相关病毒载体质粒pAAV-MCS中,构建成pAAV-KK;(2)分别将pAAV-KK及pAAV-LacZ与另外两种质粒pHelper、pAAV-RC通过脂质体共同转染AAV-293细胞,包装出rAAV-KK和rAAV-LacZ重组腺相关病毒。将rAAV-LacZ原液稀释成不同浓度梯度并感染HT-1080细胞,通过β-半乳糖苷酶染色测定病毒感染滴度,并观察LacZ传代HT-1080细胞的表达情况;(3)将rAAV-KK感染HUVEC,检测其对缓激肽、NO、ET-1水平和eNOS基因表达的影响。结果:(1)成功构建了带有KK目的基因的重组腺相关病毒载体和带有LacZ报告基因的重组腺相关病毒载体(对照载体);(2)rAAV-LacZ重组病毒以感染滴度6.2×107I U/ml感染HT-1080细胞后,LacZ基因能够在连续传代的HT-1080细胞内稳定持续表达;(3)与空白组、LacZ组(对照组)相比,KK感染组的HUVEC细胞培养液中BK[(2.864±1.36)pmol/ml∶(2.782±1.48)pmol/ml∶(6.576±2.08)pmol/ml]、NO[(16.42±1.02)μmol/L∶(16.46±1.25)μmol/L∶(21.28±1.46)μmol/L]水平明显增加,eNOS基因[(0.353±0.031)∶(0.364±0.049)∶(0.423±0.038)]表达明显增强,ET-1[(262.91±17.85)pg/ml∶(263.56±15.87)pg/ml∶(199.48±16.99)pg/ml]水平显著下降(P均0.01)。结论:(1)成功构建了携带有人激肽释放酶基因的重组腺相关病毒,rAAV-KK感染体外培养的人脐静脉内皮细胞;(2)可使细胞分泌BK、NO,以及表达eNOS基因增加,ET-1减少,改善内皮细胞功能。