应用多重连接依赖探针扩增技术快速检测胎儿染色体非整倍体异常

目的 探讨多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在常见染色体非整倍体异常检测及其在产前诊断中的应用价值.方法 应用MLPA技术检测561份产前诊断样本和20例已知染色体异倍体标本,所有样本均进行常规染色体核型分析,比较MLPA结果和染色体核型分析结果,评价MLPA技术的临床符合率.结果 MLPA技术能够在48 h内出具检测结果,共检测出38例染色体异倍体,包括20例21-三体,10例18-三体,1例13-三体,4例Turner综合征,1例Klinefelter综合征,1例超雄综合征,1例48,XYY,+18双三体综合征.MLPA结果与染色体核型结果一致,检测结果100％准确.在561份产前诊断样本中,有550份样本的MLPA分析结果和细胞染色体核型的结果一致,临床符合率达到98.04％.结论 MLPA技术具有快速、简单、稳定等优点,可检测常见非整倍体异常,能作为产前诊断的可靠方法,具有临床实际应用价值.     

MLPA技术在快速产前诊断染色体非整倍体异常的应用

目的探讨多重链接探针扩增(multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA)技术在快速产前诊断染色体非整倍体异常的临床应用。方法选取我院2016年1月至2016年12月具有产前诊断指征孕妇,在适宜孕周进行穿刺取羊水、脐血或绒毛,采用MLPA技术进行21、18、13、X和Y染色体非整倍体快速检测,同时进行细胞培养后染色体核型分析双盲检测。结果在5396例产前诊断样本21、13、18、性染色体非整倍体与染色体核型分析比较的符合率为99.9%,141例异常结果涉及21、13、18、X/Y染色体分别为81例、12例、18例、30例。结论 MLPA技术对染色体非整倍体检测具有低成本、高通量、检测周期短等优势,结合染色体核型分析可应用于快速产前诊断染色体非整倍体异常。     

MLPA在诊断自然流产绒毛染色体非整倍体异常中的研究与应用

目的应用多重探针扩增技术（multiplex ligation—dependent probe amplification，MLPA）探索自然流产与染色体数目异常的关系，并与常规经典染色体核型分析相比较，以此来评估其应用价值。方法对105例自然流产胎儿绒毛组织进行MLPA检测，PCR产物用3130基因分析仪进行信号收集，应用Coffalyzer对电泳结果进行片段分析；同时对所有标本进行细胞核型分析验证。结果105例标本中有101例检测成功（97．1％），提示有43例为染色体核型异常，其中24例45，X，4例47，＋21，2例47，＋18，9例47，XXY，4例47，＋13，总的异常检出率为42．6％；经细胞培养核型分析，有73例培养成功（69．5％），培养成功率与MLPA检测成功率差异显著（P〈0．05）；核型结果中有71例与MLPA的结果相符，MLPA检测敏感度为94．2％，特异性为74．0％。结论MLPA在对流产绒毛染色体非整倍体检测的成功率比细胞培养的成功率要高，且对染色体异常检测的敏感度为94．2％，特异性为74．0％，相较于传统的细胞培养，可有效、快速的检测用于流产病因的检查工作。     

MLPA技术联合染色体核型分析在胎儿非整倍体异常检测中的研究与应用

目的探讨多重连接依赖探针扩增技术(multiplex ligation—dependent probe amplification,MLPA)联合染色体核型分析在染色体非整倍体异常诊断中的应用价值。方法收集290例符合产前诊断指征孕妇的羊水标本,同时采用MLPA技术和核型分析技术对这些标本进行染色体非整倍体产前诊断。结果两种方法联合检测共发现:21-三体3例,嵌合体3例,染色体结构异常13例。290例MLPA方法检测的结果均在核型分析之前得出,其中289例结果与核型分析结果完全一致,1例45,X嵌合体未能检测出,符合率为99.6%。结论 MLPA快速诊断技术与核型分析联合应用,可以实现优势互补,在产前诊断染色体病方面具有良好的应用价值。     

新疆地区荧光原位杂交产前诊断非整倍体的应用价值

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术产前诊断常见染色体非整倍体的应用价值。方法采用21、18、13、和Y染色体特异性DNA探针对96例孕18～23周孕妇的未培养羊水细胞进行FISH检测,同时行羊水细胞染色体核型分析。结果 FISH检测98例成功96例（97.9%）,其中染色体数目正常93例（48例为46,XX;45例为46,XY）染色体数目异常3例（2例47,XX,＋21;1例47,XX＋18）。FISH诊断结果与核型分析结果一致,染色体数目异常的3例与传统核型分析结果完全一致。结论 FISH技术用于产前诊断常见染色体非整倍体,具有简便、快速、特异性强敏感性高、所用样本量少等优点。     

MLPA技术联合染色体核型分析在羊水染色体非整倍体产前诊断中的应用

目的探讨多重连接探针扩增技术联合染色体核型分析在羊水染色体非整倍体产前诊断中的应用。方法选取我院2016年1月至2017年12月收治的9370例符合产前诊断指征的孕妇,行羊膜腔穿刺术获取胎儿羊水标本,同时进行MLPA技术检测和染色体核型分析,并采集产前诊断指征等相关临床资料。结果 MLPA技术对羊水产前诊断样本检测成功率为100%,21、13、18、性染色体非整倍体与染色体核型分析两者检测符合率为99.8%;染色体非整倍体异常检出率由高到低的孕妇产前诊断指征分别为:高龄妊娠(占55.7%)、NIPT高风险(30.17%)、唐氏筛查临界/高风险(26.72%)、B超异常中以NT增厚和胎儿鼻骨未显示所占比例较高,分别为6.03%,5.60%。结论 MLPA技术具有高通量、快速、低成本等优势,但也有不能检测低比例的嵌合、三倍体和染色体倒位、易位,探针不能覆盖整个基因组的局限性,联合传统的染色体核型分析应用于羊水染色体非整倍体产前诊断,对提高胎儿染色体非整倍体的检出,减少出生缺陷具有重要意义。     

多重链接探针扩增技术在染色体非整倍体畸变诊断中的应用

目的 探讨多重连接探针扩增(multiplexligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在13、18、21、X、Y染色体非整倍体畸变诊断中的应用价值.方法 收集本院经染色体核型分析确诊包括有上述5种染色体数目异常及正常的样本共44份,其中外周血30份、胎儿脐带血10份、羊水4份,提取标本DNA,采用MLPA技术对样本染色体数目进行分析,并与染色体核型分析结果进行比对.结果 42例样本检测结果与染色体核型分析结果一致,1例染色体核型分析未能作出判断的标记染色体片段被识别为Y染色体片段,1例21-三体嵌合体未能做出明确判断,临床检出率97.7%(43/44).结论 MLPA技术通过单管反应同时检测40多个不同靶基因序列的拷贝数,具有高通量、特异、便捷及成本较低等特点,可应用于常见染色体非整倍体畸变的临床诊断和产前诊断.     

多重链接探针扩增技术在染色体非整倍体畸变诊断中的应用

目的 探讨多重连接探针扩增(multiplexligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在13、18、21、X、Y染色体非整倍体畸变诊断中的应用价值.方法 收集本院经染色体核型分析确诊包括有上述5种染色体数目异常及正常的样本共44份,其中外周血30份、胎儿脐带血10份、羊水4份,提取标本DNA,采用MLPA技术对样本染色体数目进行分析,并与染色体核型分析结果进行比对.结果 42例样本检测结果与染色体核型分析结果一致,1例染色体核型分析未能作出判断的标记染色体片段被识别为Y染色体片段,1例21-三体嵌合体未能做出明确判断,临床检出率97.7%(43/44).结论 MLPA技术通过单管反应同时检测40多个不同靶基因序列的拷贝数,具有高通量、特异、便捷及成本较低等特点,可应用于常见染色体非整倍体畸变的临床诊断和产前诊断.     

MLPA联合染色体核型分析在产前诊断中的应用探讨

目的探讨MLPA技术联合羊水培养核型分析在产前诊断中的应用价值。方法采集妊娠18周-24周、有产前诊断指征孕妇的羊水标本695例,同时进行MLPA与染色体核型分析2种检测方法。结果在常见染色体数目异常方面,MLPA检测结果与染色体核型分析结果达到高度一致性,符合率达100%;优缺点:前者操作简便、出结果快速,但不能检测出染色体结构异常;后者不仅能检测染色体非整倍体异常也可检测染色体结构异常,但耗时长、技术要求高。结论同时开展MLPA检测和羊水培养核型分析,可实现优势互补,在产前诊断中具有良好的应用前景。     

应用QF-PCR技术对3075例常见染色体非整倍体快速产前诊断结果分析

目的对3075例产前诊断标本进行常见染色体非整倍体快速产前诊断的结果进行回顾性分析,探讨分析荧光定量PCR（QF-PCR）在快速产前诊断常见染色体非整倍体中的临床应用价值。方法采用QF-PCR技术对样本进行21、18、13、X及Y染色体非整倍体诊断,并与核型分析结果进行比较。结果 QF-PCR均正确检出38例21、18、13、X及Y染色体非整倍体,无假阳性结果;同时亦正确检出1例18-三体嵌合样本,但是漏诊了3例涉及21和性染色体异常的嵌合体。对于体外培养失败的样本,可将QF-PCR作为培养失败的样本一个补充。结论 QF-PCR技术能够在48～72h内快速、准确地诊断21、18、13、X及Y染色体非整倍体,此技术在快速产前诊断常见非整倍体方面具有重要临床实用价值,可弥补核型分析带来的不足,可以最大程度地缓解孕妇及其家人的焦虑。     

重复片段的荧光定量PCR技术在快速检测胎儿染色体非整倍体异常中的应用

目的探讨SD-QF-PCR技术在常见染色体非整倍体异常中的应用价值和临床应用前景。方法选择670例产前诊断的羊水标本,每例标本分成两份,一份样本进行常规染色体核型分析,另一份标本采用我们开发的SD-QF-PCR技术进行胎儿常见染色体非整倍体的分析,并比较两种方法的检测结果以验证SD-QF-PCR的可行性。结果在670例样本中,应用SDQF-PCR方法检测出了21三体综合征20例;18三体综合征2例;13三体综合征,45,X,47,XXX和48,XXYY各1例,SD-QF-PCR的检测结果与传统染色体核型分析方法的结果一致。结论 SD-QF-PCR对13、18、21、X和Y非整倍异常的检测具有操作简单、检测速度快、敏感性高和特异性强的特点,在临床上有广阔的应用前景。     

应用多重连接探针扩增筛查高风险胎儿染色体亚端粒区变异北大核心CSCD

目的探讨多重连接探针扩增（multiplex ligation—dependent probe amplification,MLPA）技术在产前大规模筛查染色体亚端粒区变异中的应用。方法选取1050例高风险胎儿,抽取羊水或脐带血,进行核型分析和MLPA检测。染色体亚端粒区变异结果用染色体微阵列验证。结果核型分析发现染色体非整倍体23例,末端异常8例。MLPA检出了所有核型分析发现的染色体非整倍体和末端异常,并对4例染色体末端异常提供了更清晰的描述。此外,MLPA发现5例核型分析为正常的样本存在染色体亚端粒区变异,经微阵列验证2例为假阳性结果,假阳性率为0．19％。MLPA实际检出染色体亚端粒区变异11例,检出率为1．05％。结论将MLPA技术应用于大规模筛查高风险胎儿的染色体异常,可以缩短检测周期,发现亚微观染色体变异,为遗传咨询和产前诊断提供依据。     

MLPA技术在检测胎儿性染色体非整倍体异常中的应用

目的探讨多重探针连接依赖式扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在胎儿性染色体非整倍体异常的相关检测中的应用。方法 4例性染色体异常的样本进行MLPA检测及染色体核型分析,MLPA所得数据通过Coffalyser v9.4软件(Holland-MRC公司)进行分析,依据样本DNA拷贝数的变化,判断有无异常。并且与染色体核型分析结果进行比较和分析。结果 4例性染色体异常胎儿经MLPA分析,结果显示对应的染色体区域呈现探针信号异常,并且与染色体核型分析结果一致。结论 MLPA技术在检测性染色体非整倍体异常中具有重要价值,可以为染色体核型分析结果提供补充。     

MLPA技术在检测胎儿性染色体非整倍体异常中的应用

目的探讨多重探针连接依赖式扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在胎儿性染色体非整倍体异常的相关检测中的应用。方法 4例性染色体异常的样本进行MLPA检测及染色体核型分析,MLPA所得数据通过Coffalyser v9.4软件(Holland-MRC公司)进行分析,依据样本DNA拷贝数的变化,判断有无异常。并且与染色体核型分析结果进行比较和分析。结果 4例性染色体异常胎儿经MLPA分析,结果显示对应的染色体区域呈现探针信号异常,并且与染色体核型分析结果一致。结论 MLPA技术在检测性染色体非整倍体异常中具有重要价值,可以为染色体核型分析结果提供补充。     

荧光原位杂交技术在染色体异常中的应用研究

目的应用荧光原位杂交（FISH）技术及细胞学对照,研究FISH产前诊断染色体异常的临床应用。方法应用5种（21、13、18、X和Y）FISH探针,平行细胞染色体分析进行565名孕妇产前诊断检测。结果565例产前诊断病历,共检出非整倍体异常核型19例,FISH检测与细胞染色体分析结果一致。结论荧光原位杂交（13,18,21,X和Y）探针,能有效检测间期羊水细胞的绝大多数非整倍体异常,且24～48h出结果。能缓解妊娠妇女的焦虑情绪。     

定量荧光PCR快速检测2322例胎儿常见染色体非整倍体结果分析

目的回顾性分析应用定量荧光PCR(quantitive fluorescent PCR,QF-PCR)快速检测2322例产前诊断标本常见染色体非整倍体结果,评价QF-PCR在胎儿常见染色体非整倍体产前诊断中的应用价值。方法应用QF-PCR对2015年1月至2016年12月共2322例产前诊断标本针对13,18,21,X及Y染色体非整倍体进行快速诊断,同时所有标本进行染色体核型分析并进行结果比较。结果 QF-PCR检出胎儿染色体非整倍体99例,其中13三体3例,18三体19例,21三体62例,X单体6例,XXX 5例,XXY 2例,XXYY合并18三体1例,三倍体(69,XXX)1例。上述染色体数目异常结果与核型分析完全一致。另外,QF-PCR结果显示1例为46,XX男性综合征,提示1例为21号染色体部分三体和3例为X染色体嵌合体。而核型分析为染色体结构异常的QF-PCR均未检出。结论 QF-PCR能快速、准确地诊断13、18、21、X及Y染色体非整倍体数目异常,且对嵌合体有一定的提示作用,可弥补核型分析结果时间过长带来的不足,最大程度缓解孕妇及其家属的焦虑。     

QF-PCR技术在胎儿超声异常病例快速产前诊断中的应用研究

目的探讨分析荧光定量PCR(Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction,QF-PCR)技术在快速产前诊断常见染色体非整倍体中的临床应用价值。方法用QF-PCR技术和核型分析两种方法对180例产前诊断样本进行检测,比较结果。结果核型分析:共有175例产前诊断样本成功进行细胞培养,核型分析报告在2-3周发出;其中正常133例,异常42例。QF-PCR结果:所有样本均成功在48h内进行QF-PCR检测;共检出染色体数目正常145例,异常35例,其中核型分析检测到的10例21-三体、13例18-三体、4例13-三体、5例45,X、1例三倍体用QF-PCR方法全部检出,1例46,XY,der(14;21)(q10;q10)和1例46,XX,der(14;21)(q10;q10),QF-PCR检测结果为21-三体。QF-PCR技术对五种常见染色体非整倍体的检出率为100%,无假阳性。结论 QF-PCR技术能够在48h内快速、准确地诊断21、18、13、X及Y染色体非整倍体,此技术在快速产前诊断常见非整倍体方面具有重要临床实用价值。     

广西地区胎儿鼻骨发育与染色体非整倍体的关系研究

目的比较胎儿鼻骨发育正常声像诊断与胎儿鼻骨发育不良声像诊断胎儿染色体非整倍体的发生率,为临床咨询提供数据。方法回顾性分析2008年11月至2013年5月因高龄妊娠或（和）产前筛查高风险或（和）胎儿鼻骨发育不良到我院行介入性产前诊断的孕中晚期胎儿,共2603例,产前诊断前超声测量胎儿鼻骨,对鼻骨声像正常的病例与鼻骨声像异常的病例的产前诊断染色体核型进行分析,比较两者染色体非整倍体的发生率。结果产前超声检查成功测量胎儿鼻骨共2603例,其中胎儿鼻骨发育正常2421例,介入性产前诊断（羊水或脐血）发现染色体核型多态173例,核型异常36例,异常率1.49%,包括21-三体11例,18-三体4例,45,X 2例,47,XXY 1例,47,XXX 1例,其他染色体异常17例;胎儿鼻骨发育不良共182例,介入性产前诊断（羊水或脐血）发现染色体核型多态6例,核型异常的58例,异常率31.87%,是鼻骨发育正常者的21.43倍,包括21-三体46例,18-三体4例,13-三体4例,47,XXX 2例,其他染色体异常2例。结论胎儿鼻骨发育不良,其染色体非整倍体发生几率显著升高,孕中期起超声观察和测量鼻骨长度可提高胎儿染色体非整倍体异常和染色体片段异常的阳性率。     

QF-PCR技术在快速产前诊断常见非整倍体染色体异常中的应用

目的:利用定量荧光PCR(QF-PCR)产前诊断常见非整倍体染色体异常。方法:对95例羊水样本采用QF-PCR技术检测短串联重复序列(STR)的多态性信息含量(PIC),并将所得实验结果与染色体核型分析结果进行比较。结果:QF-PCR检测发现95例羊水标本中正常63例,21三体14例(1例嵌合型,1例易位型),18三体4例,(45,X)3例,(47,XXX)8例;检测结果与染色体核型分析结果一致。QF-PCR检测结果的符合率为96.8%。结论:QF-PCR可快速检测非整倍体染色体异常,并且结果可靠。     

应用多重连接依赖探针扩增技术分析自然流产绒毛染色体异常的研究

目的 探讨多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation dependent probe amptification,MLPA)技术在孕早期自然流产绒毛组织染色体分析中的应用.方法 195例自然流产患者留取绒毛组织,包括12例已污染标本,其余183例标本进行绒毛细胞培养及染色体G显带核型分析,同时应用P036和P070试剂盒对195例标本作MLPA分析.结果 183例标本成功培养177例,其中160例(90.4％)采用MLPA技术进行染色体分析的非整倍体结果与G显带染色体核型分析方法的结果一致,包括正常核型65例、所有染色体三体78例、所有染色体单体14例(除1例嵌合体)和不平衡易位3例;G显带核型分析结果异常的15例标本中包括10例多倍体及2例平衡易位,2例9号倒位及1例嵌合体异常MLPA结果显示正常;此外MLPA检测出1例Dup6p;dup6q和1例Dup8p;del 11q,G显带分析结果显示为46,xx和46,xy.结论 MLPA技术对非整倍体异常的检出与经典的染色体核型分析是一致的,同时它能快速的检测出染色体非平衡结构异常以及经典染色体核型分析不能检测的微缺失和微重复,是一种简单、快速且有效的方法,具有临床实际应用价值.