早期嗅觉剥夺对SD鼠发育的影响

目的:为了揭示嗅觉发生及其对发育的影响,进行了早期嗅觉剥夺对SD鼠发育影响的研究.方法: 本实验以出生3.5d SD乳鼠应用三氯甲烷滴注法定量定点破坏嗅黏膜,采用神经行为学方法评估其与正常对照组SD鼠的行为学差异,并进一步结合形态学研究揭示嗅脑发育及嗅觉发生的变化.结果: 3.5d乳鼠的早期嗅觉剥夺使乳鼠发育明显迟缓,不能趋利避害;嗅小球消失.结论: 嗅觉及嗅脑对个体整体发育具有重要的调节作用,早期嗅觉剥夺能够使嗅脑结构发生变化,改变嗅脑脑区神经元的突触连接方式.     

蜜炼川贝枇杷膏灌胃给药SD大鼠14天毒性探索研究

目的 研究京都念慈庵蜜炼川贝枇杷膏可能的毒性反应,为临床或家庭用药安全性提供参考。方法 采用大鼠14 d重复给药毒性试验,SD大鼠,按体重随机分成对照组、枇杷膏低、中、高剂量组,每组10只,雌雄各半,共40只,给药剂量分别为0、2.5、5、10 ml/（kg·d）,给药体积为10 ml/（kg·d）,相当于人临床用量的2.5、5、10倍。每天经口灌胃给药1次,连续14 d。第15天测定血液学、血液生化学各指标,同时测定心、肝、脾、肾脏器重量并计算脏器系数。结果 雌雄大鼠各剂量组体重正常增长,与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。雄性大鼠各给药组血液学检测指标与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;雌性大鼠中剂量组MCV偏低,与对照组比较,统计学意义显著（P＜0.01）;雄性大鼠中、高剂量组BUN降低,与对照组比较,统计学意义显著（P＜0.01）;雌性大鼠各给药组血液生化学检测指标与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。雌性、雄性大鼠的脏体比数据中,中剂量组肝系数升高,与对照组比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 蜜炼川贝枇杷膏SD大鼠重复给药14d未提示有明显毒性反应。     

SD大鼠间充质干细胞的分离培养及生物学特性初探

目的：探讨体外分离培养、纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法,明确增殖及生长特征。方法：从骨髓中提取间充质干细胞,加入淋巴分离液后用密度梯度离心培养法和静止贴壁培养法,分离纯化大鼠骨髓MSCs,对其进行传代扩增和形态学观察,细胞计数,绘制生长曲线。结果：(1)通过离体培养,可使体内环境下低丰度的骨髓间充质干细胞实现数目扩增;(2)体外单层培养条件下贴壁生长的骨髓间充质干细胞大多数具有成纤维细胞生长特性。结论：对比两种分离方法可知淋巴分离法更有利于骨髓间充质干细胞的纯化,体外培养成功为今后进一步利用体内间充质干细胞研究细胞衰老．并建立衰老模型奠定了基础。     

吸烟影响胚胎发育的机理及干预措施

众所周知，吸烟有害，但全球仍有1．2亿吸烟者，每年有5亿人死于吸烟导致的疾病。国外报道3／4高中女生在调查前30天内有吸烟史，成人91％以上在20岁前开始吸烟，29％孕龄妇女吸烟。我国男性吸烟率为66．9％，女性吸烟率为4．4％。由此引起的吸烟对妊娠的影响也引起广泛关注。本文就吸烟对胚胎发育的影响及干预措施进行综述如下。     

桑寄生的遗传毒理学研究

目的探讨桑寄生水煎液对成年小鼠及胚胎鼠的遗传毒性。方法采用小鼠急毒试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠胚胎肝转移微核试验、小鼠精子畸形试验。结果桑寄生水煎液急毒试验为无毒级,最大用药剂量为40g/kg。桑寄生水煎液灌胃孕鼠和雄鼠40g/kg剂组诱发的胚胎肝微核率、骨髓微核率、精子畸形率均较阴性对照组显著升高（P〈0.05）。桑寄生灌胃剂量为20g/kg时,诱发的胚胎肝微核率较阴性对照组显著升高（P〈0.05）,骨髓微核率与精子畸形率与阴性对照组相比,无显著性差异（P〉0.05）。而10g/kg剂量组诱发的胚胎肝微核率、骨髓微核率、精子畸形率与阴性对照组相比,均无显著性差异（P〉0.05）。结论桑寄生水煎液40g/kg剂量组对成年小鼠和胎鼠均具有潜在的遗传毒性,20g/kg剂量组仅对胎鼠有潜在的遗传毒性,10g/kg剂量组对成年小鼠和胎鼠均无遗传毒性。     

桉叶油对大鼠胚胎发育的影响

目的 探讨桉叶油对SD大鼠胚胎发育的影响。 方法 取SD孕鼠25只,随机分成3个实验组（桉叶油高、中、低剂量）、溶剂对照组（花生油）和阳性对照组（环磷酰胺）,每组5只。实验组和溶剂对照组分别在大鼠妊娠第10天用300、200、100mg/kg 的桉叶油和花生油2ml/只灌胃,每天1次,连续5d。阳性对照组于孕第13天腹腔注射环磷酰胺1次（12.5mg/kg）。各组孕鼠于孕19d处死取胚胎,记录孕鼠的体重、子宫重、卵巢重和胎盘重;统计胚胎植入的总数、吸收胎数、活胎数和死胎数;观察胚胎外形,并测量胎鼠体重、身长和尾长。 结果 桉叶油灌胃SD孕鼠后,孕鼠的体重、子宫重、卵巢重及胎盘重与溶剂对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。胚胎植入总数、吸收胎数、活胎数及死胎数与溶剂对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。桉叶油各组活胎鼠平均体重、身长及尾长均较溶剂组高,但只有高剂量桉叶油组胎鼠平均体重（2.318±0.606）与溶剂组（1.462±0.397）比较有明显差异（P<0.05）,其余指标与溶剂组比较无明显差异（P＞0.05）。阳性对照组胎鼠平均体重、尾长明显低于溶剂组,且有差异（P<0.05）。阳性对照组胎鼠平均身长低于溶剂组,但统计学分析无差异（P＞0.05）。 结论 本实验条件下,桉叶油对SD孕鼠胚胎无毒性,环磷酰胺对大鼠胚胎有毒性。     

孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响

目的探讨孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响。方法应用雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积大鼠模型,光镜和电镜观察母鼠和胎鼠心脏的病理改变。结果（1）胆淤组和对照组比较,孕鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、总胆汁酸（TBA）的差异有显著性（P〈0．01）。（2）胆淤组孕鼠肝脏光镜下见部分肝细胞有颗粒样变性和空泡变性,电镜下见肝组织中毛细胆管扩张,毛细胆管及肝细胞内见高电子致密物沉积。（3）胆淤组孕鼠胎盘光镜下见部分滋养细胞颗粒样变性和空泡变性。（4）胆淤组孕鼠心脏光镜下见心肌组织中局灶性心肌细胞颗粒样变性。（5）胆淤组胎鼠心脏光镜下见心肌组织中心肌细胞广泛空泡变性;电镜下见胎鼠心肌细胞内高电子致密物沉积,部分肌丝断裂,肌节模糊,细胞内线粒体水肿,脱髓鞘样改变。结论孕鼠肝内胆汁淤积症时高胆汁酸血症对母鼠和胎鼠心肌细胞均有明显的毒性作用,尤其以胎鼠心肌细胞病变更为严重。     

桑寄生水煎液对小鼠胚胎肢芽细胞生长发育的影响

目的探讨桑寄生水提液对小鼠胚胎肢芽细胞生长发育的影响。方法取小鼠E13后肢芽制成细胞悬液,接种到细胞培养板中,分别加入0.2,0.1,0.05 g/ml桑寄生水提液和蒸馏水,设置为高,中,低,和空白对照组。培养72h后采用MTT法、甲苯胺蓝染色法、流式细胞术分别检测肢芽细胞的增殖、分化和凋亡情况。结果 (1)高剂量桑寄生水煎液抑制肢芽细胞的增殖,与空白对照组比较,差异具有显著性(P0.05);而低和中剂量促进肢芽细胞的增殖,其中低剂量与空白对照组比较差异具有显著性(P0.05)。(2)各剂量组桑寄生水煎液均诱导了肢芽细胞的分化,中和低剂量组与空白对照组比较均有显著性差异(P0.05)。(3)各剂量组均诱导了肢芽细胞坏死,高剂量组与空白对照组比较具有显著性差异(P0.05);高和低剂量诱导了肢芽细胞的凋亡,其中高剂量与空白对照组比较差异具有显著性(P0.05)。结论桑寄生水煎液高剂量抑制肢芽细胞的增殖,诱导细胞凋亡和坏死;低和中剂量促进肢芽细胞的增殖和分化。     

采用全胚胎培养法研究酒精对胚胎发育的毒性影响

目的化学物质的毒性作用常因其在体内代谢而变化。为探讨酒精在代谢条件下的发育毒性，本研究应用植入后全胚胎培养技术研究了酒精对胚胎发育的影响。方法：孕９５天大鼠胚胎于体外条件下移植分离培养在含４０、１００、２０、４０ｍｇ／ｄｌ内含Ｓ９的即可离心大鼠血清培养基中连续培养４８小时，观察酒精对胚胎生长发育和器官形态分化的影响。结果：４０ｍｇ／ｄｌ＋Ｓ９组与对照组各指标无显著性差异，１００ｍｇ／ｄｌ＋Ｓ９组则导致胚胎的体长、ＤＮＡ、蛋白质含量及部分器官形态评分呈剂量相关的下降，但前脑、中脑评分并无影响。随染毒剂量增加，胚胎的绝大多数指标显著降低，胚胎致畸率和死亡率相应增高。结论：酒精在Ｓ９作用下转化为乙醛后，毒性作用的靶器官发生改变，表现为肢芽、心脏等器官发育异常为主，代谢产物乙醛也有一定的致畸作用。     

SD乳鼠窦房结细胞原代分散培养的光电镜研究

目的 探讨体外窦房结细胞原代纯化培养方法，观察培养的窦房结细胞生长状况及光电镜形态学特征。方法 （１）用差速贴壁和Ｂｒｄｕ处理作细胞培养；（２）观察和记录各类型培养细胞的生长状况；（３）ＨＥ染色和Ｈｅｉｄｅｎｈａｉｎ苏木素染色；（４）透射电镜观察。 结果 在培养的窦房结细胞中，至少有３种自发性收缩细胞及少量的星状和不规则细胞。收缩性细胞中，最多的是多边形细胞，其次是梭形，最少的是三角形细胞，且多边     

新生SD大鼠血常规各项与发育时间的相关性分析及其与血清铁浓度变化的机制

 目的：探讨经心脏穿刺和剪尾2种采血方式对新生SD大鼠血常规的影响;建立其血常规正常参考值范围;研究发育过程中血常规各项、血细胞形态和血清铁（SI）的消长变化及其相互关系,揭示SI变化的可能机理。方法：新生鼠出生后1、2、3、7和14 d,经全自动血液分析仪检测心脏血和鼠尾血中红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数和白细胞(WBC)计数的改变;通过瑞氏-姬姆萨染色观察2种血液中血细胞形态的差别,及其在不同发育阶段的变化情况;选择心脏穿刺采血建立血常规正常值参考范围;经血液生化分析仪检测各时点心脏血SI含量变化;统计学分析发育时间、血常规各项及SI含量三者间的动态关系。结果：鼠尾血中RBC计数、HGB含量和WBC计数均高于心脏血,且RBC碎片较多;RBC形态随发育逐渐成熟稳定,其碎片亦明显减少;发育时间与心脏血中RBC和PLT计数呈正相关(P<0.01),与HGB含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、WBC计数和SI含量呈负相关(P<0.01)。SI含量与RBC计数呈负相关(P<0.05),与MCV(P<0.01)和MCH(P<0.05)则呈显著正相关。结论：经心脏采血能建立相对完善的正常新生SD大鼠血常规参考值范围;新生鼠血常规各项与发育时间存在显著相关性;发育早期RBC的不稳定性可能是导致SI含量在发育早期较高的原因。     

SD大鼠钳夹脊髓损伤模型的建立

目的探讨构建一种SD大鼠脊髓钳夹损伤模型,用于脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）的研究。方法将36只成年雄性SD大鼠随机分成A、B、C三组,每组12只。脊髓损伤组（A组）：用动脉瘤夹钳夹大鼠第10胸椎对应脊髓。假手术组（B组）：只打开椎板,暴露脊髓,不造成SCI。正常对照组（C组）：正常大鼠,不做任何处理。通过行为学观察（BBB评分）、HE染色和神经电生理检测进行判断。结果HE染色结果：A组可见脊髓正常组织被破坏,损伤区可见血管破裂出血,有大片坏死灶,周围神经细胞肿胀变性,内有炎症细胞浸润。B、C两组基本一致,组织结构正常。BBB评分：B组术后1周功能恢复接近正常,评分20分。A组术后第2周开始恢复,到第3周基本停止,最终BBB评分低于6分,两组比较有明显差异（P〈0．05）。神经电生理（SEP）检测：A组可以明显看到SEP的波峰趋于水平,且潜伏期无限延长,与B组相差显著（P〈0．05）。A组内动物BBB评分、SEP无显著性差异（P〉0．05）。结论通过动脉瘤夹钳夹SD大鼠T10脊髓,能够建立良好的脊髓损伤动物模型。     

ROCK介导缓激肽开放SD大鼠血肿瘤屏障

目的利用ROCK的特异性抑制剂Y-27632,研究ROCK是否介导缓激肽开放血肿瘤屏障。方法应用ROCK的特异性抑制剂Y-27632预处理大鼠原代脑微血管内皮细胞后,用缓激肽诱导血肿瘤屏障开放,测量跨内皮阻抗值(TEER),辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障的通透性的改变;应用Western-blot法检测紧密连接相关蛋白ZO-1的表达;应用免疫荧光方法观察原代大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白结构和分布的改变。结果 Y-27632显著抑制缓激肽诱导TEER值的降低,HRP的升高;Y-27632显著抑制ZO-1的表达;Y-27632抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,应力纤维形成明显减少。结论 ROCK介导缓激肽开放血肿瘤屏障。     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠醛糖还原酶的影响

目的:观察白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠醛糖还原酶的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组和依帕司他组(n=8)。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射STZ(55 mg.kg-1),成功造模后白藜芦醇组分别给予5、154、5 mg.kg-1白藜芦醇,依帕司他组给予10 mg.kg-1依帕司他,连续灌胃6 w后,检测大鼠血糖、体重,HE染色检测肾脏病理改变,ELISA法检测醛糖还原酶(AR)活性。结果:与正常对照组相比,糖尿病组血糖与AR活性明显升高(P<0.05),与模型组比较,白藜芦醇各组血糖与AR活性明显降低(P<0.05)。结论:白藜芦醇可降低糖尿病大鼠血糖,其降糖效应可能与抑制AR活性有关。     

恶性肿瘤细胞对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的： 探讨生命早期形式与恶性肿瘤细胞在相同微环境下的早期胚胎发育情况和肿瘤细胞的生物学行为。方法： 建立小鼠2-细胞胚胎-恶性肿瘤细胞(HepG2,SKOV3,HNE1,Hepa1-6,B16,CHO)体外共培养模型，观察小鼠胚胎的发育状况和恶性肿瘤细胞的生物学行为。结果： 处于不同种属源性和胚层来源恶性肿瘤微环境的小鼠胚胎4-细胞形成率，桑葚胚形成率和囊胚形成率及其形成的囊胚细胞数目与对照组比较无显著差异（P>0.05）。小鼠的2-细胞胚胎能在人源性和鼠源性不同胚层来源的恶性肿瘤细胞体外培养环境中按一定的时间顺序发生卵裂、卵裂球紧密化、分化、囊胚腔形成，而肿瘤细胞的形态、增殖及核分裂相与对照组比较没有明显差异。结论： 在共培养环境中，恶性肿瘤细胞对小鼠2-细胞胚胎的发育时程没有阻滞和破坏作用，且与恶性肿瘤细胞的种属和胚层来源无关。小鼠早期胚胎能在不同种属和胚层的恶性肿瘤环境中按正常体外培养发育时程发育，这可能与早期胚胎发育的自我组织、高适应性和肿瘤细胞分泌的某些因子有关。     

SD大鼠视网膜中央动脉的应用解剖学研究

目的　为建立稳定可靠的视神经损伤动物模型寻求解剖学依据。 方法　用红色乳胶灌注技术显示正常SD大鼠视网膜中央动脉的来源、分支、分布及其与视神经的关系,并采用体视显微镜摄片测量;明胶墨汁灌注技术显示距眼球后极2.0 mm或6.0 mm处横断视神经后视网膜的血供。 结果　视网膜中央动脉及其分支在视神经鞘内始终与视神经干伴行,视网膜中央动脉起始部到眼球后极的距离为(5.784±0.054)mm;距离眼球后极6.0 mm处鞘内视神经横断组大鼠视网膜单位面积血管数目高于其他部位横断组。 结论　在制备视神经损伤SD大鼠模型时,损伤视神经应在鞘内进行,损伤部位距眼球后极　6.0 mm最佳。     

人胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用

目的：比较人和小鼠胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用,为胚胎干细胞定向诱导各系统细胞应用于临床,消除异种蛋白污染打下基础。方法：分别采用人胚胎成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层细胞,支持人受精卵的培养,观察其增殖和分化情况。结果：人和小鼠胚胎成纤维细胞分别加入白血病抑制因子（hLIF）均能很好支持人胚胎干细胞生长增殖,并保持未分化状态。结论：完全可以使用人胚胎成纤维细胞支持人胚胎干细胞增殖,消除异种蛋白污染的可能性,为胚胎干细胞定向诱导分化发育应用于临床打下坚实基础。     

自发性高血压模型大鼠(SHR)与SD大鼠大脑中动脉的应力松弛特性

研究5月龄SD雄性大鼠和5月龄SHR雄性大鼠大脑中动脉的应力松弛特性.为了解高血压的发病机制提供应力松弛特性参数.对5月龄正常SD雄性大鼠大脑中动脉和5月龄自发性高血压模型大鼠(SHR)大脑中动脉各10个试样在日本岛津电子万能试验机上对SD大鼠和SHR大鼠大脑中动脉进行应力松弛实验,在(36.5±0.5)％的温度场下以0.05％/s的应变增加速度对试样施加应变,设定时间为7200s.采集100个数据,采用归一化分析的方法计算两组试样的归一化应力松弛函数方程.两组试样应力松弛曲线是以指数关系变化的,SD大鼠组大脑中动脉试样7200 s应力下降大于SHR组大脑中动脉试样,差异显著(P＜0.05).正常SD大鼠中动脉和SHR大鼠大脑中动脉具有不同的应力松弛特性,SHR大鼠中动脉应力松弛特性发生改变.     

神经干细胞移植对大鼠脑损伤锚蛋白表达的影响

目的观察神经干细胞(NSCs)移植治疗大鼠脑损伤前后大脑皮质神经元锚蛋白(ankyrin)的表达变化,探讨NSCs移植治疗对脑外伤功能恢复的作用。方法体外培养NSCs,自由落体撞击大鼠左脑大脑皮质运动感觉区以制作脑外伤模型,观察脑外伤后1w,2w和4w及脑外伤神经干细胞移植后1w,2w和4w时细胞骨架蛋白ankyrin的表达变化。采用免疫组织化学、免疫印迹来检测Ankyrin的表达变化。结果创伤组SD大鼠大脑皮层ankyrin的表达水平随脑外伤后时间增加(1w-4w)逐渐减少(P0.05),移植组ankyrin的表达水平随时间增加(1w-4w)逐渐增加(P0.05)。结论 NSCs移植对脑外伤的修复作用可能与ankyrin的表达有关。