基于TLR4/JNK信号通路探讨木犀草素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用

摘要：目的:基于Toll样受体4（TLR4）/c-Jun N末端激酶（JNK）信号通路探讨木犀草素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用。方法:100只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、吡咯列酮组(10.0 mg·kg-1)、木犀草素低、高剂量组(20.0,40.0 mg·kg-1),每组20只。除正常对照组外,其余各组建立2型糖尿病大鼠模型,并于建模成功后第1天开始灌胃给予相应药物,持续4周,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水。给药结束后,测定空腹血糖（FPG）、血清胰岛素水平（INS）、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感性检测指数（QUICKI）,同时测定胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白水平显著升高（P<0.05）,HOMA-β、QUICKI水平显著降低（P<0.05）;与模型组比较,木犀草素低、高剂量组和吡咯列酮组FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白水平显著降低（P<0.05）,HOMA-β、QUICKI水平显著升高（P<0.05）,且随着木犀草素给药剂量的增加,FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白水平逐渐降低（P<0.05）,HOMA-β、QUICKI水平逐渐升高（P<0.05）;与吡咯列酮组比较,木犀草素低、高剂量组FPG、INS、HOMA-IR水平、胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白水平显著升高（P<0.05）,HOMA-β、QUICKI水平显著降低（P<0.05）。模型组胰岛边界模糊,体积缩小,胰岛细胞减少,胰岛细胞核固缩,可见明显炎症细胞浸润;木犀草素低、高剂量组和吡咯列酮组胰腺组织较模型组有不同程度地改善。结论:木犀草素能明显改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗作用,减轻2型糖尿病大鼠胰腺炎症反应;其机制可能与木犀草素能抑制2型糖尿病大鼠胰腺TLR4、JNK mRNA和蛋白表达水平有关。     

盘龙七片调控 Toll样受体 4-骨髓样分化因子 88-核因子 -κB通路保护佐剂性关节炎大鼠滑膜组织

目的 研究盘龙七片通过调控Toll样受体4(TLR4)-骨髓样分化因子88(MyD88)-核因子-κB(NF-κB)信号通路保护类风湿关节炎(RA)大鼠滑膜组织的作用机制.方法 将50只SD大鼠以随机数字表法分为正常组,模型组,低、中、高盘龙七片组,每组10只,除正常组外,其余组均采用风、寒、湿环境结合弗氏完全佐剂注射的方式制备RA模型,RA大鼠模型制备成功后,低、中、高盘龙七片组分别灌胃给予盘龙七片溶液150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg,对照组与模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃处理15 d后,切片观察滑膜组织病理形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组大鼠滑膜组织细胞中TLR4 mRNA、MyD88 mRNA以及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测滑膜组织中NF-κB p65蛋白表达情况.结果 与正常组相比,模型组滑膜组织可见明显变性坏死,滑膜处可见中度充血水肿,且有大量炎细胞并伴随轻度滑膜增生,与模型组相比,不同剂量盘龙七片处理后关节变性坏死情况明显改善,滑膜组织充血水肿情况减轻,炎细胞浸润情况极大的改善,且呈浓度依赖;模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1分别为(1.26±0.11)μg/L、(0.35±0.08)μg/L,显著高于正常组的(0.68±0.05)μg/L、(0.11±0.02)μg/L,滑膜组织中TLR4、MyD88、TRAF-6的mRNA相对表达水平分别为(2.56±0.21)、(3.83±0.26)、(2.78±0.23),显著高于正常组(1.00±0.02)、(1.01±0.02)、(1.00±0.01)(P<0.05),NF-κB p65蛋白磷酸化水平为(1.37±0.22),显著高于正常组(0.21±0.06)(P<0.05),与模型组相比,不同剂量盘龙七片组大鼠血清中TNF-α、IL-1水平显著降低(P<0.05),滑膜组织中TLR4、MyD88、TRAF-6的mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05),NF-κB p65蛋白磷酸化水平也显著降低(P<0.05).结论 盘龙七片通过抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号转导通路,降低滑膜组织处炎症反应,改善滑膜细胞增生,从而保护滑膜组织.     

羧甲基茯苓多糖对溃疡性结肠炎大鼠的研究

目的 研究羧甲基茯苓多糖通过调控Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路对溃疡性结肠炎大鼠的改善作用。方法 从40只SPF级大鼠中随机分出8只大鼠作为正常组,其余大鼠用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）联合乙醇造模法建立大鼠溃疡性结肠炎模型,造模成功后大鼠随机分为模型组、对照组和低、高剂量实验组。低、高剂量实验组分别给予0.5%羧甲基茯苓多糖混悬液2 mL和1.5%CMP混悬液2 mL,灌胃;对照组给予0.5 g·kg^-1柳氮磺吡啶灌胃;正常组和模型组每日灌胃给予等量的生理盐水,连续给药14 d。末次给药结束后,测定大鼠体质量、脾质量、结肠长度和质量,用自动化血液学分析仪分析血液参数,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-12（IL-12）水平;用蛋白质印迹法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白TLR4、MyD88和NF-κB p65的表达水平。结果 正常组、模型组、对照组和低、高剂量实验组的肠质量分别为（1....     

成纤维细胞生长因子21对胰岛素抵抗所致高血压的治疗作用

本文研究考察成纤维细胞生长因子21(FGF21)对果糖诱导的胰岛素抵抗高血压模型的治疗作用及其机制。10%果糖诱导SD大鼠4周建立胰岛素抵抗高血压模型,成模后随机分为4组:模型对照组及FGF210.25、0.1和0.05μmol·kg-1·d-1剂量组,5只相同周龄的正常SD大鼠作为正常对照组。每天注射1次,治疗4周,给药期间每周监测大鼠体重,采用尾套法检测收缩压变化;口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素稳态评价模型检测胰岛素抵抗情况;给药结束时留取血清样本分别测定血清胰岛素、血脂、血糖水平。结果显示,治疗4周后,不同剂量FGF21治疗组大鼠收缩压均下降至正常水平[(122.2±3.5)mmHg,P<0.01],而注射生理盐水的模型对照组大鼠的收缩压在治疗期间一直维持在较高水平[(142.5±4.5)mmHg]。24 h观察各组大鼠血压发现,FGF21治疗组大鼠24 h血压基本维持在(130±4.5)mmHg,各时间段血压均显著低于模型对照组[(130±4.5)vs(143±5.5)mmHg,P<0.01]。FGF21治疗组大鼠血脂改善明显,总胆固醇与甘油三酯含量均显著下降至正常水平。FGF21各治疗组大鼠血清NO含量均显著高于模型对照组[(7.32±0.11),(7.24±0.13),(6.94±0.08)vs(6.56±0.19)μmol·L-1,P<0.01],且其改善程度呈现明显的剂量依赖性,表明FGF21可明显升高果糖诱导高血压模型大鼠血清NO含量,改善内皮释放NO功能。OGTT及HOMA-IR结果显示,经FGF21治疗4周后胰岛素抵抗亦明显得到改善,且呈现剂量依赖性。因此本研究揭示了FGF21通过改善胰岛素抵抗,显著降低SD大鼠由于胰岛素抵抗所引起的高血压。这一发现为临床应用FGF21治疗原发性高血压奠定了理论基础。     

白芍多糖对小鼠急性肝损伤的保护与机制研究北大核心CSCD

目的 研究白芍多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 将小鼠随机分5组,低、高剂量实验组(283.5,1 134 mg·kg^(-1)·d^(-1)白芍多糖溶液),阳性对照组(2 mg·kg^(-1)·d^(-1)联苯双酯),空白组和模型组(等量蒸馏水)。灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均腹腔注射10 mg·kg^(-1)四氯化碳(CCl_(4))溶液,诱导急性肝损伤。试剂盒法检测血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)含量;Lowry法测量肝组织氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附试验法测定抗炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6);蛋白质印迹法检测肝组织Toll样受体4(TLR4)、NF-κBp65、髓样分化蛋白88(MyD88)和p-NF-κBp65蛋白的表达;苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝组织病理变化。结果 空白组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组血清GPT含量分别为(46.89±5.10),(194.07±21.46),(113.69±10.88),(144.51±21.36)和(126.96±7.85)U·L^(-1);GOT含量分别为(75.75±14.42),(231.63±24.30),(143.09±16.76),(187.04±18.82)和(163.89±17.96)U·L^(-1);各组肝组织匀浆SOD含量分别为(33.88±5.35),(15.15±4.20),(26.71±3.68),(20.03±1.92)和(23.10±3.35)U·mg^(-1);各组肝组织匀浆GSH含量分别为(12.72±2.09),(2.78±0.46),(8.68±2.15),(6.59±2.49)和(8.16±2.27)μmol·mg^(-1);各组肝组织匀浆MDA含量分别为(5.98±1.00),(14.56±2.57),(8.60±1.24),(11.36±1.07)和(9.04±1.75)nmol·mg^(-1)。与模型组比较,阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组血清的GOT、GPT活性明显降低,肝组织SOD、GSH明显升高,MDA明显降低,肝组织坏死程度明显改善。结论 白芍多糖通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路,对CCl_(4)所诱导的小鼠肝损伤具有保护作用。     

原花青素通过抑制 Toll样受体 4/核因子 -κB信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探究原花青素通过抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对大鼠脑缺血再灌注(ischemia-reper-fusion,I/R)损伤的保护作用.方法 选取60只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为对照组、模型组、原花青素低剂量组(80 mg/kg)和原花青素高剂量组(160 mg/kg),每组15只;除对照组外,其他各组大鼠使用改良线栓法制成I/R模型,原花青素低剂量组和原花青素高剂量组分别使用80 mg/kg和160 mg/kg的原花青素灌胃处理,连续处理1周.比较各组大鼠脑含水量;采用神经行为学评估比较各组大鼠神经功能缺损评分;使用试剂盒检测各组大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)水平;采用蛋白质印迹法检测TLR4/NF-κB信号通路和凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)表达水平;采用苏木素染色观察神经细胞凋亡率.结果 与对照组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、活性氧含量水平、TLR4蛋白、NF-κB蛋白、Bax蛋白和Caspase-3蛋白表达、神经细胞凋亡率升高,SOD含量水平、GPX含量水平、Bcl-2蛋白降低(P<0.05),其中TLR4蛋白和NF-κB蛋白分别为(1.80±0.20)和(1.85±0.21),显著低于对照组的(0.45±0.04)和(0.51±0.04);相比模型组,使用原花青素处理各组大鼠神经功能评分、脑含水量、活性氧含量水平、TLR4蛋白、NF-κB蛋白、Bax蛋白和Caspase-3蛋白表达、神经细胞凋亡率降低,且原花青素高剂量组低于原花青素低剂量组(P<0.05),其中原花青素高剂量组TLR4蛋白和NF-κB蛋白分别为(0.59±0.06)和(0.64±0.06),显著低于原花青素低剂量组的(1.00±0.10)和(0.98±0.09);与模型组比较,使用原花青素处理各组大鼠SOD含量水平、GPX含量水平、Bcl-2蛋白升高,且原花青素高剂量组高于原花青素低剂量组(P<0.05).结论 原花青素过抑制TLR4/NF-κB信号通路调控下游凋亡蛋白的表达抑制I/R后大鼠脑细胞的凋亡,缓解脑组织损伤.     

鸦胆子苦醇通过Toll样受体4介导对尖锐湿疣角质形成细胞免疫调节的研究北大核心CSCD

目的探究鸦胆子苦醇(BRU)对尖锐湿疣(CA)角质形成细胞免疫调节的机制。方法收集本院尖锐湿疣组织,并分离CA角质形成细胞。用0、5.0、10.0和20.0 nmol·L^(-1)的BRU处理CA角质形成细胞,分别标记为空白组和低、中、高剂量实验组。将本院分离的CA角质形成细胞分为对照组(正常培养的CA角质形成细胞)、高剂量实验组(用20.0 nmol·L^(-1)的BRU处理细胞)、BRU+pcDNA-NC组(转染pcDNA-NC+20.0 nmol·L^(-1)的BRU)、BRU+pcDNA-TLR4组(转染pcDNA-TLR4+20.0 nmol·L^(-1)的BRU)。用CCK-8法和EdU法检测细胞的增殖情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达量,用蛋白质印迹法检测各组细胞TLR4和细胞核相关抗原Ki67(Ki67)的表达水平,用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-8(IL-8)含量。结果高剂量实验组和空白组的TLR4 mRNA表达量分别为0.32±0.03和1.00±0.08,TLR4蛋白相对表达水平分别为0.36±0.04和1.07±0.11,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、高剂量实验组、BRU+pcDNA-NC组和BRU+pcDNA-TLR4组的EdU阳性细胞率分别为(42.36±3.92)%、(21.70±2.42)%、(20.89±1.85)%和(40.43±4.07)%,TLR4蛋白相对表达水平分别为1.02±0.09、0.34±0.03、0.38±0.04和0.79±0.09,Ki67蛋白相对表达水平分别为0.99±0.11、0.44±0.05、0.46±0.04和0.88±0.06,IFN-γ分别为(98.79±7.68)、(165.53±11.57)、(168.01±12.73)和(119.93±8.03)pg·mL^(-1),IL-8分别为(116.41±11.89)、(243.72±19.60)、(248.42±28.17)和(128.11±13.19)pg·mL^(-1)。对照组的上述指标与高剂量实验组比较,BRU+pcDNA-NC组的上述指标与BRU+pcDNA-TLR4组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论BRU可通过调控TLR4的表达,进而抑制CA角质形成细胞增殖,从而参与调控CA的进展。     

鱼藤酮诱导帕金森大鼠导致棕色脂肪产热功能的变化北大核心CSCD

目的探索鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)大鼠模型对下丘脑室旁核(PVN)中神经递质及棕色脂肪(BAT)功能的影响。方法将20只雄性SD大鼠随机分成对照组和实验组,每组10只。实验组在颈背部以1 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量注射1 mg·mL^(-1)鱼藤酮注射液,连续注射4周;对照组则在相对应部位注入等量的0.9%NaCl。用免疫荧光法、蛋白质印迹法分别检测PVN与BAT中酪氨酸羟化酶(TH)的表达水平,用蛋白质印迹法检测BAT中β3肾上腺素能受体(β3-AR)、解耦连蛋白-1(UCP-1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)蛋白的表达水平。结果实验组和对照组大鼠PVN中TH阳性细胞数量分别为(7±3)和(4±2)个,PVN中TH蛋白表达水平分别为0.14±0.02和0.09±0.01,BAT中TH蛋白表达水平分别为0.72±0.04和0.57±0.02,BAT中β3-AR蛋白表达水平分别为1.16±0.05和0.97±0.04,BAT中UCP-1蛋白表达水平分别为1.25±0.06和0.77±0.03,BAT中PRDM16蛋白表达水平分别为0.68±0.04和0.38±0.05,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论实验组大鼠PVN中TH蛋白表达水平发生了显著改变,棕色脂肪细胞分化能力及产热功能显著增加。     

妊娠糖尿病大鼠视黄醇结合蛋白4水平的变化及与胰岛素抵抗的关系

目的探讨妊娠糖尿病大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)水平的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法将20只健康SD孕鼠随机分为妊娠糖尿病大鼠(GDM)组10只、正常妊娠对照组(NC)10只。采用链脲佐菌素(STZ)腹腔一次性注射制备GDM大鼠模型。各组大鼠于分娩前及妊娠20d,测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹胰岛素水平(FINS)和血清RBP-4水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果①GDM组大鼠血清FPG、FINS、TG、TC、LDL-C、RBP-4、HOMA-IR高于正常妊娠对照组(P<0.05,P<0.01);②Pearson相关分析显示,GDM组大鼠HOMA-IR与FPG、FINS、TG、TC、LDL-C、RBP-4呈正相关(P<0.05,P<0.01)。③多元线性逐步回归分析结果提示,TG、RBP-4是影响GDM组大鼠HOMA-IR独立的危险因素。结论 RBP-4水平的升高与GDM胰岛素抵抗有关。     

摄食抑制因子对2型糖尿病大鼠胰岛素的影响

目的 研究摄食抑制因子（Nesfatin-1）对2型糖尿病（T2DM）模型大鼠中胰岛素的影响。方法 用高糖高脂饲料喂养SD大鼠和腹腔注射链脲佐菌素制备T2DM模型大鼠。将模型大鼠随机分为模型组和低、高剂量实验组，每组3只；另取9只正常大鼠随机分为空白组、低剂量对照组和高剂量对照组，每组3只。空白组和模型组在第三脑室注射人工脑脊液（aCSF）10μL;低剂量对照组和低剂量实验组注射Nesfatin-1（5 pmol）10μL,高剂量对照组和高剂量实验组注射Nesfatin-1（50 pmol）10μL。用酶联免疫吸附法检测胰岛素含量，用实时荧光定量聚合酶链反应检测蛋白激酶B（AKT）、磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）和葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-pase）mRNA的表达水平。结果 低、高剂量对照组和低、高剂量实验组及模型组的血清胰岛素含量分别为（24.39±1.44）,（22.95±1.90）,（19.51±0.97）,（20.28±1.43）和（17.84±2.33）mU·L^-1,AKT mRNA表达量分别为0.90±0.11,0.91±0.27,0.71±0....     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路研究愈疡胶囊抗中耳炎的作用

目的构建肺炎链球菌诱导大鼠中耳炎(OM)模型,探讨愈疡胶囊延缓OM炎的作用与机制。方法体外抑菌实验测定愈疡胶囊对肺炎链球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)与最低杀菌质量浓度(MBC)。将50只大鼠均分为模型组、阳性对照组(左氧氟沙星20 mg·kg~(-1))以及愈疡胶囊高、中、低剂量组(600,300,150 mg·kg~(-1)),每组10只。采用鼓室内注射菌液构建模型,灌胃给药,每日1次(20 mL·kg~(-1))。第7天和第14天观察鼓膜情况并收集眼眶静脉血,使用Elisa法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。第14天后处死大鼠,采集中耳鼓室,使用HE染色与扫描电镜观察鼓室黏膜,用Western Blot法检测鼓室Toll-样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-88(MyD88)和磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)的含量。结果体外MIC与MBC分别为12.5,25.0 g·L~(-1);与模型组相比,愈疡胶囊高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IgA和IgG含量均降低,TLR4、MyD88与p-NF-κB蛋白含量均降低(P<0.05),鼓膜观察、HE染色与电镜观察均显示细菌感染情况减轻。结论愈疡胶囊对大鼠细菌感染OM具有抑菌抗炎作用,主要表现为减少炎症与免疫反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠Toll样受体2 mRNA及MyD88 mRNA表达的影响

目的探讨青藤碱对佐剂性关节炎大鼠Toll样受体(TLR)2mRNA及MyD88mRNA表达的影响。方法清洁级SD大鼠40只,随机分为模型组、青藤碱组、甲氨蝶呤组及正常对照组。前3组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎模型,正常对照组大鼠右后足跖皮内注射等量0.9%氯化钠注射液。各组分别干预4周后,取膝关节滑膜,采用实时聚合酶链反应(PCR)法检测TLR2mRNA,MyD88mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α。结果模型组大鼠膝关节滑膜组织TLR2mRNA,MyD88mRNA表达及TNF-α均较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(均为P<0.01)。经青藤碱治疗后,TLR2mRNA,MyD88mRNA表达及TNF-α均较模型组明显下降,差异有统计学意义(均为P<0.01)。结论青藤碱可改善佐剂性关节炎大鼠的关节炎症,该作用可能与抑制TLR2通路有关     

麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染小鼠肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制

目的：探讨麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染模型肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制。方法：选取80只SPF级Balb/c小鼠为研究对象，根据随机数字表法分为对照组、模型组、奥司他韦组、麻杏石甘汤组，每组20只。比较各组肺组织TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB水平。结果：给药后3 d，与对照组相比，模型组TLR2、TLR4、NF-κB水平升高；与模型组相比，给药组TLR2水平降低，奥司他韦组和麻杏石甘汤组TLR4水平降低，麻杏石甘汤组NF-κB水平降低（P<0.05）。给药后7 d，与对照组相比，模型组TLR4、MyD88水平升高；与模型组相比，麻杏石甘汤组TLR4、MyD88水平降低，奥司他韦组MyD88水平降低（P<0.05）。结论：麻杏石甘汤通过调节TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平起到流感病毒肺部感染抗病毒的作用。     

芍药总苷对6MV-X射线放射性食管炎模型大鼠的作用研究

目的研究芍药总苷对6MV-X射线放射性食管炎模型大鼠的影响。方法取健康雄性Wistar大鼠,用6MV-X射线单次照射建立放射性食管炎模型,空白组大鼠17只不接受射线照射。按照体重将造模成功大鼠随机分为4组,每组17只:模型组、对照组和低、高2个剂量实验组。模型组和空白组给予0.9%Na Cl 2 m L,tid;对照组给予西药合剂(0.9%NaCl 250 mL+利多卡因3.2mL+地塞米松1.6 mg+硫酸庆大霉素5.12万单位)2 mL tid;低、高2个剂量实验组分别给予2,6 mg·mL^-1芍药总苷溶液2 m L,tid,均连续给药8 d。用光学显微镜观察食管组织病理变化并评分,用酶联免疫吸附法测定血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平,用蛋白质免疫印迹法检测食管组织神经生长因子(NGF)、酪氨酸蛋白激酶A(Trk A)蛋白、P75蛋白表达水平。结果给药后,空白组、模型组、对照组和低、高2个剂量实验组食管组织病理变化程度评分分别为0,(4.24±0.58),(2.15±0.26),(1.08±0.15),(0.53±0.07)分,这5组的血清PCⅢ水平分别为(40.73±5.24),(90.48±10.38),(71.23±8.72),(58.46±7.66),(49.36±6.12)μg·L^-1,这5组的食管组织NGF蛋白表达水平分别为0.54±0.07,1.32±0.18,1.13±0.12,0.84±0.11,0.69±0.08,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论芍药总苷能够减轻6MV-X射线放射性食管炎模型大鼠的病理损伤程度,降低血清PCⅢ、TGF-β1水平,防治食管纤维化,其作用可能与降低NGF及其受体Trk A蛋白和P75蛋白的表达水平有关。     

L型钙通道介导垂体腺苷酸环化酶激活肽38对大鼠胰岛素分泌的促进作用及其机制研究

目的研究垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP38)对大鼠胰岛素分泌的影响及其机制。方法 (1)将大鼠胰岛和胰岛细胞分为4组:正常组(2.8 mmol·L^-1葡萄糖)、模型组(8.3 mmol·L^-1葡萄糖)和低,高2个剂量实验组(模型组+1,10 nmol·L^-1 PACAP38),测定不同干预下的胰岛素分泌量。(2)将大鼠胰岛和胰岛细胞分为5组:正常组、模型组、高剂量实验组、阿折地平(L型钙通道阻滞药)组(模型组+0.1μmol·L^-1阿折地平)和联合组(阿折地平组+高剂量实验组),用胰岛素分泌实验和钙成像技术分别检测阿折地平干预下胰岛素分泌量和β细胞内Ca^2+浓度(F-F0值)水平。结果 (1)正常组、模型组和低、高2个剂量实验组的胰岛素分泌量分别为(86.74±4.05),(165.63±5.26),(175.03±5.21)和(209.28±4.13)μu·mL^-1,模型组与正常组相比,胰岛素分泌量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);高剂量实验组与模型组相比,胰岛素分泌显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)正常组、模型组、高剂量实验组、阿折地平组和联合组的胰岛素分泌量分别为(46.93±4.58),(79.11±8.02),(135.65±3.68),(72.78±7.95),(78.51±5.13)μu·mL^-1;这5组的Ca^2+浓度分别为3.00×10^-2±0.12,6.57×10^-2±0.35,1.40×10^-1±0.46,7.71×10^-2±0.42,8.00×10^-2±0.43,上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001);联合组与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001);阿折地平与模型组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 PACAP38通过作用于L型钙通道,使β细胞内Ca^2+浓度升高,最终促进胰岛素分泌。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的干预作用

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法:以小鼠巨噬细胞RAW264.7为对象,以阿托伐他汀钙为阳性对照,经脂多糖(LPS)诱导以复制炎症细胞模型,采用酶联免疫吸附测定法检测低、中、高剂量黄连素(5、10、20μmol/L)作用24 h后细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、NF-κB含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中TLR4、MyD88 mRNA的表达水平,采用Western blotting法检测细胞中TLR4、MyD88、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD206蛋白的表达水平。结果:与空白对照组比较,LPS诱导组细胞培养液中TNF-α、IL-6、NF-κB含量,细胞中TLR4、MyD88 mRNA的相对表达量以及TLR4、MyD88、iNOS蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。与LPS诱导组比较,阿托伐他汀钙组和黄连素中、高剂量组TNF-α、IL-6含量,TRL4、MyD88 mRNA及其蛋白的相对表达量以及各给药组NF-κB含量和i NOS蛋白的相对表达量均显著降低,且黄连素高剂量组NF-κB含量显著低于阿托伐他汀钙组(P<0.05);阿托伐他汀钙组和黄连素高剂量组CD206蛋白的相对表达量均显著升高,且黄连素高剂量组CD206蛋白的相对表达量显著高于阿托伐他汀钙组(P<0.05)。结论:不同剂量的黄连素均可不同程度地干预小鼠巨噬细胞极化,其机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。     

茯苓酸改善多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的 研究茯苓酸对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法 将126只雌性大鼠按随机数字表法分为空白组、PCOS组、茯苓酸低剂量组（8.33 mg/kg）、茯苓酸高剂量组（33.32 mg/kg）、炔雌醇环丙孕酮组（阳性对照组,0.34mg/kg）、重组大鼠高迁移率族蛋白B1蛋白（rHMGB1）组（8μg/kg）和茯苓酸高剂量+rHMGB1组（33.32 mg/kg茯苓酸+8μg/kg rHMGB1）,每组18只。除空白组外,其余各组大鼠均通过灌胃来曲唑混悬液的方式构建PCOS模型。建模成功后,每天给药1次,持续4周。给药结束后,检测大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,检测大鼠血清中促卵泡素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）水平及卵巢组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,计算大鼠卵巢系数,观察大鼠卵巢组织病理变化,检测大鼠卵巢组织中HMGB1、晚期糖基化终产物受体（RAGE）、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达情况。结果 与空白组比较,PCOS组大鼠卵巢组织病理损伤严重,...     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠心肌损伤的改善作用研究

目的观察利拉鲁肽(LRG)能否通过调控NOD样受体家族3(NLRP3)炎性小体延缓2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌病变及其机制。方法按照体重将大鼠随机分为3组:正常组、模型组和实验组,每组10只。实验组皮下注射LRG 200μg·kg ^-1,正常组和模型组给予等剂量0.9%NaCl,1次/日,连续4周。以试剂盒法测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;计算心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVWI);以免疫印迹法测定心肌组织NLRP3和沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平(灰度值)。结果正常组、模型组和实验组CK分别为(370.85±38.73),(615.12±52.57)和(493.49±45.32)U·mL^-1;这3组的LDH分别为(686.12±63.05),(1161.60±154.05)和(885.53±109.62)U·L^-1;这3组的HMI分别为(2.22±0.25),(3.04±0.16)和(2.51±0.25)mg·g^-1;这3组的LVWI分别为(1.59±0.18),(2.24±0.16)和(1.85±0.26)mg·g^-1;这3组的NLRP3蛋白表达分别为0.31±0.05,0.81±0.05和0.55±0.11;这3组的SIRT1蛋白表达分别为0.70±0.10,0.21±0.03和0.49±0.05;上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 LRG能够延缓T2DM心肌病变,其机制可能与激活SIRT1从而抑制NLRP3炎性小体的活化及减轻心肌炎性损伤有关。     

二十二碳六烯酸对戊四氮诱导的癫痫模型小鼠的治疗作用及机制

目的 探究二十二碳六烯酸(DHA)在戊四氮(PTZ)诱导的癫痫模型小鼠的治疗作用及机制。方法 昆明小鼠腹腔注射PTZ构建模型，成功构建模型的小鼠分为模型组、阳性对照组和低、高剂量实验组，各10只；另取10只正常小鼠作为正常组。低、高剂量实验组腹部注射0.10%和0.60%DHA,正常组、模型组均腹部注射等体积生理盐水，阳性对照组腹部注射甘草多糖溶液50 mg·kg^-1。观察病理组织，评估认知学习能力，以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测炎症反应指标，观察惊厥持续时间、发作次数，采用TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色观察脑组织神经元凋亡，采用蛋白质印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达。结果 正常组、模型组、阳性对照组和低、高剂量实验组的逃避潜伏期分别为(12.08±2.13)、(47.82±4.71)、(33.89±3.94)、(28.75±3.51)和(23.16±3.10)s;穿越平台次数为(6.91±0.68)、(3.02±0.35)、(4.25±0.43)、(4.98±0.46)和(5.26±0.53...     

健脾清化中药复方对大鼠慢性萎缩性胃炎TLR4-MyD88依赖途径蛋白表达及TNF-α的影响

目的观察健脾清化中药复方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠TLR4及下游My D88依赖途径相关蛋白表达及炎性因子TNF-α的影响,探讨健脾清化中药复方治疗CAG的分子机制。方法将53只Wistar大鼠随机分为空白组8只和CAG造模组45只,以"氨水+去氧胆酸钠+乙醇"法复制CAG大鼠模型。确认造模成功后,将造模组余下40只CAG大鼠随机分为模型组、维酶素组、中药低、中、高剂量组,各8只。各组给予相应药物灌胃,连续30 d。HE染色观察病理组织学改变,Western blot法检测TLR4、My D88、NF-κB、COX-2的蛋白表达量,ELISA法检测血清中TNF-α含量。结果模型组大鼠TLR4、My D88、NF-κB、COX-2蛋白表达水平明显增高(P<0.01),血清TNF-α含量明显增高(P<0.01)。与模型组比较,健脾清化中药复方低、中、高剂量组胃黏膜病变明显改善,TLR4、My D88、NF-κB、COX-2蛋白表达水平均明显下降(P<0.05或P<0.01),血清TNF-α含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论健脾清化中药复方可有效改善CAG大鼠胃黏膜组织病理改变,其治疗机制可能与降低组织中TLR4-My D88依赖途径中相关蛋白表达,以及抑制炎症因子的表达有关。