骨髓移植诱导特异性免疫耐受同种皮肤移植的动物实验研究

目的证实通过动物实验模型的骨髓移植可以诱导同种皮肤移植的免疫耐受.方法将114只日本白色家兔和Dutch家兔分为对照组和实验组,日本白色家兔作为供体,Dutch家兔作为受体.对照组,在不使用免疫抑制剂的情况下,将12只日本白色家兔与12只Dutch家兔行相同面积的背部全厚皮肤互换移植,观察其成活时间.实验组,将45只日本白色家兔和45只Dutch家兔行全厚皮肤移植的同时行骨髓移植,然后将作为受体的Dutch家兔分为A,B,C,D四组,分别行非致死量的γ射线全身照射的骨髓细胞移植及同种皮肤移植,观察移植皮肤的成活时间.结果对照组,供体与受体移植皮肤的平均成活时间分别为(12.0±1.7)天和(10.3±1.3)天.实验组,A,B,C,D四组移植皮肤的平均成活时间分别为(61.0± 7.2)、(80.7± 10.4)、(78.8± 12.7)、(88.0± 6.0)天.结论通过骨髓移植导特异性免疫耐受同种皮肤移植的动物实验,旨在为临床应用提供了理论基础及可靠依据,为同种组织重建提供一个新方法.     

骨髓移植诱导特异性免疫耐受同种皮肤移植的动物实验研究

目的　证实通过动物实验模型的骨髓移植可以诱导同种皮肤移植的免疫耐受。方法　将 114只日本白色家兔和Dutch家兔分为对照组和实验组 ,日本白色家兔作为供体 ,Dutch家兔作为受体。对照组 ,在不使用免疫抑制剂的情况下 ,将 12只日本白色家兔与 12只Dutch家兔行相同面积的背部全厚皮肤互换移植 ,观察其成活时间。实验组 ,将 4 5只日本白色家兔和 4 5只Dutch家兔行全厚皮肤移植的同时行骨髓移植 ,然后将作为受体的Dutch家兔分为A ,B ,C ,D四组 ,分别行非致死量的γ射线全身照射的骨髓细胞移植及同种皮肤移植 ,观察移植皮肤的成活时间。结果　对照组 ,供体与受体移植皮肤的平均成活时间分别为 (12 .0± 1.7)天和 (10 .3± 1.3)天。实验组 ,A ,B ,C ,D四组移植皮肤的平均成活时间分别为 (6 1.0± 7.2 )、(80 .7± 10 .4 )、(78.8± 12 .7)、(88.0± 6 .0 )天。结论　通过骨髓移植导特异性免疫耐受同种皮肤移植的动物实验 ,旨在为临床应用提供了理论基础及可靠依据 ,为同种组织重建提供一个新方法     

MHC基因胸腺转移诱导异基因小鼠皮肤移植免疫耐受

目的通过胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ）,表达外源性主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）抗原,以小鼠皮肤移植为模型,诱导移植免疫耐受,为免疫耐受提供理论和实验依据。方法应用逆转录病毒载体介导的基因转移技术,通过ＢＡＬＡ／Ｃ胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ）,将外源性ＭＨＣ基因转移到胸腺细胞,１４天后行异基因小鼠皮肤移植。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）,单克隆抗体免疫荧光染色流式细胞仪检测胸腺细胞ＤＮＡ,ｍＲＮＡ和ＭＨＣ蛋白质表达。结果外源性ＭＨＣ基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地转录,胸腺细胞表面有外源性ＭＨＣ分子表达,转染效率为５％,胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ）能明显延长异基因小鼠的皮肤移植时间,平均２７天,对照为１０天（Ｐ＜０００１）。受体鼠脾细胞对ＣｏｎＡ的增殖反应在正常范围。结论供体鼠ＭＨＣ基因转移至受体鼠胸腺诱导了对供体皮肤移植的免疫耐受。     

短期运用环孢素A对供者骨髓移植所诱导的混合嵌合体和免疫耐受的抑制作用

目的探讨临床常用免疫抑制剂对供者骨髓移植和T淋巴细胞协同刺激信号阻滞联合诱导的混合嵌合体和免疫耐受的影响。方法将BALB/c小鼠的皮肤移植于C57BL/6小鼠背部,术后经尾静脉注射BALB/c小鼠骨髓细胞5×10~7个和AdCTLA4-FasL 5×10~9 PFU(标准方案组),部分小鼠在此基础上还接受环孢素A(CsA组)、霉酚酸酯(MMF组)和环孢素A、霉酚酸酯联合(CsA+ MMF组)皮下或腹腔注射,共用药28 d,同时设移植后不给任何处理的对照组。观察移植皮肤存活情况,流式细胞仪测定受者外周血Vβ11~+T淋巴细胞的水平和供者来源细胞的嵌合水平,行单向混合淋巴细胞反应(MLR)了解受者对供者抗原的反应。结果除对照组外,其它几个组在短期内(21 d)均诱导了高水平的混合嵌合体(＞30%),但在停药后的140 d,仅标准方案组和MMF组仍保持稳定的嵌合水平。对照组移植皮片的存活时间为(9．8±1．2)d,CsA组和CsA+MMF组皮片存活时间均不超过50 d,标准方案组和MMF组皮片存活时间均超过150 d,明显长于CsA组和CsA+MMF组(P＜0．05)。术后150 d,标准方案组和MMF组的MLR受到显著抑制,刺激指数均＜1,而CsA组和CsA+MMF组的MLR未受抑制(刺激指数均＞1)。术后21d时,各组小鼠外周血中Vβ11~+T淋巴细胞的水平均低于对照组,但标准方案组和MMF组的Vβ11~+ T淋巴细胞较CsA组和CsA+ MMF组更低(P＜0．05),至术后140 d时,标准方案组和MMF组的Vβ11~+ T淋巴细胞比例降至更低水平。结论CsA或含CsA的免疫抑制方案对供者骨髓移植和输注CTLA4-FasL联合诱导的混合嵌合体和免疫耐受具有抑制作用,其机理可能与早期外周供者反应性T淋巴细胞删除减少有关。     

FK506预处理下骨髓移植诱导同种异体小鼠皮肤移植耐受的实验研究

目的探讨短期大剂量FK506作为宏嵌合诱导供体特异性耐受中,骨髓移植前对受体预处理方法的可行性及临床实用性. 方法 100只雄性C57BL/6和60只雌性BALB/C小鼠分别作为皮肤移植的供体和受体,雄性ICR小鼠15只作为无关第三品系用以检测移植耐受状态的特异性.将60只受体小鼠随机分为5组,即无处理对照组、单纯FK506组、单纯骨髓细胞移植(BMT)组、实验组(FK506 BMT)和无关供体对照组,每组12只.FK506诱导及维持方案是皮肤移植前对受体小鼠先给予大剂量FK506腹腔注射(3 mg/kg×2 d),移植当天尾静脉输注2×107个骨髓细胞,再以小剂量FK506(0.5 mg/kg×7 d)短期维持治疗.观察皮肤移植存活时间、对第三方皮肤的排斥反应及对供体鼠的单向混合淋巴细胞反应,并用多聚酶链式反应(PCR)检测嵌合体的形成. 结果常规剂量的骨髓输注或短期FK506治疗并不能延长移植物的存活时间,也没有宏嵌合形成.实验组皮肤移植物存活时间(24.0±1.5)d比无处理对照组(9.6±1.1)d、单纯FK506组(10.5±1.6)d、单纯骨髓细胞移植组(10.3±1.5)d、无关供体对照组(9.8±1.1)d明显延长(P<0.05).混合淋巴细胞反应实验组供者特异性抑制率80.55%±14.10%明显高于单纯FK506组38.65%±12.43%及单纯骨髓细胞移植组35.41%±8.99%(P<0.05),实验组宏嵌合呈阳性. 结论采用短期大剂量FK506这一温和的非照射预处理方法,可获得一定程度的免疫耐受,延长移植物存活.移植前输注供体骨髓细胞能够促进宏嵌合的形成及移植物的存活.     

胸腺内注射异基因抗原诱导鼠神经移植免疫耐受的实验研究

目的探讨小鼠胸腺内注射异基因抗原在同种异体异基因坐骨神经移植免疫耐受中的作用。方法自供体小鼠C57BL／6的脾细胞中提取MHC抗原注人受体鼠Balb／c小鼠胸腺内，于2周后移植供体鼠坐骨神经。48只Balb／c小鼠随机分为4组，A组（胸腺内注射组）、B组（自体神经移植组）、C组（冷冻异体神经移植组）、D组（异体神经移植加用免疫抑制剂组）。于3周后进行电生理学、组织学、免疫学检测。结果A组运动神经传导速度（38．23m／s）与D组（36．39m／s）相比无显著性差异（P〉0．05），组织学、电镜、免疫学（混合淋巴细胞培养及迟发性超敏反应）检测结果均证实B组分别优于A组、D组和C组。结论胸腺内注射异基因MHC抗原可诱导大鼠对异体坐骨神经移植的特异性免疫耐受。     

骨髓移植诱导免疫耐受家兔全耳同种移植

目的　为了减轻免疫诱导过程中对受体的侵袭 ,进一步探讨以家兔为动物模型 ,通过异体骨髓移植诱导同种皮肤移植免疫耐受。方法　通过骨髓腔内直接注射异体骨髓细胞 ,进行骨髓移植。结果　皮片的平均存活时间是 (88.0± 6 .0 )天 (P <0 .0 0 1 )。为了探讨其普遍性 ,我们用此诱导方法 ,还进行了同种全耳移植。平均存活时间是 (1 4 6 .0± 1 5 .1 )天 ,并有 1只移植耳存活时间已超过 1年 ,未见任何排斥反应。结论　本研究证明了以家兔为动物模型 ,在不使用免疫抑制剂的情况下 ,通过骨髓腔内直接注射异体骨髓细胞 ,进行骨髓移植的方法 ,不仅在皮肤移植上可以诱导长期稳定的特异性免疫耐受 ,而且在实质性器官耳的同种移植上取得了良好的效果     

骨髓移植诱导免疫耐受家兔全耳同种移植

目的为了减轻免疫诱导过程中对受体的侵袭,进一步探讨以家兔为动物模型,通过异体骨髓移植诱导同种皮肤移植免疫耐受.方法通过骨髓腔内直接注射异体骨髓细胞,进行骨髓移植.结果皮片的平均存活时间是(88.0±6.0)天(P<0.001).为了探讨其普遍性,我们用此诱导方法,还进行了同种全耳移植.平均存活时间是(146.0±15.1)天,并有1只移植耳存活时间已超过1年,未见任何排斥反应.结论本研究证明了以家兔为动物模型,在不使用免疫抑制剂的情况下,通过骨髓腔内直接注射异体骨髓细胞,进行骨髓移植的方法,不仅在皮肤移植上可以诱导长期稳定的特异性免疫耐受,而且在实质性器官耳的同种移植上取得了良好的效果.     

胸腺内诱导胰岛移植物免疫耐受

排斥反应是导致胰岛移植物失败的主要因素。新一代的免疫抑制剂虽给器官移植带来广阔前景，但是类固醇激素、CsA、FK506均有致糖尿病作用，长期应用也会带来严重的毒副作用。所以，成功的胰岛移植将依赖特殊的抗排斥手段。近年来胸腺的免疫功能重新受到重视，本文简要综述了胸腺内接种抗原诱导同种和异种胰岛移植物免疫耐受的研究进展。     

未成熟树突状细胞联合雷帕霉素诱导小鼠肤移植免疫耐受

状细胞组、联合组的皮肤移植物存活时间分别为(6.9±1.9)、(10.3±3.0)、(17.0±3.4)、(20.8±3.6)d.方差分析提示组间差异有统计学意义(P＜0.05);S-N-K检验提示各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 供者骨髓来源未成熟树突状细胞可诱导小鼠皮肤移植免疫耐受;联合使用雷帕霉素可延长免疫耐受的持续时间.     

骨髓移植诱导临床心脏移植后供者特异性免疫耐受方案的探讨

目的 探讨骨髓移植诱导临床心脏移植后供者特异性免疫耐受的可行性.方法 采取供心的同时采用改良"灌流法"获取供者的骨髓350 ml,经过滤及离心处理后,加入细胞冷冻保护液共80ml,分装于低温冻存袋,经程序降温,置于-80℃冰箱中保存.在常规原位心脏移植术后40 d,取冻存骨髓快速复温,穿刺受者双侧髂后上嵴,立即行骨髓腔内骨髓细胞输注(IBM-BMT),共输注单核细胞1.2×107/kg,CD34+细胞2.38×105/kg.骨髓输注前3 d行预处理,包括应用氟达拉滨、抗胸腺细胞球蛋白及全身淋巴结照射.骨髓移植后静脉应用他克莫司(Tac),维持血Tac浓度谷值在10～20μg/L;3周后改为口服Tac+吗替麦考酚酯(MMF);6周后改为环孢素A及MMF.分别于心脏移植后2、4、8和12周采集受者外周血,分别于术后4、8和12周采集受者的骨髓,应用短串联重复序列-聚合酶链反应法检测供者嵌合体.心脏移植后每周行心肌内心电图检查,每月行心肌活检1次.术后3个月,取受者及第三者外周血单核细胞,行混合淋巴细胞反应(MLR).结果心脏移植后1、2及3个月时受者的外周血及髂骨内骨髓细胞中供者来源的细胞比例分别为26.3%、19.1%、4.8%和46.3%、24.4%、7.6%.IBM-BMT后心肌内心电图监测显示心肌阻抗及R波波幅无明显变化.术后3个月行心内膜心肌活检,未见排斥反应征象.术后3个月时行超声心动图检查,提示心脏舒张、收缩功能良好.MLR提示受者对供者特异性刺激呈现低反应性,而对第三者仍保持良好的免疫活性(P＜0.01).结论 采取分期骨髓移植免疫耐受诱导方案可安全、有效地建立嵌合体,成功诱导心脏移植后供者特异性免疫耐受,但远期效果有待进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate a new strategy of bone marrow transplantation (BMT) for donor-specific tolerance induction after heart transplantation. Methods Donor bone marrow cells (BMCs)were harvested simultaneously with donor cardiac graft using modified perfusion method (PM) ,then stored in a -80 ℃ refrigerator after filtration and centrifugation. Whole BMCs (IBM-BMT) (monocytes 1.2 ×107/kg,CD34+ cells 2.38× 105/kg) in host iliac bones were injected into the bone marrow cavity 40 days after heart transplantation. Preconditoning regimens that consisted of fludarabine, antithymoctye globin and total lymphoid irradiation were performed 3 days before BMT. Tacrolimus (Tac) was administrated intravenously after BMT or orally in conjunction with mycophenolate mofetil (MMF) 3 weeks later.Cyclosporine and MMF were orally administrated 6 weeks later. Donor chimerism was detected using short tandem repeats-polymerase chain reaction in monocytes from peripheral blood at the 2nd,4th, 8th or 12th week after BMT or BMCs at the 4th, 8th or 12th week after BMT. Intramyocardium electrocardiography examination or endomyocardial biopsy was performed weekly or monthly respectively. Mixed lymphocyte reactions (MLR) were performed 3 months after BMT. Results Donor chimerism in monocytes in peripheral blood or BMCs in iliac bones measured at the 1 st,2nd and 3rd month after BMT was 26.3%, 19.1%,4.8% ,and 46.3%, 24.4%, 7.6%, respectively. After 3-month follow-up, there was no rejection confirmed by endomyocardial biopsy or intramyocardium electrocardiography. Echocardiography revealed that the diastolic and systolic function of the cardiac graft was maintained well 3 months after BMT. MLR revealed donor-specific hyporesponsiveness while immunocompetence was preserved to third-party antigens. Conclusion These findings indicate that the two-stage BMT strategy is a safe and feasible method for the induction of donor-specific tolerance via stable mixed chimerism and needs to be further confirmed after a long-term observation.     

Tju103和CTLA4-Ig联合诱导主要组织相容复合物半相合小鼠骨髓移植耐受

目的观察吲哚亚甲基异烟腙(Tju103)和细胞毒性T淋巴细胞相关性抗原4免疫球蛋白(CTLA4-Ig)联合应用，对主要组织相容复合物(MHC)半相合小鼠骨髓移植的植入以及移植后移植物抗宿主病(GVHD)、移植物抗白血病(GVL)和抗感染的影响；探索一条既能降低GVHD能保留GVL和抗感染能力的移植途径。方法体外以受者(正常CB6F1鼠，H-2^bd)抗原为特异性免疫耐受诱导原，MHC半相合的供者(C57BL／6鼠，H-2^b)T淋巴细胞经和Tju103、CTLA4-Ig共育后，与供者骨髓细胞混合输入经预处理的受者体内。观察Tju103和CTLA4-Ig联合作用对移植后造血重建、GVHD、GVL和抗感染的影响。结果单纯照射组(A组)：全部(10只)白血病小鼠于照射后11d内死于造血功能衰竭，大部分(8只)死于照射后4～7d。环磷酰胺(CTX)治疗组(B组)：全部(10只)小鼠于接种白血病细胞后16～23d(移植后11～18d)死于白血病，但CTX治疗延长了白血病小鼠存活期。单纯移植组(C组)：全部(10只)小鼠于移植后21d内死亡，均死于GVHD。CsA预防组(D组)：4只小鼠于移植后8～22d内死亡，其中1只死于白血病，2只死于感染，1只死于GVHD；6只存活超过30d。Tju103处理组(E组)：4只小鼠于移植后9～26d内死亡，其中1只死于白血病，1只死于感染，2只死于GVHD；6只存活超过30d。CTLA4-Ig处理组(F组)：3只小鼠于移植后14～23d内死亡，其中1只死于感染，2只死于GVHD；7只存活超过30d。Tju103 CTLA4-Ig处理组(G组)：仅1只小鼠于移植后第19d死于GVHD；9只存活超过30d。结论CsA、Tju103或CTLA4-Ig单独处理均可以明显延长小鼠移植后生存期，降低GVHD的发生和程度；CTLA4-Ig有抗感染和GVL作用，而Tju103和CsA则没有此作用；CTLA4-Ig和Tju103两者联合处理供者T淋巴细胞对延长受者生存期和降低GVHD作用更明显。     

大剂量免疫抑制剂预处理后骨髓移植诱导小鼠皮肤移植耐受的实验研究

目的用大剂量免疫抑制剂作为骨髓移植前受者的预处理，诱导其对供者特异性器官移植免疫耐受，并探讨宏嵌合的形成与移植耐受的关系。方法雄性C57BL/6和雌性BALB／c小鼠作为皮肤移植的供者和受者。实验分为11组：第1组为对照组，仅作皮肤移植，不做其他处理；第2组为单纯供者骨髓细胞移植(BMT)后进行皮肤移植；第3～5组：分别使用免疫抑制剂他克莫司(FK506)、环孢素A(CsA)、环磷酰胺(CTX)后进行皮肤移植；第6～8组：分别应用FK506、CsA、CTX预处理后作骨髓移植，再进行皮肤移植。前8组皮肤及骨髓供者均为雄性C57BL／6小鼠。第9～11组：处理同第6～8组，但移植皮肤来自无关供者雄性ICR小鼠，以验证耐受的特异性。每组受鼠6只。观察皮肤移植存活时间、皮肤的排斥反应，并用多聚酶链式反应(PCR)检测嵌合体的形成。结果单独应用常规剂量的供者骨髓细胞输注或短期的免疫抑制治疗并不能延长移植物的存活，也没有宏嵌合形成。而6～8组的皮肤移植物存活时间较各对照组明显延长；宏嵌合检查呈阳性。来自无关供者的皮片存活时间无延长。结论采用短期应用大剂量免疫抑制剂这一温和的非照射预处理方法，再输注供者骨髓细胞，可获得一定程度的免疫耐受，达到延长皮肤移植物存活的目的。移植前输注供者骨髓细胞形成的宏嵌合与移植物耐受有关。     

心脏移植后骨髓腔内供者骨髓移植诱导供者特异性免疫低反应性再探讨

目的 再次探讨骨髓腔内供者骨髓移植诱导心脏移植后供者特异性免疫耐受的可行性.方法 2011年10月至2012年12月间,对3例心脏移植受者进行分期骨髓腔内供者骨髓移植.采用改良灌流法采集骨髓细胞,以增加骨髓细胞采集数目.应用抗胸腺球蛋白、氟达拉滨及巴利昔单抗进行预处理,以降低预处理不良反应.结果 应用改进灌流法采集的单核细胞数目由1.2×107/kg增加至5.8×107/kg(P＜0.01);CD34+细胞数目由2.38×105/k增加至6.7×105/kg(P＜0.01).骨髓移植后随访3个月,3例均无巨细胞病毒和真菌感染,未发生移植物抗宿主病等并发症.心内膜活检证实无排斥反应发生.体外混合淋巴细胞反应提示受者淋巴细胞对供者脾细胞呈免疫低反应性,而对无关第三者抗原仍维持良好的免疫活性.结论 改进的心脏移植后骨髓腔内供者骨髓移植诱导方案可降低骨髓移植后早期感染发生,提高了治疗的安全性,但仍可成功诱导供者特异性免疫低反应性.     

Effects of ex vivo activated immune cells on syngeneic and semi-allogeneic bone marrow transplantation in mice

We have previously shown that a novel immunotherapy using ex vivo activated immune cells is capable of promoting survival and hematopoietic recovery in mice after combined chemotherapy and radiotherapy. In this study, we investigated whether the immunotherapy with ex vivo activated immune cells had the same beneficial effects after syngeneic and semiallogeneic bone marrow transplantation (BMT) in BALB/c mice subjected to a lethal dose of total body irradiation (TBI). Immune cells were cultured in vitro with a combination of cytokines and a calcium ionophore for 2 days and subsequently injected to mice daily for 4 days starting 1 day after BMT. The immunotherapy enhanced survival and multilineage peripheral blood recovery in BMT mice with limited numbers of transplanted bone marrow cells when a low dose of ex vivo activated immune cells were used. However, the beneficial effects were completely lost when a higher dose of the same therapeutic immune cells were tested, and instead the immunotherapy significantly exacerbated complications associated with the lethal radiation and BMT. This detrimental effect appeared to be the result of strong in vivo nonspecific immune responses induced by either activated therapeutic immune cells or interaction between therapeutic immune cells and MHC-mismatched bone marrow cells transplanted or both. Our data suggest that the immunotherapy with appropriately selected dosages may be beneficial to BMT but vigorous in vivo immune responses soon after BMT may exacerbate post-transplant complications.     

供体骨髓细胞输注诱导大鼠肢体移植免疫耐受

目的 探讨环磷酰胺(CP)加供体脾细胞输注联合供体骨髓细胞(DBMC)输注诱导大鼠肢体移植免疫耐受的效果及机制.方法选择25只雄性Wistar大鼠、25只雌性SD大鼠分别作为肢体移植的供体和受体.实验分为五组:A组:无处理对照组,B组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注预处理;C组:受体在肢体移植前给予CP预处理,D组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注加CP预处理,E组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注联合DBMC输注加CP预处理,每组5只.建立肢体移植动物模型,诱导耐受后观察大鼠一般情况,移植肢体排斥反应出现时间及存活时间,通过混合淋巴细胞培养确定耐受状态,采用PCR检测嵌合体的形成.结果 E组肢体移植物的存活时间[(27.6±1.1)d]较A组[(6.8±0.4)d]、B组[(7.2±0.8)d]、C组[(7.8±1.3)d]、D组[(17.8±0.8)d]显著延长,差异均有统计学意义(P＜0.01).混合淋巴细胞反应E组特异性抑制率[(88.00±1.06)%]显著高于B组[(36.90±1.08)%]、C组[(37.90±0.95)%]和D组[(67.20±1.12)%],差异均有统计学意义(P＜0.01).E组嵌合体呈阳性.结论联合CP加供体脾细胞输注及DBMC输注可一定程度诱导大鼠同种异体肢体移植的免疫耐受,延长移植物存活时间.嵌合体的形成可能与免疫耐受的形成及维持有关.     

第三方骨髓间充质干细胞对同种异体皮肤移植的影响

目的 探讨第三方骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)对同种异体皮肤移植的影响.方法 40只雌性C57BL/6和50只雄性BALB/C小鼠分别作为皮肤移植的供体和受体.将50只BALB/C小鼠随机分为5组,每组10只:空白对照组,直接进行皮肤移植;给予受体环磷酰胺组(Cyelophosphamide,CP组);给予受体SD大鼠BMSCs移植组(SD-BMSCs组);给予受体CP+SD-BMSCs移植组(CP+SD-BMSCs组);CM-DiI荧光标记组.CP+SD-BMSCs组给予大剂量CP腹腔注射,200 mg/kg,2 d,移植当天自受体小鼠尾静脉注射1×10~6个SD-BMSCs.检测项目包括:观察皮片存活时间、单向混合淋巴反应、组织HE染色、组织荧光镜检,流式细胞仪检测受体外周血单核细胞中SD-BMSCs的含量等.结果 CP+SD-BMSCs组皮肤移植物存活时间(14.5±1.9)d,空白对照组为(8.O±0.8)d,CP组为(11.1±1.4)d,SD-BMSCs组为(10.9±1.4)d,CP+SD-BMSCs组皮肤移植物存活时间明显比后3组延长(P<0.05).混合淋巴反应结果显示,BMSCs对淋巴细胞的增殖抑制作用存在量效关系.HE染色发现CP+SD-BMSCs组不但有血管生成,淋巴细胞浸润也较少.CM-DiI标记的SD-BMSCs能够在BALB/c小鼠体内存活30 d以上,SD-BMSCs组与CP+SD-BMSCs组外周血流式细胞仪均检测到SD-BMSCs.结论 BMSCs能够在异种受体体内存活较长时间;第三方BMSCs能够延长同种异体移植物的存活时间;BMSCs能够抑制异种T淋巴细胞的活化增殖.     

Donor skin allograft survival after bone marrow transplantation: Case report and systematic review of the literature☆

Background

We present a case of skin allograft survival in a patient who previously received a bone marrow transplant from the same HLA-matched donor. DNA fingerprinting of skin biopsies showed mixed cellularity originating from the donor and recipient (68% and 32% donor DNA in the allograft skin and the native recipient's skin, respectively). Histologic sections demonstrated both grade 3/4 rejection and graft-versus-host-disease. We have conducted a systematic review in search for other cases of donor skin allograft survival after a bone marrow or hematopoietic stem cell transplantation.

骨髓输注和抗淋巴细胞球蛋白诱导对同种异体移植肾特异性免疫无反应性的临床研究

国外使用抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）和输入供体特有骨髓（ＢＭ）诱导同种移植物的耐受力，并建立了动物模型。我们将这研究用于诱导特异性免疫无反应性病例２０例（骨髓组），并随机抽样２２例尸体肾移植患者作为对照组。骨髓组接受常规三联免疫抑制治疗，在１４天从ＡＬＧ诱导期后，停用１周，于第７天输入冷藏骨髓，随访５～４１个月。结果：１～６个月发生排斥反应２例（２／２０），均用大剂量激素逆转；另１例合并败血性肺炎死亡。对照组采用三联常规免疫抑制治疗剂量较骨髓组大，但不输入骨髓，结果同期发生排斥反应６例（６／２２），后期排斥反应２例，其中４例因排斥反应未能逆转而移植肾失功，有１例因合并心衰死亡。从两组结果分析，人的一年成活率两组无明显差别。移植肾一年成活率则骨髓组高于对照组（Ｐ＜０．０１），排斥反应发生率骨髓组明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），且骨髓组常规免疫抑制剂用量较对照组小。