甲状腺乳头状癌BRAF V600E、NRAS、TERT基因的突变特征及其与临床病理特征的相关性

目的:探索甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)三种驱动基因BRAF V600E、NRAS和TERT基因突变与临床病理特征的相关性,旨在为甲状腺癌患者提供更精准的分子分型检测指导。方法:纳入2018年01月至2018年12月期间空军军医大学西京医院收治的接受BRAF V600E、NRAS、TERT三基因检测的PTC患者,回顾性收集患者的临床病理特征和三种基因突变状态资料,分析各基因的突变特点及其与临床病理特征的相关性。结果:本研究347例患者,BRAF V600E、TERT、NRAS基因突变率分别为89.3%、2.0%以及1.2%。TERT和NRAS基因的患者同时发现有BRAF V600E基因突变。BRAF V600E/NRAS或BRAF V600E/TERT双基因突变率为3.2%。双基因突变患者多发病灶占72.7%,病理分型非PTMC占72.7%,淋巴结转移率为81.8%。BRAF V600E/NRAS双基因突变患者均发现淋巴结转移,BRAF V600E/TERT双基因突变患者有71.4%（5/7）出现淋巴结转移。单因素分析结果显示,年龄、病灶数量、病灶位置以及淋巴结转移与基因突变相关（P均＜0.05）。结论:BRAF V600E基因在PTC中的突变率达89.3%,TERT、NRAS基因突变往往与BRAF V600E基因突变同时出现,双基因突变可能与PTC侵袭性相关。     

BRAF V600E突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性

目的:探讨BRAF V600E基因突变对甲状腺乳头状癌（PTC）临床病理特征的影响。方法:收集经甲状腺切除术且病理证实为PTC患者的临床资料,分析BRAF V600E基因突变与PTC临床病理特征、甲状腺功能的关系。结果:PTC患者882例,发生BRAF V600E基因突变者722例（81.86%）,单因素分析显示,突变组癌灶多发、双侧、包膜外侵犯比例、复发危险度分层中/高危及TNM分期Ⅲ/Ⅳ期明显高于未突变组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;而淋巴结转移率、转移数目和直径均无统计学差异;突变组TPOAb、TGAb、TSH水平低于未突变组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,FT4、FT3水平无统计学差异（均P＞0.05）。分别行多因素Logistic回归分析显示:BRAF V600E基因突变与癌灶多发、包膜外侵犯显著相关（OR值分别为1.722、1.436,均P＜0.05）;原发癌灶直径>1 cm、BRAF基因突变、TGAb异常升高与PTC患者包膜外侵犯呈独立正相关（OR值分别为2.862、1.619、1.532,均P＜0.05）。结论:BRAF V600E基因突变的PTC易发多灶和包膜外侵犯,提示可能有不良预后;癌灶直径>1 cm、BRAF V600E基因突变及TGAb异常升高是PTC包膜外侵犯的独立危险因素。     

BRAF基因V600E突变与Ⅰ～Ⅱ期乳头状甲状腺癌临床病理特征及预后的相关性分析

目的 探讨Ⅰ～Ⅱ期乳头状甲状腺癌（PTC）患者肿瘤组织中BRAF基因V600E突变情况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。方法 采用RT-PCR法检测374例Ⅰ～Ⅱ期PTC患者组织样本中BRAF基因V600E突变,并分析其与临床病理特征及预后的关系。 结果 374例PTC患者标本中BRAF基因V600E的突变率为40.37％（151／374）。BRAF基因V600E突变与包膜侵犯、多灶、多次131I治疗相关（P＜0.05）。374例 PTC患者中31例复发,复发患者中有BRAF基因V600E突变的22例。31例复发病例中,BRAF基因V600E突变患者的中位生存期为5.3年（95％CI：3.9～6.7年）,未突变患者为7.0年（95％CI：5.1～8.9年）,差异无统计学意义（P＞0.05）。Logistic多因素回归分析显示,BRAF基因V600E突变及包膜侵犯是Ⅰ～Ⅱ期PTC患者复发的独立危险因素（P＜0.05）。 结论 BRAF基因V600E突变可能是Ⅰ～Ⅱ期PTC患者预后的一项重要预测指标。     

BRAF联合TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关性Meta分析

摘 要：［目的］ 探讨BRAF基因联合TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）颈部淋巴结转移的相关性。［方法］通过文献管理数据库检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、中国生物医学文献数据库（CBM）、中国知网数据库（CNKI）、万方数据库、维普数据库，收集其中关于BRAF基因联合TERT启动子在PTC患者中表达情况及PTC临床病理特征相关的文献。采用Review Manager 5.4软件对研究结果进行Meta分析，通过异质性检验选择随机效应模型合并其效应量（RR值）及其95%置信区间（95%CI），并进行敏感性分析及发表偏移评估。［结果］ 根据纳入及排除标准，最终纳入17篇中英文文献进行Meta分析，共计病例5 660例，其中BRAF基因联合TERT启动子共同突变组343例，其他组5 317例，合并后效应量RR= 1.26（95%CI：1.07～1.48，P=0.006），排除3篇异质性较高的文献重新计算出RR=1.31（95%CI：1.16～1.48，P<0.001）。中央区淋巴结清扫数量的5篇文献进行单独分析，计算得出RR=1.31 (95%CI：1.02~1.69，P<0.05)。［结论］ BRAF和TERT启动子共突变与PTC颈部淋巴结转移呈明显正相关，两者共突变可显著提高PTC患者颈部淋巴结转移发生率，尤其中央区淋巴结。     

体质量指数与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性分析

目的:分析体质量指数（body mass index,BMI）与甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）临床病理特征的相关性。方法:回顾性分析2017年1月至2018年6月于西京医院甲乳血管外科行手术的829例PTC患者临床资料,并将入组患者根据BMI的不同分为四组:较轻组（BMI＜18.5 kg/m2）、正常组（18.5≤BMI＜25 kg/m2）、超重组（25≤BMI＜30 kg/m2）及肥胖组（BMI≥30 kg/m2）。通过单因素分析及多元逻辑回归分析BMI与PTC临床病理特征相关性。结果:不同BMI组PTC患者的年龄、性别以及高血压病史之间具有统计学差异（P<0.001）。超重组患者与其他组相比平均年龄较大,肥胖组患者男性居多。单因素分析显示,BMI与肿瘤多灶性、BRAF V600E基因突变以及TNM分期显著相关（P<0.05）,而与病灶大小、病灶分布、是否侵犯包膜以及淋巴结转移数目和位置无关（P>0.05）。BMI正常组患者的肿瘤发生灶多为单灶（60.3%）,而非正常组患者多灶的发生率显著增加（P=0.040）。随着BMI的增长,BRAF V600E基因突变率显著提高（P=0.001）。经多元逻辑回归分析的校正,PTC患者的TNM分期与BMI无统计学差异（P>0.05）,肿瘤多灶性以及BRAF V600E基因突变仍与BMI显著相关。结论:在PTC患者中,非正常BMI组患者肿瘤多灶的发生率较正常BMI组显著增加,且BRAF V600E基因突变率与BMI呈正比,而除多灶性以外的侵袭性病理特征与BMI之间未发现相关性。     

甲状腺结节穿刺标本中BRAF V600E突变检测的临床意义

背景与目的：在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）中，BRAF V600E突变是迄今报道最多的基因突变。检测甲状腺穿刺细胞中的BRAF V600E突变有助于提高细针抽吸细胞学检查（fine-needle aspiration cytology，FNAC）诊断的准确性。本研究对甲状腺穿刺细胞液进行BRAF V600E突变检测，与术后组织病理学诊断结果进行比较，评估BRAF V600E突变的术前诊断价值。方法：回顾性分析2016年6月—2017年4月在复旦大学附属肿瘤医院就诊的563例甲状腺结节患者的B超引导下FNAC标本中的BRAF V600E突变结果，所有病例用QIAamp DNA Mini Kit提取DNA，并用突变特异性扩增系统（amplification refractory mutation system，ARMS）方法检测BRAF V600E突变。结果：563例患者的FNAC标本中，ARMS方法检测成功率为99.3%，男女比例为1.0∶3.7，平均年龄（45.0±0.9）岁。以组织病理学诊断作为金标准对209例接受手术治疗的患者进行诊断，细胞学诊断PTC的灵敏度为86.6%，特异度为100.0%；细胞学联合BRAF V600E诊断PTC的灵敏度为92.1%，特异度为100.0%。FNAC联合BRAF V600E检测的诊断准确率高于细胞学诊断。组织病理学诊断为PTC的患者中，有11例患者细胞学诊断未见肿瘤细胞，但BRAF V600E检测有突变，其中9例为微小PTC。结论：用ARMS方法检测FNAC标本中BRAF V600E基因突变，检测成功率高，是临床易于开展的术前辅助诊断方法。将细胞学诊断与BRAF V600E检测结果相结合，可提高PTC的检出率，提高术前诊断的准确率。     

甲状腺乳头状癌BRAFV600E突变分析

  目的  检测BRAFV600E突变在甲状腺乳头状癌(PTC)中的发生情况, 分析BRAFV600E突变与临床各病理参数以及与合并桥本氏甲状腺炎(HT)和结节性甲状腺肿的关系。  方法  天津医科大学附属肿瘤医院2011年3月至2011年8月所收治的临床考虑甲状腺癌患者112例, 术中取部分新鲜肿瘤组织, 送基因诊断室检测BRAFV600E突变情况, 其中30例患者同时取部分正常甲状腺组织进行检测对照。  结果  112例患者病理结果显示110例为PTC, 2例为结节性甲状腺肿。其中BRAFV600E突变在110例PTC的突变率为62.7%, 不存在于结节性甲状腺肿及正常甲状腺组织。年龄≤30岁PTC患者8例, 突变率为25.0%;30~60岁患者86例, 突变率为62.8%;≥60岁患者16例, 突变率为81.2%, 差异有统计学意义(P=0.027)。、BRAFV600E突变与其他临床病理参数间的差异无统计学意义。合并HT的PTC患者40例, 突变率42.5%;未合并HT的PTC患者70例, 突变率74.3%, 差异有统计学意义(P=0.001)。合并结节性甲状腺肿的PTC患者61例, 突变率72.1%;未合并结节性甲状腺肿的PTC患者49例, 突变率51.0%, 差异有统计学意义(P=0.023)。  结论  PTC的BRAFV600E突变率可能与种族差异有关。BRAFV600E突变率可能与患者年龄构成比有一定的相关性。合并HT的PTC BRAFV600E突变率低, 而合并结节性甲状腺肿的PTC BRAFV600E突变率高。      

BRAF V600E基因检测联合细针穿刺活检对甲状腺结节良恶性诊断中的价值

  目的  探讨BRAF V600E基因检测联合超声引导下细针穿刺活检（fine needle aspiration biopsy,FNA）对甲状腺良恶性结节的临床诊断价值。  方法  选取2018年1月至2018年6月首次收入郑州大学附属肿瘤医院穿刺活检并手术的121例患者共130枚甲状腺结节,对穿刺标本行细胞学诊断及洗脱液BRAF V600E突变基因检测。  结果  130枚结节中术后病理诊断乳头状癌120枚,良性10枚,BRAF V600E基因突变检测联合FNA将细胞学诊断的敏感度由81.7%提升至92.5%,准确度由83.1%升至92.3%,差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  BRAF V600E基因检测联合FNA能有效提高甲状腺结节良恶性诊断的敏感度和准确度,比传统单纯细胞学诊断具有更大的参考价值。      

Notch1 receptor as a marker of lymph node metastases in papillary thyroid cancer

Notch functions as an oncogene or tumor suppressor according to the type of malignancy, and the BRAF(V600E) mutation is commonly observed in thyroid cancer. However, the role of Notch and BRAF(V600E) in papillary thyroid cancer (PTC) is unclear. This study sought to elucidate the clinicopathological characteristics in patients with PTC regarding the expression of Notch1/Notch3 receptors and BRAF(V600E) mutation. Clinicopathological characteristics were evaluated according to the Notch1/Notch3 receptors and BRAF(V600E) mutation in 187 patients with PTC who underwent definitive surgery. Expression of the Notch1 receptor was significantly associated with poor prognostic markers including large tumor size, nodal metastasis, capsular invasion, and extrathyroidal extension. However, there was no significant association between the clinicopathological characteristics and Notch3 receptor expression/BRAF(V600E) mutation. In multivariate analysis, Notch1 receptor expression showed a significant relationship with lymph node metastasis (P = 0.04). Notch1 receptor may be a predictor of lymph node metastasis and may be related to poor prognostic markers in patients with PTC. Further investigation of Notch1 receptor may further the understanding of the pathogenesis of nodal metastasis in PTC.     

Detection of BRAF V600E mutation and RET gene rearrangement in papillary thyroid carcinoma and their clinical significance

Objective To investigate the correlation between BKAF V600K mutation and RET gene rearrangement and clinical pathological factors in papillary thyroid carcinoma (ITC). Methods The samples from 180 FTC patients and 30 patients with other l>enign j>r malignant thyroid lesion as control from January K 2012 to January 2014 were collected. The surgical removal tumor tissues were used for D.N'A and KNA extraction, and the BRAF V600E mutation and'RET gene rearrangement were detected. The correlations letween BRAF V600E mutation ami RET gene rearrangement and sex, age, the primary focal size, thyroid capsule invasion, lymph node metastasis and the clinical stage were analyzed. Results The BRAF V600E mutation rale and the RET gene rearrangement rate in ITC group were 59.4 % (107/180) and 42.2 % (76/180), respectively, hut those were not found in control group. BRAF V600E mutation positive rates in different sex, age and primary tumor size had no statistical difference (P>0.05), whereas those in different thyroid extracapsular invasion (X2 = 5.46, P = 0.01), neck lymph node metastasis (X2 = 3.36, P 0.02) and clinical stage Or = 6.36, P=0.03) had statistical difference. Conclusions BRAF V600E mutation and RET gene rearrangement are related with extracapsular invasion, neck lymph node metastasis anil clinical stage HI-IV in PTC.     

是否合并桥本甲状腺炎的甲状腺乳头状癌患者的临床病理特征及与淋巴结转移相关性的分析

目的:探讨甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎患者临床病理特征以及合并桥本甲状腺炎对淋巴结转移的影响。方法:回顾性分析我院2014年10月至2019年10月术后病理证实为甲状腺乳头状癌3 411例患者临床资料,其中合并桥本患者498例,未合并桥本患者2 913例,经过倾向性评分匹配方法对两组患者进行匹配,得到组间协变量均衡样本,比较两组患者临床病例特征并分析患者淋巴结转移的危险因素。结果:经过倾向性评分匹配后,甲状腺乳头状癌患者是否合并桥本甲状腺炎仅与病灶大小和BRAF V600E基因突变显著相关（P＜0.05）,而与病灶数目、侵犯包膜、淋巴结转移、中央区淋巴结转移、颈侧区淋巴结转移以及淋巴结转移数目无关（P＞0.05）。Logistic回归分析显示年龄≥55岁PTC患者淋巴结转移的发生风险是年龄<55岁患者的0.957倍（OR=0.957,P＜0.001）。肿瘤病灶＞1 cm患者淋巴结转移的发生风险是病灶≤1 cm患者的2.697倍（OR=2.697,P＜0.001）。肿瘤病灶多灶的患者淋巴结转移的发生风险是单灶患者的2.186倍（OR=2.186,P＜0.001）。结论:合并桥本甲状腺炎与更小的肿瘤病灶和更高的BRAF V600E基因突变率显著相关,而与淋巴结转移无关。患者年龄≥55岁是甲状腺乳头状癌患者淋巴结转移的独立保护因素,而病灶>1 cm和病灶多灶是淋巴结转移的独立危险因素。     

BRAF mutations in thyroid tumors from an ethnically diverse group

Background

The molecular etiology of thyroid carcinoma (TC) and other thyroid diseases which may present malignant precursor lesions is not fully explored yet. The purpose of this study was to estimate frequency, type and clinicopathological value of BRAF exon 15 mutations in different types of cancerous and non-cancerous thyroid lesions originating in an ethnically diverse population.

Methods

BRAF exon 15 was sequenced in 381 cases of thyroid lesions including Hashimoto´s thyroiditis, nodular goiters, hyperplastic nodules, follicular adenomas (FA), papillary TC (PTC), follicular variant PTC (FVPTC), microcarcinomas of PTC (micro PTC; tumor size ≤ 1 cm), follicular TC (FTC), and non-well differentiated TC (non-WDTC).

Results

We identified BRAF mutations in one of 69 FA, 72 of 115 (63%) PTC, seven of 42 (17%) FVPTC, 10 of 56 (18%) micro PTC, one of 17 (6%) FTC, and one of eight (13%) non-WDTC. Most of the cases showed the common V600E mutation. One case each of PTC, FVPTC, and FTC harbored a K601E mutation. A novel BRAF mutation was identified in a FA leading to deletion of threonine at codon 599 (p.T599del). A rare 3-base pair insertion was detected in a stage III PTC resulting in duplication of threonine at codon 599 (p.T599dup). Patients with PTC harboring no BRAF mutation (BRAF^wt) were on average younger than those with a BRAF mutation (BRAF^mut) in the PTC (36.6 years vs. 43.8 years). Older age (≥ 45 years) in patients with PTC was significantly associated with tumor size ≥ 4 cm (P = 0.018), vessel invasion (P = 0.004), and distant metastasis (P = 0.001). Lymph node (LN) involvement in PTC significantly correlated with tumor size (P = 0.044), and vessel invasion (P = 0.013). Of notice, taken the whole TC group, family history of thyroid disease positively correlated with capsular invasion (P = 0.025).

Conclusions

Older age is manifold associated with unfavorable tumor markers in our series. The K601E identified in a PTC, FVPTC, and FTC seems to be more distributed among different histological types of TC than previously thought. The T599del is a yet undescribed mutation and the rare T599dup has not been reported as a mutation in PTC so far.     

多灶性甲状腺乳头状癌BRAFv600E基因突变及临床生物学特性分析

探讨多灶性甲状腺乳头状癌不同病灶的BRAFv600E基因突变情况及其临床生物学特性。方法:对86例多灶性与282例单发病灶的甲状腺乳头状癌进行对比,研究其临床生物学特征,并对病灶进行BRAFv600E突变检测分析。结果:86例多灶性甲状腺乳头状癌中,单侧病灶12例,双侧病灶74例;颈部淋巴结转移51例（59.3%）;合并微小癌者46例（53.5%）;合并桥本氏甲状腺炎者23例（26.7%）;局部侵犯10例（11.6%）;发生远处转移者1例（1.2%）;10年生存率91.9%。41.9%的患者所有病灶均有BRAFv600E突变,17.5%均不存在BRAFv600E突变,至少有40.6%的多灶性甲状腺乳头状癌是独立起源的。结论:多灶性甲状腺乳头状癌多发生于双侧甲状腺,合并微小癌及桥本氏甲状腺炎者较多,颈部淋巴结转移及局部侵犯也较多,但远处转移率及10年生存率与单发的甲状腺乳头状癌比较无明显差异,BRAFv600E突变可以间接预测不同病灶的起源问题,且有相当部分多灶性甲状腺乳头状癌的不同病灶是独立起源的。