反相高效液相色谱法测定槐米中槲皮素的含量

中药槐米为豆科植物槐Sophora japonica L的干燥花蕾，具有清热止血的功效，用于血热所致的各种出血症。槐米的成分十分复杂，主要有效成分是芦丁和槲皮素等黄酮类生物活性物质。槲皮素具有抗炎、抗氧化、抗过敏、抗菌、抗病毒等多方面的药理作用，其对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。槲皮素是芦丁的甙元。因此分析测定槐米中黄酮类化合物含量时，一般先通过酸水解方法，使芦丁转化成槲皮素。槲皮素的高效液相色谱测定方法已有文献报道，但槲皮素的提取方法为中国药典(2000版，第一卷)记录的甲醇提取法，而且提取与酸水解同时进行，提取率低，溶剂使用量大，因此提取成本高，且会造成环境污染。本实验利用芦丁在沸水与冷水中的溶解度不同，先提取槐米中的芦丁，然后再将其酸水解为槲皮素．大大提高了提取率，为槐米中药制剂开发研制提供了一种新技术。     

正交试验法优选槐米中槲皮素的提取工艺

目的 优选槐米中槲皮素的提取工艺。方法 采用正交试验法，以提取物中槲皮素的含量和槲皮素的提取率为指标进行试验。结果 优选出从槐米中提取槲皮素的最佳工艺为：用10倍量的0．05％氢氧化钠溶液煮沸4次，每次20min，调节pH值至6，取沉淀加10倍量的4％硫酸溶液微沸水解1h。结论 该工艺可提高槐米中槲皮素的提取率和纯度。     

微波法提取洋葱中槲皮素的意义

槲皮素属黄酮类化合物，蔬菜中以洋葱的含量较高，在临床上主要用于心血管疾病的治疗。它具有抗癌、防癌的作用，近年来对这方面开发应用的研究较多。也可做食品添加剂。用微波法从洋葱中提取槲皮素与经典提取方法相比，具有提取率高、费时少、耗能低等优点，不仅可提高洋葱的利用率，而且还可以降低槲皮素研究和应用的成本，因此，本研究具有非常重要的意义。     

内生镰刀菌漆酶辅助提取槐米中总黄酮的研究

目的研究内生真菌胞外漆酶在槐米总黄酮提取中的应用。方法内生镰刀菌在起始pH7.0的综合马铃薯培养基中,20℃下摇瓶培养6d,具有较高的漆酶活力(36.1U/mL)。槐米干粉投入真菌发酵液中进行酶解处理,比较酶料比、酶解温度、酶解时间和酶解液pH值对槐米总黄酮提取率的影响。结果槐米干粉以酶料比40∶1加入粗酶液中,在pH7.0、20℃下酶解处理1h后,总黄酮提取率可达11.4%,比常规提取法提高了28.7%。结论内生菌漆酶辅助提取法为槐米总黄酮提取的可行新方法。     

槲皮素及槐米提取物对小鼠Lewis肺癌的抑瘤实验研究

目的　观察槲皮素及槐米提取物对小鼠Lewis肺癌的肿瘤生长抑制作用 ,以及与顺铂联合治疗的效果 ,并探讨其对小鼠免疫功能器官重量和血常规指标的影响。方法　以槲皮素和槐米提取物制成受试溶液 ,以移植Lewis肺癌的ICR小鼠为动物模型 ,槲皮素试验组和槐米提取物试验组分别在移植前以槲皮素或槐米提取物连续灌胃 10d ,在移植后继续灌胃 16d ,顺铂治疗组在移植后隔天腹腔注射 1mg/kg剂量的顺铂 1次 ,肿瘤移植 17d后测定各组小鼠体重、瘤重、脾脏及胸腺的重量和血常规指标 ,计算抑瘤率 ,脾指数和胸腺指数。结果　槲皮素高、中、低剂量组的抑瘤率分别为 4 4 .5 %、4 2 .7%、34.3% ;槐米提取物高、中、低剂量组抑瘤率分别为 4 6 .4 %、4 3.8%、37.3%。顺铂治疗组的抑瘤率为 4 0 .2 % ,而顺铂 中剂量槲皮素组和顺铂 中剂量槐米提取物组的抑瘤率分别为 4 9.3%和 5 5 .2 %。小鼠荷瘤后出现脾脏重量和血常规指标的异常 ,经过治疗后 ,异常状态有明显改善。结论　经口给予槲皮素和槐米提取物对小鼠Lewis肺癌有良好的抑瘤作用 ,与顺铂联合治疗的效果明显增强。      

利用HPLC法测定槐米中槲皮素含量及意义

目的:探讨槐米中槲皮素含量的测定方法和意义。方法:采用微波辅助萃取槐米中槲皮素,利用HPLC测定槲皮素的含量;色谱条件:色谱柱为DiamonsilC18柱(200×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.02%H3PO4水溶液(60:40,v/v);流速为1mL/min;柱温为30℃;检测波长为254nm。结果:方法在5～100μg/mL呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.7%(RSD=1.7%)。结论:该方法灵敏度高,准确性和精密度均很好,适合于槐米中槲皮素含量的测定,具有非常重要的意义。     

应用正交设计法研究槐米炭炮制工艺

用正交设计,以槐米中所含的鞣质、芦丁,槲皮素为指标,研究槐米炭炮制工艺。试验数据经用多指标试验公式评分法处理,得出最佳制炭工艺方案,即铁锅温度     

多指标试验全概率公式评分法研究槐米炭炮制工艺

应用多指标试验全概率公式评分法结合正交设计，以槐米中所含鞣质、芦丁、槲皮素为指标，探求槐米炭炮制工艺，获最佳方案为Ａ３Ｂ１Ｃ２，即铁锅温度２２０℃，加温时间２０ｍｉｎ，药材投料量１９０ｇ。     

槐米提取物的制备工艺及其紫外吸收特性考察

目的：优选槐米防晒成分芦丁的最佳提取工艺。方法采用紫外分光光度法检测槐米提取液在波长200~400 nm各区间的平均吸收率,采用高效液相色谱法测定其主要成分芦丁含量。分别以槐米提取液紫外吸收率、芦丁含量为指标,对超声波提取工艺进行单因素考察,并采用L9(34)正交试验优选槐米芦丁的提取工艺。结果槐米提取液在UVA、UVB、UVC波段内对紫外线均有较强的吸收作用。槐米提取液的最佳提取工艺：乙醇浓度为70%,料液比为1：30,超声时间为30 min,超声温度为65℃。结论槐米提取液在紫外各区间均有较强吸光能力,具有很好的广谱防晒能力。超声波提取法具有时间短、提取率高等优点,可用于槐米防晒成分芦丁的提取。     

结肠靶向定位滴丸克癌素的提取工艺研究

目的 建立结肠靶向滴丸克癌素的提取工艺方法。方法 采用碱溶酸沉法从槐米中提取芦丁,再进行酸水解得到槲皮素;采用传统乙醇回流法从姜黄中提取总姜黄素,以姜黄中的总姜黄素含量为指标,通过正交表分析确定最佳提取工艺。结果 槲皮素的提取条件为：碱性pH 8~9,酸性pH 3~5条件下提取芦丁;得到精制芦丁加100倍量的2%硫酸酸水解90 min。姜黄的最佳提取工艺为：85%乙醇回流提取3次,每次1 h;得浸膏上硅胶柱收集氯仿洗脱部分得总姜黄素。结论 该工艺可行,可为结肠靶向滴丸克癌素的生产提供参考。     

表面活性剂SDS协同提取槐米总黄酮的实验研究

目的:研究表面活性剂SDS的加入对超声及回流提取槐米总黄酮的影响。方法:在超声及回流提取槐米黄酮的过程中,比较十二烷基硫酸钠(SDS)加入与否对总黄酮提取率的影响。结果:超声水提和回流水提时,SDS的加入能够增加槐米黄酮的提取率;超声醇提和回流醇提时,SDS的加入几乎不影响槐米黄酮的提取。结论:在多种提取方法中,回流醇提槐米总黄酮的提取率最高,SDS的加入没有起到增溶提取的效果。     

发酵槐米液中有效成分检测方法的建立

目的 建立利用高效液相色谱法(HPLC)测得槐米发酵液中芦丁和槲皮素含量的方法。方法 采用发酵法提高槐米中的芦丁和槲皮素含量。采用色谱柱为Phenomenex Gemini 5μ C18 110A (250 mm × 4.6 mm I.D.,5 μm);流动相为甲醇(B)-水(A)(0.05%甲酸)的溶剂系统线性梯度洗脱[0 min→15 min→20 min→25 min→26 min→36 min,甲醇-水(0.05%甲酸)比例为35:65→50:50→55:45→60:40→35:65→35:65];流速1.0 mL/min,槲皮素的检测波长254 nm,芦丁的检测波长为257 nm,柱温25℃。结果 芦丁和槲皮素在0.031~1 mg/mL质量浓度范围线性关系良好(R12=0.9997,R22=0.9991);精密度RSD分别为芦丁0.997%,槲皮素0.392%;稳定性RSD分别为芦丁0%,槲皮素0.05%;重复性RSD分别为芦丁1.405%,槲皮素1.649%;平均加样回收率分别为芦丁93.90%,RSD 1.55%,槲皮素为98.55%,RSD 1.65%。3批槐米供试品溶液中芦丁的含量为(19.9199±0.1436)mg/g,槲皮素的含量为(0.6501±0.0089)mg/g。结论 检测方法准确可靠、简便,适用于槐米发酵液中芦丁和槲皮素的含量测定。     

正交法优化槐米中芦丁的提取工艺

目的优选槐米的最佳提取条件。方法以槐米中所含成分芦丁含量和提取率为评价指标,采用L9(34)正交试验,对影响槐米的沸水煎煮提取效果的诸因素(药材的粉碎度、溶剂用量、提取次数、提取时间)进行优选。结果药材为细粉、溶剂2 500 mL、提取3次、提取时间40 m in提取效果最好。结论本实验为优化槐米中芦丁的提取工艺提供了参考依据。     

槐米中提取芦丁的实验研究

目的对从槐米中提取芦丁的工艺进行实验研究。方法采用3种不同的实验方法从槐米中提取芦丁。结果研究表明较佳的提取条件为:在加入Na2SO3作抗氧剂的条件下,提取液的条件是pH值在9~10,酸析出的条件是pH值在4~5。结论抗氧剂的加入阻止了芦丁在提取过程中被氧化,提高了芦丁的提取效率和纯度。     

微波辅助萃取槐米中芦丁工艺条件的探讨

芦丁是豆科植物槐树SophorajaponicaL.的花蕾即槐米中提取的植物原料药。槐米含芦丁约10%~28%。芦丁具有维生素P样作用,可防治毛细血管发脆而引起的出血症,用于高血压的辅助治疗;具有抗毛细血管脆性和异常的透过性作用。微波辅助提取(microwave-assistedextraction)具有快速、高效、安全、节能等优点,提取时间极短,设备简单,投资较少,无污染,具有绿色化学概念。因此本试验利用微波萃取技术辅助提取槐米中的芦丁,提取效果增大,用时缩短。1仪器与试剂格兰仕家用微波炉PW700型(改装,顶部开口加回流冷凝装置),普通家用粉碎机,Agilent1100型液…     

细梗胡枝子中槲皮素提取分离方法的探讨

目的以湖北罗田产的豆科植物细梗胡枝子中槲皮素进行提取分离的结果,比较常规提取法和新型的生物分离技术提取法的优势,探讨生物分离技术在中药研究中的应用。方法分别采用回流提取-吸附树脂法、超声提取-萃取分离法和热回流提取-萃取分离法对细梗胡枝子中槲皮素进行提取分离,并测定其含量。结果经分析发现不同的提取方法所提得的槲皮素含量存在明显差异,其中超声提取-萃取分离法提取的含量最多。结论细梗胡枝子中的槲皮素的提取分离方法,采用超声提取-萃取分离方法可能更好。     

HPLC法测定槐米中槲皮素成分的微波辅助提取

目的 建立高效液相色谱法测定槐米中槲皮素的含量.方法 用正交试验法确定微波辅助提取的最优条件,采用Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5 μm),以甲醇-0.4%磷酸溶液(70∶30)为流动相,流速0.8mL·min-1,检测波长370nm.结果 线性范围(8.92～89.2)μ g·mL-1,r=0.9991,加样回收率98.59%(RSD为2.26%).结论 本方法简便、准确,所得结果稳定、重复性好,可作为槐米药材质量控制的定量方法.     

走马胎槲皮素提取工艺研究及含量测定

目的优选走马胎槲皮素的提取工艺,建立走马胎槲皮素含量测定方法。方法以走马胎槲皮素提取率为指标,通过单因素考察,研究走马胎槲皮素的最佳提取工艺;采用紫外可见分光光度法,以槲皮素为对照品,Al(NO3)3显色在波长270 nm处对样品中的槲皮素进行含量测定。结果走马胎中槲皮素最佳提取工艺为:料液比1:10(g:m L),60%乙醇提取1 h。在此提取条件下,三份走马胎中槲皮素平均含量为1.38%。结论建立了超声提取走马胎槲皮素含量测定方法,此方法简单、稳定、参数准确,有一定的实用价值。     

槐花、槐米和槐叶脂肪酸成分的GC-MS分析

目的:研究槐花、槐米和槐叶中的脂肪酸成分。方法:采用索氏提取法分别提取槐花、槐米和槐叶中的脂溶性成分,用气相色谱-质谱联用检测其化学成分。结果:从槐花中分离鉴定了22个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的86.73%,从槐米中分离鉴定了16个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的55.74%,从槐叶中分离鉴定了14个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的66.5%。结论:有7种化合物:硬脂酸、肉豆蔻酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、山嵛酸和植醇是槐花、槐米和槐叶所共有的。     

几种炭药研究概要

炭药在临床上应用广泛 ,多数药物经炒炭或煅炭后 ,均有不同程度的止血作用 ,元·葛可久《十药神书》曰 :“大抵血热则行 ,血冷则凝 ,见黑则止” ,即“血见黑止 ,红见黑止”的传统炭药止血理论。现普遍认为制炭过程中理化成炭能够生成一定数量的炭素(活性炭 ) ,具有吸附、收敛作用 ,能够促进止血过程 ;鞣质的增加而增强收敛止血作用 ;抗凝血成分减少而止血作用增强等。笔者就几种常见炭药的研究情况作以简述。1　槐花 (米 )槐花主要含芦丁、槲皮素、异鼠李素及鞣质等 ,现代对槐米的炮制研究主要是以芦丁和鞣质的含量及出凝血时间等为指标 ,比…