一起鼠伤寒沙门菌单相变异株引起食源性疾病暴发的检测分析

目的对1起农村家宴所致疑似细菌性食源性疾病暴发进行病原学检验与溯源分析,为患者诊治、事件处置提供依据。方法 2019-05广元市某县发生1起村民家中自办丧宴所致食源性疾病暴发事件,根据流行病学调查信息,采集患者粪便或肛拭和可疑食物,开展病原菌分离鉴定、药敏试验、脉冲场电泳(PFGE)试验、分子分型聚类与溯源分析。结果从3例患者粪便标本和4份可疑食品中均检出鼠伤寒沙门菌单相变异株;PFGE聚类分析结果显示患者分离株与食品分离株PFGE型别一致;所有分离株均对氨苄西林、四环素、氯霉素、复方新诺明耐药。结论本次食源性疾病由鼠伤寒沙门菌单相变异株污染食品所致。     

脉冲场凝胶电泳在一起慕尼黑沙门菌食源性暴发中的应用研究

目的 脉冲场凝胶电泳(PFGE)在食源性疾病病原菌诊断中的应用.方法 采集19例患者和18名厨师的肛拭子、9份自制冷饮、2份井水以及5例患者的急性期和恢复期血清.同时采集未发病学生大便10份,血清5份,作为正常人对照.用传统的方法进行致病菌的分离和表型鉴定,对所分离的菌株参照美国疾病预防控制中心(CDC)的实验方法用PFGE进行DNA分子分型,使用BioNumerics软件进行聚类分析.方法 从19份食物中毒患者肛拭子中分离出14株慕尼黑沙门菌、从9份可疑食物中分离出3株慕尼黑沙门菌、从18名厨师肛拭子中分离出7株慕尼黑沙门菌,所分离菌株生化结果一致、耐药性相同,患者恢复期血清比急性期血清对所分离的菌株抗体有4倍以上增长.23株分离株的PFGE型完全一致.结论PFGE能直观判断肠道致病菌的亲缘关系,及时确定传染源、传播途径和流行范围,是有效控制食源性疾病大面积暴发的早期预警手段.     

一起肠炎沙门菌引起的食源性疾病调查及病原分析

目的对一起因食用快餐而引起的食源性疾病进行调查分析,查明病原菌,为采取相应防治措施提供依据。方法采集此次事件中某快餐饭店当天的剩余食物及加工剩余原料10份、食品加工场所环境涂抹样品5份、肛拭子18份(加工人员4份、学生病例14份),共33份样品进行分离培养,对分离菌株进行血清分型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果从所检样品中分离出11株肠炎沙门菌(其中5份剩余食物及加工剩余原料、3份食品加工场所环境涂抹样、1份加工人员肛拭子、2份学生病例肛拭子),血清分型相同,经PFGE分型分析证实均为同源菌株。结论综合现场流行病学调查、患者临床症状与体征及实验室检验结果,确认该起食源性疾病由肠炎沙门菌污染引起,PFGE可有效应用于食源性疾病溯源。     

一起鼠伤寒沙门菌引起食物中毒的病原鉴定与同源性分析

目的对引起本次食物中毒主要病原菌鼠伤寒沙门菌进行生物学鉴定,血清学分型以及分子的溯源分析,研究分析其相关性,从而达到准确溯源的目的。方法对3份患者肛拭子样本和1份食品样本分离到的沙门菌进行菌株鉴定,采用美国临床实验室标准化研究所CLSI标准推荐微量肉汤稀释法,对分离株进行15种抗生素敏感实验,利用限制性内切酶Xba I酶切沙门菌基因组进行脉冲场凝胶电泳,通过Bio Numerics 6.6软件对电泳图谱进行同源性比较。结果3份患者样本和1份食品留样中共检出鼠伤寒沙门菌4株,均对氨苄西林、四环素、红霉素耐药。运用PFGE对所分离到的鼠伤寒沙门菌进行基因分型,其PFGE图谱相似性系数为100%。结论本次食源性疾病暴发疫情是由进食被鼠伤寒沙门菌污染的食品所致,通过PFGE对致病菌进行溯源,分析其溯源关系,能追踪到菌株来源,PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究。     

一起山夫登堡沙门菌食物中毒的检测与溯源

目的查明一起食物中毒事件的病原,并对其进行溯源分析。方法对4份患者样本和8份食品留样进行病原菌的分离、培养和鉴定,对分离株进行药敏实验和脉冲场凝胶电泳分子分型。结果 4份患者样本和1份食品留样中检出山夫登堡沙门菌,5株分离菌株均对磺胺甲恶唑耐药,其PFGE图谱相似性系数为100.0%。结论本起食源性疾病暴发疫情是由进食被山夫登堡沙门菌污染的食品所致。     

副溶血性弧菌食物中毒的分子分型及耐药性分析

目的对1起副溶血性弧菌引起的食物中毒病原菌进行分子分型及耐药性分析。方法采用脉冲场凝胶电泳进行分子分型,利用药敏卡通过仪器对分离菌株进行药敏检测。结果从患者肛拭分离的9株副溶血性弧菌与可疑剩余食物中的菌株PFGE图谱完全一致,相似度为100％。分离的副溶血性弧菌菌株的耐药结果基本一致：均对氨苄西林耐药,对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明等敏感,对头孢一代、头孢二代中度敏感,部分头孢三代中度敏感。结论利用脉冲场凝胶电泳对本起副溶血性弧菌引起的食物中毒病原菌进行分子分型,为食源性疾病溯源及分子流行病学研究提供科学依据。     

一起由金黄色葡萄球菌引起幼儿园食源性疾病暴发事件的病原学分析

目的 对一起疑似为金黄色葡萄球菌导致的幼儿园食源性疾病暴发事件进行葡萄球菌肠毒素检测,结合病原学分析,为明确食源性疾病诊断提供依据。方法 对分离自某起食源性疾病暴发事件的6株金色葡萄球菌分离株进行生化鉴定,采用微孔板酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)进行肠毒素型别检测,并应用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)法对菌株进行分子分型,应用BioNumerics软件对不同来源的菌株进行比对,分析菌株之间的相关性。结果 34份样品检出6株金黄色葡萄球菌,肠毒素检测均为阳性,其中3株(分别来源于患者呕吐物、患儿粪便、切菜台)检出SEA、SEC、SEE等3种肠毒素,2株(分别来源于食物样本、生活老师粪便)检出SEE 1种肠毒素,1株(来源于食物样本)检出SEA、SEC等2种肠毒素。PFGE分型结果显示,1株来源于患者呕吐物的株菌和1株来源于切菜台的菌株具有高度同源性(96.8%)。结论 本起食源性疾病暴发事件由具有肠毒素的金黄色葡萄球菌污染切菜台导致,葡萄球菌肠毒素检测对明确食源性疾病的病因十分重要,PFGE分型技术有助于食源性疾病的溯源分析。关键词: 金黄色葡萄球菌; 肠毒素; 食源性疾病     

一起伦敦沙门菌引起的食源性疾病调查及病原分析

目的对一起食用凉拌卤肉制品而引起的食源性疾病进行调查分析,为采取相应防治措施提供依据。方法采集剩余卤制品3份及患者肛拭子9份进行培养,对分离株进行血清及生化鉴定、药敏试验和PFGE分型。结果从卤制品中检出伦敦沙门菌3株,患者肛拭子中分离到2株伦敦沙门菌,5株分离株血清型抗原式均是010:l、v:1、6,PFGE型别一致,生化代码4株为0015610461526210、1株为0015610461526200,致病因子波及22人,均发病,潜伏期为13 h~20 h;5株分离株抗生素敏感性的共同点是对头孢一代、二代耐药,对头孢三代敏感;对喹诺酮类、黄胺类及碳青霉烯类敏感;对氨基糖甙类耐药;另一单独代码分离株对青霉素及四环素类敏感,其他4株均耐药。结论该起食源性疾病由伦敦沙门菌污染食物引起,应加强食品安全监管和宣传指导,尽量避免食源性疾病的发生。     

1起肠炎沙门菌引起的食源性疾病暴发事件的流行病学调查

目的对1起食源性疾病暴发事件进行病原学分子流行病学调查,以便明确病因,进行有效的预防控制。方法按照病例定义开展病例搜索,采用统一的问卷对员工食物暴露情况进行调查,采用回顾性队列研究寻找可能危险因素;采集病例粪便、肛拭子样本及环境样本进行荧光定量PCR核酸检测和细菌分离培养,对分离到的菌株进行PFGE分型和聚类分析。结果首例病例发病时间为2013年6月15日3时30分,末例病例发病时间为6月16日22时,共发生病例56例,均为夜班员工,夜班员工罹患率为40．00％（56／140）。流行曲线为点源暴露模式;回顾性队列研究结果提示6月14日夜餐的炸鸡翅是危险食物（RR=∞,P〈0．01）。共采集病例粪便、肛拭子和环境样本36份,其中32份检出同一血清型的肠炎沙门菌（09：Hg,m）,检出率为88．9％;分离到的17株菌株PFGE图谱带型完全一致。结论结合流行病学调查、临床资料和实验室病原学检测结果,判定该起事件为1起可能由鸡翅引起的肠炎沙门菌感染的食源性疾病暴发疫情,建议加强食品溯源体系建设,做好食品安全监管工作。     

一起维尔肖沙门菌食物中毒病原学检测分析

目的对一起食物中毒事件中分离的维尔肖沙门菌（Salmonella virchow）进行病原学检测分析,为该事件的处置提供实验依据。方法采集患者肛拭、饭店厨师手拭和肛拭、菜板涂抹样、抹布共10份样品,依照GB/T4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行菌株分离、生化反应、血清学分型、药敏试验等;根据国际食源性疾病分子分型国家电子网络（National Molecular Subtyping Netwok for Foodborne Surveillance,PulseNet）公布的沙门菌脉冲场凝胶电泳分型方案,用BioNumerics软件对酶切图谱进行聚类分析。结果在4份患者肛拭和1份饭店菜板涂抹样中检出5株维尔肖沙门菌,生化谱均为0017610541566210,血清型为6,7：r：1,2,均对大部分抗生素敏感,但对阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素等氨基糖苷类抗生素耐药;对头孢唑啉、头孢替坦等部分头孢类抗生素耐药。经XbaⅠ和BlnⅠ两种限制性内切酶酶切,脉冲场凝胶电泳后,菌株带型相似性均达到100%,提示为同脉冲场凝胶电泳（PFGE）带型。结论病原学检测分析结果结合流行病学调查证实,这是一起因食用被维尔肖沙门菌污染的食物而发生的中毒事件。     

农村寄宿制学校宋内志贺菌菌痢暴发及全基因组溯源分析

对陕西省3起寄宿制学校感染性腹泻暴发事件进行流行病学调查、病原分离鉴定及分子溯源分析,为科学指导临床诊断治疗及流行病学调查工作提供参考.方法 对陕西省3起寄宿制学校感染性腹泻事件开展现场调查,描述疫情三间分布,分析流行特征.采集病例肛拭子标本、剩余食物、环境及水源标本,进行病原分离鉴定.选择代表菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型,全基因组多位点序列分型(MLST),单核苷酸多态(SNP)分析,预测毒力基因谱及耐药基因谱.结果 2017年8-9月报告的3起疫情共发病282例,以发热、腹泻为主,里急后重及粘液脓血便症状不明显,均为学生群体,性别间差异无统计学意义.病例肛拭宋内志贺菌检出率为62.22% (56/90),肛拭ipaH基因检测阳性率为69.70% (46/66),环境样本阳性率为12.31% (8/65);PFGE,全基因组MLST,SNP分析表明,3起疫情代表菌株不同源.毒力基因预测共有12种毒力基因.耐药基因预测有氨基糖苷类、甲氧苄啶类、磺胺类、β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类的耐药基因.结论 陕西省3起寄宿制学校宋内志贺菌引起的细菌性痢疾暴发之间无直接关联,病原菌毒力基因谱与国内常见宋内志贺菌特征一致,存在多重耐药基因.     

一起菌痢疫情实验室检测分析

目的查明某校食物中毒事件的原因,为有效控制和处置疫情提供技术支持。方法采集患者粪便、肛拭子、呕吐物;厨师粪便、肛拭子;留样食物和水样进行致病菌检测,对分离的可疑致病菌进行鉴定、药敏试验、PCR毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型比较溯源。结果从患者样品中分离出13株宋内志贺菌;经PFGE分子分型证明13株菌为同一带型;所有菌株均带有ipa H基因,11株携带ial基因,3株携带Sen基因,均不带有Set1基因;分离株对磺胺耐药率最高为61.54%。结论结合实验室结果和流行病学调查,可证实宋内志贺菌是引起这次菌痢疫情的病原菌。     

多重实时PCR及脉冲场凝胶电泳技术在一起食源性疾病暴发事件中的应用

目的探讨多重实时PCR(multiplex real-time PCR,MRP)和脉冲场凝胶电泳(pulse field gel elec-trophoresis,PFGE)技术在食源性疾病检测中的应用。方法利用多重实时PCR技术对39份样本增菌培养物进行沙门菌侵袭蛋白A基因(invA)、肠产毒素性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因(elt)、志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌侵袭力基因(ipaH)的检测,并根据多重实时PCR的结果有针对性的开展了常规的分离培养鉴定工作。应用PFGE对10株分离菌株进行分子分型。结果 10份患者肛拭检出沙门菌侵袭蛋白A(invA)基因,并从这10份样本中分离到10株都柏林血清型沙门菌。39份样本均未检出肠产毒素性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因(elt)、志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌侵袭力基因(ipaH)。10株都柏林血清型沙门菌PFGE条带完全一致。结论多重实时PCR有助于提高细菌性食源性疾病的判明率,指导病原菌的常规分离培养,PFGE可用于细菌性食源性疾病的追踪溯源。     

河南省4起食源性疾病暴发事件的关联溯源分析

目的 对4起食源性疾病暴发事件进行病原菌分离鉴定和关联性溯源分析,调查事件发生原因。方法 采集相关样品进行实验室检测,利用基质辅助激光解析飞行时间质谱和VITEK 2 compact全自动微生物鉴定仪对分离菌株鉴定,按照试剂盒说明进行血清学分型,利用脉冲场凝胶电泳和BioNumerics 7.6软件对其进行分子生物学分型和同源性溯源分析。结果 4起食源性疾病暴发事件暴露人数共475人,患病89例,罹患率18.74%,死亡0例。从4起暴发事件食物样品和病例粪便样品中均检出乙型副伤寒沙门菌,4株食物分离株和3株病例分离株的聚类分析结果显示100%同源性。结论 本次食源性疾病暴发事件由乙型副伤寒沙门菌引起,所有分离株均为同一带型,溯源结果显示4起暴发事件原因食品为同一来源。     

一起由乌盖利沙门菌引起的食物中毒调查

目的在区域性食源性疾病监测网络实验室中了解本区域内沙门菌的病原分布情况、流行情况、生化鉴定、血清分型、抗生素敏感性试验和致病基因情况。方法按照区域性食源性疾病监测网络实验室平台建立的研究和达州市食源性疾病监测方案实施。结果对5份患者肛拭,7份食品进行细菌分离、生化试验与血清学诊断,其中1份患者肛拭,3份食品检出乌盖利沙门菌。结论证实这是1起由乌盖利沙门菌引起的食物中毒暴发事件。乌盖利沙门菌是一个极少见的血清型,为四川省首次分离出来。     

一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病事件的病原学检测结果分析

目的 对绍兴市某学校一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病事件进行病原学研究，为食源性疾病突发事件的应急处置提供依据。方法 采集该事件患者肛拭子、食堂工作人员肛拭子、留样食品样品和环境样品共46份，采用快速多重病原基因检测系统筛查病原体，锁定目标病原后，将病原菌分离鉴定与实时荧光PCR同步检测，采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)探究菌株同源性，采用琼脂稀释法检测菌株耐药情况。结果 采集的46份样品中，分离鉴定出空肠弯曲菌4份，均来自患者。PFGE聚类分析结果显示，4株空肠弯曲菌同源性为100.0%。药敏结果显示，4株菌对萘啶酸、环丙沙星、氟苯尼考和四环素4种抗生素均耐药。结论 这是绍兴市首次由空肠弯曲菌感染引起的食源性聚集疫情，建议加强学校食堂卫生管理、在校学生和教职员工的健康教育，养成良好的卫生习惯。     

1起副溶血性弧菌食物中毒的菌型鉴定及同源性分析

目的对1起副溶血性弧菌引起的食物中毒进行菌型鉴定及同源性分析,为食物中毒疫情处置提供参考。方法采集病例和食物、外环境标本进行菌株型别的分离鉴定,并对菌株同源性进行分析。结果共采集标本17份,其中3份外环境标本和5份病例标本检出副溶血性弧菌,病例菌株血清型均为O3:K6,环境菌株血清型为O4:KUT和O1:KUT。所有菌株trh基因阴性,病例菌株tdh阳性,环境菌株tdh阴性。脉冲场凝胶电泳(PFGE)指纹图谱显示所有病例菌株具有相同的PFGE图谱,与环境菌株的PFGE图谱的相似性为64.1%。结论该起食源性疾病暴发疫情是由O3:K6型副溶血性弧菌引起的食物中毒事件。     

一起不典型症状宋内志贺菌暴发疫情的实验室诊断

目的分析本实验室对1起由宋内志贺菌引起的不典型临床症状、疑似不明原因发热暴发疫情的实验室检测过程,为类似事件的实验室诊断提供参考。探讨通过增菌前后Ct值变化,荧光PCR用作病原菌确诊方法的可能性。方法采用总大肠菌群酶底物法测定总大肠菌群和大肠埃希菌,常规培养法和荧光PCR法测定患者咽拭和肛拭样品以及水样中病原微生物,用MIC法对分离菌株进行体外药敏试验。结果 10份饮用水中6份总大肠菌群和大肠埃希菌,不符合GB5749-2006的要求。常规培养9份肛拭均检出宋内志贺菌,而10份水样均未检出肠道致病菌。荧光PCR结果 9份肛拭和5份水样检出志贺菌核酸,5份水样增菌后Ct值较增菌前有明显下降。肛拭中分离的9株菌对青霉素类抗生素中的阿莫西林、哌拉西林、替卡西林100%耐药,对磺胺类、β-内酰胺类、头孢菌素类(1-4代)、氨基糖苷类等存在不同程度耐药。结论实验室应用指标菌检测、常规培养和荧光PCR技术,48 h即找到引起疫情暴发的原因,为疫情的控制提供了及时科学的依据。药敏试验为患者治疗提供了正确的药物选择依据。     

济源市一起致泻大肠埃希菌引起食源性疾病的实验室检测及溯源分析

目的 分析2020年河南省济源市报告的一起食源性疾病暴发事件,查明事件原因,制定有效的食源性疾病预防控制措施。方法 采用现场流行病学方法对此次食源性疾病暴发事件开展病例调查;采集可疑剩余食品及患者呕吐物和粪便等样本,以传统方法进行食源性致病菌的分离鉴定,采用多重荧光PCR法对分离到的致病性大肠埃希菌进行毒力基因检测,并用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对菌株聚类分析。结果 调查病例79例,罹患率25.08%(79/315),临床表现以腹痛、恶心和腹泻为主;采集标本22份（食品样本10份,患者标本12份）,从五香牛肉、大刀耳片和3份粪便共计5份样本中检出致病性大肠埃希菌,检出率22.73%;分离菌株18株,经多重荧光PCR检测,均显示肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）毒力基因阳性;所有菌株经PFGE分析显示同源性>85%。结论根据现场流行病学调查和实验室检测结果,可判断该食源性疾病是因食用被EAEC污染的食品引起;多重荧光PCR法和PFGE分型技术可作为致病性大肠埃希氏菌检测的重要参考依据。     

某地3起沙门菌肠炎暴发疫情溯源分析

目的某地区1月内连续地发生3起由肠炎沙门菌引起的食源性疾病,应用脉冲场凝胶电泳分型技术对疫情分离菌株进行分析,为查找传染源和传播途径,控制疫情发展提供依据。方法运用限制性内切酶XbaⅠ,对3起疫情中分离的7株肠炎沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型,BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析。结果 3起疫情中分离的7株肠炎沙门菌交叉分为3个基因型,其中分别从疫情1、2、3中的4株菌同属基因型1,分别从疫情1、2中分离的2株菌同属基因型2,从疫情1中分离的1株菌属基因型3。结论此地区1月内暴发的3起疫情分离菌株的PFGE型别具有相同的型别,提示该地1月内暴发的3起疫情有共同的传染来源。