介入联合仑伐替尼桥接治疗超米兰标准肝癌肝移植2例报道

目的 探究超米兰标准肝癌肝移植术前肝癌降期或桥接治疗的新方案,评价介入联合仑伐替尼治疗超米兰标准肝癌后实施肝移植的安全性和疗效。方法 回顾性分析我中心2例超米兰标准肝癌通过介入治疗联合仑伐替尼靶向治疗后成功接受肝移植患者的临床资料,术后规律复查血清学标记物、CT检查或肝脏彩超等评估患者的预后及肿瘤复发情况,评估该桥接方案的安全性和疗效。结果 第一例患者为肝癌伴门静脉右前支癌栓,为我国肝癌分期（CNLC分期）Ⅲa期,通过介入联合仑伐替尼治疗2个月,患者接受同种异体原位肝移植术,术后切口愈合良好,痊愈出院,术后病理提示肿瘤绝大部分坏死,仅周围见少许异形细胞团,规律随访16个月,未见肿瘤复发。第二例患者为肝癌伴肝中静脉侵犯,为CNLC分期Ⅲa期,通过介入联合仑伐替尼治疗1个月,肿瘤学评价为SD,患者接受同种异体原位肝移植术,术后切口愈合良好,痊愈出院,术后病理提示绝大部分组织已坏死,仅见少量肿瘤细胞呈条索样、腺样排列,规律随访14个月,未见肿瘤复发。两例患者目前肝功能正常,无其他并发症发生。结论 介入治疗联合仑伐替尼靶向治疗对晚期肝癌能较好的控制肿瘤进展,可作为超米兰标准肝癌肝移植前有效的桥接治疗手段,近期预后良好,对腹部切口的影响以及患者的中远期疗效需增加样本量并长期随访。     

初始不可切除肝癌转化治疗后行肝切除术九例临床特征分析

目的 分析初始不可切除的肝癌转化治疗后再行肝切除术的临床特征,为初始不可切除肝癌的治疗提供依据。方法 回顾性分析航天中心医院普外科和北京大学肿瘤医院裕和肿瘤中心2019年1月至2021年4月间收治的9例初始不可切除的肝癌患者临床资料。结果 9例患者均为男性,中位年龄48（33~61）岁;均合并乙肝肝硬化,肝功能Child-Pugh A级4例,B级5例;巴塞罗那分期B期4例,C期5例;PS评分均≤1分。转化治疗方案：6例行帕博利珠单抗联合仑伐替尼治疗,1例行卡瑞利珠单抗联合仑伐替尼治疗,1例行卡瑞利珠单抗联合阿帕替尼治疗,1例行信迪利单抗联合仑伐替尼治疗。治疗过程中发生高血压5例、乏力6例、腹泻2例。转化治疗后再行肝切除术：行左半肝切除术5例,右半肝切除术3例,左半肝联合尾状叶切除术1例,均为R0切除。1例患者因腹腔出血再次手术,其余患者无明显手术相关并发症发生。术后住院时间（12.9±2.1）d;术后中位随访时间10.1个月,随访期间肝癌复发2例,其余7例患者生存状态良好,随访期间无死亡病例出现。结论 免疫治疗联合靶向治疗在初始不可切除的肝癌转化治疗中有效且安全。     

胆管癌中14-3-3蛋白各亚型的表达及其临床意义

目的 探讨14-3-3蛋白各亚型在胆管癌组织中的表达情况及其临床意义.方法 采用石蜡包埋组织,进行免疫组织化学染色,分析14-3-3蛋白各亚型在20 例胆管癌及5 例胆管癌旁正常组织的表达状态,探讨其与胆管癌临床病理参数之间的关系.结果 14-3-3 蛋白β、γ、ε、ζ、η、θ和σ亚型在胆管癌组织原发灶表达的阳性率分别为85.00% (17/20)、85.00% (17/20)、55.00% (11/20)、75.00% (15/20)、50.00% (10/20)、80.00% (16/20) 和80.00%(16/20).其中,β、γ、η、σ、ε和θ亚型与癌旁正常胆管组织比较,具有统计学意义(P<0.05),而ζ亚型无统计学意义(P>0.05);14-3-3蛋白阳性表达率与胆管癌的分化程度、恶性级别及是否淋巴结转移均无差别(P>0.05).结论 14-3-3蛋白七个亚型中β、γ、η、σ、ε和θ亚型在胆管癌原发组织中高表达,表明14-3-3蛋白在胆管癌的发生过程中具有重要作用.     

结肠瓣膜成形术诱导SD大鼠短肠综合征模型结肠上皮化生的机制研究

目的 结肠瓣膜成形术可以使瓣膜前结肠上皮具有类似小肠的吸收功能,本研究拟进一步阐明结肠瓣膜成形术诱导结肠上皮向小肠上皮化生的机制。方法 将40只大鼠随机分配到两组（各20只）,对照组大鼠切除80%小肠,实验组同时行结肠瓣膜成形术。实验后30周处死大鼠,取回肠、瓣膜前结肠及瓣膜后结肠作检测。原位荧光免疫组化法检测肠上皮细胞内Wnt7b蛋白和β-catenin蛋白。结果 实验组大鼠比对照组的大鼠重。HE染色光镜检查发现瓣膜近端的结肠具有类似小肠上皮的特征（上皮增厚、肠隐窝增长以及杯状细胞减少）。免疫组化检查发现瓣膜近端结肠上皮的Wnt7b蛋白和β-catenin蛋白比瓣膜远端结肠上皮的大幅增多。结论 结肠瓣膜成形术促进结肠上皮的吸收功能,其机制很可能是Wnt/β-catenin通路介导的肠上皮干细胞再生。     

胆囊癌中TβR Ⅰ与细胞增殖及细胞周期的关系

目的 探讨T13R Ⅰ与胆囊癌细胞增殖和细胞周期的关系,分析其在胆囊癌发病中的机制,评价其对胆囊癌预后的价值.方法 用免疫组化法对原发性胆囊癌及胆囊腺瘤、慢性胆囊炎行转化生长因子βⅠ型受体(transforming growth factor β receptor type Ⅰ,TβR Ⅰ)、增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)、细胞周期素E(Cychn E)进行检测,对胆囊癌患者进行随访.结果 胆囊癌中TβR Ⅰ阳性表达率34.29%,显著低于胆囊腺瘤、胆囊炎(P均小于0.05).伴淋巴结和远处转移者TβR Ⅰ阳性表达率明显低于无转移者(P<0.05),TβR Ⅰ阳性表达率与PCNA LI呈负相关(r=0.4024,p=0.0166).TβR Ⅰ表达阳性者预后比阴性者好(P<0.05).结论 TβR Ⅰ与胆囊癌细胞增殖和细胞周期关系密切,是判断胆囊癌发生发展的重要生物学标志.TβR Ⅰ低表达而导致TGF-β负性生长调控作用的逃逸,可能是胆囊癌变过程中的重要机制.TβR Ⅰ是判断胆囊癌预后的良好指标.     

胃癌组织中HIF-1α,CD68及CD206在胃癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的 分析低氧诱导分子-1α（HIF-1α）及肿瘤相关巨噬细胞（TAM）相关抗原CD68、CD206在胃癌及癌旁组织中的表达情况。方法 利用免疫组化技术检测43例胃癌和癌旁组织中HIF-1α、CD68、CD206的表达状态,计算三种蛋白表达的阳性率及阳性细胞数,揭示其与临床因素的相关性。结果 HIF-1α、CD68、CD206的阳性表达率分别为58.1%、69.8%、51.2%,均高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌、癌旁组织中每个视野下CD68⁺细胞数分别为（39.7±7.6）、（8.5±2.8）个;CD206⁺阳性细胞数分别为（32.0±9.2）、（3.4±1.8）个;HIF-1α⁺细胞数（22.9±5.6）、（2.1±1.2）个;组间比较差异均有统计学意义（P<0.01）。胃癌组织中CD206⁺细胞数与HIF-1α⁺细胞数表达呈正相关（P<0.01,R²=0.641）。三种蛋白的表达与胃癌病理分期、淋巴结转移明显相关（P<0.05）。结论 胃癌组织中CD68、CD206、HIF-1α表达率及阳性细胞数明显增加,且CD206与HIF-1α表达呈正相关。胃癌缺氧区域对M2型巨噬细胞有趋化作用,促进胃癌发生发展。     

一氧化氮与阻塞性黄疸肾功能障碍关系的实验研究

目的: 研究一氧化氮(N0)与阻塞性黄疸(OJ)肾功能障碍的关系. 方法: 雄性SD大鼠胆总管结扎后随机分成5 d、10 d及15 d三组(B1组、B2组、B3组),同时建立对应的假手术对照组.观察肾功能的变化,同时测定血和肾组织N0水平及一氧化氮合酶(NOS)活性,并用图像分析检测NOS-mRNA于肾脏表达的部位和量的变化. 结果: B1、B2及B3各组的血及肾组织NO含量分别是(43.72±10.61)μm01/L,(0.515±0.082)μmol/g@pro;(34.44±9.63)μmol/L,(0.375±0.096)μmoL/g@pro;(27.34±8.88)μmol/L,(0.251±0.086)μmol/g@pro.血及肾组织NO与内生肌酐清除率(Ccr)、肾皮质血流(RCBF)呈正相关.肾组织iNOSmRNA表达增加,血和肾组织NOS活性降低. 结论: 血和肾组织NO水平下降,是导致OJ时肾功能损伤的原因之一,体内NO水平的持续下降是由于NOS活性降低而非NOS基因表达减少.     

肝硬化合并肝癌患者围手术期糖代谢的临床分析

目的 探讨肝硬化合并肝癌患者围手术期糖代谢的临床特点,以便更好地控制患者术前血糖. 方法 检测40例肝硬化合并肝癌患者空腹及服糖后0.5,1,2,3 h血糖(BG)、胰岛素(INS)、C肽(C-P)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-IS),10名健康者为对照. 结果 肝癌组糖耐量显著低于正常组.血清胰岛素测量:正常对照组空腹为(10.3±3.7)mIu/L,服糖后0.5,1,2,3 h分别为35.2±12.8,65.1±10.2,19.5±11.2,12.2±10.1 mIu/L;肝癌组空腹为(20.4±5.7)mIu/L(P<0.05),服糖后0.5,1,2,3h分别为55.1±12.6,95.1±14.2,75.3±21.5,36.4±16.5 mIu/L(P值均<0.05).血清C肽测定:正常对照组空腹为(1.5±0.3)ng/ml,服糖后0.5,1,2,3 h分别为4.1±0.1,6.1±1.4,1.9±0.6,2.1±0.9ng/ml;肝癌组空腹为(3.2±0.1)ng/ml(P<0.05),服糖后0.5,1,2,3 h分别为6.3±0.3,10.1±0.9,8.3±1.2,4.8±1.1 ng/ml(P值均<0.05).胰岛素抵抗指数(IR)对照组和肝癌组分别是2.42和5.26(P<0.05),胰岛β细胞功能指数(IS)对照组和肝癌组分别是93.6和177.4(P<0.05).肝癌组中Child B的患者口服葡萄糖2h后,血糖、胰岛素和C肽明显高于对照组和Child A的患者. 结论 肝硬化合并肝癌患者容易引起糖代谢异常,主要表现为糖耐量降低、胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能异常,糖代谢异常与肝功能状态有关.     

双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7增殖及凋亡的影响

目的建立乐伐替尼肝细胞肝癌(简称"肝癌")细胞耐药模型,以研究双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药细胞Huh7增殖和凋亡的影响。方法通过CCK8法检测乐伐替尼作用下Huh7细胞的半抑制浓度(IC50),采用浓度递增法诱导Huh7细胞乐伐替尼耐药。各组细胞处理:对照组为Huh7细胞加普通培养液培养后的细胞;敏感组为Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;耐药组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;联合组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+1μmol/L双硫仑+0.5μmol/L铜离子培养后的细胞;抑制剂组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+10μmol/L Akt抑制剂MK2206培养后的细胞。CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的存活率和凋亡率;Western blot法检测磷酸化-Akt(p-Akt)和半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)和B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达;Transwell法检测细胞侵袭性。结果乐伐替尼耐药细胞系成功建立,选取10、20、40、60、80及160μmol/L 6个乐伐替尼浓度对Huh7细胞作用48 h后计算得出细胞IC50为12.35μmol/L。耐药组细胞存活率明显高于敏感组(P<0.01),联合组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.01),抑制剂组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.05)。与耐药组比较,联合组及抑制剂组p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01)、caspase-9明显升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白在耐药组和联合组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组细胞凋亡率明显高于耐药组(P<0.01)。Transwell结果显示联合组的肿瘤细胞侵袭数明显少于耐药组(P<0.01)。结论双硫仑联合铜离子能增加乐伐替尼对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7的敏感性,同耐药组相比其细胞抑制率明显提高,其机制可能与抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/Akt通路及促进caspase-9蛋白表达有关。     

血清MMP-11、TGF-β1水平在胸主动脉瘤患者中的检测意义

目的 探究血清基质金属蛋白酶11（MMP-11）、转化生长因子-β（TGF-β1）水平在胸主动脉瘤患者中的检测意义。方法 选取我院2020年7月~2020年12月收治的30例胸主动脉瘤患者为研究对象,将其纳入研究组;再以30例健康体检志愿者为对照,将其纳入对照组。对比两组受试者初检时血清MMP-11、TGF-β1表达水平差异,经Pearson相关系数分析胸主动脉瘤患者血清MMP-11与血清TGF-β1水平的相关性;根据病理类型,将研究组患者分为真性动脉瘤组和主动脉夹层动脉瘤组两个亚组,比较其血清MMP-11、TGF-β1水平的差异。结果 研究组血清MMP-11、TGF-β1水平明显高于对照组（P<0.05）;胸主动脉瘤患者血清MMP-11与血清TGF-β1水平呈正相关性（P<0.05）;真性动脉瘤组患者血清MMP-11、TGF-β1水平明显高于主动脉夹层动脉瘤组（P<0.05）。结论 胸主动脉瘤患者中血清MMP-11表达与TGF-β1调控关系密切,了解MMP-11、TGF-β1表达水平有利于临床防治胸主动脉瘤。     

miR-542-3p对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及机制探讨

目的 探讨microRNA-542-3p(miR-542-3p)在人肝癌细胞系及组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响.方法 采用RT-PCR检测miR-542-3p在肝癌细胞系(HCCLM3、Hep3B、Huh7、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L)以及人正常肝细胞LO2中的表达;...     

N-cadherin、 β-连环素在肝癌组织中的表达及与Wnt信号途径的关系

目的 观察肝癌(HCC)中N-cadherin分子是否调控β-连环素(β-catenin)的表达及Wnt信号途径的活化。方法 免疫组织化学分析64例肝癌组织中N-cadherin及β-catenin的表达及相互关系。调控肝癌细胞株HCCLM3、SMMC-7721中N-cadherin表达并检测β-catenin的表达及Wnt信号途径的活化。结果 64例肝癌中,N-cadherin表达缺失34例;β-catenin在细胞膜上表达,无细胞核内聚集,且13例细胞膜表达缺失;细胞膜上β-catenin表达缺失与N-cadherin表达缺失呈正相关(P＜0.05)。下调HCCLM3细胞或上调SMMC-7721细胞中的N-cadherin表达导致细胞膜上β-catenin表达减弱或增强,但均未导致Wnt信号途径的活化。结论 在肝癌中,N-cadherin表达与细胞膜上β-catenin的表达水平呈正相关,但N-cadherin分子并不参与Wnt信号途径的调控。     

全反式维甲酸对肝癌细胞株细胞连接蛋白基因表达的影响

目的观察全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）对肝癌细胞株CX26、CX32和CX43基因表达的影响.方法体外培养肝癌细胞株SMMC-7721和BEL-7404.分别用常规培养基和含ATRA（10-5 mol/L）的培养基培养两种细胞,在ATRA处理后的24、48、72 h提取细胞总mRNA.采用RT-PCR方法检测CX26、CX32、CX43基因的表达.结果用常规培养基培养的SMMC-7721细胞不表达CX26 mRNA和CX32 mRNA,但是经ATRA培养48 h开始出现CX26 mRNA的表达,经ATRA培养72 h后出现CX32 mRNA的表达.常规培养的BEL-7404细胞没有CX26 mRNA和CX32mRNA的表达,但是经ATRA培养48 h开始出现CX26 mRNA和CX32 mRNA的表达.两种肝癌细胞株在经ATRA处理前后均有CX43 mRNA的表达.结论全反式维甲酸能够在转录水平上调CX26、CX32基因在肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7404中的表达.     

Hedgehog信号通路在人肝癌细胞株中的表达及意义

目的 探讨Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系中的表达及意义。 方法 采用半定量 RT-PCR 法检测PLC/PRF/5、HepG2及 SMMC-7721肝癌细胞株中Shh、Ptch1、Smo、Gli1、Gli2 mRNA 的表达;Western blot法检测PLC/PRF/5、HepG2及 SMMC-7721肝癌细胞株中Gli2蛋白的表达。 结果 除Shh外, Ptch1、Smo、Gli1、Gli2 mRNA在PLC/PRF/5、HepG2及 SMMC-7721细胞中均有不同程度表达。其中,Ptch1、Smo、Gli1、Gli2 mRNA在PLC/PRF/5及SMMC-7721细胞中的表达强度显著高于成人正常肝细胞,而Gli1 mRNA在HepG2细胞中的表达量与正常肝细胞无明显差异;Gli2蛋白在成人正常肝细胞中几乎没有表达,在HepG2细胞中的表达也与正常肝细胞无明显差别,而在PLC/PRF/5及 SMMC-7721细胞中,尤其是SMMC-7721细胞,Gli2的表达量异常增高。 结论 Hedgehog 信号通路的异常激活参与了肝细胞癌的发生发展过程,Gli2可能成为肝细胞癌重要生物学标志和生物治疗靶点。     

NADPH氧化酶DUOX1在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨NADPH氧化酶DUOX1在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与临床病理指标及预后的关系。方法选取7株人HCC细胞系及1株人正常肝细胞系、30例正常肝组织及103例肝癌标本作为研究对象,采用RT-PCR的方法研究DUOX1mRNA的表达情况,结合临床病理指标及预后进行分析。结果DUOX1mRNA在MHCC-97H、MHCC-97L及BEL7402细胞系中表达,在HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Changliver和L02中无表达。30例正常肝组织中均无表达。在肝癌和癌旁肝组织中表达阳性率分别为53．4％（55／103）和14．5％（15／103）,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。相关性统计分析提示肝癌组织中DUOXImRNA表达状态与性别、年龄、有无卫星结节及术前AFP水平相关。单因素分析提示影响肝癌术后总体生存率的因素为性别、年龄、肿瘤直径、有无卫星结节、有无门静脉癌栓、TNM分级以及DUOX1mRNA表达状态。多因素分析提示影响肝癌术后总体生存率的因素为肿瘤直径、有无门静脉癌栓及DUOX1mRNA表达状态。结论肝癌组织DUOX1mRNA表达状态是肝癌术后总体生存的独立预后因素,DUOX1基因可能与肝癌的发生发展有关。