慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞INF-α和IL-8表达的检测及临床意义

目的检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞α干扰素（IFN—α）的诱导表达及白细胞介素8（IL-8）表达,评价慢性乙肝患者外周血单个核细胞（PBMC）细胞免疫功能。方法PolyIC体外刺激正常对照组和慢性乙型肝炎病毒（Hepatitis Bvirus,HBV）感染组病人PBMC,取培养上清液利用病毒保护试验测定IFN—α2b治疗前后病人PBMC表达的干扰素抗病毒生物学活性。同时在IFN—α2b治疗前后,RT-PCR检测慢性乙肝患者不同干扰素应答组病人PBMCIL-8表达的变化。结果治疗前应答组病人（n=13）和无应答组病人（n=27）PBMC分泌的干扰素生物学活性显著低于正常对照组（n=20）（P〈0．01;P〈0．01）。应答组病人PBMC分泌的干扰素活性随治疗时间延长而增加,1个月时已显著高于无应答组病人（P〈0．01）;无应答组病人PBMC分泌的干扰素活性始终处于低下水平。治疗前,应答组病人和无应答组病人PBMCIL-8mRNA水平都显著高于正常对照组（均为P〈0．01）;治疗后,应答组病人IL-8水平随治疗时间延长而降低,1个月时已显著低于无应答组病人（P〈0．01）,无应答组病人IL8水平始终处于较高水平。结论慢性HBV感染病人的细胞免疫功能受损,不能正常表达IFN-α但应答组病人经干扰素治疗后IFN—α表达能力逐渐恢复。慢性乙肝患者PBMCIL-8表达与肝脏炎症活动有关。慢性乙肝患者PBMCIFN—α活性检测结果也许可以作为干扰素治疗预后的判断指标。     

CXCL8及其受体CXCR1、CXCR2在慢性乙肝患者外周血PMNs中的表达

目的:探讨慢性乙肝患者外周血中性粒细胞(PMNs)上CXCL8及其受体CXCR1、CXCR2的表达。方法:以中性粒细胞分离液分离、纯化PMNs,检测患者血清HBe Ag及PMNs内HBV DNA,入选患者依据检测结果进行分组,SABC免疫细胞化学染色法检测各组患者PMNs内CXCL8及其受体CXCR1、CXCR2的表达。结果:SABC免疫细胞化学染色结果显示,CXCL8主要位于PMNs胞浆中,CXCR1、CXCR2多见于胞浆和胞膜上。其中HBe Ag(+)者CXCL8、CXCR1免疫着色较深,而CXCR2免疫着色较浅;PMNs内HBV DNA(+)者CXCL8、CXCR1免疫着色亦较深,而CXCR2免疫着色亦较浅。患者CXCL8和CXCR1的水平均显著升高,与正常对照相比,差异均有显著性(P0.05),而CXCR2的表达无统计学意义(P0.05)。结论:HBV侵染中性粒细胞后可促进CXCL8分泌,使胞膜CXCR1表达进一步增强。CXCL8、CXCR1、CXCR2免疫组化染色程度与患者HBe Ag表达、HBV DNA载量密切相关。高表达CXCR1的中性粒细胞与CXCL8相互作用,趋化吸引更多PMNs至病灶,参与局部炎性损伤和组织修复。     

经腹超声引导下清宫术治疗对子宫瘢痕妊娠患者受体CXCR1和CXCR2 mRNA表达的影响

目的 探讨经腹超声引导下清宫术治疗对子宫瘢痕妊娠(cesarean scar pregnancy, CSP)患者受体CXCR1和CXCR2 mRNA表达的影响。方法 前瞻性收集2019年6月至2021年1月上海市松江区妇幼保健院收治的CSP患者96例患者为CSP组,并选取同期的入本院接受剖宫产手术的正常妊娠患者90例为正常妊娠组。实时荧光定量PCR检测血清或组织中IL-8及受体CXCR1和CXCR2 mRNA的水平。免疫组化法检测IL-8及受体CXCR1和CXCR2的阳性表达。结果 与正常妊娠组相比,CSP组中子宫内膜组织和血清中IL-8及受体CXCR1和CXCR2 mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);清宫术前和术后24h对比,血清中IL-8及受体CXCR1和CXCR2 mRNA水平对比差异无统计学意义(P>0.05),与清宫术前和术后24h对比,术后30d血清中IL-8及受体CXCR1和CXCR2 mRNA水平显著降低(P<0.05);复发的患者中血清中IL-8及受体CXCR1和CXCR2 mRNA水平的表达明显高于未复发的患者(P<0.05);复发组...     

IL-8/CXCR1/2轴与膀胱癌关系的研究进展

白细胞介素8(IL-8)是一种具有趋化作用的小分子分泌型炎症性细胞因子,属于CXC趋化因子家族的成员,又名CXC趋化因子8(CXCL8).近年研究发现体内多种细胞如单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、角质形成细胞、肿瘤细胞等都具有分泌IL-8的能力.IL-8与其相应受体CXCRl/2结合后,除了对中性粒细胞有趋化和诱导其脱颗粒作用外,还可以通过促进血管形成、影响肿瘤细胞增殖、存活及运动,在肿瘤的发生、发展和转移中发挥重要作用.本文主要综述了IL-8及其受体与膀胱癌生物学行为的关系.     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR2 mRNA表达与IFN-γ及IL-4表达相关性分析

Toll样受体2（Toll-like receptor，TLR2）是一种模式识别受体（Pattern recognision receptors，PRRs），广泛分布于各类免疫细胞。我们检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR2 mRNA的表达，用流式细胞术检测外周血CD3^＋ CD8^- T细胞内IFN-γ和IL-4水平，反映Th1、Th2细胞数量，     

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中趋化因子水平与干扰素治疗的关系

目的了解丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染患者外周血单个核细胞(PBMC)中趋化因子mRNA表达水平及与α干扰素(IFN-α)治疗的关系. 方法以实时反转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)法动态观察35例慢性丙型肝炎患者接受IFN联合利巴韦林治疗前、治疗3个月、6个月后其外周血单个核细胞中白细胞介素-8(IL-8)、T细胞活化蛋白-3(TCA-3/I-309)、γ干扰素诱生的单核因子(MIG)、胸腺及活化调节趋化因子(TRAC)和巨噬细胞源性趋化因子(MDC)的mRNA表达水平. 结果治疗前慢性丙型肝炎患者IL-8、MIG、TARC和I-309的mRNA表达水平均高于正常对照组(n=12),差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.001).治疗过程中IL-8、MIG、TARC的表达水平有显著下降.治疗前的IL-8、MIG和MDC的表达水平在HCV高复制组(HCV RNA＞106 copies/ml,n=21)和HCV低复制组(HCV RNA＜106 copies/ml,n=14)之间差异有统计学意义(P＜0.05),高复制组的表达水平明显高于低复制组.然而上述5个趋化因子的治疗前表达水平在丙氨酸转氨酶(ALT)异常组(n=24)和ALT正常组(n=11)之间差异无统计学意义,与干扰素疗效和病毒基因型也无相关性(P＞0.05). 结论 HCV慢性感染能诱导外周血单个核细胞表达IL-8、I-309、MIG和TARC.IFN控制感染后,IL-8、MIG和TARC的表达下降.治疗前的上述趋化因子表达水平与干扰素疗效和肝组织的炎症损伤程度无直接相关性.     

重组干扰素-γ对哮喘患者外周血单个核细胞IL-8和IL-10的作用研究

目的 研究重组干扰素－γ对哮喘患者体外单个核细胞ＩＬ－８和ＩＬ－１０释放的影响以及与血清ＥＣＰ水平的关系。方法 取哮喘患者８例、正常人５例的外周静脉血,分离单个核细胞培养,６６ｈ后将哮喘患者的ＰＢＭＣ上清液分为重组干扰素－γ干预组、氟美松干预组、未加干预物组,７２ｈ收集上清液测定ＩＬ－８和ＩＬ－１０的浓度。同时留取血清测ＥＣＰ。结果 哮喘者血清ＥＣＰ值与ＰＢＭＣ培养细胞上清液中ＩＬ－８值呈现显著正相关（ｒ＝０．７０１）,与ＩＬ－１０值呈显著负相关（ｒ＝０．６３８）。者喘患者血清中ＥＣＰ和ＰＢＭＣ上清液ＩＬ－８和ＩＬ－１０浓度与正常相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。ｒＩＦＮ－γ干预后ＰＢＭＣ上清中ＩＬ－８较未干预组显著下降（Ｐ〈０．０５）,而ＩＬ－１０显著增高（Ｐ〈０．０５）;氟美松干预组则无明显差异性。结论 ｒ     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中IL-18表达水平

目的探讨白细胞介素 18(IL- 18)在乙型肝炎病毒感染中的作用。方法应用流式细胞免疫学方法 ,对 30例慢性乙型肝炎活动期、缓解期 ,15例 HBS Ag阳性无症状携带者 ,10例正常对照外周血单个核细胞 (PBMC) IL- 18的表达进行检测。结果无症状携带者表达最低 ,慢性乙型肝炎缓解期低于正常对照 (P<0 .0 1) ,活动期与正常对照无显著差异 (P=0 .2 5 )。活动期 IL- 18的表达与肝组织炎症活动度有关 (P<0 .0 1) ,与血清 AL T水平呈正相关 (r=0 .6 3,P<0 .0 1)。结论 IL- 18与慢性乙型肝炎病情的活动相关 ,与肝组织炎症程度相关     

CXCR1、CXCR2 及CXCL8 在乙肝相关肝癌中的表达及临床意义

目的:探讨乙肝相关肝癌患者外周血单个核细胞及肝活检组织CXCR1、CXCR2 及CXCL8 表达及其临床意义。方法:用实时荧光定量PCR 法检测36 例乙肝相关肝癌患者外周血PBMCs 中CXCR1、CXCR2 及CXCL8 mRNA 水平;SP 法检测肝活检组织CXCR1、CXCR2 及CXCL8 蛋白表达水平;化学发光免疫分析法检测血清CRP 水平,并对各指标进行相关性分析。结果:乙肝相关肝癌患者PBMCs 中CXCR1、CXCR2 及CXCL8 mRNA 水平分别为(0.952 7±0.197 2)、(0.896 9±0.173 0)、(1.771 9±0.248 9),较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。SP 结果提示,CXCR1、CXCR2 及CXCL8 的蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05)。乙肝相关肝癌患者血清CRP 水平与PBMC 内CXCR1(r =0.54,P<0.01)、CXCR2(r =0.49,P<0.01)及CXCL8(r = 0.63,P<0.01)呈正相关。结论:乙肝相关肝癌患者外周血PBMCs 及肝活检组织CXCR1、CXCR2 及CXCL8 表达明显升高,且与血清CRP 呈正相关,推测CXCR1、CXCR2 及CXCL8 介导的信号转导过程可能在乙肝相关肝癌发病过程中发挥重要作用,为肝癌免疫干扰治疗提供新的靶点。     

干扰素α对Jurkat细胞中CCR5表达的影响

目的:通过研究干扰素(IFN-α)对Jurkat E6-1细胞内CCR5 mRNA表达及基因表达调控的影响,探讨采用干扰素治疗相关疾病的方法。方法:用不同浓度的IFN-α刺激处于对数生长期的CD4+T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞。培养48小时后,提取细胞的总RNA,逆转录成cDNA,进行RT-PCR和Real time-PCR扩增目的基因CCR5;利用脂质体转染荧光素酶报告系统检测Jurkat E6-1细胞内CCR5活性变化情况。结果:(1)IFN-α在浓度为100 U/ml时对CCR5 mRNA的表达有明显抑制作用;在浓度为1 000 U/ml时对CCR5 mRNA的表达表现为增强作用;在浓度为10 000 U/ml时对CCR5 mRNA的表达增强作用有所减弱。(2)当IFN-α的浓度为100 U/ml时荧光素酶的活性最低;当IFN-α的浓度为1 000 U/ml时荧光素酶的活性最高;当IFN-α的浓度为10 000 U/ml时荧光素酶的活性又有所减低。结论:IFN-α作为一类很好的免疫调节、抗病毒生物制剂,不同剂量在一定范围内会对细胞CCR5的表达有显著影响。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞上CXCR3表达的初步观察

目的：探讨趋化性细胞因子受体CXCR3在慢性乙型肝炎症发生机制中的作用。方法：采用流式细胞术，检测炎症活动程度不同患者外周血淋巴细胞表面CXCR3的表达，及其在CD4^ 和CD8^ T细胞上的分布。结果：慢性乙肝患者外周血CXCR3^ 淋巴细胞和单核细胞明显增多，以CXCR3^ CD8^ T细胞的增加更明显。结论：趋化因子受体CXCR3与其配体的相互作用，可能在募集淋巴细胞及炎症形成过程中有重要作用。     

IL-21对慢乙肝患者HBeAb生成与B淋巴细胞增殖的促进作用

目的研究IL-21对慢性乙型病毒型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)的促抗体分泌作用以及促B细胞增殖作用。方法以流式细胞术检测体外培养基线水平0 d和7 d的PBMC中B淋巴细胞的增殖及分化情况;用ELISA法检测培养上清液中HBeAb-IgG水平。结果①体外培养7 d后,各刺激组的B淋巴细胞均有明显增殖(P<0.01);与0 d时比较,IL-4与IL-21刺激组增殖最为显著(P<0.05)。②培养7 d后,各刺激组均可检测到HBeAb-IgG分泌,其中以IL-21刺激组产生的HBeAb水平明显增高,差异显著(P<0.05);而IL-4与IL-10刺激组无明显差别(P>0.05)。结论 IL-21具有促进B淋巴细胞增殖和HBeAb-IgG分泌的作用,在HBeAg(+)慢乙肝患者HBeAg血清学转换中可能发挥一定作用。     

趋化因子及受体与中国HCV/HIV合并感染相关性的研究

目的：探讨趋化因子自细胞介素8（IL-8）、干扰素诱导蛋白10（IFN-inducible 10-kdaprotein，IP-10）及趋化因子受体CCR5、CXCR3，在丙肝病毒（HCV）单纯感染，艾滋病病毒（HIV）单纯感染和HCV／HIV合并感染过程中的表达及意义。方法：采用流式细胞术，检测HCV感染组（n=21）、HIV感染组（n=14）、HCV／HIV感染组（n=28）及正常对照组（n=30）人外周血CD4^＋T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞表面CCR5、CXCR3的表达。ELISA方法检测血清趋化因子IL-8、IP-10含量。结果：HCV感染组、HIV感染组和HCV／HIV合并感染组，血清IP-10水平都明显升高，而在合并感染组水平最高；血清IL-8水平在3组亦明显升高。HIV感染组及HCV／HIV合并感染组CD4^＋T细胞表面CXCR3表达显著降低（P〈0．001），CD8^＋T细胞表面CXCR3表达显著升高（P〈0．001）；HCV感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CXCR3表达轻度升高，但差异不显著。HCV感染组及HCV／HIV合并感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CCR5表达显著降低（P〈0.001）；HIV感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CCR5表达显著升高（P〈0.001）。结论：中国HCV／HIV合并感染患者中，血清IL-8和IP-10水平都明显升高；受体CXCR3在CD4^＋T细胞表面表达降低，而在CD8^＋T细胞表面表达升高；受体CCR5在CD4^＋及CD8^＋T细胞表面表达降低，提示趋化因子及受体与HCV／HIV合并感染密切相关。     

CXCR1/CXCR2拮抗剂G31P抗中性粒细胞介导的炎症作用研究

目的 建立肺炎动物模型,使用人CXCR1/CXCR2受体拈抗剂G31P,治疗与中性粒细胞相关的炎性疾病.方法 检测G31P能否阻断人IL-8对中性粒细胞趋化以及阻断支气管上皮细胞A549释放IL-8;建立pcDNA3.0-CXCR1、2、4转染的肾细胞HEK293,检测G31P阻断IL-8对细胞株的趋化作用;建立肺炎动物模型,计数肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞数,进行肺组织病理学观察.结果 实验证实G31P可以阻断中性粒细胞趋化和IL-8介导的CXCR1、CXCR2转染的HEK293细胞株的趋化作用,抑制A549释放炎性介质;G31P治疗组中性粒细胞比例下降,病理检测有明显差异.结论 G31P可以阻断ELR+CXC趋化因子对中性粒细胞的趋化作用,阻断ELR+CXC趋化因子与中性粒细胞表面受体CXCR2的结合,阻断肺泡上皮细胞和血管内皮细胞表面的CXCR2,从而进一步阻止中性粒细胞介导的炎症反应.     

IL-2和IL-4联合诱导B细胞死亡受体CCR3的表达及其功能研究

目的　研究在IL 2和IL 4作用下 ,趋化性细胞因子受体CCR3在人生发中心 (germinalcenter,GC)B细胞上的表达及其功能特性。方法　采用流式细胞术检测人GCB细胞上CCR3表达和在CCR3配体eotaxin作用下B细胞的凋亡 ,实时定量RT PCR和Northernblot法检测GCB细胞内CCR3mRNA的表达 ,淋巴细胞趋化和黏附试验检测B细胞的趋化和黏附能力。结果　人GCB细胞极低表达趋化性细胞因子受体CCR3,经IL 2和IL 4作用后 ,GCB细胞高表达CCR3,但此时CCR3不能在其配体作用下诱导GCB细胞的趋化和黏附功能 ,而是诱导GCB细胞凋亡。结论　IL 2和IL 4联合诱导人GCB细胞CCR3表达 ,CCR3可能具有死亡受体的功能。     

Granulocyte chemotactic protein 2 acts via both IL- 8 receptors,CXCR1 and CXCR2

Interleukin-8 (IL-γ) acts on human neutrophils via two receptors, CXCR1 and CXCR2. It shares CXCR2 with all neutrophil-activating chemokines, which like IL-8 have a conserved Glu-Leu-Arg (ELR) N-terminal motif, but is generally considered to be the only relevant agonist for CXCR1. IL-8 has a basic residue at the sixth position after the second cysteine, which was suggested to contribute to CXCR1 specificity. Among the other ELR chemokines, only granulocyte chemotactic protein 2 (GCP-2) has such a basic determinant. Using Jurkat cells that stably express either CXCR1 or CXCR2, we studied receptor activation by IL-8, GCP-2 epithelial neutrophil-activating protein 2 (ENA-78) (which shares 77 % identical amino acids with GCP-2) and growth-regulated oncogene α (GROα). At 10 nM and higher concentrations, GCP-2 and IL-8 induced significant activation of CXCR1-expressing cells, but no activity was found with GROα and ENA-78. As expected, however, all four chemokines had similar activities on CXCR2-expressing cells. A variant of GCP-2 in which the basic residue, Arg20, was replaced by a glycine was synthesized. This derivative was ineffective on CXCR1, but was as active as wild-type GCP-2 in CXCR2-expressing cells. GCP-2 displaced radiolabeled IL-8 from both receptors with low affinity, and in this respect resembled ENA-78 and GROα. Our data show that GCP-2 acts via both IL-8 receptors and thus appears to be functionally more similar to IL-8 than to the other ELR chemokines. Activation of CXCR1 appears to depend significantly on the presence of a basic binding determinant close to the second cysteine.     

Quantitative evaluation of CXCL8 and its receptors (CXCR1 and CXCR2) gene expression in Iranian patients with multiple sclerosis

CXCL8 and its receptors (CXCR1 and CXCR2) play important roles in CNS development, neuronal survival, modulation of excitability, and neuroimmune response. The aim of this study is to evaluate gene expression of CXCL8 and CXCR1/CXCR2 in peripheral blood cells (PBCs) of Iranian patients with relapsing remitting (RR) form of Multiple sclerosis (MS). We explored the mRNA expression of CXCL8 and its receptors in PBCs of 49 RR-MS patients in remitting status and 60 healthy controls by quantitative Real-Time PCR. Median expression of CXCL8 mRNA in peripheral blood of MS patients decreased more than 3-fold compared to control group (p?<?0.001), while there were not significant differences in CXCR1 and CXCR2 gene expression between MS patients and healthy subjects (p?=?0.159 and p?=?0.248, respectively). There was a significant negative correlation of CXCR2 expression with EDSS (rs?=??0.432, p?=?0.004). It appears that decreased expression of CXCL8 may lead to a raised risk of MS.     

17β-雌二醇和二噁英对子宫内膜间质细胞表达趋化因子IL-8及其受体CXCR1的调控作用

解析内外环境因素对子宫内膜间质细胞表达IL-8及其自分泌作用的调控。采用免疫组化法比较子宫内膜异位症患者异位灶和在位内膜CXCR1翻译水平表达;流式细胞术分析17β-雌二醇和二噁英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞表面CXCR1表达的调控作用;ELISA法分析17β-雌二醇和二噁英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞分泌IL-8的影响。结果显示CXCR1在子宫内膜异位症患者异位灶组织高表达。17β-雌二醇和二噁英单独作用均抑制子宫内膜间质细胞表面CX-CR1的表达以及IL-8的分泌。二者联合作用能够上调CXCR1的表达,上调幅度与雌二醇浓度呈正相关;但进一步抑制了IL-8的分泌。雌激素与二噁英对子宫内膜间质细胞复合作用抑制其IL-8的分泌及其自分泌作用;子宫内膜异位症患者腹腔液高水平IL-8并非由内外雌激素样物质直接作用于异位灶子宫内膜间质细胞所致。     

The chemokine SDF-1, stromal cell-derived factor 1, attracts early stage B cell precursors via the chemokine receptor CXCR4

In the bone marrow, progenitor (pro-) and precursor (pre-) B cells depend on close contact with stromal cells for growth and maturation. Stromal cell-derived factor 1 (SDF-1), also known as pre-B cell growth-stimulating factor, is produced by bone marrow stromal cells and was reported to act together with interleukin-7 as co-mitogen for pre-B cells. SDF-1 was recently shown to be a chemokine which is chemotactic for different types of leukocytes and acts via the chemokine receptor CXCR4. Using sorted B220⁺ bone marrow cells and several B cell lines characteristic for different stages of B lymphopoiesis, we now show that SDF-1 is a potent attractant for pro- and pre-B cells, but is inactive on B cells at later stages of development. In early B cell precursors, SDF-1 induced intracellular Ca²⁺ mobilization and in vitro migration with a potency and efficacy similar to that observed for chemokines acting on blood leukocytes. These responses were mediated via CXCR4 as they could be inhibited by an anti-receptor antibody. SDF-1 is the first chemokine shown to act on early-stage B cell precursors. Mice lacking SDF-1 die perinatally and show a severe deficiency in B lymphopoiesis. We propose that SDF-1 released from the stromal cells exerts its critical hematopoietic function by selectively attracting and confining early B cell precursors within the bone marrow microenvironment that provides the necessary factors for growth and differentiation.