IgY联合乳酸杆菌防治阴道白色念珠菌感染的实验研究

目的:观察特异性抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌的体内外生物学效应,探讨将二者复合应用的可能性。方法:分离人阴道上皮细胞,用抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌对阴道上皮细胞预处理后进行白色念珠菌黏附抑制试验;建立小鼠白色念珠菌性阴道炎模型,通过阴道局部给抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌来观察其疗效。结果:抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌均能抑制白色念珠菌黏附阴道上皮细胞,并能减少白色念珠菌在小鼠阴道内的定植和减轻小鼠阴道局部的炎症反应。结论:特异性抗白色念珠菌IgY具有良好的体内外生物学效应且优于单独使用乳酸杆菌,二者复合应用效果最佳。     

抗白色念珠菌IgY的稳定性与应用研究

目的：观察抗白色念珠菌鸡蛋黄抗体IgY的稳定性与体外生物学效应。方法：用水溶法从免疫鸡蛋黄中提取抗白色念珠菌抗体IgY,ELISA法检测抗体耐热,耐酸,耐碱的稳定性,观察IgY抑制白色念珠菌生长和抑制白色念珠菌粘附肠上皮细胞（IEC－6）,结果：IgY在巴氏消毒后活性为对照的61％,在pH7.0至3．0酸性环境中活性改变不显著,在pH7.9,37℃作用150min活性仍对照的60％,IgY在10mg/ml时能明显抑制白色念珠菌生长和对肠上皮细胞的粘附,明显降低细胞上清二胺氧化酶（DAO）释放。结论：鸡蛋黄抗抗IgY具有高度稳定性和良好的体外生物学效应。,     

烧伤后早期白色念珠菌粘附肠上皮的防治研究

目的:观察烧伤后早期白色念珠菌在下消化道内粘附定植变化,以及应用微生态制剂双歧杆菌的预防效果和机制。方法:无特殊病原菌小鼠67只,肠道给入白色念珠菌,隔离饲养14d后,随机分为伤前对照组(10只),烧伤对照组(29只),烧伤治疗组(28只)。烧伤治疗组和烧伤对照组,小鼠背部致以20％TBSAⅢ°烧伤,烧伤治疗组在伤后经口给入双歧杆菌菌悬液。动物伤后1、2、3d分批活杀,观察以下指标:肠粘膜表面粘附白色念珠菌计数,肠固有层淋巴细胞增殖原位观察,肠粘液中特异抗白念菌SlgA。结果:烧伤对照组以及烧伤治疗组白色念珠菌粘附数量在伤后2、3d均高于伤前对照组,但治疗组明显少于烧伤对照组同时相水平;烧伤治疗组肠固有层淋巴细胞增殖和肠粘液中特异抗白念菌SIgA水平尽管低于伤前水平,但高于烧伤对照组。结论:烧伤后早期可发生白色念珠菌在下消化道内粘附增多,应用微生态制剂双歧杆菌可提高烧伤后肠道粘膜免疫中效应部位的细胞增殖水平,部分减少白色念珠菌粘附。     

卵黄中蝮蛇蛇毒抗体对蝮蛇蛇毒毒性成分的中和作用

目的：制备特异性高的蝮蛇蛇毒卵黄抗休事半功倍对其体内保护和体外保护作用进行了研究。方法：用蝮蛇蛇毒作为抗原免疫鸡，使之在蛋黄中产生抗体IgY，然后用聚乙二醇法提取IgY，并通过小鼠体内保护和体外中和试验。研究IgY对蝮蛇蛇毒毒性成分的中和作用。结果：通过本法制得的IgY在体内和体外试验中都能中和蝮蛇蛇毒，对蝮蛇蛇毒急性中毒的小鼠有明显的保护作用。结论：聚乙二醇法从免疫鸡蛋黄中提取的蛇毒抗体IgY，可用于救治蝮蛇蛇毒急性中毒的小白鼠。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体的保护试验

目的：制备特异性高的鸡眼镜王蛇毒卵黄抗体，并对其进行体外和体内保护试验。方法：用眼镜王蛇毒免度母鸡，在卵黄中产生抗眼镜王蛇毒抗体IgY，用水溶解法提取IgY，进行小鼠体外中和试验和体内保护试验。结果：沐外、体内保护试验显示，6mg／kg的IgY可有效中和小鼠体内低剂量（≤3LD50）的蛇毒，对致死剂量蛇毒有很好的保护效应。结论：从卵黄中制备的抗眼镜王蛇毒IgY可有效地中和眼镜王蛇毒。     

抗生素诱导小鼠肠道菌群失调对免疫功能和Toll样受体2、4基因表达的影响

目的:探讨抗生素诱导小鼠肠道菌群失调后对机体免疫功能和Toll样受体2、4的影响.方法:60只BALB/c小鼠分为2组:抗生素组和对照组,抗生素组连续7天口服头孢哌酮,7天后经口给予白色念珠菌.结果:抗生素组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌较对照组减少,白色念珠菌增加;脾指数、PHA诱导的淋巴细胞转化率、迟发型变态反应、抗体生成细胞数和脾脏的TLR2和TLR4基因表达水平均低于对照组.结论:抗生素诱导肠道菌群失调后小鼠免疫功能和TLR2、TLR4 mRNA表达均降低.     

EV71-VP1抗原在双歧杆菌中表达的免疫效果检测

目的 检测表达肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）VP1基因的重组双歧杆菌免疫后小鼠IgG、IgA表达变化,并对免疫的孕鼠产下的新生小鼠注射EV71病毒,以检测免疫保护作用可否从母代传给子代。方法 ELISA法检测免疫小鼠血清IgG、IgA抗体效价;用EV71毒株对免疫孕鼠所产下的新生小鼠攻毒。结果 两种抗体效价都有明显升高（P<0.01）;实验组受病毒攻击新生小鼠存活率明显高于对照组。结论 口服表达VP1蛋白的双歧杆菌能够激活体内免疫系统产生特异性抗体,重组双歧杆菌可通过免疫孕鼠而使新生幼鼠获得保护性抗体。为研制EV71亚单位口服活疫苗奠定了研究基础。     

双歧杆菌对小鼠免疫细胞的影响

本文观察了双歧杆菌对小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能和脾细胞转化功能的影响。结果表明，双歧杆菌腹腔注射后，使小鼠脾脏重量明显增加，吞噬功能显著加强，血中碳粒廓清速度加快，吞噬指数（Ｋ）较对照组明显增高，差异非常显著。淋巴细胞转化试验表明，本菌能在体外直接刺激小鼠脾脏淋巴细胞增植，并协同增强ＣｏｎＡ对淋巴细胞的刺激作用。提示双歧杆菌能非特异性活化巨噬细胞和增强淋巴细胞的转化功能。     

双歧杆菌细胞壁与富锗灵芝的协同抑瘤作用

目的：双歧杆菌细胞壁与富锗灵芝联合应用于荷瘤动物体内，观察抑瘤效果。方法：将纯系小鼠随机分４ 组，建立 Ｓ１８０ 实体瘤模型后，分别用双歧杆菌细胞壁及双歧杆菌细胞壁加富锗灵芝进行治疗。结果：检测巨噬细胞活性及干扰素活性均有明显的升高。结论：双歧杆菌细胞壁加富锗灵芝比单独应用双歧杆菌细胞壁对机体的免疫促进作用更为明显。     

严重烧伤特异抗白念菌IgA下降与白念菌粘附定植的关系

目的对烧伤后早期肠内特异抗白念菌IgA变化及其白念菌粘附肠粘膜的关系进行观察。方法利用无特殊病原菌(SPF)的小鼠定植白念菌模型 ,致以20%TBSAⅢ度烧伤。ELISA法检测伤前及伤后1、2、3d的肠内特异抗白念菌IgA水平 ;同时选择培养并计数盲肠及小肠粘膜表面粘附的白念菌。结果伤前组特异IgA为(69.37±25.37)U/mg,伤后1d为(48.84±26.47)U/mg,2d明显降为(38.22±23.57)U/mg,3d为(52.64±37.35)U/mg;肠内白念菌总量伤后第1天最高 ;伤后第2、3天粘附菌量明显升高。结论特异IgA下降与肠粘膜表面粘附菌量增多密切相关。     

抗白念珠菌IgY的动物实验研究

目的:制备抗白念珠菌特异性IgY,并对其活性及应用进行研究。方法:自烧伤继发感染白念珠菌病人的创面分离出的白念珠菌免疫蛋鸡,并对从该鸡产的蛋白中分离提取出的特异性IgY进行纯化及活性测定,同时用于烧伤大鼠感染白念珠菌的预防。结果:本实验制备的IgY有与白念珠菌特异性结合的能力,并能明显抑制烧伤鼠创面(痂下组织)继发感染白念珠菌。结论:抗白念珠菌特异性IgY有助于烧伤鼠预防白念珠菌的继发感染     

抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能.方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体.用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度.用Tris-tricine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,Western blot确定蛋白来源.以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性.ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价.结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%.提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性.提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合. ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1:12 000.结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低.在体外能够特异性地与白念珠菌结合.     

轻度肠型放-烧复合伤救治的实验研究

目的探讨颈交感阻滞、壳聚糖包裹的pVITRO3-HD5-GLP2纳米粒联合L203对轻度肠型放-烧复合伤小鼠的治疗作用,探索救治肠型放-烧复合伤的综合措施.方法 TBSA15%Ⅲ度烧伤合并10 Gy放射损伤小鼠分为综合救治组及复合伤对照组,观察两组动物的平均存活时间以及小肠湿重、小肠隐窝细胞早期凋亡、恢复期增殖和肠道细菌移位等相关指标.结果综合救治可以使放-烧复合伤后动物平均存活时间延长;减轻小肠湿重的降低程度,减少肠隐窝细胞凋亡,促进恢复期肠上皮的增殖以及减少肠道细菌移位的发生.结论综合救治措施可以改善肠型放-烧复合伤肠道的损伤,延迟小鼠的死亡时间.     

Role of Lipid Peroxidation in Bacterial Translocation from the Small Intestine after Thermal Injury in Rats

Oxygen-derived free radicals have bran proved to play a role in the intestinalmucosa damage induced by ischemic reperfusion after burns,but their role in thebacterial translocation from the intestine to other organs is not documented so far.Theauthors intended to investigate this problem on 186rats,which were randomized into 5groups:the normal control group,the group receiving oral Pseudomonas,the group ofsimple burn injury,and the groups of combined oral Pseudomonas and burn injury withor without superoxide dismutase(SOD)treatment.The burn injury was 30% TBSA fullthickness scalding.The oral administered Pseudomonas was labdled with isothiocyanatefor tracing.The animals were killed in the 4th,12th,24th,48th,or 72nd hour afterinjury respectively.The changes of malondialdehyde(MDA)in the ilcal mucosa were ob-served with optical and electron microscope,and bacterial translocation from the intes-tine to the liver and blood stream was traced .The animals with combined injury and simple burns showed a marked increase ofileal mucosal MDA with the peak in the 12th hour accompanied with intense pathologicalchanges in the small intestine;the incidence of bacterial translocation from the intestineto other organs also increased.With SOD treatment,the MDA levd in the ileal mucosawas significantly lower,the pathological changes in the intestinal mucosa were allevia-ted,and the incidence of bacterial translocation from the intestine was lowered with nolabdled Pseudomonas isolated from the blood stream.In this study,it was demonstrated that free radicals are one of the factors ofintestinal mucosal damage and bacterial translocation from the intestine after burns,andSOD could protect the intestinal mucosal barrier from being injured and inhibit thebacterial translocation from the intestine.     

耳念珠菌不同条件下生长特性及体内毒性

目的 探讨耳念珠菌在不同条件下的生长特性、代谢特点及体内毒性特征。方法 以白色念珠菌为参照,测定并比较耳念珠菌与白色念珠菌在常规培养条件、不同pH值和不同盐含量下的生长情况;利用微量生化反应管测定两种念珠菌糖醇发酵情况;以四周龄裸鼠为实验动物,用随机数字表法分为3组,耳念珠菌感染组、白色念珠菌感染组和生理盐水对照组,5只/组。耳念珠菌感染组和白色念珠菌感染组取0.3 mL已调至5×109 cfu/mL菌液,对裸鼠进行灌胃处理,建立胃肠道感染模型,对照组用等量生理盐水灌胃,取肝脏、肾脏、肠、粪便和血液等标本,通过真菌培养和组织病理学变化分析耳念珠菌的体内分布和毒性特征。结果 耳念珠菌的对数生长期约为8~24 h,约在24 h后进入生长稳定期,最适生长的pH值范围为5~7,生长模式与白色念珠菌相同;耳念珠菌在浓度为5%和10%的NaCl培养基中生长情况优于白色念珠菌,能发酵葡萄糖、蔗糖、海藻糖和山梨醇;从裸鼠的粪便、血液、肝脏和肾脏组织中分离出耳念珠菌,肝脏载菌量最多为5.7 log10 cfu/g,其可造成肝组织和肠组织病理学改变,但病变程度比白色念珠菌弱。结论 耳念珠菌在弱酸或中性条件下最适宜生长,具有高耐盐性,在免疫抑制状态下感染机体后,存在突破肠屏障入血及随血流播散并导致组织病变的可能。     

卡介苗免疫预防小鼠白色念珠菌感染的实验研究

目的探讨卡介苗（BCG）预先免疫对小鼠白色念珠菌感染的影响。方法采用BCG或灭菌生理盐水皮内注射预先免疫2周,然后由尾静脉注射白色念珠菌进行攻击,观察小鼠死亡率及计算存活小鼠肾组织带菌量。结果BCG免疫组存活时间长于生理盐水免疫组（P〈0.01）;存活小鼠肾组织菌落计数：BCG免疫组远少于省里盐水免疫组（P〈0.01）。结论BCG对小鼠白色念珠菌感染具有很好的保护作用。     

Experimental studies on the treatment and pathological basis of combined radiation and burn injury

Objective To investigate therapeutics for and the pathological basis of combined radiation and burn injuriesMethods Combined radiation and burn injuries on mice and rats were inflicted by γ ray irradiation from a (60)Co source and thermal radiation from a 5 kW bromotungsten lampResults The dysfunction of myocardium played an important role in the development of early stage shock. Transfusion of irradiated (in vitro, 20 Gy) or stored (4℃, 7 days) blood after irradiation was done to promote the success of allo-transplantation of bone marrow. Decrease of IL-4 mRNA expression was the molecular basis of depression of intestinal mucosa immune and intervention of IL-4 showed an antagonistic effect on enterogenic infection. A new lipid component extracted from burn eschar was documented for the first time and its toxic effects were elucidated. The survival rate of alloskin grafts after removal of burn eschar from the recipient animals was obviously increased in combined injury due to reduction of immune rejection activity by the radiation effect. In contrast, in animal models with simple burn, the alloskin grafts were all rejected within ten days after the procedure. A successful therapeutic result (survival rate: 92% for 30 days and 67% for 100 days) was obtained by comprehensive management of treated animals, while the untreated control animals all died within 3-7 days after injury. Conclusion The pathogenesis of injury caused by simultaneous radiation and burn is extremely complicated and the treatment is very difficult. A comprehensive management program consisting of several therapeutic measures aimed at key links of the pathogenesis may achieve significantly improved results.