苄索氯胺法——一种新的尿蛋白定量检测方法

目的 对苄索氯胺法这种新的尿蛋白检测方法进行评价。方法 收集150例门诊就诊患者尿液,用苄索氯胺法检测其尿蛋白含量,以此评价该方法的线性范围、精确度、灵敏度、回收试验、重复试验。结果该方法线性范围上限达2.014g／L,回收率手工法为86．95％,自动法为106．85％,有良好的精密度（CV分别为4．97％和2．63%）,灵敏度为单一钨酸比浊法的19～34倍,该法与单一钨酸比浊法的相关性良好,相关系数r为0．9846。两法结果进行t检验,t=0．436,P〉0．05,结果 差异无统计学意义。结论 该方法有灵敏度高、重复性好的优点,结果稳定,标本用量少,适用于自动分析,是值得在临床上推广的方法。     

苄索氯铵比浊法测定脑脊液蛋白质的方法学评价

目的对一种新的测定脑脊液蛋白质含量的方法——苄索氯铵比浊法进行方法学评价。方法采用罗氏（Roche）公司的质控品、c．f．a．s定值血清和试剂在Roche P800全自动生化分析仪上,参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）评价方案对苄索氯铵比浊法的灵敏度、精密度、线性、抗干扰性进行评价,并与强生（Johnson）公司的干化学法进行比对。结果经实验得出苄索氯铵比浊法的测量灵敏度为42．7mg／L,标本浓度在85mg／L与2685mg／L之间线性关系良好,精密度检查低、中、高浓度标本的批内、批间、日间、总变异系数（CV）〈5％,干扰试验除了血红蛋白在浓度达到0．1g／L开始产生明显干扰外,葡萄糖、维生素C、胆红素在试验浓度内均未产生明显干扰,与强生公司的干化学法进行比对,Passing—Bablok回归方程为y=0．931X＋12．5,线性回归的Cusum检验证实偏倚无统计学意义（P〉0．05）。一元直线回归方程为y=0．922X＋13．8,计算得出相关系数（r）=0．986,表明两种方法相关性良好。结论苄索氯铵比浊法稳定性好、灵敏度高、线性范围宽、能对抗多种物质的干扰,是一种适合于临床应用的较理想的方法。     

苄乙氯胺法用于微量蛋白测定的评价

目的 对测定微量蛋白的苄乙氯胺法(BCM)进行评价.方法 用基于免疫比浊法的苄乙氯胺试剂,分别对尿液和脑脊液中的蛋白进行测定,并评价该法的灵敏度、精密度以及线性范围等.结果该法的灵敏度为60mg/L;线性范围为2000mg/L;精密度批内为1.4%,日间为0.65%.与磺基水杨酸-硫酸钠法相关回归分析,Y=0.798X+0.085,r=0.972,二者有明显相关性.结论 该法准确、敏感、稳定,所用标本量少,非常适合临床实验室开展及推广.     

脑脊液蛋白质氯烃基二甲基代苯甲胺比浊测定法

氯烃基二甲基代苯甲胺（ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＢＡＣ）季胺化合物能与蛋白质反应形成浊度［１］，据此，用于脑脊液蛋白质含量的测定。１　材料与方法１．１　试剂１．１．１　ＢＡＣ贮存液　于９０ｍｌ蒸馏水中溶解ＢＡＣ（Ｓｉｇｍａ，Ｂ－６２９５）１１３ｍｇ，ＥＤＴＡ二钠盐３．６５ｇ，ＮａＯＨ８ｇ，然后用１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ调ｐＨ至１２．８，最终加蒸馏水至１００ｍｌ。１．１．２　ＢＡＣ应用液　取ＢＡＣ贮存液１份加０．１５ｍｏｌ／ＬｐＨ７．０磷酸盐缓冲液４份。１．１．３　蛋白标准液　总蛋白标…     

苄索氯铵原料毒理学评价

摘要 目的 评价苄索氯铵原料的毒理学安全性。方法 采用小鼠急性经口毒性试验、家兔多次完整皮肤刺激试验、家兔多次阴道黏膜刺激试验、豚鼠皮肤变态反应试验等方法,对苄索氯铵的急性毒性、刺激性和致敏性进行研究。结果 苄索氯铵对雌、雄ICR小鼠的急性经口LD50值均为316 mg/（kg·bw）［95%CI：205～488 mg/（kg·bw）］。5 000 mg/L苄索氯铵水溶液对新西兰白兔完整皮肤刺激指数为0.8,多次阴道黏膜刺激指数为1.9;对豚鼠皮肤致敏率为0%。结论 苄索氯铵原料为中等毒性物质;其5 000 mg/L水溶液对完整皮肤、黏膜分别为轻刺激性和极轻刺激性,且无皮肤致敏性。     

尿血红蛋白对苄索氯铵法定量测定尿蛋白的干扰评价

目的评价尿血红蛋白对苄索氯铵法定量测定尿蛋白的影响。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)的EP7-A2方案,配制不同浓度血红蛋白的尿液标本做剂量-效应试验,同时收集50例不同隐血程度的尿液标本做临床标本的偏倚试验;尿蛋白定量在DPP罗氏生化工作站采用苄索氯铵法检测,与磺基水杨酸法进行比较。结果剂量-效应试验显示,当尿血红蛋白浓度达0.2g/L时即对苄索氯铵法测定尿蛋白产生显著性干扰(P0.05);临床标本的偏倚试验显示,不同程度的隐血对苄索氯铵法测定尿蛋白产生明显的正干扰。结论重视尿隐血阳性和/或含有红细胞的尿液标本,在采用苄索氯铵法测定尿蛋白时应评价其准确性,必要时使用磺基水杨酸法进行确认。     

高效液相色谱法同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵

目的建立一种高效液相色谱法,同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵。方法用配备二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪,采用Agilent TC-18C液相色谱柱,以乙腈/乙酸铵/冰乙酸(70/30/0.15,V/V/V)为流动相,使用DAD(检测波长270 nm)进行检测分析。结果苯扎氯铵和苄索氯铵在20~400 mg/L范围内,线性回归方程的相关系数r=0.9990。2种成分的分离度为1.87,可以较好地分离苯扎氯铵和苄索氯铵。日内精密度苯扎氯铵为0.98%,苄索氯铵为0.23%;日间精密度苯扎氯铵为0.80%、苄索氯铵为0.47%。平均回收率范围苯扎氯铵为96.3%~103%,苄索氯铵为99.5%~104.0%;RSD范围苯扎氯铵为1.0%~1.5%,苄索氯铵为0.64%~2.6%。灵敏度苯扎氯铵检出限(LOD)为0.364 mg/L,定量限(LOQ)为1.21 mg/L;苄索氯铵LOD为0.311 mg/L,LOQ为1.04 mg/L。结论建立的高效液相色谱法能更准确地测定苯扎氯铵的含量,并能与苄索氯铵进行区分测定。     

两种方法检测脑脊液蛋白质的比较

目的比较干化学法(A法)和改良的邻苯三酚红钼络合显色法(B法)测定脑脊液蛋白质的特点,选择一种快速、准确、适合临床常规检验的方法。方法A法、B法分别采用改良双缩脲法和改良邻苯三酚红钼络合显色法。对2种方法的精密度、线性予以评价。按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件,以A法为比较方法,B法为实验方法进行对比,同时对2法进行药物干扰试验。结果线性范围:A法为0．2-3．5 g／L,B法为0．3-2．1g/L。批内CV:A法分别为2．28％、2．40％,B法分别为2．87％、2．62％;批间CV:A法分别为2．50％、2．80％,B法分别为3．01％、3．10％。2种方法的相关系数r =0．994,线性回归方程:Y=0．979X-0．036。结论2种方法都可用自动生化仪进行检测,能减少人为误差。A法准确、线性范围较宽,灵敏度高;B法准确,药物干扰较少。     

苄索氯胺法检测尿蛋白联合尿β2-微球蛋白测定在糖尿病肾病早期诊断中的价值

目的探讨苄索氯胺法检测尿蛋白联合免疫比浊法尿β2-微球蛋白(β2-MG)测定在糖尿病肾病(diabetic mephropathy DN)早期诊断中的价值。方法选取尿常规检查尿蛋白阴性的糖尿病(diabetes mellitus DM)病人97例,用苄索氯胺法检测尿蛋白、用免疫比浊法测定β2-MG,选取健康查体者30名做对照。结果97例尿常规检测尿蛋白阴性的DM病人中有7例苄索氯胺法测定尿蛋白和β2-MG均增高,3例仅苄索氯胺尿蛋白增高,9例仅β2-MG增高。结论肾小球损害时可导致尿蛋白增高,尿常规检测因为试纸条敏感性差,未有明显增高的病人往往检测不出,而苄索氯胺法检测尿蛋白敏感性高,可以较好的筛选该类病人;糖尿病肾病以肾小球和肾小管结构和功能的改变为特征,肾小管和肾小球损害时尿β2-MG往往增高。通过苄索氯胺法检测尿蛋白联合免疫比浊法测定尿β2-MG可以很好的了解DM病人早期肾损害情况,对及早发现和治疗DN具有重要意义。     

几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较

本研究对蛋白质染色法进行比较和分析，以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法。实验采用2-D电泳分离急性早幼粒白血病细胞株NB4的全蛋白及1-D电泳分离蛋白质分子量标准物，从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度，比较了传统考马斯亮蓝染色法、胶体考马斯亮蓝染色法、改良考马斯亮蓝染色法和银染法4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响，探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素。结果显示，银染检测灵敏度最高，但质谱鉴定相容性差，鉴定率近10％；改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高，可达4ng／spot．质谱鉴定率可接近55％。结论：改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高，与质谱兼容好，能满足蛋白质组研究需要。     

尿液和脑脊液蛋白测定自动比浊法的评价

目的：评估和证实尿液和脑脊液蛋白测定自动比浊法的性能，方法：用罗氏公司的苯索氯铵试剂，以比浊法进行尿液和脑脊液蛋白测定，并对方法的检测限，病人结果可报告范围，精密度和准确度等作了实验观察，结果：方法的检测低限为0．04g/L，可定量报告的检测限为0．08g/L，病人结果可报告范围为0．08－2．0g/L，批内CV为1．5％，批间CV为2．2％，传统磺柳酸蛋白测定与之比较，二法间尿液Y1＝0．85X＋0．068，r=0.972,脑脊液Y2＝0．86X＋0．056，r=0.980。结论：本法简便，快速，准确且样本用量少（5－15ul)，适合临床实验室推广应用。     

用邻苯三酚红钼络合法测定尿液及脑脊液蛋白

目的　寻找及建立 1种不粘附比色杯 ,灵敏度高的准确的微量蛋白自动分析法。方法　改良邻苯三酚红钼络合法。结果　其线性范围上限达 8.0 0 g/L ,回收率手工法为 89.2 %,自动法为 10 5 .6 %,有良好的精密度 (CV =6 .0 0 %) ,灵敏度为单一钨酸比浊法的 12～ 2 2倍 ,该法与单一钨酸比浊法的相关性良好 ,回归方程为Y=1.1881X - 0 .32 0 5 ,r为 0 .96 92 ,进行配对t检验 ,t=0 .40 2 ,P >0 .0 5 ,说明两法结果差异无显著性。结论　该法具有不粘附比色杯 ,又有灵敏度高、准确的优点 ,标本用量少 ,适用于自动分析 ,是值得在临床上推广的方法。     

脑脊液总蛋白、葡萄糖、氯化物和IgG室间质量评价结果调查

目的总结并分析2012—2016年脑脊液生化检测项目的室间质量评价结果,为提高我国脑脊液检测水平提供参考。方法卫生部临床检验中心每年向参评单位发放脑脊液生化检测项目质控品,收集实验室回报的检测值,对回报的结果按照方法学分组进行统计分析,并评价其检测水平。结果对于总蛋白检测,邻苯三酚红钼铬合显色法变异系数(CV)变化不明显,及格率略有上升趋势;染料结合法2012、2014年CV相对较小,及格率最高,2013、2015、2016年及格率较低;比浊法和干化学法CV波动明显。对于氯化物检测,干化学法CV最小,及格率最高。对于葡萄糖检测,CV均较小且呈逐年降低趋势,及格率均较高(平均及格率99.23%)。对于IgG检测,CV为9.2%～16.43%,及格率低于83.6%但呈逐年增高趋势。结论目前我国脑脊液生化项目的质量水平差异较大,开展室间质评项目计划有利于了解我国脑脊液生化检测的整体水平。     

脑脊液乳酸含量联合细胞学指标对神经外科手术后细菌性脑膜炎的早期诊断价值

目的 探索脑脊液乳酸含量(cerebrospinal fluid lactate,CSF-Lac)联合细胞学指标所建之模型对于神经外科手术后的细菌性脑膜炎(post-neurosurgical bacterial meningitis,PNBM)早期诊断的价值.方法 选取2019年1—12月于神经外科有创操作术后连续转...     

Evaluation of Sysmex UF-1000i for use in cerebrospinal fluid analysis

BACKGROUND: Caution is of paramount importance in the interpretation of flow cytometric white blood cell counts in specimens with a high lymphocyte percentage as it is in the interpretation of bacterial counts in hemorrhagic and ventricular drainage CSF specimens. Recently, flow cytometry using a semiconductor laser along with forward and sideward scatter detection and also a dedicated bacterial channel has been developed (Sysmex UF-1000i). We explored the possible applications of this novel approach in the differential diagnosis of meningitis. METHODS: Flow cytometry, microscopy and biochemical data of 161 CSF samples were analyzed. Microbiological analysis was performed in 53 suspected cases of meningitis. RESULTS: Good agreement for leukocytes was obtained between UF-1000i (rho=0.614) and UF-100 (rho=0.582) and microscopy and between both flow cytometers (rho=0.734). Lymphocytes were correctly classified as WBC by UF-1000i. Bacterial count on UF-1000i showed to be reliable in hemorrhagic samples and in samples collected by ventricular drainage for which interference by blood platelets and cell debris forms a known caveat on UF-100. Bacterial background signal in sterile CSF samples was absent on UF-1000i. One case of Cryptococcus neoformans meningitis, missed by UF-100 was properly detected by UF-1000i. CONCLUSION: Sysmex UF-1000i CSF flow cytometer offers the clinician an improved aid in directing the differential diagnosis of meningitis towards viral, bacterial or fungal causes.     

Evaluation of cerebrospinal fluid adenosine deaminase activity in HIV-seropositive subjects and its association with lactate dehydrogenase and protein levels

The purpose of this study was to investigate the role of ADA as additional marker of HIV infection as well as its association with other biochemical markers. This study included 55 patients, 26 being diagnosed as HIV positive and 29 patients diagnosed as HIV negative. Glucose, total protein, lactate dehydrogenase, and adenosine deaminase (ADA) activity were measured on cerebrospinal fluid (CSF). ADA activity on CSF was statistically different in HIV-seropositive subjects compared with HIV-negative subjects. The sensitivity and specificity of ADA activity on CSF was 50 and 82.76%, respectively. ADA activity was positively correlated with lactate dehydrogenase and protein in patients with HIV positive and it was negatively correlated with glucose levels. ADA determination in CSF could add information about inflammatory processes in patients with HIV infection.     

脑脊液生物标志物在阿尔茨海默病诊断中的价值

阿尔茨海默病（AD）是一种老年期的神经退行性疾病,早期干预是目前延缓该病进展的唯一可靠手段。该文汇总并分析近年来各类AD生物标志物研究的代表性文献,分类评述了各类脑脊液（GSF）标志物对AD诊断及鉴别诊断的效能。其中CSF Aβ42、Aβ42/Aβ40、tau蛋白、Aβ42/p-tau、生长相关蛋白43、突触相关蛋白2...